CC BY
18
METALOTHIONEIN CONCENTRATION IN BLOOD PLASMA OF DAIRY COWS IN DEPENDENCE OF AGE AND VARIOUS CADMIUM CONTENT IN THE PLOUGHED
LAYER OF SOIL
Biktashev R.U., Bulanrova S.R. Summary
In article are represented concentrations of cadmium and metalothionein in dairy cow blood plasma. Established dependence of cadmium concentration rise
In connection with animal age. Physiological norm of metalothionein concentration in blood plasma is 20-30 nmol/ml.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-236-4-33-39 УДК: 636.7:612.11:619:616-001.4-039.22-085
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ, ПРИ ЛЕЧЕНИИ ИНФИЦИРОВАННЫХ РАН У СОБАК В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Билан А.М.- аспирант, Шнякина Т.Н. - д.в.н., профессор
ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный аграрный университет»
Ключевые слова: гематологические исследования, скорость оседания эритроцитов, лейкоциты, иммунологический статус, многокомпонентные смеси.
Key words: hematological examination, erythrocyte sedimentation rate, leukocytes, immunological status, multicomponent mixtures.
Кровь является жидкой тканью организма, состоящей из плазмы и кровяных клеток. Эритроциты, лейкоциты и тромбоциты являются форменными элементами крови. Кровь, лимфа и тканевая жидкость играют важнейшую роль в метаболизме животных [10]. По мнению ряда авторов [1,3,4] кровь является «отражением» состояния организма. Морфологический состав крови является одним из главных показателей физиологического состояния организма и позволяет более полно судить о течении обменных процессов в нем. В плазме крови содержатся белки, липиды, глюкоза, молочная и пировиноградная кислоты, небелковые азотистые вещества, минеральные соли, ферменты, гормоны, витамины, пигменты. С током крови транспортируются кислород, углекислый газ, азот. При оптимальной работе органов и тканей организма поддерживается го-меостаз.
Одним из важнейших диагностических методов является морфологическое
исследование крови, которое наиболее полно отражает реакцию всех внутренних органов при воздействии на организм различных патологических факторов. Основные показатели крови предоставляют картину состояния организма и позволяют судить о его защитных способностях, так как процессы, протекающие в организме, всегда отражаются на морфологическом и белковом составе крови [7]. Кроме того, наряду с исследованием морфологического состава крови определяют скорость оседания эритроцитов. Этот показатель играет большую роль в диагностике патологий, повышаясь при воспалительных процессах в организме животного, в частности пр раневом процессе [12]. В результате ряда исследований установлено, что возникновение и скорость течения инфекции на раневой поверхности зависит как от патогенных свойств микрофлоры, так и от местных факторов иммунной защиты [11]. В развитии раневой инфекции важную роль играют ослабление иммунной системы ор-
ганизма. Это обусловлено, прежде всего, тем, что организм животных подвержен воздействию многих неблагоприятных факторов внешней и внутренней среды, связанных с неудовлетворительными условиями содержания и кормления [5].
Материал и методы исследований. Исследования проводили на кафедре незаразных болезней ФГБОУ ВО ЮжноУральский ГАУ. Для гематологических исследований брали кровь из латеральной боковой вены голени собак до оказания лечебной помощи, затем на 3-и, 7-е, 14-е и 21-е сутки терапии. Морфологические исследования крови проводили по следующим показателям: скорость оседания эритроцитов (СОЭ), количество эритроцитов (RBC), лейкоцитов (WBC) и гемоглобина (HGB). Анализ проводили на автоматическом гематологическом анализаторе для ветеринарии BC-2800Vet, Mindray. СОЭ определяли по методике Панченкова Т.П.
[9].
Иммунологические исследования осуществляли по 3 показателям: фагоцитарная активность, фагоцитарное число, фагоцитарный индекс. Уровень иммунологических показателей устанавливали при помощи светового микроскопа " Olympus -CX 31" и латекса для фагоцитоза в 10 %-й суспензии. Математические исследования полученных данных проводили при помощи программы BioSta 2009. Статистическую значимость между контрольной и опытными группами оцениали по критерию Стьюдента. Для моделирования инфицированных ран были отобраны 15 беспородных собак, живой массой 10-13 кг, в возрасте 2-5 лет, из которых были сформированы 3 группы животных: контрольная, опытная группа №1 и опытная группа №2. В исследованиях на животных были соблюдены правила проведения доклинических исследований лекарственных средств [8]. Собаки были выбраны по типу аналогов и находились в одинаковых условиях вивария. У всех экспериментальных групп перед моделированием ран осуществляли общее и местное обезболивание [2].
С целью создания ран у выбранных животных на латеральной поверхности бедра после осуществления общего обезболивания через отверстие из металлической пластины диаметром 3,0 см вытягивали кожу с подлежащей тканью в виде конуса высотой 1см, данный фрагмент иссекали. Далее на образовавшуюся раневую поверхность накладывали на 5 секунд марлевый тампон, смоченный в 70 %-м растворе уксусной кислоты. Затем с целью инфицирования раны на следующие сутки на пораженную поверхность наносили суточную культуру золотистого стафилококка со взвесью фекалий крупного рогатого скота.
Начиная с 3-х суток после моделирования и инфицирования ран, животным контрольной группы, инфицированные раны ежедневно двукратно обрабатывали мазью левомеколь; собакам второй группы (опытная группа №1) раны обрабатывали спиртовым раствором сока алоэ; собакам третьей группы (опытная группа №2) в первой фазе заживления по М.И. Кузину [6].
Обработки ран осуществляли при помощи смеси метсин (трипсин - мет-рогиловая смесь), а при лечении животных во вторую и третью фазу заживления по М.И. Кузину, в целях длительного действия препарата и предотвращения повторного микробного обсеменения инфицированной раны применяли актовин (актове-гин - винилиновый линимент).
Результаты исследований. В первые дни моделирования ран у всех 3-х групп животных были выявлены выраженные признаки воспаления: гиперемия, повышение местной температуры, болезненность. В процессе терапии у животных были установлены изменения морфологических показателей крови. В таблице 1 представлена картина крови всех исследуемых групп проведенных до начала эксперимента, а также на 3-и, 7-е, 14-е и 21-е сутки. С 7-и по 14-е сутки наблюдалось снижение содержания лейкоцитов, что связано с угасанием воспалительного процесса в патологическом очаге.
Таблица
Морфологические показатели крови у собак
Показатели Среднее нормативное значение Группа Срок исследования, сут.
До лечения 3-и 7-и 14-и 21-и
Эритроциты, 1012/л 5,62 Контроль 5,62±0,31 6,98±0,3 6,72±0,3 6,96±0,7 6,4±0,1
5,92 1 -опытная 5,92±0,2 6,64±0,31 6,74±0,5 6,74±0,31 6,5±0,25
6,1 2-опытная 6,1±0,1 6,68±0,21 6,8±0,3 7,28±0,31,2 5,9±0,31,2
Лейкоциты, 109/л 8,12 Контроль 8,12±0,6 12,42±1,9 12,58±0,6 11,4±0,4 10,14±0,2
8,52 1 -опытная 8,52±0,4 13,56±1,81 12,32±0,6 10,7±0,51 9,5±0,41
7,96 2-опытная 7,96±0,4 11,58±0,812 9,64±0,61,2 9,3±0,31,2 8,01±0,512
Гемоглобин, г/л 159,22 Контроль 159,22±7,5 165,26±3,4 179,28±5,2 183,3±4,9 152,36±1,5
152,92 1 -опытная 152,92±5,04 169,74±3,3 180,16±6,7 183,08±5,9 148,25±1,21
157,84 2-опытная 157,84±6,8 174,88±4,31,2 178,08±4,4 176,02±7,72 159,4±0,71,2
СОЭ, мм/ч 3,5 Контроль 2,85±0,6 11,6±0,7 7,88±1,0 7,64±0,3 6,8±0,3
3,5 1 -опытная 4,83±1,011 12,2±0,8 8,36±0,61 8,10±0,4 7,05±0,4
3,5 2-опытная 3,5±1,02 12,1±0,5 8,56±0,11 7,21±0,4 4,1±0,41,2
Примечание. Данные в таблице представлены в виде M±m для всех групп животных; 1 - достоверные отличия к группе контроля ф<0,05); 2 - достоверные отличия к опытной группе 1 (р<0,05)
У животных контрольной группы на 3-и сутки количество лейкоцитов составляло 12,42±1,9х109/л, у опытной группы №1 - 13,56±1,8х109/л, у опытной группы №2 - 11,58±0,8х109/л, что свидетельствует о повышении показателей относительного среднего нормативного значения на 52%; 60%; 45% соответственно. Этот факт является следствием течения воспалительного процесса.
На 21 -е сутки терапии установлено незначительное снижение количества лейкоцитов в контрольной и опытной группе №1. В контрольной и опытной группе №1 количество белых клеток крови снизилось на 11 % и 24 % соответственно.
В опытной группе № 2 количество лейкоцитов на 21 -е сутки составило 8,01±0,5х109/л, что свидетельствует об облегчении состояния животных, указывая на эффективность данных препаратов.
Показатели СОЭ указывают, что на 3-и сутки лечения у всех групп отмечался воспалительный процесс.
В контрольной группе он равен 11,6 мм/ч, в опытной группе № 1-12,2 мм/ч и в опытной группе № 2 - 12,1 мм/ч, что, соответственно, в 3,3; 3,48; 3,45 выше среднего нормативного значения и связано с острой реакцией организма на воспалительный процесс. На 7-е сутки показатели СОЭ были предельно выше нормы, указывая на продолжающийся воспалительный процесс. В контрольной группе показатель СОЭ был равен 7,88 мм/ч, в опытной группе № 1- 8,36 мм/ч, а в опытной группе № 2- 8,56 мм/ч, что соответственно в 2.25; 2,4; 2,44 выше нормы. На 21 -й день лечения у контрольной группы показатель СОЭ снизился до 6,8 мм/ч, у опытной группы № 1 до 7,05 мм/ч, а в опытной группе № 2 показатель составлял 4,1 мм/ч, что соответственно 1,9; 2; 1,17 выше среднего нормативного значения, что свидетельствует об угасании воспа-лительного процесса.
Таким образом, было выявлено, что у всех подопытных групп на 3-и сутки лечения наблюдалась острая реакция на воспалительный процесс в организме. Про-
цесс нормализации показателей СОЭ протекал наиболее интенсивно в опытной группе №2 по сравнению с другими подопытными группами. После применения лекарственных препаратов в опытной группе №2 наблюдалось снижение количества лейкоцитов в наиболее короткий срок, что свидетельствует об эффективном противовоспалительном действии разработанных нами препаратов. У животных, которым применяли метсин и актовин (опытная группа №2) наблюю-
далось снижение показателей эритроцитов
12
5,9±0,3х10 /л в сравнении со среднем нормативным показателем 6,1х1012/л к концу экспериментального исследования на 21 -е сутки. В контрольной и 1 опытной группах выявлено, что показатели составляли 6,4±0,1х1012/л и 6,5±0,25х1012/л, что, соответственно, выше на 9% и 13% от средних нормативных значений. Данная динамика связана, вероятнее всего, со снижением вязкости крови и является следствием регидратации организма, как признака выздоровления. Гемоглобин у всех испытуемых животных был незначительно повышен, но при этом находился в пределах референтных интервалов (гемоглобин: 120-180 г/л для данного вида животного), что связано с повышением дыхательной функции крови. В таблице 2 представлены изменения клеточных факторов иммунитета всех подопытных групп собак при различных способах лечения инфицированных ран.
Анализируя иммунологические показатели крови всех подопытных групп собак, отображенных в таблице 2, установлено, что тенденция повышения показателей фагоцитарной активности, фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса, является следствием повышения иммунного статуса организма. На 7-е сутки лечения раневой поверхности отмечается очевидное улучшение показателей клеточного иммунитета у опытной группы № 2. Данный факт доказывает, что разработанные нами препараты поло-жительно влияют на повышение иммун-ного статуса организма собак.
Таблица 2 - Изменение клеточных факторов иммунитета всех подопытных групп у собак
Показатель Фагоцитарная активность, % Фагоцитарное число, у.е. Фагоцитарный индекс, у.е.
Среднее нормативное значение 28,63 2,37 1,34
Контрольная группа До лечения На 3 -е сутки На 7-е сутки 28,63±2,45 32,45±1,23 36,26±1,22 2,37±2,37 3,9±0,27 5,92±0,17 1,34±0,2 1,69±0,08 3,89±0,11
Среднее нормативное значение 26,3 2,5 1,23
Опытная группа 1 До лечения На 3-е сутки На 7-е сутки 26,3±2,4 34,47±1,6 1 38,99±0,7 1 2,5±0,08 4,11±0,24 6,41±0,17 1 1,23±0,13 1,55±0,07 1 3,76±0,25
Среднее нормативное значение 23,5 2,14 1,26
Опытная группа 2 До лечения На 3-е сутки На 7-е сутки 23,5±1,4 35,48±1,3 1,2 31±0,75 1,2 2,14±0,2 3,59±0,19 2 4,37±0,08 1,2 1,26±0,14 1,61±0,2 2,6±0,08 1,2
Примечание. Данные в таблице представлены в виде M±m для всех групп животных; 1- достоверные отличия к группе контроля ф<0,05); 2- достоверные отличия к опытной группе 1 (р<0,05)
Заключение. В результате применения разработанных многокомпонентных смесей метсин и актовин для лечения инфицированных ран у собак при ежедневной двукратной обработке нами установлено, что данные средства оказывают эффективное терапевтическое действие, что было подтверждено результатами проведения гематологических и иммунологических исследований.
Кроме того, использование этих препаратов оказывает благоприятное влияние на течение воспалительного процесса и способствует нормализации показателей крови пациентов.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Васильев, Ю.Г. Ветеринарная клиническая гематология / Ю.Г. Васильев,
Е.И. Трошин, А.И. Любимов. — Санкт-Петербург: Лань, 2015. - 656 с.
2. Вишневский, А.В. Местное обезболивание по методу ползучего инфильтрата / А. В. Вишневский. — Москва: Медгиз, 1956. - 350 с.
3. Гематологические показатели бычков казахской белоголовой породы при скармливании новых кормовых добавок / И.Ф. Горлов, ЮН. Нелепов, ЕВ. Карпенко, Е.Ю. Злобина // Известия Нижневолжского агроуниверситетского комплекса: наука и высшее профессиональное образование. - 2014. - №4 (36). - С. 117121.
4. Гришин, В.С. Влияние кормовых добавок, содержащих в своём составе органические кислоты, на гемато-
логические показатели крови бычков мясных пород / В.С. Гришин // Известия Нижневолжского агроуниверситетского комплекса: наука и высшее профессиональное образование. - 2015. - №4 (40). - С. 144150.
5. Кузин, М.И. Раны и раневая инфекция / М.И. Кузин, Б.М. Костюченок., Москва, Медицина, 1990. -591с.
6. Миронов, А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / А.Н Миронов Москва: Гриф и К, 2012. - 944 с.
7. Никольский, В.В. Основы иммунитета животных. / В.В. Никольский Москва: Колос, 1968. - 224 с.
8. Панченков, Т.П. Определение оседания эритроцитов при помощи микрокапилляра / Т. П. Панченков // Врачебное дело. - 1924. - №16. - С. 695-697.
9. Сивкова, Т.Н. Клиническая ветеринарная гематология / Т.Н. Сивкова, Е.А. Доронин-Доргелинский. Пермь: Про-кростъ, - 2017. - 123 с.
10. Смольянников, A.B. Динамика раневого процесса // Патологическая анатомия боевой травмы. - Москва, 1960-С. 107-165.
11. Хотим, Е.Н. Синдром ускоренной СОЭ в практике врача: интерпретация и вопросы тактики / Е. Н. Хотим, А. М. Жигальцов, Аппаду Кумара // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2015. -№1 (49). - С. 129-133.
12. Шкуратова, И.А. Коррекция иммунного статуса у высокопродуктивных коров / И.А. Шкуратова, Н А. Верещак, М.В. Ряпосова и др. // Ветеринария. - 2008. -№2. - С. 11-12.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ, ПРИ ЛЕЧЕНИИ ИНФИЦИРОВАННЫХ РАН У СОБАК В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Билан А.М., Шнякина Т.Н.
Резюме
В последние годы для лечения ран различной этиологии широко применяется многокомпонентные фармакологические смеси, которые активно проникают в глубину раны и оказывают антимикробное действие. В состав апробированных многокомпонентных мазей входят полиэтиленоксиды, анестетики, пиримидиновые производные и другие. Но существующие препараты в большинстве случаев направлены не на конкретные фазы заживления и эффективны в отношении широкого спектра микроорганизмов. В данной статье продемонстрированы материалы по изучению морфологических и иммунологических исследований состава крови собак, которым применяли разработанные нами фармакологические смеси (смесь метсина и линимент актовина). В I фазу заживление раны нами было использована многокомпонентная смесь метсина, которая направлена на очищение раны от поврежденных тканей, так же обладающее обезболивающим действием, уменьшением отека и антимикробным действием. Во II-III фазы заживления ран, применяли линимент актовин, который улучшает кровоснабжение тканей, стимулирует заживление раны и ликвидацию повторного микробного обсеменения.
HEMATOLOGICAL AND IMMUNOLOGICAL INDICATORS OF BLOOD IN THE
TREATMENT OF INFECTED WOUNDS IN DOGS DURING THE EXPERIMENT
Bilan A.M., Shnyakina, T.N.
Summary
In recent years, for the treatment of wounds of various etiologies, multi-component pharmacological mixtures are widely used, which actively penetrate into the depth of the wound
and have an antimicrobial effect. The composition of tested multi-component ointments includes polyethylene oxides, anesthetics, pyrimidine derivatives and others. But the existing approved drugs are not aimed at specific phases of healing and show a wide range of treatment. This article focuses on the materials for the study of hematological and immunological investigation of blood of dogs who were treated by pharmacological agents metsyn and actovin. Which have been developed be us. In the first phase of wound healing we used metsin solution, which is aimed at cleansing the wound from damaged tissues it, has analgesic effect, reduces swelling and has an antimicrobial effect. In the II-III phase of wound healing, liniment (actovin) was used, which improves blood supply to tissues, stimulates wound healing and elimination of remicrobial contamination.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-236-4-39-43 УДК 577.615.9
ИЗУЧЕНИЕ ИЗМЕНЕНИЙ БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КУЛЬТУР КЛЕТОК ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ Т-2 ТОКСИНА
Валиуллин Л.Р. - к.б.н., Бирюля В.В.- к.б.н., Идиятов И.И. - к.б.н., *Касанова Н.Р. - к.с/х.н., **Набатов А.А. - д.б.н.
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э.Баумана» ФГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет»
Ключевые слова: Культура клеток, аланинаминотрансфераза,
аспартатаминотрансфераза, вторичные метаболиты грибов рода Фузариум.
Key words: Cell culture, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, secondary metabolites of fungi r. Fusarium.
Обеспечение мирового населения пищевой продукцией, свободной от токсикантов агротехногенного происхождения становится все более актуальной задачей, особенно для организаций занимающихся контролем здоровья населения [1,2,3]. Контаминация продовольственного сырья микроскопическими грибами (Fusarium, Aspergillus, Penicillum и др.) приводит к загрязнению высокотоксичными метаболитами [4,5]. Одними из высокораспространённых микроскопических грибов в зонах масштабного производства продукции сельского хозяйства являются микроми-цеты рода Fusarium. Это связано с присутствием данного микромицета в биотопах почвы и с переходом их в продовольственное сырье при хранении [6]. Грибы р. Fusarium при определенных климатических воздействиях на мицелий экспресси-руют вторичные метаболиты (фумони-зины, зеараленон, Т-2 токсин и др.). При воздействии фумонизинов на организм
животных возникают патологические процессы в работе центральной нервной системы [7]. Зеараленон при попадании в организм вызывает увеличение вульвы, молочных желез, выпадение влагалища, атрофию яичников, аборты и бесплодие [8, 9]. При отравлении Т-2 токсином происходит нарушение функций желудочно-кишечного тракта, дыхательной системы и подавление иммунитета [10,11].
Исследователями было установлено, что при токсическом воздействии Т-2 токсина на организм крыс наблюдалось подавление активности ферментов осуществляющих биотрансформацию и деток-сикацию токсичных веществ в организме [4]. В связи с этим целью наших исследований явилось изучение изменений биохимических показателей культур клеток при воздействии Т-2 токсина в различных дозах.
Материал и методы исследований. Для изучения биохимических показа-
