Научная статья на тему 'Морфологическая и функциональная характеристика гепатоцитов эмбрионов и плодов человека в ранние периоды эмбриогенеза'

Морфологическая и функциональная характеристика гепатоцитов эмбрионов и плодов человека в ранние периоды эмбриогенеза Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
253
34
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ПЕЧЕНЬ / ХРОМАТИН / ЭМБРИОН / ПЛОД / МИТОТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ / LIVER / CHROMATIN / FETUS / MITOTIC ACTIVITY

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Пономарев Борис Лаврентьевич, Обухова Лариса Евстигнеевна, Высоцкий Юрий Александрович, Барсукова Наталья Ивановна, Бородина Галина Николаевна

Изучено морфологическое и функциональное состояние гепатоцитов эмбрионов и плодов человека в ранние сроки беременности. На разных этапах гистогенеза печени наблюдается перераспределение ядерного хроматина и изменение митотической активности клеток органа.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Пономарев Борис Лаврентьевич, Обухова Лариса Евстигнеевна, Высоцкий Юрий Александрович, Барсукова Наталья Ивановна, Бородина Галина Николаевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

MORPHOLOGICAL AND FUNCTIONAL CHARACTERISTICS OF HUMAN EMBRYOS AND FETUSES IN EARLY STAGES OF EMBRYOGENESIS

Th e morphological and functional state of embryo and fetus hepatocytes in early stages of pregnancy has been studied. At various stages of hepatic histogenesis redistribution of nuclear chromatin and changes in mitotic activity of cells of an organ have been observed.

Текст научной работы на тему «Морфологическая и функциональная характеристика гепатоцитов эмбрионов и плодов человека в ранние периоды эмбриогенеза»

Таблица 1

Сравнительные результаты лечения у пациенток с викарно увеличенным яичником

Контрольная группа Основная группа Контрольная группа Через 2 мес Основная группа Через 2 мес Контрольная группа Через 6 мес Основная группа Через 6 мес

Наличие болевого синдрома + + + - ± -

Объем яичника, УЗИ см3 18,2±4,21 18,2±4,21 14,2±4,23 6,2±1,71* 15,8±4,46 6,9±1,1*

Уровень ФСГ,мЕд/мл 15,1±3,12 15,9±3,40 15,1±3,12 9,1±2,42* 15,1±3,12 7,71±1,89*

Содержание эстрадиола, пмоль/л 128,6±18,4 128,6±18,4 132,2±21,6 138,1±13,8 130,7±11,2 134,8±9,6

Примечание: * — статистически значимые различия величин между контрольной и основной группами перед началом лечения, затем через 2 и 6 месяцев (р<0,05). «+» и «-» — наличие или отсутствие болевого синдрома.

При динамическом ультразвуковом контроле в основной группе после 2, 4 и 6 месяцев лечения выявлено, что через 2 месяца терапии объём яичника уменьшился у 31(65,95%) пациентки и составил 6,2±1,2 см3. Через 4 месяца объём яичника уменьшился у 42 (89,4%) пациенток. После 6 месяцев приема объем яичника уменьшился у всех пациенток и составил 6,9±1,1 см3. Болевой синдром купировался у всех пациенток. При проведении динамического контроля содержания ФСГ и эстрадиола в сыворотке крови выявлено, что уровень ФСГ на 6 день менструального цикла, в основной группе был выше нормы 15,9±3,4 мЕд/мл (норма 2,811,3 мЕд/мл), содержание эстрадиола было в пределах нормы. При последующих определениях содержания ФСГ через 2 месяца лечения выявлено значительное снижение содержания до 9,1±2,42 мЕд/мл, через 6 месяцев — до 7,71±1,89. Содержание же эстрадиола через 2,

4 и 6 месяцев лечения колебалось незначительно и было в пределах нормы. В контрольной группе при ультразвуковом исследовании размеры яичника отличались незначительно (р>0,05). Содержание ФСГ в сыворотке крови в контрольной группе во все исследуемые сроки практически не отличалось от показателя содержания ФСГ до начала лечения. В этой группе содержание эстрадиола в изучаемые сроки колебалось незначительно и было в пределах нормы.

Таким образом, методом лечения болевого синдрома при викарно увеличенном яичнике, толерантном к лечению спазмолитиками, аналгетиками, нестероидными противовоспалительными препаратами, антибиотиками, является применение эстроген-гестагенных препаратов (фемостон 1/10). Целесообразно, при болевом синдроме, связанном с викарно увеличенным яичником после односторонней аднексэктомии, определять объем яичника при ультразвуковом исследовании и его объеме более 8 см3 назначают фемостон 1/10 по 1 таблетке в сутки в непрерывном режиме 6 месяцев, с последующим ультразвуковым контролем 1 раз в год. Результат лечения — купирование болевого синдрома, уменьшение объема яичника до нормальных величин. Преимущество метода лечения — экономичность, неинвазивность.

ЛИТЕРАТУРА

1. Абрамченко В.В., Костючек Д.Ф., Хаджиева Э.Д. Гнойносептическая инфекция в акушерстве и гинекологии. — СПб.: СпецЛит, 2005. — С. 3-22.

2. Буянова С.Н., Щукина Н.А., Горшилин А.В. Репродуктивный прогноз у больных с гнойными воспалительными заболеваниями органов малого таза: проблемы и решения. // Российский вестник акушера-гинеколога. — 2009. — №2. — С. 11-17.

3. Гаспаров А.С. Оптимизация тактики ведения больных с острыми гинекологическими заболеваниями. // Акушерство и гинекология. — 2003. — №1. — С. 40-41.

4. Долгов Г.В. Гнойно-воспалительные осложнения в оперативной гинекологии: прогнозирование, профилактика. — СПб.: ЭЛБИ-СПб, 2001. — С.5-17.

5. Краснопольский В.И., Буянова С.Н., Щукина Н.А. Гнойная гинекология. — М.: МЕДпресс, 2001. — С.30-34.

6. СметникВ. П., Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология. — М.: Медицина, 2002. — С.241-265.

7. Стрижаков А.Н., Подзолкова Н.М. Гнойные воспалительные заболевания придатков матки. — М.: Медицина, 1996. — С. 5-33.

8. Соломатина А.А., Курбатская О.Н., Сикорская Н.В., Максимова М.Ю. Морфофункциональное состояние оставшегося яичника после односторонней аднексэктомии. // Актуальные вопросы акушерства и гинекологии. — 2002. — №1. — С. 34-44.

9. Ibarrola Vidaurre M., Benito J., Azcona B., Zubeldia N. Infectious pathology: vulvovaginitis, sexually transmitted diseases, pelvic inflammatory disease, tubo-ovarian abscesses. //An Sist Sanit Navar. — 2009. — Vol. 32. Suppl. 1. — P. 29-38.

10. Lareau S.M., Beigi R.H. Pelvic inflammatory disease and tubo-ovarian abscess. // Infect Dis Clin North Am. — 2008. — Vol. 22(4). — P. 693-708.

Информация об авторах: 630099, г. Новосибирск-99, Красный проспект 52, тел. 232-13-80, e-mail: docgorin@ mail. ru Горин Виктор Сергеевич — д.м.н., профессор кафедры;

Кондранина Татьяна Геннадьевна — к.м.н., заведующая отделением, докторант тел. (8-384-3)-796-02-37; Молоткова Елена Доржеевна — врач акушер-гинеколог, заочный аспирант;

Будаев Александр Иванович — врач акушер-гинеколог, соискатель кафедры

©ПОНОМАРЕВ Б.Л., ОБУХОВА Л.E., ВЫСОЦКИЙ Ю.А., БАРСУКОВА Н.И., БОРОДИНА Г.Н., ЧЕРДАНЦЕВА Т.М., БОЛГОВ А.А. — 2011 УДК 616 — 053.2

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕПАТОЦИТОВ ЭМБРИОНОВ И ПЛОДОВ ЧЕЛОВЕКА В РАННИЕ ПЕРИОДЫ ЭМБРИОГЕНЕЗА

Борис Лаврентьевич Пономарев, Лариса Евстигнеевна Обухова, Юрий Александрович Высоцкий, Наталья Ивановна Барсукова, Галина Николаевна Бородина, Татьяна Михайловна Черданцева, Александр Андреевич Болгов

(Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул, ректор — д.м.н., проф. А.М. Брюханов, кафедра нормальной анатомии человека, зав. — д.м.н., проф. Ю.А. Высоцкий)

Резюме. Изучено морфологическое и функциональное состояние гепатоцитов эмбрионов и плодов человека в ранние сроки беременности. На разных этапах гистогенеза печени наблюдается перераспределение ядерного хроматина и изменение митотической активности клеток органа.

Ключевые слова: печень, хроматин, эмбрион, плод, митотическая активность.

MORPHOLOGICAL AND FUNCTIONAL CHARACTERISTICS OF HUMAN EMBRYOS AND FETUSES IN EARLY STAGES OF EMBRYOGENESIS

B.L. Ponomarev, L.E. Obukhova, U.A. Vysotski, N.I. Barsukova, G.N. Borodina, T.M. Cherdantseva, A.A. Bolgov

(Altay State Medical University, Barnaul)

Summary. The morphological and functional state of embryo and fetus hepatocytes in early stages of pregnancy has been studied. At various stages of hepatic histogenesis redistribution of nuclear chromatin and changes in mitotic activity of cells of an organ have been observed.

Key words: liver, chromatin, fetus, mitotic activity.

Научные интересы характеризуются поисками морфологического выражения функциональных изменений органов эмбриона и плода [2, 8]. Печень все еще являются недостаточно изученными органом в организме. В эмбриональный период в печени происходят морфологические изменения, позволяющие этому органу полноценно участвовать в реакциях организма не только в плодный период, но и после рождения.

Целью настоящего исследования явилось изучение морфологического и функционального состояния клеток печени эмбрионов и плодов в разные периоды митотического цикла.

Материалы и методы

Объектом исследования служили образцы печени эмбрионов и плодов человека на 7-14 неделе внутриутробного развития, взятые при медицинских абортах по социальным показаниям (в соответствии с Постановлениями Правительства РФ от 8 мая 1996 года № 567 и от 11 августа 2003 года № 485). Для проведения исследования было получено разрешение локального этического комитета и индивидуальное информированное согласие от каждой женщины на взятие абортивного материала для исследования. В ходе работы были соблюдены этические принципы проведения медицинских исследований согласно Хельсинской декларации — редакция 2000 г. Возраст беременных женщин колебался от 20 до 38 лет. Печень, взятая у 120 эмбрионов и плодов, распределялась по четырем возрастным группам: 7-8 недель, 9-10 недель, 11-12 и 13-14 недель внутриутробного развития. Полученный материал фиксировали параформом на буфере Миллонига. Для световой микроскопии материал после обезвоживания заливали в парафин. С парафиновых блоков на ротационном микротоме готовили срезы толщиной 7-10 мк.

Для гистологического исследования препараты печени окрашивали гематоксилин-эозином, полих-ромным методом Маллори. Готовые срезы изучали в световом микроскопе. Для электронной микроскопии кусочки органов дофиксировали в 1 % растворе осмиевой кислоты. Обезвоживание проводили этанолом, начиная с 30о до абсолютного, затем материал заключали в аралдит. Ультратонкие срезы контрастировали свинцом по Рейнольдсу и изучали в электронном микроскопе УЭМВ-100К.

Диффузный хроматин в ядрах печени определяли с помощью планиметрического метода [1]. Готовили 10 срезов каждого объекта исследования. Производили съемку ядер клеток печени, после чего их изображение с помощью фотоувеличителя приводилось к единому увеличению в 20000. В качестве измерительного инструмента послужила тестовая сетка с шагом в 1 см. Объемную плотность диффузного хроматина в ядрах клеток вычисляли в долях, в процентах.

Подсчет митотического индекса проводили на эпи-телиоцитах печени и эндотелиальных клетках печеночных капилляров. Подсчет митозов осуществляли под иммерсией при общем увеличении 900. Митотический индекс вычисляли в промилле.

Статистическую обработку проводили в программе Sygma Stat 3,10 для Windows. Все количественные показатели имели нормальное распределение (тест Колмагорова-Смирнова). Значимость различий срав-

нивали по ^критерию Стьюдента. Результаты работы представлены в виде значений М (средняя арифметическая) ± т (стандартная ошибка среднего). За статистически значимые различия принимались значения р<0,05.

Результаты и обсуждение

При ультраструктурном исследовании клеток печени эмбрионов и плодов человека в ранние сроки беременности было обнаружено, что структура ядер не является однородной и меняется на протяжении интерфазы митотического цикла. Морфологические признаки, выявленные нами при изучении печени, показывают, что в ранние сроки эмбриогенеза в печени обнаруживаются периоды, характеризующиеся повышенной функциональной активностью ядра, о чем свидетельствует изменение доли диффузного хроматина (рис. 1). Следует считать, что это происходит на 11-12 неделе внутриутробного развития. Первые структурные признаки усиления функциональной активности проявлялись в ядрах гепатоцитов на 7-8 неделе. В них увеличивалось количество диффузного хроматина (79,3%). Кариоплазма имела среднюю электронную плотность. Такое состояние ядра, по мнению УШероП:еап (1992), свидетельствует о начале функциональной активности клеток. Позднее в процесс вовлекается перинуклеарное пространство, что характеризуется появлением небольших расширений по его периметру. Цитоплазматические органеллы гепатоцитов еще не имели признаков функциональной активности. В таком состоянии клетки печени оставались не долго. На 9-10 неделе внутриутробного развития в ядрах гепатоцитов происходило уменьшение площади диффузного хроматина (34,3%). Перинуклеарное пространство расширялось по всему периметру. Появлялись морфологические признаки активизации других структур клетки. В первую очередь изменения касались канальцев эндоплазматического ре-тикулума, в его просвете выявлялось мелкодисперсное осмиофильное содержимое. Изменения такого типа со стороны клеточных органелл встречаются и в органах взрослого организма и оцениваются авторами как проявление адаптивной реакции, связанной с повышенной функциональной нагрузкой испытываемой клеткой [4,

7-8 9-10 11-12 13-14

______________________________надели_______________________________

Рис. 1. Диффузный хроматин в гепатоцитах эмбрионов и плодов человека.

Рис. 2. Митотическая активность клеток печени эмбрионов и плодов человека.

7]. У плодов человека именно на 9-10 неделе происходит активное внедрение кровеносных сосудов в паренхиму печени [5].

Дальнейшее изучение клеточных ядер показывает, что в с 11 недели в ядрах гепатоцитов увеличивается площадь диффузного хроматина. Перераспределение

ядерного хроматина с преобладанием диффузного связано с увеличением степени зрелости этих структур и более интенсивными синтетическими процессами [6]. Диффузный хроматин является генетически активной фракцией ядра [3, 6, 9], он интенсивно включается в процесс саморегуляции, так необходимый клетке при выборе нового пути развития.

О наличии функционального напряжения, существующего в период 11-12 недели, в клетках печени свидетельствует также и возрастание индекса митотической активности (рис. 2). Наибольшая митотическая активность отмечалась в печени на 11-12 неделе внутриутробного развития (91,5%о). Это наибольшее количество делящихся клеток, обнаруженных нами в период эмбриогенеза.

Таким образом, с 7 по 14 недели эмбрионального развития происходят изменения в клетках печени в разные периоды митотического цикла. Отмечено, что хроматиновые структуры проявляют высокую мобильность в зависимости от срока внутриутробного развития. Изменение диффузного хроматина в ядрах клеток печени отражает сложные процессы дифференцировки клеток, смену фаз митотического цикла, происходящие в эмбриональном органе.

ЛИТЕРАТУРА

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. — М.: Медицина. 1990. — С. 275-280.

2. Агеев А.К. Акцидентальная инволюция тимуса и ее значение в развитии приобретенных (вторичных) иммунодефи-цитных состояний // Физиология, морфология и патология тимуса. — М., 1986. — С. 44-48.

3. Быков В.А. Цитология и общая гистология (функциональная морфология клеток тканей человека — СПб.: СОТИС, 2000. — 520 с.

4. Козельцев В.П. Клетка и субклеточные структуры // 20 век. биол. — М. Моск. проф, 1994. — С. 12-23.

5. Торбек В.Э. Морфогенез тимуса — М.: Изд-во Рос. университет Дружбы народов, 1995. — 116 с.

6. Исакова Н.Т. Морфология ядра в связи с органной и ги-стогенетической принадлежностью клеток и тканей: Автореф. дисс. ... д-ра биол. наук. — Новосибирск, 1996. — 33 с.

7. Georgatos S.D. Towards an understanding of nuciear morphogenesis // J. Cell. Biochem. — 1994. — Vol. 55. № 1. — P. 69-76.

8. Miller R.G. The tight junction as a barrier to cholesterol in canine epithelial cells // J. Ultrastruct. Res. — 1988 — Vol. 90. — P. 275-285.

9. Villepontean B., Brawley J., Martinson J. Nucleosome spacing is compressed in active chromatin domains of chick erythroid cells // Biochemistry. — 1992. — Vol. 31. № 5. — P. 1554-1563.

Информация об авторах: Обухова Лариса Евстигнеевна — к.м.н., доцент, е-шай: lirisse@yandex.ru, Пономарев Борис Лаврентьевич — д.м.н., профессор,

Высоцкий Юрий Александрович — д.м.н., профессор, заведующий кафедрой,

Барсукова Наталья Ивановна — к.м.н., ассистент, Бородина Галина Николаевна — к.м.н., доцент, Черданцева Татьяна Михайловна — к.м.н., доцент, Болгов Александр Андреевич — к.м.н., доцент.

© БОЧАРОВ С.Н., КУЛИНСКИЙ В.И., ВИНОГРАДОВ В.Г., ЛЕБЕДЬ М.Л., КИРПИЧЕНКО М.Г., ГУМАНЕНКО В.В.,

ЛЕПЕХОВА С.А., РОДИОНОВА Л.В. — 2011

ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ МЕТАБОЛИЗМА И ГОРМОНАЛЬНОГО ПРОФИЛЯ ПОСЛЕ МНОЖЕСТВЕННОЙ СКЕЛЕТНОЙ ТРАВМЫ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Сергей Николаевич Бочаров 1-2, Владимир Ильич Кулинский2, Валентин Георгиевич Виноградов2,

Максим Леонидович Лебедь1, Михаил Геннадьевич Кирпиченко1, Виталий Викторович Гуманенко3, Светлана Александровна Лепехова1, Любовь Викторовна Родионова1 (1Научный центр реконструктивной и восстановительной хирургии СО РАМН, г. Иркутск, директор — д.м.н., чл.-корр. РАМН, проф. Е.Г. Григорьев; 2Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов; 3МУЗ Городская клиническая больница №3 г. Иркутска, гл. врач — И.А. Кузнецов)

Резюме. Общий адаптационный синдром проявляется выраженной активацией гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы при сохранении активности симпатоадреналовой системы на исходном уровне. Гипофункция щитовидной железы компенсируется увеличением образования Т3 на периферии. Все вышеназванные изменения более выражены в подгруппе лабораторных животных, умерших в течение 7 суток после операции (n=10). Ключевые слова: стратегия адаптации, резистентность, толерантность.

CHANGES IN ACTIVITY OF METABOLISM AND HORMONAL TYPE AFTER MULTIPLE SKELETAL TRAUMA IN EXPERIMENT

S.N.Bocharov1'2, V.I.Kulinsky2, V.G. Vinogradov2, M.L.Lebed1,

M.G. Kirpichenko1, V.V. Gumanenko3, S.A. Lepekhova1, L.V. Rodionova1 (1 Scientific Center of Reconstructive and Restorative Surgery SB RAMS; 2 Irkutsk State Medical University;

3Irkutsk Municipal Clinical Hospital №3)

Summary. The results of experimental research in group of 22 Chinchilla rabbits allow to conclude that laboratory animals

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.