CC BY
25
для формирования оптимальной плотности коллатерального русла, из которых наиболее передовой на сегодняшний момент являются генно-инженерные клеточные технологии.
В АО «ННМЦ» с 2010 г. начата разработка принципиально новой схемы лечения критической ишемии нижних конечностей на основе полученных собственных экспериментальных данных.
В основе нового разрабатываемого метода лежат полученные данные при создании модели критической ишемии на экспериментальных животных - моделирование этажного поражения артериального русла в подвздошно-бедренно-подколенной зоне с исключением возможности компенсации артериального кровотока по системе естественного коллатерального коллектора через внутренне-подвздошную - запирательно-глубокобедренную систему.
Полученные данные показали полное соответствие модели критической ишемии в эксперименте, её близость к клиническим проявлениям, а результаты лечения обнадеживающими.
Таким образом, на основе экспериментальных данных появляется реальная возможность подтвердить эффективность применения клеточных технологий с целью стимуляции ангиогенеза на фоне тяжелых этажных поражений артериального русла при критической ишемии нижних конечностей.
Результаты эспериментальных и клинических исследований будут доложены позднее.
ПРИМЕНЕНИЕ КЛЕТОЧНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ В СОЧЕТАНИИ С КОЛЛАГЕНОВЫМ МАТРИКСОМ ДЛЯ
ЛЕЧЕНИЯ РАН ПРИ ЛОКАЛЬНОЙ ИШЕМИИ НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Кауламбаева М.З., Бименов К.С., Узбеков М.Б., Беспаев А.Т.
ТОО Научно-производственное предприятие «Антиген», Алматы, Казахстан Национальный научный медицинский центр Астана, Казахстан
Целью данной работы было обосновать эффективность применения культур аутологичных стволовых клеток костного мозга и клеток диплоидного штамма фибробластов человека ЭФЧ 01/05 , иммо-билизированных на коллагеновом матриксе для лечения ран при экспериментально воспроизведенной локальной ишемии нижних конечностей.
Опыт проводили на кроликах массой 3-4 кг, 18 голов. Животные были разделены на три группы. Животным первой группы вводили в/м в область раны в несколько точек 1 мл суспензии культивируемых аутологичных клеток костного мозга (АККМ) в концентрации 1 млн.клеток. Затем 1,5 мл суспензии смешали с коллагеновым матриксом и в виде геля наносили на поверхность раны. Поверхность раны закрывали коллагеновой мембраной. Животных второй группы проводили аналогичные манипуляции с использованием суспензии культуры клеток эмбриональных фибробластов человека ЭФЧ 01/05. Животным третьей группы (контрольной) на рану наносили метилурациловую мазь.
На 7 и 14 сутки эксперимента животным под местной анестезией удаляли фрагмент раневой поверхности для приготовления гистологических препаратов, наносили контуры ран на прозрачные пленки, для определения размера ран. Производили забор крови для анализа на печеночные пробы АсАТ и АлАТ.
В результате проведенных исследований было определено, что наиболее оптимальным методом лечения ран при локальной ишемии нижних конечностей является введение культивируемых аутологичных клеток костного мозга (АККМ). В этом случае происходит почти полное заживление раны(82,3±4,6%) и показатели крови на печеночные пробы АсАТ и АлАт приходят в норму на 7 сутки лечении. Во второй испытуемой группе так же происходит заживление ран, но не столь активно, как в первой. Площадь заживления раны составляет 65,5±6,5% и показатели крови на печеночные пробы приходят в норму только на 14 сутки лечения. Применение метилурациловой мази за 14 суток приводит к заживлению 40±4,5% поверхности раны, а показатели крови не приходят в норму, что указывает на локальную ишемию.
Таким образом, на основании полученных результатов можно сделать заключение о том, что применение аутологичных клеток костного мозга в сочетание с коллагеновым матриксом для лечения ран при экспериментально воспроизведенной локальной ишемии нижних конечностей является более эффективным по сравнению с традиционными методами лечения.
Результаты данного эксперимента открывают широкие возможности применения клеточных технологий в ветеринарии и медицине.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ЗАЖИВЛЕНИЯ ТРАВМАТИЧЕСКОГО
ДЕФЕКТА БАРАБАННОЙ ПЕРЕПОНКИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КУЛЬТИВИРОВАННЫХ
АЛЛОФИБРОБЛАСТОВ
Досова А.К., Федотовских Г.В., Шаймарданова Г.М.
Национальный научный медицинский центр Астана, Казахстан
Как известно, аллогенные и аутогенные фибробласты успешно применяются в отоларингологии, восстанавливая целостность барабанной перепонки (Пальчун и др.2001,Туманов В.П. и др.,2001).
Наряду со значительно сокращенными сроками регенераторного процесса, весьма важным является и качество морфологической структуры восстановленной барабанной перепонки, несомненно влияющее на акустические свойства тимпано-оссикулярной системы. Поэтому в цель настоящей экспериментальной работы входило сравнить морфологическую картину заживления дефекта барабанной перепонки в условиях саморегенерации и при использовании культуры аллогенных фибробластов. Травматический дефект барабанной перепонки моделировали на овцах путем перфорации парацентезной иглой диаметром 3мм. Аллогенные фибробласты брались из кожно-мышечной ткани 8-10 недельных плодов кроликов и культивировались на коллагеновой губке. Животные были разделены на группы: с интактной барабанной перепонкой, с дефектом её в условиях самовосстановления и при лечении трансплантацией аллогенных культивированных фибробластов. Животные выводились из эксперимента на 29 сутки моделирования. Материал фиксировали в 2,5% растворе глютаральдегида, проводили по общепринятой электронномикроскопической методике и заключали в эпон. Полутонкие срезы окрашивали метиленовым синим, азуром-2 и основным фуксином (С. Humphrey, F. Pittman, 1974).
Морфологическая структура интактной барабанной перепонки состояла из соединительнотканной основы, наружного эпидермального покрова и внутреннего однослойного реснитчатого эпителия. Самовосстановленная барабанная перепонка характеризовалась различной степенью зрелости грануляционной ткани - от низкой до резко фиброзированной. Регенерирующий эпителиальный пласт был неполноценен. Расположенная на протяжении барабанная перепонка имела патологически изменённую соединительнотканную основу, участки подэпителиального отёка и деструкции эпителия. При восстановлении барабанной перепонки с помощью клеточной терапии, грануляционная ткань отличалась появлением многочисленных клеточных элементов, коллагеновых волокон и сосудов. Регенерирующий эпителий имел характерные соединительнотканные сосочки. Расположенный рядом многослойный плоский эпителий располагался на утолщенной рыхлой соединительной ткани с многочисленными капиллярами и клеточными элементами. Внутренний эпителий был представлен 2 рядами клеток, отдельные из которых были с ресничками.
Таким образом, использование культивированных аллогенных фибробластов способствует полноценному восстановлению целостности травмотического дефекта барабанной перепонки.
