CC BY
61
ЭКОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ
УДК 591.69-973.55-51
НЕКОТОРЫЕ ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ КУЛЬТУР ENTEROBACTER СЮДСДЕ, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ОВЕЦ ПРИ АССОЦИАТИВНЫХ ГЕЛЬМИНТОЗНО-БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
© 2010 Гайрабеков Р.Х., Ачаев Р.А., Эржапова Э.С., Эржапова Р.С.
Чеченский государственный университет
От овец выделено 124 культур Enterobacter cloacae. Выделенные культуры исследованы на наличие некоторых факторов патогенности: гемагглютинирующая способность как в присутствии Д-маннозы, так и в ее отсутствии, гемолитическая способность, устойчивость к антибактериальным препаратам. В результате чего установлено, что большинство штаммов обладает этими факторами патогенности и множественной устойчивостью к антибиотикам.
There were isolated 124 kinds of bacteria related to genus Enterobacteria, kind of Enterobacter. These isolated kinds were researched for having some facts of pathogenicity hemaglutinating ability as by D-mannosy, as by its absence, hematlogic ability, resistance to antibacterial prepirations. As a resalt were apparented that the more of strains have got traitsof pathogenisity and multiple resistance to antibiotics.
Ключевые слова: гельминт, бактерия, культивирование, бактериальная флора, род. Key words: Helminth, bacterium, cultivation, bacterial flora, genus.
В Чеченской республике и сопредельных республиках Северного Кавказа животноводство занимает крайне важное положение в производственной структуре сельского хозяйства этих субъектов. Успешное развитие животноводства зависит от благополучия хозяйств от инфекционных и инвазионных заболеваний. Результаты исследований и практический опыт ветеринарии свидетельствуют о том, что в подавляющем большинстве случаев инфекционные и инвазионные заболевания, как правило, протекают не как моноинфекции, а в ассоциативном виде и представляют собой паразитоценозы [1, 2]. Следует отметить, что ассоциации паразитов сельскохозяйственных животных чрезвычайно многообразны, как в таксономическом отношении (вирусы, бактерии, грибы, простейшие, гельминты), так и по вызываемой ими патологии. Кроме того, большинство ассоциативных болезней имеет более тяжелое течение в сравнении с моноинфекцией или инвазией.
Исследования, проведенные нами в хозяйственных структурах Чеченской республики у овец, показали, что легочные и желудочно-кишечные гельминтозы широко распространены среди животных, высокую обсемененность пастбищ и трасс перегона скота. В ходе эксперимента от гельминтных овец нами было выделено 124 штаммов бактерий, относящихся к семейству Entero-bacteriaceae, которые на основании морфологических, культуральных и биохимических свойств были отнесены нами к роду Enterobacter, к виду Enterobacter cloacae.
Материал и методы. Материалом для гельминтологических и бактериологических исследований служили свежевыделенные фекалии отдельных животных.
Исследования проводили с соблюдением правил стерильности. Фекалии овец, взятые до утреннего кормления, набирали в пробирки с 1 мл физиологического раствора, затем разводили этим же раствором в соотношении 1:9. После гомогенизации полученную взвесь подвергали последовательным десятикратным разведениям в физиологическом растворе от 101 до 1010 со сме-
ной пипеток. Затем по 0,1 мл каждого разведения засевали на чашки Петри с твердыми питательными средами с последующим растиранием шпателем, а по 1 мл - в пробирки с полужидкой питательной средой. Посевы культивировали при температуре 37°С в термостате, а анаэробные бактерии - в микроанаэростате в тех же условиях. Учет результатов проводили через 24-48 часов для аэробных бактерий и через 48-96 часов - для анаэробных бактерий.
С целью установления видовой принадлежности и изучения биохимических свойств, выделенные микроорганизмы получали в чистой культуре. Выделение и родовую идентификацию бактерий осуществляли в соответствии с методиками, изложенными в рекомендации «Совершенствование микробиологической диагностики дисбактериозов» [3].
Бактерии семейства Enterobacteriaceae выделяли на средах Эндо, Плоскирева, Левина. На основании характерных особенностей колоний и данных микроскопирования подсчитывали количество кишечных палочек, сальмонелл, протея и др. Морфологию изучали в препаратах, окрашенных по Грамму. Чувствительность бактерий к антибиотикам определяли общепринятым методом дисков. Адгезивная активность бактерий определялась в реакции гемагглютинации с 3% взвесью эритроцитов барана в присутствии Д-маннозы и без нее. Положительная реакция ге-магглютинации в присутствии Д-маннозы рассматривалась как наличие у бактерий Д-маннозорезистентной адгезивной активности.
Гемолитическую активность бактерий выявляли на питательном агаре с добавлением 3-5% отмытых эритроцитов кролика. Гемолиз учитывали через 24-48 часов инкубации.
Результаты исследований. Все выделенные штаммы Enterobacter cloacae имели типичную морфологию, представляли собой грамотрицательные палочки с перитрихиально расположенными жгутиками. Все выделенные штаммы хорошо росли при температуре 37°С.
Так как для характеристики условно-патогенных микроорганизмов, к которым относятся и выделенные Enterobacter cloacae, важная роль принадлежит факторам патогенности, в связи с чем нами проведено определение некоторых свойств относящихся к патогенности и вирулентности бактерий: способность адсорбировать краситель конго красный, гемагглютинирующая и гемолитическая способности, устойчивость к антибактериальным препаратам.
Таблица 1
Устойчивость к антибиотикам штаммов Enterobacter cloacae
Антибиотик Устойчивость к антибиотикам штаммов Enterobacter cloacae (число / процент)
устойчивые умеренно устойчивые чувствительные
Пенициллин 120/96,8 - 4/3,2
Метициллин 114/92,0 6/4,8 4/3,2
Ампициллин 76/61,3 18/14,5 30/24,2
Оксациллин 118/95,2 2/1,6 4/3,2
Карбенициллин 36/29,0 38/30,6 50/40,4
Тетрациклин 92/74,2 28/22,6 4/3,2
Стрептомицин 54/43,5 34/27,4 36/29,0
Мономицин 10/8,1 52/41,9 62/50,0
Гентамицин 12/9,7 - 112/90,3
Неомицин 10/8,1 70/56,4 44/35,5
Эритромицин 118/95,2 4/3,2 2/1,6
Левомицитин 22/17,8 36/29,0 66/53,2
Рифампицин 118/95,2 - 6/4,8
Ристомицин 114/92,0 4/3,2 6/4,8
Способностью адсорбировать краситель конго красный обладали 50 из 124 испытанных культур, что составило 40,3%. Гемолитическая активность была выявлена у 20 штаммов из 124 испытанных культур, что составило 16,1%. Способность продуцировать тиолзависимые гемолизины у испытанных культур Enterobacter cloacae не обнаружена.
Для всех выделенных штаммов была выявлена чувствительность к 14 антибиотикам: пенициллину, метициллину, ампициллину, оксациллину, карбенициллину, тетрациклину, стрептомицину, мономицину, гентамицину, неомицину, эритромицину, левомицитину, рифампицину, ри-стомицину (табл. 1).
Испытанные штаммы Enterobacter cloacae были наименее устойчивыми к мономицину (81%), гентамицину (9,7%), неомицину (8,1%), левомицитину (17,8%), карбенициллину (29,0%).
Весьма слабыми антимикробными действиями обладали пенициллин (только 3,2% штаммов были чувствительными к этому антибиотику), оксациллин (3,2%), метициллин (3,2%), эритромицин (1,6%), рифампицин (4,8%).
В таблице 2 приведены данные по распространению среди штаммов Enterobacter cloacae множественно устойчивых к испытанным антибактериальным препаратам.
Таблица 2
Вариации устойчивости к действию антибиотиков у штаммов Enterobacter cloacae
Число штаммов Число штаммов, устойчивых к антибиотикам Среднее кол-во антибиотиков, к которым устойчивы бактерии
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
124 2 2 - - 2 2 6 26 28 30 12 8 4 2 - 8,2
Выводы:
1. Исследования, проведенные нами в хозяйственных структурах Чеченской республики у овец, показали, что легочные и желудочно-кишечные гельминтозы широко распространены среди животных, а также высокую обсемененность пастбищ и трасс перегона скота.
2. В ходе эксперимента от гельминтных овец нами было выделено 124 штаммов бактерий, относящихся к семейству Enterobacteriaceae, которые на основании культуральных и биохимических свойств были отнесены к роду Enterobacter, к виду Enterobacter cloacae. Выделенные бактерии были исследованы на наличие факторов патогенности (агглютинирующая способность, гемолитическая активнсоть, устойчивость к антибиотикам).
3. Среди выделенных от овец штаммов Enterobacter в большинстве случаях встречаются культуры, обладающие несколькими факторами патогенности.
Библиографический список
1. Апатенко В.М. Паразитоценология и ее значение в условиях интенсификации животноводства. / В.М. Апатенко // Вестник сельскохозяйственной науки. 1985, № 11. - С. 110-116. 2. Дьяконов Л.П. Некоторые факторы, обусловливающие возникновение и развитие смешанных (ассоциативных) инфекций (инвазий) у животных. / Л.П. Дьяконов // Паразитоценозы и ассоциативные болезни. - М., 1984. - С. 143-155. 3. Раевский К.К., Добрынин В.М., Кочеровец В.И. Совершенствование микробиологической диагностики дисбакте-риозов. // Вестник РАМН. №3. - М.: Медицина, 1997. - С. 13-17.
