Таблица 1. Распределение сеянцев по устойчивости к милдью в гибридных популяциях без орошения, %, 2014-2015 гг.
Распределение сеянцев по устойчивости к милдью, %
Комбинация скрещивания устойчивые, поражение листа толерантные, поражение листа восприимчивые, поражение листа
1-2 балла 3 балла 4-5 баллов
Талисман х Эльф 53 47 0
Талисман х Марс 85 13 2
Талисман х 1-17-7-4 31 69 0
Талисман х2-7-2-11 48 52 0
Талисман х Памяти Смирнова 41 59 0
Талисман х Вита 27 73 0
Талисман хГУ-6-1-1 29 71 0
Талисман х 11-8-6-пк 37 63 0
Талисман х Золотце 40 40 20
Талисман х 2-7-6-18 17 83 0
Кеша х Илья 100 0 0
23-22-11-ппк х Илья 100 0 0
Восковой х Илья 3 97 0
Илья х Эльф 100 0 0
Илья х Матрёшка 0 100
3-16-7-6 х Матрёшка 0 100 0
ИРС х Матрёшка 16 84 0
2-7-2-11х Матрёшка 11 89 0
ЗОС-1 х Матрёшка 0 100 0
ЗОС-1 х Памяти Смирнова 31 23 46
6-1-5-3х Памяти Смирнова 17 17 66
Таблица 2. Распределение сеянцев по устойчивости к милдью гибридным потомством, %, капельное орошение, 2015 г.
Распределение сеянцев по устойчивости к милдью, %
Комбинация скрещивания Устойчивые, поражение Толерантные, пораже- Восприимчивые, пора-
листа 1-2 балла ние листа 3 балла жение листа 4-5 баллов
Талисман х Кешос 0 67 33
Талисман х Ярушка 0 32 68
Талисман х Кишмиш Запорожский 0 25 75
Талисман х Красень 3 6 91
Талисман х Золотце 0 46 54
Памяти Кострикина х Золотце 8 11 81
(Восторг красный х Баклановский)х Памяти Смирнова 0 38 62
Plant Protection News, 2016, 3(89), p. 97-98
THE INHERITANCE OF MILDEW RESISTANCE BY HYBRID OFFSPRING OF GRAPES,
SEEDLESS DIRECTIONS CROSSINGS A.L. Maistrenko
All-Russian Research Institute of Viticulture and Winemaking named after Ya.I. Potapenko, ruswine@yandex.ru
The aim of the research is to identify donors and sources of resistance to mildew for wider use in breeding work. The work was carried out in own-rooted hybrid nursery, the seedlings were cultivated in uncoveredculture, without protection from diseases, with thickened planting scheme (1 x 0.2 m), the seedlings planting 2010-2011 without irrigation, and 2012-2014 planting on drip irrigation. Identified a donor for resistance to mildew -variety Talisman and sources of high resistance to disease - grape varieties Pamyati Smirnova, Ilya and promising form of Matryoshka. The data obtained allow to use in the selection process audited the parent form to create new varieties of grapes with high resistance to fungal diseases.
УДК 633.854.78:631.523
НАСЛЕДОВАНИЕ УСТОЙЧИВОСТИ К МИЛДЬЮ ГИБРИДНЫМ ПОТОМСТВОМ ТЕХНИЧЕСКИХ СОРТОВ ВИНОГРАДА СЕЛЕКЦИИ ВНИИВИВ
А.Н. Майстренко, Л.А. Майстренко, Н.А. Дуран
Всероссийский НИИ виноградарства и виноделия имени Я.И. Потапенко, Новочеркасск, Россия,
LA-majstrenko@yandex.ru
Целью исследования является выявление доноров и источников устойчивости к милдью для использования в селекционной работе. Сеянцы возделывались в корнесобственном гибридном питомнике в неукрывной культуре, без
«Эколого-генетические основы современных агротехнологий». СПб, 27-29 апреля 2016 г.
99
защиты от болезней, схема посадки (1 х 0.2 м). Вновь выделены: доноры по устойчивости к милдью -белые технические сорта виноградаДонус, Престиж. Сорта винограда селекции ВНИИВиВ им. Я.И. Потапенко -Платовский, Станичный, Шатен подтвердили свой статус доноров устойчивости к милдью. Полученные данные позволят использовать в селекционном процессе проверенные родительские формы для создания новых сортов винограда с высокой устойчивостью к грибным болезням. В элиту выделены пять сеянцев с высокой устойчивостью к милдью.
Ключевые слова: гибридный питомник, донор, источник, комбинация скрещивания, селекция, толерантность, устойчивость.
В 2014 и в 2015 гг. в конце мая - начале июня выпали значительные осадки, что явилось причиной эпифи-тотийного развития милдью на листовом аппарате виноградных растений. Это позволило провести анализ по устойчивости гибридных популяций сеянцев к патогену (табл.).В скрещиваниях Престиж х Платовский толерант-
ными к милдью оказались 100 % сеянцев. Значительный процент толерантных сеянцев выявлен в комбинации скрещивания с неустойчивым к милдью сортом Фиолетовый ранний: Престиж х Фиолетовый ранний -71 %. Это позволило в 2015 году выделить технический сорт винограда Престиж в качестве донора устойчивости к милдью.
Таблица. Устойчивость гибридного потомства к милдью, 2015г.
Комбинация скрещивания Количество Распределение сеянцев по устойчивости к милдью,%
сеянцев, шт. устойчивые 2 балла толерантные 3 балла Восприимчивые, 4-5 баллов
Донус х Мугофир 25 40 60 0
Донус х Ефремовский 28 0 63 37
Донус х Мускат Голодриги 47 8 68 24
Пухляковский белый х Донус 34 0 23 77
Мускат аксайский х Донус 243 18 82 0
Престиж х Фиолетовый Ранний 34 0 71 29
Престиж х Платовский 37 0 100 0
Станичный х Фиолетовый ранний 91 4 59 37
Станичный х Мускат Голодриги 44 0 4 96
Станичный х Платовский 25 36 64 0
1-8-9-1 х Станичный 27 0 0 0
Станичный х Шатен 36 100 0 0
У1-10-1-7 х Шатен 200 90 10 0
Платовский х 11-4-1-3 36 0 100 0
Мускат аксайский х Платовский 31 90 10 0
У1-6-5-1 х Платовский 310 98 2 0
Пухляковский белый х Платовский 80 50 50 0
Шампанчик х Платовский 350 96 4 0
Сорта винограда Платовский, Станичный, Шатен подтвердили свой статус доноров по передачи признака устойчивости к милдью гибридному потомству. Наиболее удачные комбинации по наследованию:
- У1-6-5-1 (ДружбахПлатовский) х Платовский - 98 % устойчивых сеянцев, Шампанчик х Платовский - 96 % устойчивых сеянцев, Мускат аксайский х Платовский -90 % устойчивых и 10 % толерантных сеянцев, Пухляков-ский белый х Платовский -50 % устойчивых и 50 % толерантных сеянцев;
- Станичный х Шатен - 100 % устойчивых сеянцев, У!-10-1-7(Дружбах(Мускат аксайскийхфеникс) х Шатен - 90 % устойчивых и 10 % толерантных сеянцев;
- Станичный х Платовский - 36 % устойчивых и 64 % толерантных сеянцев, Станичный х Фиолетовый ранний (48 % и 65 %).
Наибольшее количество устойчивых к милдью сеянцев было получено в гибридных популяциях с обоими устойчивыми родителями: Станичный х Шатен (100 %), Мускат аксайский х Платовский и У1-6-5-1 х Платовский (98 %), У1-10-1-7 х Шатен (90 %). При скрещивании неустойчивого сорта Фиолетовый ранний с устойчивыми сортами в гибридном потомстве преобладали толерантные сеянцы Престижх Фиолетовый ранний (76 % толерант-
ных) и Станичный х Фиолетовый ранний (4 % устойчивых и 59 % толерантных сеянцев). По результатам гибридологического анализа сеянцев пяти гибридных популяций в качестве донора устойчивости к мильдью выделен сорт Донус. В скрещиваниях с неустойчивыми сортами получен значительный процент толерантных к милдью сеянцев: Пухляковский белый х Донус - 68 % (неустойчивый х устойчивый), Донус х Ефремовский - 63 % (устойчивый х неустойчивый), Донус х Мугофир - 60 % (устойчивый х толерантный). В популяциях сорта Донус с устойчивыми сортами (устойчивый х устойчивый) выделились сеянцы высокоустойчивый и толерантные: Мускат аксайский х Донус - 18 % устойчивых и 82 % толерантных, Донус х Мускат Голодриги соответственно 8 % и 68 %.
Следовательно, для получения устойчивого к милдью потомства, применяя метод межвидовой гибридизации, в качестве доноров признака следует использовать в скрещиваниях сорта Платовский, Донус, Шатен.
В 2015 году выделены в элиту 5 сеянцев белого технического направления с высокой устойчивостью к милдью: 11-22-4-4, 11-22-3-2 из семьи У1-10-1-7 [Дружбах(Мускат аксайскийхфеникс)] х Шатен; 11-25-7-5; 11-25-2-6 из семьи Шампанчик х Платовский; 10-16-1-1 из семьи Платовский х Шатен.
Plant Protection News, 2016, 3(89), p. 98-100
THE INHERITANCE OF RESISTANCE TO MILDEW HYBRID SEED VARIETIES BREEDING VNIIVIV A.N. Maistrenko, A.L. Maistrenko, N.A. Duran
All-Russian Research Institute of Viticulture and Winemaking named after Ya.I. Potapenko, ruswine@yandex.ru
The aim of the study is to identify donors and sources of resistance to mildew for grape breeding. The seedlings were cultivated in own-rooted hybrid kennel in uncovered culture, without protection against disease, the scheme of planting (1 x 0.2 m). Novel donors of resistance to mildew -white technical grapes of Bonus, Prestige were determined. Grape breeding at VNIIViV named by Y. I. Potapenko Platovsky, Stanitsa, Shaten confirmed their status as donors of resistance to mildew. The data obtained allow to use in grape breeding novel and known sources of resistance to fungal diseases. Five selected seedlings with high resistance to mildew were selected as an elite material.
УДК 577.29
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ШТАММОВ АГРОБАКТЕРИЙ В ПОРАЖЕННЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫМ РАКОМ АМПЕЛОЦЕНОЗАХ АНАПО-ТАМАНСКОЙ ЗОНЫ
КРАСНОДАРСКОГО КРАЯ
М.В. Макаркина1, И.А. Владимиров2, Е.Т. Ильницкая1, Т.В. Матвеева2
1Северо-Кавказский зональный НИИ садоводства и виноградарства, Краснодар, Россия, kubansad@kubannet.ru 2Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия, radishlet@gmail.com
Целью исследования являлось изучение видового состава и разнообразия штаммов агробактерий на виноградниках Анапо-Таманской зоны Краснодарского края. В качестве материала использовали опухоли с виноградных растений различных сортов, собранные на виноградниках Анапо-Таманской зоны. ДНК из опухолей выделяли ЦТАБ-методом с некоторыми дополнениями [Doyle et al., 1987; Tamari et al., 2013]. Для видовой идентификации агробактерий применяли метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием прибора АНК-32. Для исследования тонкого полиморфизма изолятов агробактерий применяли классический метод полимеразной цепной реакции с использованием прибора «Терцик» с последующей оценкой результатов методом электрофореза в агарозном геле и секвенированием фрагментов ДНК методом Сенджера. Полученные последовательности фрагментов ДНК анализировали в базе данных NCBI (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/). В результате работы был определен видовой состав агробактерий и разнообразие изолятов на виноградниках Анапо-Таманской зоны Краснодарского края. Установлена принадлежность исследуемых патогенных агробактерий, к виду Agrobacterium vitis и близость их к штамму Ag57.
Ключевые слова: бактериальный рак винограда, A. vitis, ПЦР в режиме реального времени, pehA ген, virF ген, патогенные штаммы Agrobacterium.
Бактериальный рак - одно из наиболее вредоносных хронических заболеваний виноградной лозы. Возбудитель бактериального рака - бактерии рода Agrobacterium. Известно, что на винограде виды Agrobacterium представлены как вирулентными, так и авирулентными штаммами; выделяют штаммы, проявляющие различную патоген-ность или наоборот - даже антагонистическое действие на опухолеобразующие штаммы бактерии. Достоверная идентификация патогенных штаммов агробактерий - актуальная проблема, как для фундаментальных аспектов микробиологии, фитопатологии, так и для прикладных задач отрасли виноградарства.
На основе проанализированных комбинаций прайме-ров к различным генам агробактерий нами были выбраны 2 тест-системы, наиболее приемлемые для анализа биоматериала на предмет заражения Agrobacterium vitis Ophel and Kerr. С помощью праймеров и зонда для ПЦР в реальном времени к гену pehA (F:TGAAGAGCGGTGTCGTGCTG; R: AATCAGCGGCTTGCAGGTCT; Pr:
TGAAGAGCGGTGTCGTGCTG) удалось обнаружить присутствие ДНК A. vitis во всех анализируемых образцах ДНК, выделенных из опухолей.
Тест-система на основе гена virF [Bini et al., 2008] предназначена для амплификации более протяженных фрагментов, пригодных для секвенирования и последующего более тонкого типирования изолятов на основе SNP. Секвенирование фрагментов гена virF двух образцов и последующее их сравнение c базой данных NCBI показало, что уровень их сходства с данным геном из A. vitis существенно выше, чем из Agrobacterium tumefaciens Conn и их соответствие фрагменту гена штамма A. vitis Ag57.
Из всего выше сказанного, можно заключить, что в ампелоценозах Краснодарского края паразитируют агро-бактерии вида A. vitis близкие к штамму Ag57. Для ответа на вопрос о степени сходства бактерий вызвавших заболевание в различных хозяйствах требуются дополнительные исследования, включающие секвенирование фрагментов генов, характерных для A. vitis и поиск полиморфизмов в них.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 15-34-51131 с использованием оборудования РЦ СПбГУ «Развитие молекулярных и клеточных технологий».