CC BY
8Некодирующие РНК в перитонеальном метастазировании
рака яичников
Авторы
Лукина Светлана Сергеевна, sveta_sergeevna349@mail.ru, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Бурденный Алексей Михайлович, koldun.pro@mail.ru, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Пронина Ирина Валерьевна, zolly_sten@mail.ru, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Филиппова Елена Александровна, p.lenyxa@yandex.ru, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Казубская Татьяна Павловна, oncogen5@ronc.ru, Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Логинов Виталий Игоревич, werwolf2000@mail.ru, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Кушлинский Николай Евгеньевич, kne3108@gmail.com, Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Брага Элеонора Александровна, eleonora10_45@mail.ru, Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва
Ключевые слова:
рак яичников, длинные некодирующие РНК, микроРНК
Актуальность
Рак яичников (РЯ) рассматривается как группа крайне агрессивных злокачественных опухолей с высокой частотой неблагоприятных исходов, высоким метастатическим потенциалом и низкой выживаемостью больных. Отмечено, что гиперметилирование онкосупрессорных белок-кодирующих генов и микроРНК (миРНК), является одним из ключевых регуляторных механизмов в патогенезе РЯ.
Цель
Оценка изменений уровня метилирования и экспрессии генов некодирующих РНК (нкРНК) у больных РЯ и их влияния на метастатический потенциал.
Материалы и методы
Анализ уровня метилирования и экспрессии проводился с применением метода количественной метил-специфичной ПЦР (qRT-PCR) на выборке из 102 образцов, включавших парные образцы опухолевой и условно нормальной ткани пациенток с РЯ, а также 30 образцов перитонеальных макроскопических метастазов (ПММ). Статистический анализ выполнен с применением непараметрического U-теста Манна-Уитни, входящего в пакет IBM SPSS Statistics 20. Для всех статистических тестов значимыми считали значения p<0.05.
Результаты
Выявлено шесть генов миРНК (MIR124-3, MIR125B-1, MIR127, MIR129-2, MIR132, MIR339), для которых показано гиперметилирование уже
на ранних стадиях РЯ. Гиперметилирование генов миРНК МШ137, М1Я203А и МШ375 проявлялось только в образцах опухолей больных с метастазами. В соответствие с этим, обнаружено значительное снижение уровней экспрессии 5 миРНК в образцах опухолей больных с метастазами в сравнении с безметастатическими. Наибольшее снижение уровня экспрессии выявлено для miR-203a-3р. Отметим также обратную корреляцию между уровнями экспрессии miR-203a-3р и гена 2ЕВ2, — стимулятора процесса эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП). Интересным представляется значимое увеличение метилирования гена МШ148А в ПММ при полном отсутствии изменений в первичных опухолях РЯ. Более того, отмечено частичное снижение уровня метилирования генов МЖ9-1 и МШ193А, что может предполагать участие нкРНК в регуляции ЭМП-МЭП реверсии, которая наблюдается при колонизации метастазов в другие органы. Эти результаты согласуются с нашим наблюдением частичного снижения уровня метилирования генов днРНК MEG3, SEMA3B-AS1 и гОТ667^1 во вторичных опухолях РЯ в брюшине в сравнении с первичными опухолями.
Выводы
Наши результаты показывают участие гипер-метилированных нкРНК (микроРНК и днРНК) на разных стадиях патогенеза и метастазирования РЯ. Можно предположить их роль в эпигенетической регуляции как процессов развития, так и метаста-зирования РЯ, причем, как на ранних этапах, так
и при формировании вторичных опухолей. Кроме того, гены МШ.137, МШ203А и МШ.375 можно рассматривать как маркеры начала метастазирования, а
Список литературы
ген МГЯ148А — как маркер колонизации метастазов в брюшине. Работа поддержана Российским научным фондом, грант № 20-15-00368.
Активация ретротранспозиции ЫМЕ1 вориностатом и его комбинациями с амсакрином и кверцетином
Авторы
Магомедова Хамис Магомедовна, h_magomedova2000@mail.ru, ФГБУ «ИТХТ им. М.В. Ломоносова», просп. Вернадского, 86, Москва 119571, Россия., Москва
Чернова Ирина Алексеевна, irincher96@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Каширское шоссе, 24, Москва 115478, Россия., Москва
Власова Ольга Александровна, olya_vlasov@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Каширское шоссе, 24, Москва 115478, Россия., Москва
Борунова Анна Анатольевна, borunova-a@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Каширское шоссе, 24, Москва 115478, Россия., Москва
Заботина Татьяна Николаевна, tatzabotina@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Каширское шоссе, 24, Москва 115478, Россия., Москва
Кирсанов Кирилл Игоревич, kkirsanov85@yandex.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Каширское шоссе, 24, Москва 115478, Россия; ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», ул. Миклухо-Маклая, 6, Москва 117198, Россия., Москва
Якубовская Марианна Геннадьевна, mgyakubovskaya@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Каширское шоссе, 24, Москва 115478, Россия., Москва
Ключевые слова:
ОМЛ, вориностат, кверцетин, амсакрин, длинные диспергированные повторы.
Актуальность
Терапевтический эффект деметилирующих агентов и ингибиторов гистоновых деацетилаз при лечении ОМЛ связывают с активацией генов опухолевых супрессоров, обусловленной снятием эпигенетической репрессии. Особый интерес представляют комбинации препаратов с дополняющими друг друга механизмами действия, направленными на увеличение участков ДНК, доступных для факторов транскрипции. Однако, при этом может наблюдаться активация экспрессии в норме репрессированных некодирую-щих последовательностей в гетерохроматине, в том числе длинных диспергированных повторов LINE1, что связывают с ростом генетической нестабильности. Таким образом, для адекватной оценки перспективности использования комбинаций эпигенетически активных препаратов с различным механизмом действия необходимо учитывать не только их воздействие на экспрессию генов супрессоров опухолевого роста, но и их влияние на ретротранспозицию LINE1.
Цель
Исследование влияния ингибитора гистоновых деацетилаз вориностата, дестабилизаторов хроматина амсакрина и кверцетина и их комбинаций на экспрессию LINE-1.
Материалы и методы
Уровень специфической транскрипции LINE-1 оценивали методом иммунофлюоресцентного окрашивания клеток (антителами к белкам ORF1 LINE1 и H2Ax-y) с последующим анализом распределений популяций обработанных и контрольных клеток на проточном цитометре (BD FACS Calibur). Клетки ТНР-1 были обработаны соединениями интереса в нетоксичных концентрациях с временной экспозицией 24 часа. Популяции клеток в исследуемых пробах содержали не более 5% апоптотических клеток.
Результаты
Наиболее показательные результаты были получены для комбинаций вориностата в концентрации 10 дМ с амсакрином в концентрации 0,26 дМ и вориностата в концентрации 10 дМ с кверцетином в концентрации 0,54 дМ: наблюдалось статистически значимое (р&к;0,05) увеличение средней интенсивности флюоресценции распределения популяции по отношению к распределению популяции необработанных клеток. Было показано увеличение в 2,16 и 1,84 раз количества белка ORF1 LINE1 в клетках популяции для двух комбинаций соответственно, и увеличение в 4,89 и 3,18 раз
