CC BY
39
10. Exterior characteristics of heifers Yenisei type and crosses with Holstein and Swedish Red-Motley breeds in Siberia / A.I. Golubkov [et al.] // The Bulletin of KrasGAU. - 2011. - No. 8. - P. 158-162.
11. Golubkov A.I., Luscenko A.E. The improvement of Red-Motley breed in Siberia // The Bulletin of KrasGAU. - 2015. - No. 12. - P. 149-154.
УДК 619:616-001.4-039.22-018:636.7
ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ТКАНЕЙ ИНФИЦИРОВАННЫХ РАН В ПРОЦЕССЕ ЛЕЧЕНИЯ У СОБАК
БИЛАН А.М.,
аспирант, Южно-Уральский государственный аграрный университет, Челябинская обл. г. Троицк, т.89602576525, e-mail:[email protected].
ШНЯКИНА Т.Н.,
доктор ветеринарных наук, профессор, Южно-Уральский государственный аграрный университет, Челябинская обл. г. Троицк, т.89068680868, e-mail: [email protected].
ЩЕРБАКОВ Н.П.,
доктор ветеринарных наук, профессор, Южно-Уральский государственный аграрный университет, Челябинская обл. г. Троицк, ул. Гагарина 13, т.89513604575, е-mail: [email protected].
Реферат. В настоящее время в крупных городах, увеличилось количество собак с нарушенным содержанием и с несбалансированным питанием, которые приводят к образованию различных открытых повреждений поверхности тканей и как следствие - появление гнойных инфицированных ран. Для предотвращения инфицирования ран, а в случае их возникновения предложено большое количество различных лекарственных препаратов и лечебных методов, направленных на успешное заживление раневой поверхности. При широком диапазоне применения лекарственных мазей, наблюдается довольно поверхностное их воздействие на процесс заживления ран. В этих случаях следует создавать иные рецепты мазей, направленные на ускорение в разных фазах их заживления. Информативным и важным методом при лечении раневых поверхностей является гистологическое (патоморфологическое) исследование. При помощи данного метода можно эффективно исследовать структуры и клеточный состав материала. Гистологическое исследование первоначально осуществляется с приготовления гистологических срезов, окраски определенными красителями и последующим изучением с помощью электронного микроскопа. Рассматриваемые гистологические срезы (2х2 мм) были взяты у собак с поражённой кожи, с прилегающими участками здоровой кожи после моделирования инфицированной раны на 3-и, 7-е и на 14-е сутки. Моделирование ран проводили на 15 собаках, разделенных на 3 подопытные группы. В контрольной группе инфицированную рану двукратно обрабатывали мазью левомеколь, опытную группу №1- раствором сока алоэ, а в опытной группе № 2 - трипсин-метрогиловым раствором (I фаза заживления) и ак-товегин-винилиновым линиментом (II-III фазы заживления). Результаты исследования показали, что в опытной группе № 2 значительно эффективнее и быстрее проходили регенеративные процессы, очищение раны от поврежденных тканей и ликвидация повторного микробного обсеменения, чем в контрольной и опытной группе № 1.
Ключевые слова: инфицированная рана, гистологическое исследование, патогенная микрофлора, фибробласты, макрофаги, некротизированные ткани.
HISTOLOGICAL EXAMINATION OF TISSUES OF INFECTED WOUNDS DURING THE TREATMENT OF DOGS
BILAN A.M.,
post-graduate student, South Ural State Agricultural University, Troitsk, Chelyabinsk Region. т. 89602576525, e-mail : aleksandrbilan189@gmail .com.
SHNYAKINA T.N.,
doctor of veterinary sciences, Professor, South Ural State Agricultural University, Troitsk, Chelyabinsk Region. т. 89068680868; e-mail: [email protected].
SHCHERBAKOV N.P.,
doctor of veterinary sciences, Professor., South Ural State Agricultural University, Troitsk, Chelyabinsk Region. ^89513604575, e-mail: [email protected].
Essay. At present time in large cities, the number of dogs with disordered keeping and unbalanced diet has increased. This leads to the formation of various open tissue damages and as a result to the appearance of purulent infected wounds. To prevent infection of wounds a large number of different drugs and therapeutic methods aimed at the successful healing of the wound surface is offered. Veterinary medicine has a wide range of medicinal ointments but they sometimes act quite superficially. In this case, doctors should create other prescription ointments, focused on accelerating wound healing in different phases of its healing. Histological (pathomorphological) study is an informative and important method of treatment of wound surfaces. With this method, it is possible to study investigate effectively the structure and cellular composition of the material. His-tological examination is initially carried out with the preparation of histological sections, coloring with certain dyes and followed by study with an electron microscope. The microscopic sections under consideration (2x2 mm) were taken from the affected skin and the adjacent areas of healthy skin after modeling of the infected wound on the 3rd, 7th, 14th day. Simulation of wounds was performed on 15 dogs divided into 3 experimental groups. In the control group, the infected wound was twice treated with levomecol ointment in the experimental group № 1 with aloe juice, and in the experimental group №2 with trypsin - with metrogyl solution (I phase of healing) and аctovegin - vinylin liniment (II-III phases of healing). The results of the study showed that in the experimental group No. 2, regenerative processes, wound cleansing from damaged tissues and elimination of remicrobial contamination were much more effective and faster than in the control and experimental group No. 1.
Keywords: infected wound, histological examination, pathogenic microflora, fibroblasts, macrophages, necrotic tissue.
Введение. Травма — нарушения целостности структуры на клеточном, тканевом и органном уровне. Возникает комплекс морфофункциональ-ных и физико-химических нарушений, в результате воздействия на эти ткани и органы различных разнообразных травмирующих факторов [1, 2, 3. -С. 9].
Процесс заживления раны - это восстановление внеклеточного матрикса и функционально -активного эпителиального покрова кожи с образованием морфогенезом или без образования морфогенеза рубца [4. - С. 9].
Главными факторами затрудняющими заживление инфицированных ран являются:
1) патогенная микрофлора;
2) некротизированные участки кожи;
3) снижение иммунологической реактивности организма.
Стимуляция регенерации тканей на всем протяжении дефекта является основной задачей восстановления дефекта кожи и поврежденных глуб-жележащих структур при применении лекарственных препаратов [5. - С. 9].
Процесс развития инфицированных ран с затяжным характером течения, является чрезвычайно опасным для организма, вследствие нарушения общего состоянием организма, с наркотизацией поражённых тканей и развитием в них очагов размножения патогенных микроорганизмов [6, 7. - С.
9].
Одной из важных проблем ветеринарной медицины на протяжении многих лет - является поиск эффективных методов лечения инфицированных ран. Обусловлено это тем, что течение раневого процесса при наличии анаэробной и аэробной
микрофлоры в очагах инфицированного воспаления приводят к нарушению тканевого дыхания в участках заживления, вызывая нарушения в окружающих тканях, которые в конечном итоге ведут к развитию ацидоза, гипоксии и метаболической интоксикации организма. Главной задачей лечения инфицированных ран является своевременное применение лекарственных препаратов на поврежденные ткани. В настоящее время ни одно из средств применяемых для лечения ран не решает поставленной задачи и не является универсальным на всех стадиях заживления ран [8. - С. 9].
Исследования репаративных процессов в тканях раневой поверхности проводят при помощи морфологических и гистологических исследований тканей, что является самым информативным и показательным методом [9. - С. 9].
Целью эксперимента являлось изучить структуру и клеточный состав приготовленных гистологических срезов и влияние разработанных нами лекарственных смесей на репаративные процессы инфицированных ран.
Материал и методика исследования. Экспериментальное исследование проводилось на 15 собаках живой массой 10-13 кг, в возрасте 2-5 лет, из которых были сформированы 3 группы: контрольная, опытная группа № 1 и опытная группа № 2. У всех животных было выполнено моделирование экспериментальных инфицированных ран. Работы с животными проводились с учетом требований биоэтических норм. Собаки были выбраны по типу аналогов, находились в условиях вивария ФГБОУ ВО Южно-Уральский ГАУ.
Всем животным под общим наркозом золетил 100 ^ЬШ) моделировали экспериментальные ра-
ны путем рассечения мягких тканей латеральной поверхности бедра длиной 6-7 см и глубиной 1,5 см. Затем в поверхность раны внедряли марлевую салфетку, смоченную взвесью суточной культуры золотистого стафилококка и смесью фекалий, которую фиксировали в ране провизорными швами.
Начиная с 3-х суток после моделирования инфицированных ран и до 21 суток животным контрольной группы инфицированные раны ежедневно двукратно обрабатывали мазью левомеколь; собакам второй группы (опытная группа № 1) раны обрабатывали спиртовым раствором сока алоэ; собакам третьей группы (опытная группа № 2) в первой фазе для обработки раны был использован повязочный метод лечения с применением всасывающих повязок с трипсин - метрогиловым раствором, а при лечении животных во второй фазе заживления в целях длительного действия препарата и предотвращения повторного микробного обсеменения инфицированной раны применяли актовегин-винилиновый линимент.
В состав актовегин - ванилиновый линимента на 100 мл входят: салициловая кислота 5 г, алое сок- 25 мл, актовегин - 10 мл, винилин - 40 мл, масло чайного дерева - 25 мл.
В состав трипсин - метрогилового раствора на 100 мл входят: новокаин - 0,5 г, трипсин - 0,5 г, хлоргексидин -25 мл, метрогил - 50 мл, димексид - 25 мл (разбавленный 1:4).
На 3-и, 7-е и 14-е сутки проводили гистологическое исследование тканей. Для гистологического исследования лезвием брали кусочки ткани
Рисунок 1 - Контрольная группа, очаг дефекта ткани (стрелки), выполненный клеточным детритом, окраска гематоксилин-эозин, ув.х50
(2х2 мм) методом иссечения мягких тканей прилежащих к краям раны. Взятый материал от экспериментальных животных сразу помещали в 10 % раствор нейтрального формалина. Заливку материала проводили на серийных парафиновых срезах. Окрашивали гематоксилином и эозином по методике Ван - Гизон, затем проводили морфологические исследования.
Динамику гистологических исследований оценивали по следующим критериям:
1. Появление повреждения в виде некроза ткани и его глубине.
2. Выраженность и вид клеточной инфильтрации.
3. Неоангиогенез в периферийных участках раны.
4. Характер репаративных процессов (грануляция, рубцевания).
Результаты исследования. На 3-е сутки после образования инфицированных ран у всех подопытных групп определялся дефект ткани в виде отсутствия эпидермиса и участка поверхностного слоя дермы, дно дефекта было выстлано детритом, имеющим вид мелкозернистых бесструктурных масс розовато-сиреневого цвета, на фоне которого под большим увеличением видны скопления микробов (палочек и кокков). Стенки дефектной ткани покрыты рыхлой соединительной тканью в состоянии некроза. Во всех слоях кожи - выраженное венозное и капиллярное полнокровие с картиной эритро- и лейкостазов, существенный отек промежуточной ткани (рисунки 1, 2, 3).
Рисунок 2 - Опытная №1, дефект ткани (стрелки) в поверхностных и средних слоях дермы, окраска гематоксилин-эозин, ув.х50
Рисунок 3 - Опыт № 2, общий вид дефекта ткани в коже с тонким роговым слоем; перифокальный нейтрофильно-лимфоцитарный вал указан стрелками, окраска гематоксилин-эозин, ув.х50
Рисунок 4 - Контрольная группа, 7-е сутки лечения, пучки и тяжи молодых фибробластов (стрелки) в поверхностных слоях дермы, окраска гематоксилин-эозин, ув.х 200
Рисунок 5 - Контрольная группа, 7-е сутки лечения, хаотично расположенные новообразованные коллагеновые волокна (стрелки) в дерме по краю дефекта ткани, окраска Ван Гизон, ув.х 200
Рисунок 6 - Опытная № 1, 7-е сутки лечения, пласт незрелой грануляционной ткани с большим количеством клеточных элементов, окраска гематоксилин-эозин, ув.х50
Рисунок 7 - Опытная № 1, 7-е сутки лечения, тонкие новообразованные коллагеновые волокна по краю дефекта ткани, окраска Ван Гизон, ув.х 50
Рисунок 8 - Опытная № 2, 7-е сутки лечения, общий вид участка формирующейся молодой грануляционной ткани, окраска гематоксилин-эозин, ув.х50
Рисунок 10 - Контрольная группа, 14-е сутки лечения, выраженный акантоз и пролиферация клеток базального слоя эпидермиса, окраска гематоксилин-эозин, ув.х50
Рисунок 12 - Опытная группа № 1, 14-е сутки лечения, пласт молодой грануляционной ткани (стрелки), отграничивающей очаг некроза дермы (1) от неповрежденной ткани (2), окраска гематоксилин-эозин, ув.х50
Рисунок 9 - Опытная № 2, 7-е сутки лечения, новообразованные капилляры (сплошные стрелки) и вновь образованные коллагеновые волокна (пунктирные стрелки), окраска Ван-Гизон, ув.х 400
Рисунок 11 - Контрольная группа , 14-е сутки лечения, пласт незрелой грануляционной ткани с новообразованными сосудами (стрелки) в пограничной зоне, окраска гематоксилин-эозин ув.х200
Рисунок 13 - Опытная группа № 1, 14-е сутки лечения, новообразованные коллагеновые волокна (стрелки), располагающиеся перпендикулярно поверхности кожи, окраска Ван Гизон, ув.х100
Рисунок 14 - Опытная группа № 2, 14-е сутки лечения, небольшие очаги лимфогистиоцитарной инфильтрации (сплошная стрелка) вокруг новообразованных сосудов (пунктирная стрелка) в сетчатом слое кожи, окраска гематоксилин-эозин, ув.х200
На 7-е сутки у контрольной группы сохранился некроз стенок ткани, но распространенность его несколько уменьшилась по отношению к 3-м суткам исследования. В перифокальных зонах видна инфильтрация стромы преимущественно клетками лимфоидного ряда с примесью небольшого количества нейтрофильных лейкоцитов и макрофагов. Новообразованные сосуды имеют вид бесклеточных щелей и «сосудистых почек». При окраске пикрофуксином по методу Ван-Гизон видны хаотично расположенные тонкие новообразованные извитые коллагеновые волокна, окрашенные в оранжево-красный цвет (рисунки 4, 5) У опытной группы №1 наблюдалось дно дефектной ткани, отграниченной от глубоких слоев дермы густым нейтрофильно-лимфоцитарным валом. Между пе-рифокальным клеточным валом и подлежащими слоями дермы - активная пролиферация тяжей фибробластов с формированием пласта незрелой грануляционной ткани. В клеточном составе помимо фибробластов встречаются макрофаги и клетки лимфоидного ряда (рисунки 6, 7). У опытной группы № 2 в препарате имеются фрагменты средних и глубоких слоев дермы с придатками кожи. На одном из полей виден участок формирующейся молодой грануляционной ткани, в клеточном составе которой преобладают юные фиб-робласты и макрофаги (рисунки 8, 9).
На 14-е сутки у контрольной группы количество гранул гликогена в цитоплазме клеток эпидермиса по сравнению с предыдущим сроком исследования не изменилось. Дефект ткани отграничен от интактной дермы пластом незрелой грануляционной ткани, богатой клеточными элементами, новообразованными сосудами и молодыми соеди-
Рисунок 15 - Опытная группа № 2, 14-е сутки лечения, перпендикулярно ориентированные пучки новообразованных коллагеновых волокон (стрелки) в рубцовой ткани, окраска Ван Гизон, ув.х100
нительно-тканными волокнами (рисунки 10, 11). У опытной группы № 1 на участке, занимающем несколько полей, сохраняется некротизированная ткань, отграниченная от подлежащей дермы пластом молодой грануляционной ткани. По краю участка некроза отмечается «наползание» проли-ферирующего эпителиального пласта поверх грануляционной ткани под некротические массы (рисунки 12, 13). У опытной группы № 2, участок, занимающий несколько полей, определятся эпите-лизированным соединительно-тканным рубцом. Сосочки дермы над рубцовой тканью сглажены, высота эпидермального пласта меньше, чем на соседних участках неповрежденной кожи. В клеточном составе рубцовой ткани преобладают молодые фибробласты. Встречаются небольшие очажки макрофагальной и лимфогистоцитарной инфильтрации (рисунки 14, 15).
Вывод. Таким образом, гистологическое исследование раневой ткани, подвергавшейся различному лечению моделированных инфицированных ран, свидетельствует, что у контрольной и опытной группы № 1 процесс заживления ран был значительно хуже, что характеризуется сохранением некротизированной ткани, дефектом ткани, отграниченной пластом незрелой грануляционной ткани. В опытной группе № 2 наблюдается значительно раннее образование рубцовой ткани, имеющей сглаженные поверхности, имеющие наименьшую высоту эпидермального пласта, чем на соседних участках неповрежденной кожи. В рубцовой ткани наблюдались молодые фибробла-сты.
Список использованных источников
1. Тимофеева С.В. Общая хирургия животных. - М.: Зоомедлит, 2007. - 687 с.
2. Частная ветеринарная хирургия: учебник для вузов по специальности «Ветеринария» / под ред. Б.С. Семенова, А.В. Лебедева. - 2-е изд. - М.: КолосС, 2003. - 496 с.
3. Шакалов К.И. Профилактика травматизма сельскохозяйственных животных в промышленных комплексах. - Ленинград: Колос, 1981.-184 с.
4. Репаративная регенерация тканей кожи крысы под действием линейчатого спектра марганца и меди, излучаемого лампой полого катода / В.И. Мельникова, М.С. Извольская, С.Н. Воронова и др. - Цитология. - 2010. - Т. 52. - № 3. - С. 203-210.
5. Алексеева Н.Т., Глухов А.А., Остроушко А.П. Роль клеток фибробластического дифферона в процессе заживления ран // Вестник экспериментальной и клинической хирургии. - 2012. - Т.5. - № 3. -С.601-608.
6. Барсуков Н.А. Лечение инфицированных ран // Ветеринария. - 1986. - № 8. - С. 68-69.
7. Шнякина Т.Н., Билан А.М., Щербаков Н.П. Лечение инфицированной раны у собак в эксперименте // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - 2018. - № 3. - С. 185-189.
8. Коломиец Ю. В. Средство для лечения ран у животных // Достижения науки и техники АПК. -2008. - № 9.
9. Данилов Р.К. Раневой процесс: гистогенетические основы. - Санкт-Петербург: ВМедА им. С.М. Кирова, 2008. - 380 с.
List of used sources
1. Timofeeva S.V. General surgery of animals. - Moscow .: Zoomedlit, 2007. - 687 p.
2. Private veterinary surgery: a textbook for universities in the specialty "Veterinary" / ed. B.S. Semenova, A.V. Lebedeva. - 2nd ed. - M .: KolossS, 2003. - 496 p.
3. Shakalov K.I. Prevention of injuries of farm animals in industrial complexes. - Leningrad: Kolos, 1981.184 p.
4. Reparative regeneration of rat skin tissue under the action of the line spectrum of manganese and copper emitted by a hollow cathode lamp / V.I. Melnikova, M.S. Izvolskaya, S.N. Voronova et al. - Cytology. - 2010. -T. 52. - № 3. - P. 203-210.
5. Alekseeva N.T., Glukhov A.A., Ostroushko A.P. The role of fibroblastic cells in wound healing // Journal of Experimental and Clinical Surgery. - 2012. - T.5. - № 3. - P. 601-608.
6. Barsukov N.A. Treatment of infected wounds // Veterinary medicine. - 1986. - № 8. - P. 68-69.
7. Shnyakina T.N., Bilan A.M., Scherbakov N.P. Treatment of an infected wound in dogs in an experiment // Bulletin of the Altai State Agrarian University. - 2018. - № 3. - p. 185-189.
8. Kolomiets Yu. V. Means for treating wounds in animals // Achievements of science and technology of the agro-industrial complex. - 2008. - № 9.
9. Danilov R.K. Wound process: histogenetic basis. - St. Petersburg: Military Medical Academy. C.M. Kirov, 2008. - 380 p.
УДК 619:612.014.428:636.7
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА АРТЕРИАЛЬНОГО ДАВЛЕНИЯ У СОБАК ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ ИЗМЕРЕНИЯ
СЕИН ОБ.,
доктор биологических наук, профессор кафедры хирургии и терапии ФГБОУ ВО Курская ГСХА. МИХАЙЛОВ К.А.,
заведующий экспериментально-биологической клиникой ФГБОУ ВО КГМУ Минздрава России, тел. 58-00-63.
ТАТЬЯНИЧЕВА О.Е.,
и.о. заведующего кафедрой общей и частной зоотехнии ФГБОУ ВО Белгородской ГАУ им. В.Я. Горина; e-mail: [email protected].
Реферат. В статье приводятся результаты определения артериального давления (АД) у собак различных пород и возраста, с использованием различных методов измерения. В работе были использованы прямой метод, осциллометрический (тонометр Little Doctor) и осциллографический (тонометр PetMAP) методы измерения АД. Определяли артериальное давление: систолическое (АДс), диастолическое (АДд), пульсовое (ПД) и среднее артериальное давление (САД). После пятикратного измерения давления у каждой собаки выводили среднее значение. В первой серии опытов проводили сравнительную
