CC BY
57
100 триптических и нетриптических фрагментов. Он влияет на
адаптивные реакции животных. Препарат вводили в/б в дозе 0,20 мкг и оценивали поведение животных в течении 60 минут, а затем и дней.
ACOUSTIC STARTL - RESPONSE OF MOUSE EXPERIMENTAL CONDITIONS
Baimatov V.N., Khromova E.V.
Summary
The article presents data on the response of mice to various strength and tone of the music. The positive and negative effects on mice BM and MM. Also, the authors used forvet domestic product which is a high molecular weight polysaccharide complex consisting of 100 and netripticheskih tryptic fragments. It affects the adaptive responses of animals. The authors administered the drug / W at a dose 0.20 mg and evaluated the behavior of animals in 60 minutes, and then the days.
УДК 619:616.98:578.825.1-092
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ПЕЧЕНИ МЫШЕЙ РАЗНЫХ ЛИНИЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЗАРАЖЕНИИ
ГЕРПЕСОМ
Байматов В.Н. - д.в.н.; Хромова Е.В. - аспирант Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии
имени К.И. Скрябина
Ключевые слова: БМ - большой мозг, ММ - малый мозг, в/б -внутрибрюшинно, ПВГ - простой вирус герпеса, ФЭЧ - фибробласт эмбрион человека, АЭЧ - амнион эмбрион человека, ЦПЭ -цитопатогенный эффект.
Keywords: BM - big brain, MM - small brain, b / w - ip PVG - simple herpes virus, FECH - fibroblast human embryo AECH - amnion human embryo, CPE - cytopathic effect.
Введение. Вирус герпеса вызывает экспериментальную инфекцию у кроликов, морских свинок, хомяков, белых мышей, крыс, обезьян. Заражение у этих животных может быть произведено путем введения вируса в роговицу, мозг, внутрибрюшинно (в брюшную полость) [1...5]. Новорожденные мыши особенно восприимчивы к вирусу герпеса и погибают на 5-6-й день после внутрибрюшинного заражения.[1]. При церебральном и внутрикожном введении у мышей возникают энцефалиты и наблюдается летальный исход через несколько дней. Чувствительными культуральными клетками оказались ФЭЧ, АЭЧ, диплоидные
фибробласты амниона человека и почек обезьян, а также культуры клеток почек хомяка, культуры клеток роговицы кролика. Среди различных культур, испытанных на чувствительность их к вирусу герпеса, были и культуры из клеток саркомы Рауса, в которых размножение вируса герпеса на 4-й день после заражения также сопровождается развитием ЦПЭ. Имеются данные, что через 72 часа инфекционный титр вируса гриппа в культуральной жидкости, полученной после заражения легочным материалом у животных равен 3,80 ^- ТЦДз/мл, а в опытной группе титр вируса снижается на 1,2 ^- ТЦДз/мл [1].
Объект и методика. Объектом исследований являлись линейные мыши ММ и БМ (полученные из опытного питомника) массой 17...19 г [2,3,5]. Их заражали вирусом ПВГ-2. Этот штамм вируса является высокоадаптированным к мышам. На мышах-самках получена экспериментальная модель генитального герпеса путем заражения их вагинально с помощью ватного тампона, смоченного неразведенной вирусной суспензией. Каждая группа содержала по 20 мышей. Через 12-14 дней погибло не менее 80% и 75% зараженных животных соответственно. У погибших животных оценивали патологоанатомичесимии методами состояние внутренних органов. Оставшихся в опыте мышей убивали и брали кусочки внутренних органов для фиксации в 12% -ном нейтральном формалине и последуюшей гистологической обработки. Полученные на микротоме срезы окрашивали гематоксилином и эозином и анализировали. После проведение опытов полученные данные статистически обрабатывали.
Результаты исследований. Установлено, что вирус герпеса обладает патогенностью для беременных белых мышей и их потомства. Существует трансплацентарная передача вируса эмбриону и плоду. Вирус активно размножается в плаценте, эмбрионе и в тканях плода, вызывая специфические изменения. В зависимости от срока беременности наблюдали выкидыши, мертворожденных, нежизнеспособных мышат и с недостатками развития. У выживших мышей, рожденных от инфицированных животных, отмечали иммунологическую толерантность к гомологическому вирусу герпеса на протяжении 2 мес. жизни. В течение этого периода мыши были достаточно активны, существенных отличий между группами не наблюдали. В тоже время при изучении стартл -реакции на звук и пищевой раздражитель выявили отличия. Животные с хорошо развитой центральной нервной системой (линия БМ) быстрее адаптировались к звуку и меньше беспокоились. В тоже время мыши с меньшей ее массовой долей (линия ММ) испытывают страх или чувство тревоги от звукового раздражителя. У каждого из опытных животных страх имеет отчетливые, легко распознаваемые проявления при действии звукового раздражителя. Он представляет собой универсальную инстинктивную и необходимую для выживания реакцию, а громкий звук
может быть реальной угрозой жизни, поэтому и требуются приспособительные реакции. Мыши, имеющие большую по величине мозг (данные Перепелкиной О.В.,2009), уже через 10 мин собирают информацию о новой обстановке, в которую их поместили.
Рис.1 Изменения в печени мышей Рис. 2. Значительного размера
линии ММ при ПВГ-2. Микрофото. пузырьковиднях образования в
Окраска гематоксилин эозином. Ок.10, печени мышей БМ при ПВГ-2.
об. 20. Микрофото. Окраска гематоксилин
эозином. Ок.Ю, об.40.
Уровень исследовательской активности у них выше, а обстановка теста быстро теряет для них новизну. Мыши лини БМ обучаются находить цель, ориентируются в пространстве. Мыши линии БМ и ММ по разному формируют навыки разной сложности. При помощи используемого нами лабиринта можно стимулировать познавательные и когнитивные способности мышей. Это согласуется с данными литературы [3.5].
Рис.3 Застойные явления в печени и расширение пространств Диссе.
Микрофото. Окраска гематоксилин эозином. Ок.10, об.20.
При исследовании органов мышей линии БМ и ММ после применения ПВГ-2 установлено, что в печени выявляются определенные гистологические изменения. У животных обеих групп печень состоит из стромы и паренхимы. Строма образована из соединительнотканной капсулы и отходящими от нее трабекулами, разделяющими железу на отдельные дольки. Каждая долька имеет шестигранную форму, в центре дольки проходят центральная вена (рис.1), от центральной вены
веерообразно к периферии проходят печеночные пластинки, образованные гепатоцитами кубической или полигональной формы. Ядра клеток округлой формы и занимают центральное положение, хроматин ядра плотный и на фоне ядра не четко определяются ядрышки. Выявляется карипикноз и хроматолиз. Довольно часто встречаются полиплоидные ядра. Гепатоциты плотно контактируют между собой, цитолемма определяется недостаточно четко, цитоплазма имеет базофильный оттенок. Между печеночными пластинками располагаются внутридольковые венозные синусоиды с повышенным полнокровием. Кровеносные сосуды выстилаются эндотелиальными и макрофагическими клетками, вокруг синусоидных капилляров определяются периваскулярная зона Диссе с небольшим отеком и наличием иммунокомпетентных клеток вокруг микрососудов. В кровеносных капиллярах в определенной степени выявляются застойные явления только в определенных участках и в большинстве случаев полнокровие заметно. Наиболее заметные изменения касаются наличия лимфоидных структур в различных участках печени - их количество, особенности расположения и размеры сильно варьируют. Дольки печени образованы печеночными пластинками. Гепатоциты в них окрашиваются равномерно с базофильным оттенком цитоплазмы, что указывает на высокую функциональную активность клеток. В слаборазвитой междольковой рыхлой соединительной ткани располагаются триада печени: междольковый желчный проток,
междольковая артерия и вен. В гепатоцитах определяются митозы и наличие полиплоидных ядер, в цитоплазме имеются секреторные компоненты. Небольшое количество и размеров лимфоидные скопления определяются за пределами долек печени, в междольковой соединительной ткани и по ходу междольковых структур: кровеносных сосудов (рис.2), желчного протока и таким образом лимфоидные клетки охватывают обширную площадь.
Несколько больших размеров лимфоидные скопления достигают в соединительной ткани в непосредственной близости от триады печени или вокруг триады, при этом наиболее часто отмечается их плотное расположение (рис.3). В тоже время в гепатоцитах видны признаки снижения пластических процессов по дистрофическому типу. Проведенный эксперимент показал, что ПВГ-2 обладает умеренным гепатотропным действием. Известно, что все культуры клеток могут быть использованы для выращивания вируса герпеса, которое сопровождается цитопатогенным эффектом (ЦПЭ), с образованием внутриядерных включений и гигантских клеток с последующей их деструкцией. На микрофотографиях хорошо видны циотопатогеннные эффекты в печени мышей. В области центральной вены расположены гепатоциты с ЦПЭ, которые составляют до 30.40% от всего количества в дольке. Причем, у мышей линии БМ их на 10.15 процентов больше, чем у линии ММ.
Полученные данные свидетельствуют о выраженности морфологических изменений при ПВГ-2, вероятно детерменированных необходимостью повышения функций гепатоцитов для обеспечения жизнеспособности в условиях патогенного воздействия. Литературные и собственные данные позволили нам составить интегральную схему изменений при ПВГ-2 (схема 1).
Аналогичные данные нами найдены у других автров, которые использовали вирус простого герпеса 1 типа (ВПГ-1) с множественным заражением - 0,01 ТНД з/кл. Через 48 часов в зараженной контрольной культуре наблюдали полное повреждение клеток (вирусное цитопатогенное действие, ЦПД), которое начинало частично проявляться после 10 часов инфекции. Специально исследовали инфекционный титр ВПГ-1 в головном мозге у двух групп животных. С этой целью заражали мышей ВПГ-1 внутрибрюшинно и на 8-ой день животных убивали. У них стерильно извлекали головной мозг и гомогенизировали в фосфатном буфере рН 7,0. Величина инфекционного титра вируса в. головном мозге животных составила 3,75; 4,84; 4,42; 4,26; 3,92 ^ ТЦД.
Выводы. Проведенные нами экспериментальные исследования обусловленных вирусом простого герпеса 2 типа, позволили получить данные о степени выраженности морфологических изменений в печени мышей разных линий. Это позволяет планировать мероприятия по стимулированию органа к инфекционному воздействию, например нами предлагается для этой цели форвет (схеме 2). В данном случае следует направить усилия на энергообеспечение печени, для усиления ее детоксикационных функций. ЦПЭ в печени является маркером эффективности рекомендованных веществ.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Баринский И.Ф., Экспериментальное изучение противовирусной активности иммуномодулятора «Гепон» при инфекциях, обусловленных вирусами простого герпеса 1 и 2 типов // Баринский И.Ф., Алимбарова Л.М., Лазаренко А.А., Атауллаханов Р.И. - Вопросы
Схема 1. Изменение синтеза белков при ПВГ-2 и влияние форвета.
Схема 2. Действие форвета при вирусных инфекциях.
вирусологии, 2003, №5.- 30-33. 2. Маркина Н.В., Перепелкина О.В., Полетаева И.И Асимметрия в поведении мышей, селектированных на вес мозга. Сб. XYIII съезда физиологического общества им. И.П. Павлова. Тезисы докладов. Казань. 2001 С. 151. 3. Маркина Н.В., Перепелкина О.В., Плеханова И.Л., Маркова Е.Г., Ревищин А.В., Полетаева И.И. Асимметрия поведения и морфологии мозга у мышей, селектированных на большой и малый вес мозга. Актуальные вопросы функц. межполушарной асимметрии. Всерос. конф., Москва, 2003, тез.докл. С. 170. 4. Perepelkina O., Pinigina E., Markina N., Poletaeva I. Environmental enrichment behavioural effects in mice, selected for large and small brain weight. 7th Annual meeting of IBANGS, Sitges, Spain, June 9-12, 2005. P.27. 5. Salimov R.M., Markina N.V., Perepelkina O.V., Poletaeva I.I. Exploratory behavior of F2 crosses of mouse lines selec-ted for different brain weight: a multivariate analysis. Progr. In Neuro-Psychopharm. Biol. Psychiatry 2004, v.28, p.583-589.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ПЕЧЕНИ МЫШЕЙ РАЗНЫХ ЛИНИЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЗАРАЖЕНИИ ГЕРПЕСОМ
Байматов В.Н., Хромова Е.В.
Резюме
В статье представлены данные о герпетической инфекции 2 типа, которая занимает одно из ведущих мест. При герпесе, как и при других хронических заболеваниях с длительной персистенцией вируса, развиваются иммунодефицитные состояния, которые обусловлены недостаточностью звеньев иммунной системы и ее неспособностью элиминировать вирус из организма. Поэтому выявление изменений в печени, важном органе защиты при инфекциях, вызываемых вирусами герпеса, является актуальной задачей.
MORPHOLOGICAL CHANGES IN THE LIVER MICE OF DIFFERENT LINES IN EXPERIMENTAL HERPES-2 INFECTED
Baimatov V.N., Khromova E.V.
Summary
The article presents data on viral diseases, herpes infection caused by the herpes simplex virus type 2, is one of the leading places. Herpes, as if with other chronic diseases with long-term persistence of the virus, develop immunodeficiency states, which are caused by lack of parts of the immune system and its inability to eliminate the virus from the body. Therefore, the study of the drug, which enhances the efficiency of the immune defense against infections caused by herpes viruses types 1 and 2, is an urgent task. At the heart of forveta - attracting macrophages in inflammation, neutrophil activation, induction of synthesis of a and в interferon, change cell program the synthesis of other cytokines.
