CC BY
20
Раздел 4. ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНЫЕ И ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ ЖИВОТНОВОДСТВА
УДК 636.92:611
МОРФОЛОГИЯ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И ПОКАЗАТЕЛИ
КРОВИ КРОЛЬЧИХ ПОЛОВОЙ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ ЗРЕЛОСТИ ПРИ ВЛИЯНИИ ПРЕПЕРАТОВ
«Е-СЕЛЕН» И «СЕЛЕНОЛИН®»
В.В. АНИПКО
ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный педагогический университет» г. Оренбург, Российская Федерация, 460844 Л.Л. АБРАМОВА ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный аграрный университет» г. Оренбург, Российская Федерация, 460795
(Поступила в редакцию 15.01.2012)
Введение. Множественные молочные железы, как позднее филогенетическое образование кожного покрова животных, относятся к специализированным сложноорганизованным, высоколабильным органам, состоящим из железистой ткани с апокриновым типом секреции, миоэпителиальной, гладкомышечной, соединительной тканей, кровеносных и лимфатических сосудов, нервов, их волокон и окончаний.
Динамичность тканевых компонентов железы обусловлена сменой физиологического состояния организма самки (размножение, беременность, лактация), определяющей общую биологическую направленность функций половых органов и молочной железы. Следовательно, для железы характерно повторение циклов структурного развития, функционального дифференцирования и регресса [3, 7].
Морфогенез молочной железы, выражающийся в последовательном взаимодействии клеток органа между собой [9], начиная с эмбрионального и на протяжении всего периода воспроизводства самки регулируют половые гормоны, выполняя важную роль в развитии физиологической адаптации организма к репродуктивному циклу [5]. Велика роль в этом и микроэлементного статуса самки, в частности селена [10].
Применение препаратов селена для стимулирования маммогенеза крольчих актуально, поскольку ранее для этих целей препараты селена в кролиководстве не применялись.
Цель работы - выявить закономерности роста и развития паренхиматозного и стромального компонентов молочной железы крольчих, их взаимосвязь с динамикой половых гормонов при влиянии препаратов «Е-селен» и «Селенолин®» в периоды половой и физиологической зрелости самок.
Материал и методика исследований. С целью изучения влияния препаратов селена на маммогенез у крольчих породы советская шиншилла в периоды полового созревания и физиологической зрелости
185
были сформированы три группы животных-аналогов в возрасте 3 и 6 месяцев по 3 гол. в каждой (n=18). Одна группа служила контролем, самкам 1-й опытной группы вводили препарат «Е-селен», 2 - «Селенолин®» в дозах соответственно 0,04 и 0,008 мл/кг массы тела животного. Спустя 10 дней после инъекции проводили убой животных с хозяйственной целью.
Экспериментальная часть включала в себя комплекс анатомических, гистологических, цитоморфологических, биохимических, химико-аналитических, морфометрических исследований и статистическую обработку материала.
Материалом для гистологического исследования служили пробы железы (1 см3) от самок всех исследуемых групп, которые подготавливали по общепринятой методике. Срезы толщиной 5-6 мкм окрашивали гематоксилином Майера-эозином, световую микроскопию осуществляли при помощи микроскопа Micros MSD 500 (Австрия), оснащенного цифровой камерой.
Цитоморфологическое исследование железы начинали с фиксации проб (0,025 см3 - для изготовления ультратонких срезов) в охлажденном 2,5%-ном растворе глютарового альдегида на фосфатном буфере (рН 7,4). После общепринятой подготовки и дегидратации материал заключали в смесь эпон-аралдит и на ультратоме LKB V (Швеция) изготавливали срезы толщиной 0,07-0,08 мкм. Электронную микроскопию производили на микроскопе JEM-7A (Япония).
Определение концентрации половых гормонов (лютеинизирующе-го (Лг), фолликулостимулирующего (ФСГ), пролактина (Прл), прогестерона (Прг), эстрадиола (Е-2)) в сыворотке крови осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа на спектрофотометре «Multiscan Labsystems» (Финляндия) с использованием стандартных наборов реагентов.
Биохимическое исследование крови проводили по следующим показателям и методикам: уровень гемоглобина, количество эритроцитов и лейкоцитов определялись гематологическим анализатором Medoni: СА 620, общий белок сыворотки крови исследовали по биуретовой реакции, АсАТ и АлАТ - кинетическим спектрофотометрическим методом, кальций - унифицированным калориметрическим методом, фосфор - UV методом без депротеинизации [4]. Коэффициент де Ри-тиса вычисляли исходя из соотношения: АсАТ/АлАТ [6].
Химико-аналитическое исследование количественного содержания селена в сыворотке крови осуществляли усовершенствованным нами флуориметрическим методом [8] на спектрофлуориметре SOLAR CM-2203.
Морфометрическое исследование гистоструктур молочной железы проводили с использованием лицензионной программы «ТестМорфо-4.0».
Статистическую обработку данных результатов исследований осуществляли при использовании программы Microsoft Excel [2]. Взаимо-
186
влияние морфометрических показателей гистоструктур выражали через коэффициенты парной корреляции [1].
Результаты исследований и их обсуждение. Половая зрелость у крольчих наступает в возрасте 3 месяцев, первая течка - сигнал готовности половой системы к спариванию. Но в это время организм самки еще не является сформированным, готовым к вынашиванию, рождению и выкармливанию потомства. Лишь в возрасте 6 месяцев с наступлением периода физиологической зрелости, самка становится способной к реализации материнского инстинкта.
В половую зрелость большая часть молочной железы представлена жировой тканью с множеством интенсивно ветвящихся кровеносных сосудов и нервов.
В этот период показатель концентрации селена в сыворотке крови самок 1-й опытной группы в 3, 2-й - в 4 раза был выше показателя в контрольной группе (рис. 1).
Рис. 1. Концентрация селена в сыворотке крови крольчих в возрасте 3 месяцев, мкг/мл
Гормональный фон самок (табл. 1) был следующий: в 1-й и 2-й опытных группах показатель концентрации Прл соответственно на 4,8 и 10 %, ФСГ на 6,1 и 7,8 %, ПРг на 65 и 68 % был ниже, чем в контрольной.
Таблица 1. Концентрация половых гормонов в сыворотке крови крольчих в возрасте 3 месяцев
Группы животных Прл, ммЕ/л ФСГ, ммЕ/мл ЛГ, ммЕ/мл ПРг, Нмоль/л Е-2, Пг/мл
Контрольная 76,0±2,08 1,32±0,03 1,13±0,02 6,25±0,07 17,66±1,76
1-я опытная 72,33±2,60** 1,24±0,01** 1,22±0,02** 2,18±0,03** 20,33±2,03*
2-я опытная 68,33±2,40* 1,22±0,03* 1,19±0,02** 2,0±0,04* 26,33±1,45**
*Р<0,05; **Р<0,01.
Концентрация ЛГ в сыворотке крови крольчих 1-й и 2-й опытных групп соответственно на 8 и 5,3 %, а Е-2 - на 15 и 49 % была выше показателей контрольной группы.
На фоне применения препаратов селена количество эритроцитов и лейкоцитов в крови животных 1-й опытной группы соответственно на 13 и 4,8 %, 2-й - на 19 и 7 % превышало данный показатель у крольчих контрольной группы.
Содержание гемоглобина и общего белка в 1-й опытной группе соответственно на 7,4 и 13 %, во 2-й - на 11,6 и 14,3 % было выше, чем в контрольной группе.
В крови самок 1-й опытной группы содержание белков альбуминовой и глобулиновой фракций (а, в, у) соответственно на 9,2, 4, 2,5 и 6 %, 2-й - на 12, 8,6, 6 и 3,7 % было выше, чем у крольчих контрольной группы.
Содержание кальция и фосфора в сыворотке крови животных 1-й опытной группы соответственно на 4,3 и 18,3 %, 2-й - на 15 и 22 % было больше контрольных показателей.
Количественное содержание ферментов АсАТ и АлАТ в сыворотке крови крольчих 1-й опытной группы соответственно на 8,7 и 3,4 % было выше, чем у контрольных, а во 2-й - ниже на 2,2 и 1,7 % по сравнению с показателями контрольной группы. Коэффициент де Ри-тиса у самок всех групп был в пределах нормы, что подтверждает отсутствие токсичного эффекта препаратов.
В данный период репродуктивного цикла в молочной железе крольчих контрольной группы только начинается формирование зачатков молочных ходов и протоков (рис. 2 А).
В местах образования железистых долек визуализируется достаточное количество нервных окончаний, пучков, выполняющих важные функции в маммогенезе.
В строме органа обнаруживаются адипоциты округлой формы с перстневидными ядрами, большое количество коллагеновых волокон.
В органе самок опытных групп (рис. 2 Б, В) отмечалась пролиферация эпителия и каналикуляция в жировую ткань терминальных отделов молочных ходов и протоков, причем интенсивность этого процесса выше во 2-й опытной группе.
Рис. 2. Гистоструктура молочной железы крольчих в возрасте 3 месяцев: А - контрольная группа; Б - 1-я опытная группа, В - 2-я опытная группа. Гематоксилин и эозин. 0б.40.0к.15; 1 - протоки; 2 - стромальный компонент; 3 - пролиферирующая часть протока; 4 - скопления адипоцитов; 5 - сосуды ГМЦР 188
Ядра клеток концевых отделов протоков с выраженной базофили-ей, что свидетельствует об активном ядерном синтезе. Сильных разветвлений эпителиальных тяжей не наблюдалось.
На фоне влияния препаратов селена в органе отмечается большое количество питающих его кровеносных сосудов.
В жировых дольках органа крольчих контрольной группы визуализируются высоко дифференцированные адипоциты, в цитоплазме которых множество вакуолей, заполненных триглициридами (рис. 3 А).
Рис. 3. Электронограмма ультратонкого среза молочной железы крольчихи в возрасте 3 месяцев: А - контрольная группа, Ув.х 10000; Б - 1-я опытная группа, Ув.х 10000;
В - 2-я опытная группа, Ув.х 10000;
1 - цитоплазма адипоцита; 2 - вакуоли с триглициридами;
3 - ядро адипоцита жировой дольки
В 1-й опытной группе на фоне влияния «Е-селена» вокруг зон пролиферации малодифференцированных эпителиоцитов терминалий протоков, в соединительнотканых трабекулах, выражен ангиогенез (рис. 3 Б).
Во 2-й опытной группе при влиянии «Селенолина®» в стенках протоков видны дифференцированые миоциты, активное формирование в соединительнотканых трабекулах сосудов обменного звена гемомик-роциркуляторного русла (рис. 3 В).
Показатели вариабельности (С,, %) результатов колебались в пределах от 0,05 до 1,7 % в контрольной группе (минимальны для диаметра нервного пучка, максимальны для диаметра железистой дольки), от 0,07 до 0,22 в 1-й (минимальны для диаметра железистой дольки, максимальны для диаметров адипоцита и внутридолькового протока) и от 0,06 до 0,27 во 2-й (минимальны для диаметра междолькового протока, максимальны для диаметра адипоцита) опытных группах (табл. 2).
Коэффициент точности (С8, %) колебался от 2,5 до 10,28 %, что свидетельствует о низкой точности величин.
Проведя парный корреляционный анализ между структурами молочной железы и гормонами, у крольчих контрольной группы выявлена максимальная положительная взаимосвязь (г = +0,99) массы молочной железы с Е-2 и ПРг и артериальными сосудами при максимально отрицательной взаимосвязи с Прл (г = -0,99), объемом адипоцита (-0,79) и диаметром протока (-0,76).
189
Таблица 2. Показатели гистоструктур молочной железы крольчих в возрасте 3 месяцев, мкм
Показатели Группы животных
контрольная 1-я опытная 2-я опытная
Артериолы 25,6±2,52 27,21±1,76* 30,13±1,64**
Собирательной венулы 35,58±2,43 41,08±2,70** 50,24±2,95*
Нервного пучка 11,45±0,30 12,45±0,70** 13,35±0,75**
Железистой дольки 232,52±12,15 241,81±7,73* 247,22±7,1**
Адипоцита 69,45±2,47 82,07±6,35 84,32±8,67
Междолькового протока 16,88±1,68 18,40±0,61* 19,08±0,48**
Внутридолькового протока 6,05±0,50 6,5±0,65* 6,7±0,48**
Эпителиоцитов протоков 5,14±0,49 5,87±0,30* 6,22±0,32*
*Р<0,05; **Р<0,01.
Обнаружена максимальная положительная (г = +0,86) взаимосвязь фонового селена с объемом адипоцита и диаметром протока, а отрицательная - с массой молочной железы и диаметром артерии (г = -0,98).
В 1-й опытной группе зарегистрирована максимально положительная связь между массой молочной железы и ЛГ (г = +0,99) и максимально отрицательная взаимосвязь Прл с селеном (г = -0,99).
Во 2-й опытной группе максимальная положительная связь зарегистрирована между массой молочной железы и объемом адипоцита (г = +0,96), диаметром артерии и селеном. Максимальная отрицательная взаимосвязь - между Прл и диаметром нервного пучка (г = -0,99), ФСГ, ПРг и селеном (г = -0,99).
Таким образом, в сыворотке крови животных контрольной группы в период эструс первого полового цикла на фоне недостатка селена увеличивается содержание Прл, ФСГ и ЛГ, в то время как содержание ПРг и Е-2 снижается. Это сдерживает ангиогенез, интенсивный рост массы молочной железы, но способствует увеличению объема жировых долек и диаметра протока.
В 1-й опытной группе на фоне применения «Е-селена» в крови повышается концентрация селена, механизм влияния которого способствует увеличению выработки Прл, ФСГ, ЛГ и ПРг и снижению Е-2, что приводит к изменению взаимосвязи структур, к сдерживанию ан-гиогенеза и притока артериальной крови, к уменьшению объема жировых долек.
Во 2-й опытной группе препарат «Селенолин®» способствует снижению концентрации ФСГ и Прг, повышению Е-2 и ЛГ, стимулирует ангиогенез, приток артериальной крови, рост и численность нервных волокон и их окончаний, сдерживает интенсивный рост паренхимы.
По сравнению с контролем препараты селена способствовали изменению морфологических и биохимических показателей крови в сторону их увеличения в пределах физиологической нормы.
В физиологическую зрелость, наступившую в возрасте 6 месяцев, концентрация селена в сыворотке крови самок 1-й опытной группы - в 3, 2-й - в 4 раза была выше показателя контрольной группы (рис. 4).
190
Контроль I огытная II спытнач
Рис. 4. Концентрация селена в сыворотке крови крольчих в возрасте 6 месяцев, мкг/мл
По сравнению с предыдущим периодом в контрольной и 1-й опытных группах она снизилась соответственно на 7 и 4,5 %.
В 1-й и 2-й опытных группах концентрация Прл соответственно на 1,6 и 7 %, Е-2 - на 44 и 41 %, ПРг - на 39 и 32 % была выше, чем в контрольной. В 1-й опытной группе концентрация ФСГ и ЛГ в сыворотке крови была ниже соответственно на 13 и 24 %, а во 2-й - на 9 и 8 % выше, чем в контрольной группе (табл. 3).
Таблица 3. Концентрация половых гормонов в сыворотке крови крольчих в возрасте 6 месяцев
Группы животных Прл, ммЕ/л ФСГ, ммЕ/мл ЛГ, ммЕ/мл ПРг, Нмоль/л Е-2, Пг/мл
Контрольная 61,66±2,03 1,41±0,02 1,53±0,02 3,87±0,12 11,66±1,20
1-я опытная 62,67±3,53* 1,23±0,06* 1,17±0,03 5,40±0,53 16,83±1,16
2-я опытная 66,0±2,65** 1,54±0,08 1,65±0,03* 5,10±0,40* 16,40±0,98**
*Р<0,05; **Р<0,01.
В сравнении с предыдущим периодом в сыворотке крови крольчих контрольной группы отмечалась тенденция к снижению Прл, ПРг и Е-2 соответственно на 19, 38 и 34 %, в то время как концентрация ФСГ на 7 %, а ЛГ на 35 % повышалась. В 1-й и 2-й опытных группах соответственно наблюдалось снижение концентрации Прл на 13 и 3 % и Е-2 на 17 и 38 %, только в 1-й снизилась концентрация ФСГ на 0,8 %, ЛГ на 4,1 %. Повышение показателей Прг на 147 и 155 % было отмечено соответственно в 1-й и 2-й опытных группах, только во 2-й ФСГ повысился на 26 %, ЛГ - на 39 %.
При применении препаратов селена количественное содержание эритроцитов и лейкоцитов в крови животных 1-й опытной группы соответственно на 3,4 и 5 %, 2-й - на 5 и 18 % превышало данный показатель у крольчих контрольной группы. По сравнению с показателями в возрасте 3 месяцев содержание эритроцитов и лейкоцитов в кон-
191
трольной группе снизилось соответственно на 1,2 и 6 %, в 1-й опытной -на 9 и 6 %, во 2-й опытной наблюдалось снижение только эритроцитов на 13 %, в то время как содержание лейкоцитов поднялось на 3,5 %.
В 1-й опытной группе содержание гемоглобина и общего белка соответственно на 5 и 0,6 %, во 2-й - на 7,4 и 1,7 % было выше, чем в контрольной группе. В этот период по сравнению с показателями в 3 месяца содержание гемоглобина в контрольной группе снизилось на 3,2 %, в 1-й и 2-й опытных группах - соответственно на 5,4 и 7 %. В контрольной группе содержание общего белка повысилось на 1,5 %, а в 1-й и 2-й опытных соответственно снизилось на 9,5 и 10 %.
Содержание альбуминов, а-, Р-, у-глобулинов в крови самок 1-й опытной группы соответственно на 3, 3,4, 6,3 и 3 %, 2-й - на 6 %, 6, 6 и 3 % было выше, чем у крольчих контрольной группы. В сравнении с показателями в возрасте 3 месяцев отмечалось снижение альбуминов в контрольной, 1-й и 2-й опытных группах соответственно на 4, 9,4 и 9 %, повышение а- глобулинов в контрольной группе на 1,2 %, в 1-й опытной - на 0,7 %, снижение во 2-й опытной группе на 0,9 %. В контрольной и 2-й опытной группах содержание Р-глобулинов снизилось соответственно на 1,6 и 1,1 %, а в 1-й опытной - повысилось на 2 %. В контрольной, 1-й и 2-й опытных группах отмечена тенденция к увеличению концентрации у-глобулинов соответственно на 4, 1,2 и 3 %.
Содержание кальция и фосфора в сыворотке крови животных 1-й опытной группы соответственно на 6 и 1,5 %, 2-й - на 6 и 7,4 % было больше контрольных показателей. Сравнив их с показателями крови самок в возрасте 3 месяцев, было отмечено, что в контрольной группе содержание Са и Р соответственно было выше на 5 и 8,6 %. В опытных группах картина несколько иная: в 1-й опытной группе содержание кальция увеличилось на 6 %, фосфора - уменьшилось на 7 %, во 2-й содержание обоих элементов уменьшилось на 4 %.
Количественное содержание ферментов АсАТ и АлАТ в сыворотке крови крольчих 1-й опытной группы соответственно на 25 и 4 %, а во 2-й - на 16,6 и 4 % было ниже, чем в контрольной группе. По сравнению с предыдущим периодом показатель АсАТ в контрольной группе увеличился на 4,3 %, а в 1-й и 2-й опытных группах уменьшился соответственно на 28 и 11 %, а АлАТ в контрольной группе был ниже на 8,6, на 15 % - в 1-й, на 10,5 % - во 2-й опытных группах. Показатель коэффициента де Ритиса у самок всех групп был в пределах нормы.
В период физиологической зрелости происходило вытеснение жировой ткани каналикулирующей железистой паренхимой. Следовательно, в органе снижалось количество адипоцитов. Особенно ускоренно этот процесс протекал в опытных группах (рис. 5 А, Б).
Стенки междольковых протоков, состоящие из двухрядного эпителия, утолщались за счет слоев миоцитов. Терминальные отделы протоков формировали железистые дольки с концевыми отделами сферической формы.
Цитоплазма эпителиоцитов внутри междольковых протоков слабо оксифильна, ядро с явно выраженной базофилией.
Рис. 5. Гистоструктура молочной железы крольчих в возрасте 6 месяцев: А - контрольная группа; Б - 1-я опытная группа, В - 2-я опытная группа.
Гематоксилин и эозин. 0б.40; Ок.15. 1 - протоки; 2 - сосуд ГМЦР;
3 - формирующаяся альвеола; 4 - сосуды ГМЦР
В эпителиоцитах концевых отделов протоков цитоплазма слабо ба-зофильна, а ядра выражено базофильны, крупные, занимающие большую часть клетки, что является характеристикой структуры малодиф-ференцированной эпителиальной клетки эктодермального дифферона молочной железы.
Регистрировалось увеличение численности гемокапилляров и нервных волокон в составе соединительнотканых трабекул. В концевых железистых образованиях видна сферическая ориентация клеток, небольшие просветы, часть эпителиоцитов дифференцирована.
У крольчих контрольной группы (рис. 5 А) отмечали разрастание соединительной ткани органа, активную пролиферацию и дифферен-цировку клеток концевых отделов протоков.
Во всех группах происходило формирование железистых долек с сосудами обменного звена и нервными окончаниями, что свидетельствовало о повышении роли нервной системы в регуляции процессов диф-ференцировки структур на завершающем этапе маммогенеза (рис. 6).
Рис. 6. Электронограмма ультратонкого среза молочной железы крольчихи в возрасте 6 месяцев. А - контрольная группа, Ув.х. 14000; Б - 1-я опытная группа, Ув.х. 10000; В - 2-я опытная группа, Ув.х. 10000; 1 - ядро фиброцита; 2 - ядро малодифференцированного эпителиоцита; 3 - безмиелинизированное нервное волокно; 4 - митохондрия 193
При влиянии препаратов селена, а в особенности «Селенолина®» (рис. 6 В), в цитоплазме клеток отмечали увеличение структур гладкого ЭПР и рибосом, участвующих в синтезе белков.
Показатели вариабельности (Су, %) результатов колебались в пределах от 0,03 до 0,45 % в контрольной группе (минимальны для диаметра адипоцита, максимальны для диаметра артерии), от 0,03 до 0,31 в 1-й (минимальны для диаметра железистой дольки, максимальны для диаметра нервного пучка) и от 0,06 до 0,30 во 2-й (минимальны для диаметра адипоцита, максимальны для диаметра нервного пучка) опытных группах (табл. 4).
Таблица 4. Показатели гистоструктур молочной железы крольчих в возрасте 6 месяцев, мкм
Показатели Группы животных
контрольная 1-я опытная 2-я опытная
Артериолы 29,9±4,67 33,09±1,93* 34,66±1,07**
Собирательной венулы 60,18±2,89 56,32±4,9* 54,30±4,05**
Нервного пучка 14,01±0,88 16,66±2,35* 17,03±2,28*
Железистой дольки 250,58±6,34 265,81±3,96* 270,74±7,09
Адипоцита 71,39±1,1 70,3±1,34** 69,7±1,97*
Междолькового протока 70,31±1,93 78,5±2,78** 79,98±2,88*
Внутридолькового протока 15,35±1,8 19,07±2,08 20,27±1,37**
Эпителиоцитов протоков 5,67±0,26 5,77±0,18** 6,13±0,25
*Р<0,05; **Р<0,01.
Коэффициент точности (С8, %) колебался от 2,62 до 13,51 %, что свидетельствует о низкой точности величин (табл. 4).
Проведя парный корреляционный анализ, установили, что в этот период в молочной железе крольчих контрольной группы выявлена максимальная положительная взаимосвязь массы молочной железы с концентрацией ФСГ (г = +1), Прл (г = +0,99), диаметром протока (г = +0,85), диаметра миоцита с ЛГ (г = 0,99), объема альвеол с ПРг (г = +0,98), объема эпителиоцита с концентрацией селена и Е-2 (г = +0,98), диаметра артерии с концентрацией селена (г = +0,96). Максимальная отрицательная связь зарегистрирована между концентрациями селена и Прл (г = -0,99), объемом ядра эпителиоцита (г = -0,99), массой молочной железы (г = -0,98) и диаметром протока (г = -0,93).
В 1-й опытной группе зарегистрирована максимально положительная взаимосвязь между ЛГ и Прл (г = +1), массой молочной железы с Прл и ПРг и Лг (г = +0,98). Максимальная отрицательная связь отмечена между объемом ядра миоэпителиоцита и концентрациями Прл и ЛГ (г = -0,99), ФСГ и ПРг (г = -0,95), а также массой молочной железы (г = -0,97), между объемом ядра эпителиоцита и Е-2 (г = -0,98), диаметром нервного пучка и концентрацией Е-2 (г = -0,95).
Во 2-й опытной группе отмечена максимальная положительная взаимосвязь диаметра протока с концентрацией Прл, ПРг (г = +1), объ-
194
ема эпителиоцита с концентрацией селена в сыворотке крови (г = +0,99), Е-2 (г = +0,92), ЛГ (г = +0,80), объема альвеол с концентрацией ПРг (г = +0,98).
Максимальная отрицательная связь зарегистрирована между диаметром протока и концентрациями ФСГ, ЛГ, селена, массой молочной железы, объемом ядра эпителиоцита и диаметром протока (г = -1). Масса молочной железы в отрицательной связи с ПРг (г = -0,98), Прл (г = -0,92) и ЛГ (г = -0,83).
Таким образом, у животных контрольной группы в период эструс полового цикла на фоне низкого содержания селена в крови существенно увеличивается концентрация ЛГ и ПРг, незначительно - концентрация Прл и ФСГ и снижается концентрация Е-2. Сдерживается увеличение массы молочной железы, рост протоков, но при этом происходит активный ангиогенез, артериальный приток, дифференциров-ка миоэпителиоцитов, ядра и цитоплазмы эпителиоцитов концевых отделов протоков.
Изменение селенового статуса организма крольчих 1-й опытной группы незначительно увеличивает выработку половых гормонов (Прл, ФСГ, ЛГ и ПРг). При снижении Е-2 поддерживается рост терминальных отделов протоков и нервов. Вместе с тем на этом этапе мам-могенеза происходит увеличение диаметра сосудов, усиление артериального притока, дифференцировка миоэпителиоцитов, задержка диф-ференцировки эпителиоцитов и роста альвеол. В концевых участках протоков отмечается активная пролиферация эпителиоцитов.
На фоне влияния «Селенолина®» повышается концентрация ЛГ, ПРг, Е-2 и ФСГ. Следовательно, стимулируется рост массы железы, ангиогенез и артериальный приток. Отмечается активное образование альвеол и стимулирование дифференцировки эпителиоцитов (ядерный белковый синтез в малодифференцированных клетках) альвеол. Сдерживается рост протоков за счет снижения концентрации Прл и повышения присутствия в крови ПРг.
В этот период в обеих опытных группах препараты селена повышали уровень гематологических показателей.
Заключение. Результаты исследований позволяют утверждать, что механизм воздействия неорганической и органической форм селена на маммогенез обусловливает появление целого ряда частных закономерностей, а именно: селен инициирует интенсивный рост протоков и паренхимы органа, десинхронизирует маммогенез (относительно контроля) и ускоряет процесс достижения органом полной морфофункци-ональной зрелости. Однако органическая форма селена («Селено-лин®») обеспечивает более раннее формирование альвеол и дифферен-цировку эпителиоцитов (в возрасте 6 месяцев), а неорганическая форма в сочетании с витамином Е наиболее активизирует пролиферацию эпителиоцитов протоков и альвеол.
195
ЛИТЕРАТУРА
1. Автандилов, Г.Г. Основы количественной патологической анатомии / Г.Г. Автандилов. - М.: Медицина, 2002. - 240 с.
2. Базаров, М.К. Статистическая обработка результатов наблюдений средствами Microsoft Excel: пособие для аспирантов / М.К. Базаров. - Оренбург: Изд. центр ОГАУ, 2008. - 44 с.
3. Жеребцов, Н.А. Цитология, гистология и эмбриология / Н.А. Жеребцов. -Ульяновск, 2000. - 144 с.
4. Клиническое руководство по лабораторным тестам: под ред. Н. Тица. - М.: Юни-мед ПРЕСС, 2004. - 960 с.
5. Колодина, Л.Н. Нейрогормональная регуляция лактации / Л.Н. Колодина, В.В. Корхов //Акушерство и гинекология. - 1985. - № 5. - С. 5-8.
6. Медведева, М.А. Клиническая ветеринарная лабораторная диагностика: Справочник для ветеринарных врачей / М.А. Медведева. - М.: ООО «Аквариум-Принт», 2008. - 416 с.
7. Племяшов, К.В. Молочная железа - морфология, физиология и биохимические аспекты лактогенеза / К.В. Племяшов, В.И. Соколов, Ю.В. Конопатов. - СПб: ГАВМ, 2007. - 30 с.
8. Anipko, V.V. Definition of selenium concentrations change in a blood after application of selenium preparations by fluorometric technique / V.V. Anipko, V.S. Maryakhina, L.L. Abramova // Topic problem of biophotonics. III international symposium, 16-22 July 2011. - St-Peterburg; Nizhniy Novgorod, 2011. - P. 77-78.
9. Hennighausen, L. Developing a mammary gland is a stat affair / L. Hennighausen, G.W. Robinson, K.U. Wagner // J. Mammary Gland Biol. - Neoplasia. - 1997. - №> 2. - Р. 365-372.
10. Rousel, A.M. Trace Elements in Man and Animals / A.M. Rousel, R.A. Anderson, A.E. Favier // Plenum Publishers. - New York, 2000. - 358 p.
УДК 636.4:087.7:612.015.3
ВЛИЯНИЕ ДОБАВКИ ГУМИНОВОЙ ПРИРОДЫ НА ОБМЕН ВЕЩЕСТВ В ОРГАНИЗМЕ СВИНОМАТОК
О.М. БУЧКО Институт биологии животных НААН г. Львов, Украина, 79034
(Поступила в редакцию 22.01.2012)
Введение. Учитывая высокую чувствительность к стрессам продуктивных свиней, их низкую резистентность, склонность к нарушениям обмена веществ, неблагоприятные условия содержания, становится понятной необходимость изучения особенностей метаболизма свиней в различные возрастные и технологические периоды для лучшего обеспечения физиологических потребностей их организма в условиях промышленного выращивания [5].
Как известно, во второй половине супоросности (с 85-х до 114-х суток) у свиноматок повышается обмен веществ, потребность в энергии возрастает в 8 раз [7]. Эти изменения в ее организме объясняют тем, что свиноматка много энергии и питательных веществ использует на формирование плода. Для этого периода характерны большие затраты, связанные с использованием субстратных и энергетических веществ. Для предупреждения истощения организма свиноматок от
