CC BY
48© Коллектив авторов, 2014 УДК 616.127-007.61-092:[612.6.05:577.21] (476)
МУТАЦИИ В ГЕНАХ MYH7, MYBPC3 У ПАЦИЕНТОВ С ГИПЕРТРОФИЧЕСКОЙ КАРДИОМИОПАТИЕЙ, ПРОЖИВАЮЩИХ В РЕСПУБЛИКЕ БЕЛАРУСЬ
С.С. Ниязова1, Н.Н. Чакова1, кандидат биологических наук, Е.П. Михаленко1, кандидат биологических наук, Н.В. Чеботарева1, С.М. Комиссарова2, кандидат медицинских наук, доцент, Э.В. Крупнова1, кандидат биологических наук, доцент
'Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, Республика Беларусь, 220072, Минск, ул. Академическая, д. 27; 2Республиканский научно-практический центр «Кардиология», Республика Беларусь, 220036, Минск, ул. Р. Люксембург, д. '10 Е-mail: n.chakova@igc.bas-net.by
Введение. Гипертрофическая кардиомиопатия (ГКМП) — распространенное генетически гетерогенное заболевание, причиной которого являются мутации в генах, контролирующих синтез белков саркомеров кардиомиоцитов. У пациентов с данным заболеванием наиболее часто встречаются мутации в генах, кодирующих тяжелую цепь в-миозина (MYH7) и миозинсвязываю-щий белок С (MYBPC3), при этом генетические дефекты специфичны для различных популяций.
Цель исследования. Определение спектра мутаций в гене MYH7 и гена MYBPC3 у пациентов с ГКМП из Беларуси и оценка фенотипических проявлений этих мутаций.
Материал и методы. У 116 пациентов с ГКМП методом автоматического секвенирования проводили поиск мутаций в 19, 20, 23 экзонах гена MYH7, а также в 17 экзоне гена MYBPC3; у 75 пациентов из анализируемой выборки определяли наличие мутаций в 24 экзоне гена MYBPC3.
Результаты и заключение. В результате исследования обнаружены мутации в гене MYH7: у 3 неродственных пациентов с ГКМП — мутация Ala729Pro в 20экзоне, у 2 — мутация Glu924Lys в 23экзоне и в 1 семье — делеция Glu930delв 23экзоне. Также выявлены мутации Arg502Gln и Asn515del в 17экзоне гена MYBPC3. Мутаций в 19 экзоне гена MYH7 и 24 экзоне гена MYBPC3 не выявлено. Для ближайших родственников пациентов представлены результаты генетического и клинического обследования и построены родословные.
Все выявленные мутации были описаны ранее у пациентов с ГКМП в других популяциях. Одни из обнаруженных мутаций определяли неблагоприятное течение ГКМП, другие ассоциировались с более благоприятным прогнозом, но часто фенотипиче-ские характеристики заболевания были гетерогенными даже у пациентов с одинаковым генетическим дефектом.
Ключевые слова: гипертрофическая кардиомиопатия, мутации в генах MYH7, MYBPC3
THE MYH7, MYBPC3 GENE MUTATIONS IN HYPERTROPHIC CARDIOMYOPATHY PATIENTS RESIDING IN THE REPUBLIC OF BELARUS S.S. Niyazova1, N.N. Chakova1, A.P. Mikhalenko', N.V. Chebotareva1, S.M. Komissarova2, E.V. Krupnova1,
1Institute of Genetics and Cytology, Republic of Belarus, 220072, Minsk, Akademicheskaya str., 27,
2Republican Scientific Practical Center «Cardiology», Republic of Belarus, 220036, Minsk, Rozy Luksemburg str., 110
Introduction. Hypertrophic cardiomyopathy (HCM) is a common genetically heterogeneous disease caused by mutations in genes encoding proteins of the cardiac sarcomere. Mutations in the genes encoding в-myosin heavy chain (MYH7) and myosin binding protein C (MYBPC3) are found most frequently in HCM patients and these genetic defects are specific for different populations.
The aim of the study was to identify the spectrum of mutations in MYBPC3 and MYH7 genes in HCM patients residing in the republic ofBelarus and to estimate phenotypic manifestations of these mutations.
Methods. We searched for mutations in exons 19, 20, 23 of the MYH7 gene and in exon 17of theMYBPC3gene in 116 HCM patients with the use of the automatic DNA sequencing; and 75 patients from the analyzed cohort were screened for mutations in exon 24 of the MYBPC3gene.
Results and conclusion. The following mutations in the MYH7 gene were identified: Ala729Pro mutation in exon 20was found in three unrelated patients with HCM, Glu924Lys mutation in exon 23 — in two unrelated patients and deletion Glu930del was found in one family. Also Arg502Gln and Asn515del mutations were identified in exon 17of the MYBPC3 gene. Mutations in exon 19 of the gene MYH7 and in exon 24of the MYBPC3 gene were not found. The genetic and clinical test results of immediate family members of patients were presented and their genealogic trees were constructed.
All of identified mutations were previously described in patients with HCM in other populations. Some of the identified mutations were unfavourable for HCM, others were associated with a better prognosis, but often the clinical features of the disease were heterogeneous, even in patients with the same genetic defect.
Key words: hypertrophic cardiomyopathy, mutations in the MYH7, MYBPC3 genes
ВВЕДЕНИЕ
Гипертрофическая кардиомиопатия (ГКМП) — распространенное генетически гетерогенное заболевание, причиной которого являются мутации в генах, кодирующие белки саркомеров кардиомиоцитов. Распространенность данной патологии колеблется в пределах от 2:10000 до 20:10000 случаев в различных популяциях [1, 2]. ГКМП обычно характеризуется асимметричной гипертрофией стенок левого и(или) правого желудочков сердца с вовлечением межжелудочковой перегородки. Это заболевание наряду с длительным стабильным состоянием может осложняться острой и хронической сердечной недостаточностью, жизнеопасными расстройствами сердечного ритма, а также внезапной сердечной смертью (ВСС) [3]. Ежегодная смертность больных ГКМП колеблется от 1 до 6%: у взрослых она составляет 1—3%, среди детей подростков и лиц с высоким риском ВСС — 4—6% [3, 4]. В 57—60% случаев заболевание носит семейный характер [5], остальные приходятся на спорадическую форму.
К настоящему времени известны 11 генов, кодирующих белковые компоненты сердечного саркомера, которые выполняют контрактильную, структурную или регуляторную функции; их дефекты являются причиной развития ГКМП [2]. В странах Западной Европы и США у пациентов с данным заболеванием наиболее часто встречаются мутации в генах тяжелой цепи р-миозина (МУН7) и миозинсвязывающего белка С (МУВРСЗ) [2].
В связи с тем, что спектр мутаций, отвечающих за развитие заболевания, различается в исследованных популяциях, нашей целью стал поиск мутаций в генах МУН7 и МУВРСЗ у пациентов с ГКМП, проживающих на территории Беларуси, а также оценка их фенотипических проявлений.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В исследование были включены 116 пациентов с ГКМП: 32 женщины и 84 мужчины (средний возраст — 44,6+14,3 года), проживающих на территории Беларуси и проходивших лечение в РНПЦ «Кардиология», а также 11 родственников пациентов, у которых были обнаружены мутации в анализируемых генах. Среди пациентов с ГКМП у 51 (44,0%) диагностирована необструктивная форма, у 61 (52,6%) — обструк-
тивная форма, у 4 (3,4%) заболевание перешло в конечную дилатационную фазу. У 66 (56,9%) пациентов установлен семейный характер заболевания.
У всех обследованных проводили поиск мутаций методом автоматического секвенирования в 19, 20 и
23 экзонах гена MYH7 и 17 экзоне гена MYBPC3, у 75 пациентов с ГКМП провели также поиск мутаций в
24 экзоне гена MYBPC3. Выделение тотальной ДНК из замороженной цельной крови выполняли методом Mathew [6]. Фрагменты ДНК, содержащие исследуемые экзоны, были амплифицированы с помощью по-лимеразной цепной реакции (ПЦР). Последовательности использованных в работе праймеров [7—10] и условия ПЦР представлены в таблице.
Амплифицированые фрагменты фракционировали в 1,2% горизонтальном агарозном геле при напряжении 1 В/см. При получении гомогенного ПЦР продукта проводили ферментативную очистку полученных фрагментов от неиспользованных праймеров и дезоксинуклеотидтрифосфатов [11]. Терминальную реакцию проводили с использованием коммерческого набора с флюоресцентно меченными терминаторами (ddNTP) BigDye Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit («Applied Biosystems», США) в соответствии с инструкцией фирмы-производителя. Очистку образцов от праймера и ddNTP проводили осаждением 96% этиловым спиртом в присутствии EDTA. Определение нуклеотидной последовательности исследуемых экзонов осуществлено на автоматическом генетическом анализаторе Applied Biosystems 3130. Полученные последовательности ДНК анализировали в программе Sequence Scanner v1.0.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Ген тяжелых цепей р-миозина (MYH7) расположен на 14-й хромосоме и состоит из 40 экзонов. На данный момент частота встречаемости мутаций в гене MYH7 составляет 40% от всех описанных мутаций в других генах при ГКМП [12]. Большинство выявленных дефектов кластируются в начальной части гена, в области 3—23 экзонов, что соответствует глобулярной головке р-миозина, шейке молекулы и подвижному региону. Данные мутации затрагивают структуру и функциональные свойства важнейших участков молекулы: актинсвязывающего центра,
ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ПРАЙМЕРОВ И ПРОГРАММА ПРОВЕДЕНИЯ ПЦР
Ген Последовательность праймеров Программа проведения ПЦР Размер продукта
MYH7 (19-20 exon) F: atcagaacccagaacttcagtccagt R:agcatcagaggagtcaatggaa 95°С - 5 мин, [95°С - 30 с, 60°С - 1 мин, 72°С - 1 мин] х 32, 72°С - 7 мин 513 п.н.
MYH7 (23 exon) F: ccctcctatttgagtgatgtgc R: ggtcagtatggtctgagagtcc 94°С - 5 мин, [94°С - 40 с, 61°С - 40 с, 72°С - 1 мин] х 35, 72°С - 7 мин 400 п.н.
MYBPC3 (17 exon) F: gcagcgggtggagtttgagt R: ggtcacctcagcatcgtcat 94°С - 5 мин, [94°С - 40 с, 61°С - 40 с, 72°С - 1 мин] х 35, 72°С - 7 мин 480 п.н.
MYBPC3 (24 exon) F: cctgtggcggttagttgg R: caccggtagctcttcttcttcttg 95°С - 5 мин, [95°С - 30 с, 60°С - 30 с, 72°С - 30 с] х 30, 72°С - 4 мин 351 п.н.
АТФ-связывающего центра, центра взаимодействия с легкими цепями миозина. Это приводит к уменьшению активности актинактивированной миозиновой АТФазы, а также нарушению кинетических свойств молекулы миозина и изменению сократительных свойств саркомера [5, 12].
В 19, 20 и 23 экзонах гена МУН7 описаны 42 мутации, приводящие к развитию ГКМП: 13 мутаций — в 19 экзоне, 20 — в 20 экзоне, 25 — в 23 экзоне [13]. В результате проведенного нами исследования у пациентов с ГКМП, проживающих на территории Беларуси, была обнаружена 1 мутация в 20 экзоне, 2 мутации в 23 экзоне гена МУН7 и не обнаружено ни одной мутации в 19 экзоне.
У 3 неродственных пациентов (№1, №2, №3) с ГКМП в 20 экзоне гена МУН7 выявлена описанная ранее мутация А1а729Рго, приводящая к замене ала-нина на пролин в 729 аминокислотной последовательности белка (рис. 1).
У пациента №1 (34 года) с данной мутацией заболевание манифестировало в 33 года, диагностирована необструктивная форма ГКМП с умеренной гипертрофией межжелудочковой перегородки (МЖП) и умеренной гипертрофией левого желудочка (ЛЖ) (толщина МЖП - 16 мм, ИММ ЛЖ - 120 г/м2). У пациентки №2 (23 года) с семейной формой ГКМП выявлена необструктивная форма заболевания с более выраженной толщиной МЖП (20 мм) и умеренной гипертрофией ЛЖ (ИММ ЛЖ - 128 г/м2). У пациентки №3 (18 лет) заболевание манифестировало в подростковом возрасте (14-15 лет), диагностирована обструктивная форма заболевания: градиент давления выносящего тракта ЛЖ (ВТЛЖ) в покое — 81 мм рт. ст. с выраженной гипертрофией ЛЖ (ИММ ЛЖ -307 г/м2, МЖП - 27 мм). В связи с прогрессированием симптомов заболевания и отсутствия эффекта от медикаментозной терапии пациентке было выполнено хирургическое вмешательство (миосеп-тэктомия). У отца пациентки №3 (48 лет) диагностирована необ-структивная форма ГКМП с толщиной МЖП - 20 мм. В целом можно отметить, что у обследованных пациентов с мутацией А1а729Рго клинические проявления заболевания были различными: от более тяжелой обструк-тивной формы до стабильного течения и отсутствия обструкции.
Впервые мутация А1а729Рго была выявлена у 2 неродственных пробандов из российской популяции, а позднее еще у 1 российского пациента [4, 14]. Фенотипические проявления заболевания у пациентов с данной мутацией были также различными: от более легкого
течения с умеренной гипертрофией МЖП (17 мм) до тяжелой формы ГКМП с выраженной гипертрофией МЖП (27 мм), обструкцией ВТЛЖ (81 мм рт. ст.) и ранней манифестацией заболевания (16 лет). В аналогичных исследованиях, проведенных на данный момент в других странах, эта мутация не обнаружена. Это может свидетельствовать о том, что мутация А1а729Рго специфична для российской и белорусской популяций.
В 23 экзоне гена МУН7 была выявлена описанная ранее миссенс-мутация 01ы924Ьуз у 2 неродственных пациентов с семейной формой ГКМП (№4, №5) (рис. 2).
Заболевание у пациента №4 (26 лет) манифестировало очень рано, в 6-летнем возрасте, и уже в 23 года на фоне прогрессирования симптомов заболевания (усиление одышки, появление синкопальных состояний) диагностирована обструктивная форма ГКМП с выраженной гипертрофией МЖП (27 мм), эпизодами неустойчивой желудочковой тахикардии (НЖТ) и пароксизмальной формой фибрилляции предсердий. С учетом прогрессирования симптомов заболевания и отсутствия эффекта от медикаментозной терапии пациенту была выполнена миосептэкто-мия. При обследовании членов семьи у отца пациента №4 была диагностирована необструктивная форма ГКМП, однако мутация 01ы924Ьуз в 23 экзоне гена МУИ7 не обнаружена.
У пациентки №5 (51 год) заболевание впервые диагностировано в 35 лет. К 42 годам наблюдалась выраженная дилатация левого предсердия, правого и левого желудочков и переход заболевания в «дила-тационную» фазу, эпизоды НЖТ и полная блокада левой ножки пучка Гиса. В 48 лет пациентке выпол-
1
2
Рис. 1. Фрагмент нуклеотидной последовательности 20 экзона гена МУН7: 1 — без мутации; 2 — с мутацией А1а729Рго (стрелка — положение замены)
1
2
Рис. 2. Фрагмент нуклеотидной последовательности 23 экзона гена МУН7: 1 — с мутацией 0!ы924Ьуз; 2 — без мутации (стрелка — положение замены)
нена имплантация ресинхронизирующего устройства. В семейном анамнезе пациентки №5 (рис. 3) имеются сведения о случаях ВСС (смерть матери и старшей сестры, у которых была диагностирована ГКМП). У дочери пациентки №5 признаков заболевания и мутации 01ы924Ьуз не обнаружено. Мутацию 01ы924Ьуз унаследовала 34-летняя дочь умершей сестры, у которой выявлена необструктивная форма ГКМП с благоприятным на данный момент течением.
Данная мутация была ранее описана у пациентов с семейной формой заболевания из Великобритании [15], она также была обнаружена в 2 неродственных китайских семьях, в родословных которых имелись случаи ВСС в молодом возрасте во время занятия спортом [16].
В нашем исследовании у пациентов с мутацией 01ы924Ьуз, несмотря на фенотипические различия в проявлении ГКМП (гипертрофический и дилатаци-онный фенотип), чаще наблюдались тяжелые клинические появления заболевания (прогрессирующее течение с необходимостью проведения хирургической
Рис. 3. Родословная семьи пациентки №5 с ГКМП: о — нет признаков ГКМП; • — диагностирована ГКМП; плюс и минус — соответственно наличие или отсутствие мутации 01ы924Ьуз; ? — нет клинического обследования
Рис. 4. Фрагмент нуклеотидной последовательности 23 экзона гена МУН7: А — с мутацией 0!ы930йв1; В — без мутации (стрелка — положение делеции)
или электрофизиологической коррекции), а также имелись случаи ВСС среди родственников.
Кроме того, при секвенировании 23 экзона гена MYH7 у пациентов с ГКМП была выявлена мутация Glu930del у брата (пациент №6, 29 лет) и сестры (пациентка №7, 18 лет). Обнаруженный генетический дефект (рис. 4) представляет собой делецию нуклео-тидов GAG, которая приводит к потере глутаминовый кислоты Glu в положении 930 последовательности белка. Данная мутация впервые описана F. Tesson и соавт. при исследовании семейных случаев ГКМП во французской популяции и ассоциировалась с плохим прогнозом заболевания [17].
У обследованных нами пациентов №6 и №7, имеющих делецию, наблюдалось различное клиническое течение ГКМП. У сестры на момент обследования выявлена необструктивная форма заболевания с благоприятным течением. У брата при наличии необ-структивной формы заболевания наблюдалась более тяжелая клиническая картина: одышка при небольшой физической нагрузке, сердцебиения, перебои в области сердца, синкопальные состояния. Выявлены дилатация левого предсердия и ЛЖ, выраженная гипертрофия МЖП (22 мм), жизнеугрожающие нарушения ритма, требующие имплантации кардиовертера-дефибриллятора.
Эта же мутация была выявлена у матери (52 года) пациентов №6 и 7 (рис. 5). У женщины диагностирована необструктивная форма ГКМП без выраженной гипертрофии МЖП (14 мм) в сочетании с некомпактным миокардом в области верхушки ЛЖ. Таким образом, у обследованных членов этой семьи клинические проявления заболевания были различными: у матери диагностирована необструктивная форма заболевания с благоприятным течением, у сына — быстрое развитие дилатационного ремоделирования с возникновением жизнеугрожающих нарушений ритма.
Ген MYBPC3, кодирующий миозинсвязывающий белок С, локализуется на 11-й хромосоме ( 11р11) и состоит из 37 экзонов. Мутации в этом гене являются причиной 40—42% случаев ГКМП [5, 12]. Миозинсвязывающий белок С участвует в формировании саркомеров миофибрилл, связываясь с миозином и тайтином, и регулирует сокращения посредством фосфорилирования. Конкретные механизмы, приводящие к нарушению сократительной функции миофибрилл и развитию ГКМП, остаются не уточненными.
В 17 экзоне гена MYBPC3 обнаружено 19 мутаций, в 24 экзоне — 12, одна из которых встречалась у 1/4 голландских пациентов с ГКМП [13, 18]. В результате проведенного исследования у паци-
ентов, проживающих на территории Беларуси, в 17 экзоне гена МУВРС3 были выявлены 2 мутации и не обнаружено мутаций в 24 экзоне.
При определении нуклеотидной последовательности 17 экзона гена МУВРС3 у пациента №8 (мужчина, 48 лет) была обнаружена ранее описанная мутация Мп515йе1 (е.1543_1545ёе1ЛЛС) (рис. 6), представляющая собой делецию 3 нуклеотидов ААС, которая приводит к потере аминокислоты аспарагина в 515 положении последовательности белка.
Данная мутация была впервые выявлена у пациента с дилатационной кардиомиопатией в немецкой популяции [19]. В нашем исследовании мутация обнаружена у пациента с ГКМП, имеющего выраженную гипертрофию ЛЖ (ИММ ЛЖ - 211 г/м2, толщина МЖП - 22 мм) и латентную обструкцию. Весьма вероятно, что выявленная делеция в гене МУВРС3 может быть причиной как гипертрофической, так и дилатационной кардиомиопатии.
При секвенировании 17 экзона гена МУВРС3 также была выявлена ранее описанная мутация Ащ50201п у пациентки №9 (рис. 7). В семейном анамнезе этой женщины (35 лет) отмечался случай ВСС (смерть отца в молодом возрасте). Заболевание манифестировало в возрасте 18 лет, диагностирована необструктивная форма заболевания в сочетании с некомпактным миокардом в области верхушки ЛЖ. При обследовании членов семьи этой пациентки (рис. 8) мутация Ащ50201п выявлена у младшего сына (1 год) и у сестры (38 лет) пациентки №9.
Мутация Ащ50201п впервые описана в 2 семьях с ГКМП в Великобритании. У 4 пациентов с мутацией Ащ50201п (от 45 лет до 81 года) наблюдались различные клинические признаки ГКМП, у 3 пациентов с данной мутацией - бессимптомное течение ГКМП с выраженной верхушечной гипертрофией или гипертрофией МЖП (24, 37 мм), выявленной при эхо-кардиографическом исследовании, также имелся случай ВСС носителя этой мутации в молодом возрасте (16 лет), а у 7 индивидуумов, имеющих мутацию А^5020!п, не выявлено признаков заболевания при длительном наблюдении. По результатам проведенных исследований можно сделать вывод, что в
большом количестве случаев мутация Ащ50201п характеризуется длительным бессимптомным течением заболевания с риском ВСС [20].
В результате проведенного исследования обнаружены мутации: А1а729Рго в 20 экзоне гена МУН7, 01ы924Ьуз и 01ы930йв1 в 23 экзоне гена МУН7, А^50201п и Азп515йв1 в 17 экзоне гена МУВРС3. Мутаций в 19 экзоне гена МУН7 и 24 экзоне гена МУВРС3 у пациентов с ГКМП, проживающих на территории Беларуси, не выявлено. Кроме того, результаты нашего исследования показывают, что одни мутации определяют неблагоприятное течение ГКМП, другие ассоциируются с более благоприятным прогнозом, но во многих случаях фенотипические характеристики заболевания являются гетерогенными у пациентов даже с одинаковыми дефектами генов. Разнообразие фенотипических проявлений ГКМП у пациентов с одинаковыми мутациями в генах белков саркомера указывает на то, что клинические характеристики заболевания, по-видимому, определяются не только этими дефектами, но и генетическим фоном, так называемыми генами-модификаторами, которые усиливают или ослабляют действие основной мутации и тем самым влияют на проявления заболевания [3, 5].
Рис. 5. Родословная семьи с ГКМП: о — нет признаков ГКМП; • — диагностирована ГКМП; плюс и минус — соответственно наличие или отсутствие мутации 0!ы930йв!; ? — нет клинического обследования
1
2
Рис. 6. Фрагмент нуклеотидной последовательности 17экзона гена МУВРС3:1 — с мутацией Asn515dвl; 2 — без мутации (стрелка — положение делеции)
Рис. 7. Фрагмент нуклеотидной последовательности 17экзона гена МУВРСЗ: А — с мутацией Ащ50201п; В — без мутации (стрелка — положение мутации)
Рис. 8. Родословная семьи пациентки №9: о — нет признаков ГКМП; • — диагностирована ГКМП; плюс и минус — соответственно наличие или отсутствие мутации Ащ5020!п; ? — нет клинического обследования
Прогресс в области изучения генетических процессов, лежащих в основе развития ГКМП, дает неоценимо важную информацию для клинической кардиологии. Основанный на генотипировании диагноз ГКМП позволяет выявить пациентов с неблагоприятным течением заболевания и изменить стратегию лечения. Использование генетического тестирования в кардиологической практике предоставит возмож-
ность врачам осуществлять контроль за развитием заболевания не у всех членов семьи пациента, а только у тех родственников, у которых обнаружены мутации. Кроме того, выявление генетических маркеров ГКМП у лиц, чья деятельность связана с профессиональным спортом, тяжелым физическим трудом или экстремальными условиями, будет способствовать снижению риска внезапной смерти у данной категории лиц.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Maron B.J., Gardin J.M. et al. Prevalence of Hypertrophic Cardiomyopathy in a General Population of Young Adults. Circulation. 1995; 92: 785-9.
2. Semsarian C., Maron M.S. et al. Genetics of hypertrophic cardiomyopathy after 20 years clinical perspectives. J Am Coll Cardiol. 2012; 60: 705-15.
3. Maron B.J. Hypertrophic cardiomyopathy: a systematic review. JAMA. 2002; 287 (10): 1308-20.
4. Селезнев Д.М., Габрусенко С.А. и др. Роль мутаций в гене тяжелой цепи сердечного р-миозина в российской популяции больных с гипертрофической кардиомиопатией. Кардиология. 2005; 45 (4): 15-20.
[Seleznev D.M., Gabrusenko S.A., Par-fenova E.V., Naumov V.G., Stambol'skii D.V., Tkachuk V.A. The role of mutation in cardiac beta-myosin heavy chain gene in population of patients, Kardiologiia. 2005; 45 (4): 15-20 (in Russian)].
5. Иманов Б.Ж. Генетические аспекты гипертрофической кардиомиопатии. Кардиология. 2003; 4: 56-60. [Imanov B.Zh. Genetic aspects of hyper-trophic cardiomyopathy, Kardiologiia. 2003; 43 (4): 56-60 (in Russian)]
6. Mathew C.C. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA. Methods Mol Biol. 1985; 2: 31-4.
7. Morita H., Rehm H.L., Menesses A. et al. Shared genetic causes of cardiac hypertrophy in children and adults. N. Engl. J. Med. 2008; 358: 1899-1908.
8. Garcia-Castro M., Reguero J.R., Batalla A. et al. Hypertrophic cardiomyopathy: low frequency of mutations in the p-myosin heavy chain (MYH7) and cardiac troponin T (TNNT2) Genes among Spanish Patients.
Clinical Chemistry. 2003; 49: 1279-85.
9. Epstein N.D., Cohn G.M., Cyran F. et al. Differences in clinical expression of hypertrophic cardiomyopathy associated with two distinct mutations in the beta-myosin heavy chain gene. Circulation. 1992; 86: 345-52.
10. Cardiogenomics: Sarcomere Gene Mutation Screening Database / National Heart, Lung and Blood Institute. 2001-2006. URL: http://cardiogenomics.med.harvard. edu/project-detail?project_id=230 (дата обращения 12.01.2012).
11. Werle E., Schneider C., Renner M. et al. Convenient single-step, one tube purification of PCR products for direct sequencing. Nucleic Acids Res. 1994; 22 (20): 4354-5.
12. Костарева А.А., Гудкова А.Я. и др. Молекулярно-генетические аспекты и особенности клинического течения некоторых форм гипертрофической кардиомиопатии. Вестник аритмологии. 2003; 32: 57-61.
[Kostareva AA, Gudkova Ala, Semernin EN, Shliakhto EV. Molecular genetic aspects and clinical features of some forms of hypertrophic cardiomyopathy, Vestnik aritmologii. 2003; 32: 57-61 (in Russian)]
13. Human Gene Mutation Database / BIOBASE Biological Databases. 2013. URL: http:// www.biobase-international.com/product/ hgmd (дата обращения 26.03.2013).
14. Жейкова Т.В., Голубенко М.В. Мутации
в гене тяжелой цепи в-миозина у больных гипертрофической кардиомиопатией. «Науки о человеке»: материалы VIII конгресса молодых ученых и специалистов. Томск: СибГМУ, 2007. 273 с. [Zheikova T.V., Golubenko M.V Mutations in the myosin heavy-chain gene in patients with hypertrophic cardiomyopathy. In:
Ogorodova L.M., Kapilevich L.V., Zhabina E.S., editors. «Science of human»: Materials VIII Congress of Young Scientists and Specialists; 2007, May 17-18; Tomsk, Russia. Tomsk: SibGMU; 2007; p. 133-134 (in Russian)]
15. Watkins H., Rosenzweig A., Hwang D. et al. Characteristics and prognostic implications of myosin missense mutations in familial hypertrophic cardiomyopathy. N. Engl. J. Med. 1992; 326 (17): 1108-14.
16. Liu W.L., Xie W.L., Hu D.Y. et al. Analysis of MYH7, MYBPC3 and TNNT2 gene mutations in 10 Chinese pedigrees with familial hyper-trophic cardiomyopathy and the correlation between genotype and phenotype. Zhonghua Xin Xue Guan Bing Za Zhi. 2006; 34 (3): 202-7.
17. Tesson F., Richard P., Charron P. et al. Gen-otype-phenotype analysis in four families with mutations in beta-myosin heavy chain gene responsible for familial hypertrophic cardiomyopathy. Hum. Mutat. 1998; 12 (6): 385-92.
18. Alders M., Jongbloed R., Deelen W. et al. The 2373insG mutation in the MYBPC3 gene is a founder mutation, which accounts for nearly one-fourth of the HCM cases in the Netherlands. Eur. Heart. J. 2003; 24 (20): 1848-53.
19. Waldmuller S., Erdmann J., Binner P. et al. Novel correlations between the genotype and the phenotype of hypertrophic and dilated cardiomyopathy: results from the German Competence Network Heart Failure. Eur. J. Heart. Fail. 2011; 13 (11): 1185-92.
20. Page S.P., McKenna W.J., Andersen P.S. et al. Cardiac myosin binding protein-C mutations in families with hypertrophic cardiomyopathy. Disease expression in relation to age, gender, and long term outcome. Circulation: Cardiovascular Genetics. 2012; 5: 156-66.
Поступила 06 декабря 2013 г.
