CC BY
14
ВЕТЕРИНАРИЯ И ЗООТЕХНИЯ
УДК 619:615:619.612.017
ВС. ВЕРЕТЕННИКОВА, ТВ. БОЙКО, М.Н. ГОНОХОВА
Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина, Омск
МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОРГАНОВ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ КРЫС ПРИ ВВЕДЕНИИ РАЗНЫХ ДОЗ ПОЛИФУНКЦИОНАЛЬНОГО ФИТОПРЕПАРАТА «УРТИКОСТИМ»
Представлены результаты гистологического исследования органов иммунной системы (тимус, селезенка, лимфатические узлы брыжейки) животных при введении различных доз полифункционального фитопрепарата с утеротоническим, руманаторным, гемостатическим и противовоспалительным эффектами, разработанного для лечения и профилактики некоторых заболеваний послеродового периода у коров. Установлено, что ежедневное подкожное введение фитопрепарата «Уртикостим» в терапевтической дозе 0,1 мл/кг массы животного не вызывает структурных изменений тимуса. Подкожное введение фитопрепарата в токсических дозах (1,0 и 2,0 мл/кг массы животного) вызывает снижение корково-мозгового индекса в 1,9 раза по сравнению с группой контроля, что обусловлено миграцией тимоцитов в периферические иммунные органы и ткани. Преобладание лимфоидных фолликулов с герминативными центрами в селезенке и высокий ГФИ у крыс этой группы свидетельствуют о процессах стимуляции гуморального звена иммунной системы при введении терапевтической дозы фитопрепарата. Высокие дозы фитопрепарата «Уртикостим» (1,0 и 2,0 мл/кг массы животного) приводят к структурным изменениям тимуса, характеризующимся разряжением плотности корковой зоны и снижением КМИ в 1,9 раза. Увеличение количества лимфоидных фолликулов с герминативными центрами в лимфатических узлах и высокие показатели ГФИ и паракортикальной зоны отражают реакцию Т и В-клеточной активации организма на введение фитопрепарата. Полученные данные отражают сходный, но различающийся по степени выраженности характер ответа тимуса, селезенки и брыжеечных лимфатических узлов на введение различных доз фитопрепарата «Уртикостим».
Ключевые слова: фитопрепарат, фитотерапия, иммунокомпетентные органы, иммуностимуляция.
Введение
Создание полифункциональных комбинированных лекарственных средств на основе фитопрепаратов является одним из способов преодоления полипрагмазии. Применение данных лекарственных средств, способствуя комплексному влиянию на этиологические факторы, патогенез и симптомы основного заболевания или сочетанных патологий, регистрируемых у животных, приводит к снижению лекарственной нагрузки на организм, получению экологически чистой продукции, а также уменьшению стоимости проводимой терапии [1-3].
Полифункциональный фитопрепарат «Уртикостим», представляющий собой экстракт спиртовый из растений Veratrum 1оЬеНапит, Urtica d^ica, АсЫПеа millefolium для парентерального введения, разработан для лечения и профилактики субинволюции, гипотонии матки и рубца, а также для комплексного лечения эндометритов у коров после отельного периода [4-6].
© Веретенникова В.С., Бойко Т.В., Гонохова М.Н., 2020
Одним из методов оценки безопасности лекарственных препаратов является морфологический метод, который позволяет объективно установить признаки физиологических или патологических процессов в организме при воздействии различных доз лекарственных средств.
Цель исследования - изучение морфологических изменений в органах иммунной системы крыс при введении разных доз полифункционального фитопрепарата «Урти-костим».
Материалы и методы
Экспериментальная работа выполнена в соответствии с рекомендациями, приведенными в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств [7].
В эксперименте использовали беспородных белых крыс-самцов массой 212,0228,0 г, которые были разделены на пять групп по 10 голов в каждой. Все животные содержались в условиях вивария и получали комплексный рацион для грызунов в форме гранулированного корма один раз в день, поение осуществляли из автопоилок вволю. Крысам экспериментальных групп (опытные группы) испытуемый фитопрепарат вводили подкожно ежедневно в течение 14 дней в следующих дозах: животным первой группы (опыт 1) - в дозе 0,1 мл/кг массы тела (терапевтическая доза (ТД) для клинического применения); крысам второй опытной группы (опыт 2) - в дозе 1,0 мл/кг массы тела (в 10 раз больше ТД); животным третьей опытной группы (опыт 3) - в дозе 2,0 мл/кг массы тела (в 20 раз больше ТД). Крысам первой контрольной группы (контроль 1) по той же схеме подкожно вводили физиологический раствор натрия хлорида в дозе 0,5 мл/кг массы тела, а крысам второй контрольной группы (контроль 2) аналогично вводили пропиленгликоль в дозе 0,5 мл/кг. Манипуляции с животными проводили в соответствии с Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (Страсбург, 18 марта 1986 г.).
В течение всего периода эксперимента вели наблюдение за общим состоянием крыс, фиксируя отклонения в их поведении. На следующий день после последнего введения испытуемого фитопрепарата животных выводили из опыта путем введения в медикаментозный наркоз. Для проведения гистологического исследования брали образцы тимуса, селезенки, краниальных лимфатических узлов брыжейки. Полученный материал фиксировали в 4%-ном растворе нейтрального забуференного формальдегида (рН 7,4) в течение 24 часов, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в парафин. Парафиновые срезы толщиной 3-5 мкм получали на ротационном микротоме LaboCut 4055 (фирма Slee, Германия), окрашивали гематоксилином и эозином. Микрофотосъемку гистологических препаратов проводили на микроскопе «Альтами БИО 1» с использованием цифровой окулярной USB-камеры USM0S03100KPA. Морфометрию органов осуществляли с помощью программы Altami Studio 3.2.
По методике В.П. Волкова (2015) вычисляли герминативно-фолликулярный индекс (ГФИ), позволяющий объективно оценить по степени развития зон просветления уровень гуморального ответа [8]. Предложенная авторами методика учитывает отношение диаметров зоны просветления и фолликула. В связи с тем, что фолликулы белой пульпы селезенки не всегда имеют форму правильного круга, в формуле заменен показатель диаметра на показатель площади фолликула и герминативного центра. Таким образом, ГФИ рассчитывали по формуле
^-•100%,
где 8г.ц - площадь герминативного центра; 8л.ф - площадь лимфоидного фолликула.
Корково-мозговой индекс тимуса рассчитывали как отношение площади коры к площади мозгового вещества. Результаты, полученные при проведении гистологического исследования препаратов тимуса, селезенки и лимфатических узлов, сравнивали с результатами, полученными от животных контрольной группы. Для проведения статистического анализа использовали критерий Стьюдента.
Результаты исследований
На протяжении всего экспериментального периода гибели животных не регистрировали, крысы были активны, потребляли корм и воду. Шерстный покров, место введения экспериментальных образцов фитокомпозиции, а также фекальные болюсы у животных опытных групп не имели визуальных отличий от таковых у крыс группы контроля.
При вскрытии животных всех экспериментальных групп органы грудной и брюшной полостей анатомически были расположены правильно. Тимус бледно-серого цвета состоял из двух долей, располагался на трахее. Селезенка была темно-вишневого цвета, имела уплощенную форму, покрыта гладкой капсулой, края органа острые. На разрезе пульпа не выступала над поверхностью селезенки. Брыжеечные лимфатические узлы располагались в виде цепочки, имели округлую или бобовидную форму светлосерого цвета, тестоватой консистенции. На разрезе выпячивания паренхимы не отмечали.
Результаты микроскопического исследования тимуса крыс экспериментальных групп. При гистологическом исследовании тимус животных контрольной (физиологический раствор натрия хлорида в дозе 0,5 мл/кг массы тела) и первой опытной («Урти-костим» в дозе 0,1 мл/кг массы тела) групп сохранял дольчатое строение, имел хорошо выраженную соединительнотканную капсулу, перегородки которой разделяли паренхиму на дольки. Каждая долька состояла из периферической корковой и центральной мозговой зон. Основным критерием такого разделения являлись плотность распределения тимоцитов, заселенных в этих участках долек. Корковая зона занимала основную площадь всей дольки и характеризовалась плотным распределением тимоцитов (рис. 1). Мозговая зона отличалась низкой плотностью распределения лимфоцитов и занимала относительно небольшую площадь всей дольки. Междольковые кровеносные сосуды умеренно наполнены кровью.
Рис. 1. Тимус животных контрольной группы. Рис. 2. Тимус крыс третьей опытной группы
Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. хб0 (2,0 мл/кг «Уртикостима»). Разреженность
корковой зоны. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. х150
При микроскопическом исследовании тимуса животных второй («Уртикостим» в дозе 1,0 мл/кг) и третьей («Уртикостим» в дозе 2,0 мл/кг) опытных групп граница между корковым и мозговым веществом выражена, отмечали просветление корковой зоны за счет менее плотного распределения тимоцитов (рис. 2) по сравнению с тимусом животных контрольной группы, что может быть связано с активной миграцией Т-лим-фоцитов, поступающих в кровеносные капилляры, находящиеся на границе коркового и мозгового вещества [9]. Далее из кровеносных сосудов они поступают в периферические лимфоидные органы.
В мозговом веществе тимуса всех экспериментальных групп регистрировали образование единичных тимусных телец, которые представляли собой продолговатые клетки с крупным ядром и слабой ацидофильной цитоплазмой (рис. 3).
Ж Ш ЩШЩШ
/ Xй
Л8 * • ' -гл-тага
: ей/"•
Рис. 3. Формирование тимусных телец в мозговом веществе крыс второй опытной группы (1,0 мл/кг «Уртикостима»). Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. х300
Рис. 4. А - тимусные тельца; Б - участки безъядерных клеток вокруг тимусных телец у животных третьей опытной группы (2,0 мл/кг). Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. ><300
Показатели корково-мозгового индекса тимуса крыс экспериментальных групп представлены в табл. 1.
Таблица 1
Морфометрические показатели тимуса у животных экспериментальных групп, М ± т
Группа 8 тимусной дольки, мкм2 8 мозгового 2 вещества, мкм 8 коркового вещества, мкм2 КМИ
Контроль 1 (ФЗ) 432 169,5 ± 101 206,1 51 514,6 ± 6 136,1 380 654,9 ± 99 650,4 7,4
Контроль 2 (ПГ) 432 050,4 ± 33 646,0 50 166,3 ± 5 146,85 482 216,7 ± 27 466,8 9,6
Опыт 1 (0,1 мл/кг) 605 850,8 ± 82 026,6 75 608,3 ± 15 476,0 530 242,5 ± 71 554,61 7,0
Опыт 2 (1,0 мл/кг) 429 054,0 ± 145416,1 89 939,6 ± 19 688,2 339 114,4 ± 129 030,4 3,8*
Опыт 3 (2,0 мл/кг) 462 974,4 ± 131 776,5 77 126,7 ± 30 696,7 385 847,7 ± 105 045,7 5,0
*р < 0,05; ФЗ - физиологический раствор натрия хлорида; ПГ - пропиленгликоль.
Результаты исследования свидетельствуют о том, что двухнедельное введение терапевтической дозы фитопрепарата «Уртикостим» не вызывает достоверных изменений корково-мозгового индекса. Подкожное введение фитопрепарата в токсических дозах (1,0 и 2,0 мл/кг массы животного) вызывает резкое снижение данного показателя (в 1,9 раза по сравнению с группой контроля), что может быть обусловлено миграцией тимоцитов в периферические иммунные органы и ткани.
Результаты микроскопического исследования селезенки крыс экспериментальных групп. У животных контрольной группы селезенка имела хорошо выраженную соединительнотканную капсулу и трабекулы, содержащие кровеносные сосуды. Паренхима органа была представлена красной и белой пульпой. В состав красной пульпы входили синусоидные капилляры и селезеночные тяжи. Белая пульпа состояла из многочисленных лимфоидных фолликулов (рис. 5). У животных первой опытной группы («Уртико-стим» в дозе 0,1 мл/кг) наблюдали зоны просветления (герминативные центры). Они составляли 40% от всех имеющихся фолликулов (рис. 6).
Рис. 5. Лимфоидный фолликул селезенки крыс Рис. 6. Герминативный центр в одном из фолликулов группы контроля. Окраска: гематоксилин и эозин. селезенки крыс первой опытной группы («Уртико-Ув. хб0 стим» в дозе 0,1 мл/кг). Окраска: гематоксилин
и эозин. Ув. х150
У животных второй и третьей опытных групп (дозы 1,0 и 2,0 мл/кг массы соответственно) наблюдали аналогичную картину. Количество лимфоидных фолликулов с герминативными центрами было ниже, чем у крыс первой опытной группы, и составило 25 и 27% соответственно (рис. 7, 8).
Рис. 7. Гистологическая картина селезенки крыс второй опытной группы («Уртикостим» в дозе 1,0 мл/кг). Лимфоидный фолликул с герминативным центром. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. х150
Рис. 8. Гистологическая картина селезенки крыс третьей опытной группы («Уртикостим» в дозе 2,0 мл/кг). Лимфоидный фолликул с герминативным центром. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. х150
Морфометрические показатели селезенки представлены в табл. 2.
Таблица 2
Морфометрические показатели селезенки у животных экспериментальных групп, М ± т
Группа 8 лимфоидного фолликула белой пульпы, мкм2 8 герминативного центра, мкм2 8 маргинальной зоны, мкм2 ГФИ
Контроль 1 (ФЗ) 231 459,2 ± 28 221,4 0,0 174 292,1 ± 21 796,4 0,0
Контроль 2 (ПГ) 258 959,8 ± 17 581,1 0,0 150 451,6 ± 9 603,5 0,0
Опыт 1 (0,1 мл/кг) 264 283,0 ± 39 739,3 19 435,6 ± 3171,6 163 917,6 ± 24 691,4 7,4
Опыт 2 (1,0 мл/кг) 272 175,3 ± 25 886,2 17 884,4 ± 1 220,7 170 577,6 ± 21 466,2 6,6
Опыт 3 (2,0 мл/кг) 241 289,0 ± 32 617,7 16 620,5 ± 1 013,7 172 615,5 ± 20 428,9 6,9
В гистологических препаратах селезенки крыс контрольной группы герминативные центры в фолликулах отсутствовали, следовательно, ГФИ оказался равен нулю. ГФИ в опытных группах имел разные значения и был в диапазоне от 6,6 (доза 1 мл/кг массы) до 7,4 (доза 0,1 мл/кг массы). Появление герминативных центров свидетельствует о стимуляции гуморального иммунного ответа, так как в данной зоне происходит пролиферация В-лимфоцитов и их дифференцировка в плазматические клетки [8; 10]. Отсутствие герминативных центров у крыс, которым в течение двух недель подкожно вводили пропиленгликоль в испытуемых дозах, указывает на индифферентность испытуемого вещества.
При микроскопии брыжеечных лимфатических узлов у животных обеих контрольных групп наблюдали признаки сохранности гистоархитектоники органа (рис. 9). При морфологическом исследовании лимфоузла крыс первой опытной группы («Урти-костим» в дозе 0,1 мл/кг) наблюдали единичные фолликулы с признаками реактивности (рис. 10).
Рис. 9. Гистологическая картина лимфатических Рис. 10. Гистологическая картина
узлов у крыс контрольной группы. Окраска: лимфатических узлов у крыс первой опытной
гематоксилин и эозин. Ув. х60 группы («Уртикостим» в дозе 0,1 мл/кг).
Расширение паракортикальной зоны. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. х60
У животных второй и третьей опытной групп («Уртикостим» в дозе 1,0 и 2,0 мл/кг массы животного соответственно) в кортикальной зоне также наблюдали наличие вторичных фолликулов с герминативными центрами, являющимися участками пролиферации В-лимфоцитов, а также расширение паракортикальной зоны с дискретно
расположенными интердигитирующими дендритическими клетками с перицеллюляр-ными просветлениями, что отражает ответную реакцию организма на введение фитопрепарата (рис. 11, 12).
Рис. 11. Гистологическая картина лимфатических узлов у крыс второй опытной группы («Уртикостим» в дозе 1,0 мл/кг). Увеличение фолликулов с герминативными центрами. Расширение паракортикальной зоны. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. х60
Рис. 12. Гистологическая картина лимфатических узлов у крыс третьей опытной группы («Уртикостим» в дозе 2,0 мл/кг). Лимфоидные фолликулы с герминативными центрами.
Расширение паракортикальной зоны. Окраска: гематоксилин и эозин. Ув. х60
Результаты анализа герминативно-фолликулярного индекса лимфатических узлов, представленные в табл. 3, свидетельствуют о достоверном увеличении данного показателя у крыс второй и третьей опытных групп («Уртикостим» в дозе 1,0 и 2,0 мл/кг массы животного соответственно) в 1,6 и 1,4 раз по сравнению с показателями контрольных групп, что свидетельствует о выраженной ответной реакции организма на введение высоких доз фитопрепарата.
Таблица 3
Морфометрические показатели лимфатических узлов у животных экспериментальных групп,
М ± т
Группа 8 фолликула, мкм2 8 герминативного 2 центра, мкм 8 маргинальной зоны, мкм2 ГФИ
Контроль 1 (ФЗ) 132 585,8 ± 9 983,8 33 671,9 ± 4 651,4 98 913,9 ± 6 807,8 25,3
Контроль 2 (ПГ) 164 777,2 ± 9 850,2* 36 441,7 ± 2 348,5 128 335,5 ± 8 662,4* 22,1
Опыт 1 (0,1 мл/кг) 147 689,4 ± 16899,9 34 382,6 ± 7891,0 113 306,7 ± 10702,6 23,2
Опыт 2 (1,0 мл/кг) 118 676,2 ± 10 728,0 48 350,5 ± 4 928,3* 70 325,7 ± 9 472,6* 40,7*
Опыт 3 (2,0 мл/кг) 181 197,7 ± 18 706,3* 67 453,4 ± 7 128,1* 113 744,3 ± 12 564,9 37,2*
*р < 0,05.
Заключение
Таким образом, ежедневное подкожное введение фитопрепарата «Уртикостим» в терапевтической дозе 0,1 мл/кг массы животного не вызывает структурных изменений тимуса. Преобладание лимфоидных фолликулов с герминативными центрами в селезенке и высокий ГФИ отражают процессы стимуляции гуморального звена иммунной системы у крыс при введении им терапевтической дозы фитопрепарата.
Высокие дозы фитопрепарата «Уртикостим» (1,0 и 2,0 мл/кг массы животного) приводят к структурным изменениям тимуса, характеризующимся разряжением плотности корковой зоны и снижением КМИ в 1,9 раза. Увеличение количества лимфоид-ных фолликулов с герминативными центрами в лимфатических узлах и высокие показатели ГФИ и паракортикальной зоны отражают реакцию Т и В-клеточной активации организма на введение фитопрепарата.
Полученные данные отражают сходный, но различающийся по степени выраженности характер ответа тимуса, селезенки и брыжеечных лимфатических узлов на введение различных доз фитопрепарата «Уртикостим».
V.S. Veretennikova, T.V. Bojko, M.N. Gonokhova
Omsk State Agrarian University named after P.A. Stolypin, Omsk
Morphological characteristics of the organs of the immune system of rats in case of administration of different doses of the polyfunctional phytopreparation "Urticostim"
The article presents the results of a histological study of the organs of the immune system (thymus, spleen, mesenteric lymph nodes) of animals after the introduction of various doses of a multifunctional phyto-preparation with uterotonic, ruminatory, hemostatic and anti-inflammatory effects, developed for the treatment and prevention of certain diseases of the postpartum period in cows. It was found that daily subcutaneous injection of the phytopreparation "Urticostim" at a therapeutic dose of 0.1 ml/kg of animal weight does not cause structural changes in the thymus. Subcutaneous injection of the phytopreparation in toxic doses (1.0 and 2.0 ml/kg of animal weight) causes a decrease in the cortical/medullary ratio by 1.9 times if compared with the control group, which is due to the migration of thymocytes to peripheral immune organs and tissues. The predominance of lymphoid follicles with germinal centers in the spleen and high GPI in rats of this group indicate the processes of stimulation of the humoral link of the immune system in rats when they are injected with a therapeutic dose of a phytopreparation. High doses of the phytopreparation "Urticostim" (1.0 and 2.0 ml/kg of animal weight, respectively) lead to structural changes in the thymus, characterized by a thinning of the density of the cortical zone and a decrease in the cortical/medullary ratio by 1.9 times. An increase in the number of lymphoid follicles with germinal centers in the lymph nodes and high rates of GPI and the paracortical zone reflect the response of T- and B-cell activation in the body to the introduction of the phytopreparation. The data obtained reflect a similar, but differing in severity, nature of the response of the thymus, spleen, and mesenteric lymph nodes to the introduction of various doses of the phytopreparation "Urticostim".
Keywords: phytopreparation, herbal medicine, immunocompetent organs, immunostimulation.
Список литературы
1. Сампиев А.М. Актуальность исследований по созданию лекарственных средств полифункционального действия, сочетающих фармацевтические субстанции природного и синтетического происхождения / А.М. Сампиев, Е.Б. Никифорова, М.В. Гамагина. - Текст : электронный // Медико-фармацевтический журнал «Пульс». - 2020. - № 1. -URL: https ://cyberleninka. ru/article/n/aktualnost-issle-dovaniy-po-sozdaniyu-lekarstvennyh-sredstv-polifunk-tsionalnogo-deystviya-sochetayuschih.farmatsevtiche-skie (дата обращения: 06.10.2020) ; http://dx.doi. org/10.26787/nydha-2686-6838-2020-22-1-80-85. -Режим доступа: свободный. - ISSN 2686-6838.
2. Николаев С.М. Системная фитофармако-логия - основа рациональной фитофармакотерапии и фитофармакопрофилактики заболеваний /
References
1. Sampiev A.M. Aktual'nost' issledovanij po sozdaniyu lekarstvennyh sredstv polifunkcional'nogo dejstviya, sochetayushchih farmacevticheskie substan-cii prirodnogo i sinteticheskogo proiskhozhdeniya / A.M. Sampiev, E.B. Nikiforova, M.V. Gamagina. -Tekst : elektronnyj // Mediko-farmacevticheskij zhur-nal "Pul's".- 2020. - № 1. - URL: https://cy-berleninka.ru/article/n/aktualnost-issledovaniy-po-soz-daniyu-lekarstvennyh-sredstv-polifunktsionalnogo-deyst-viya-sochetayuschih.farmatsevticheskie (data obra-shcheniya: 06.10.2020) ; http://dx.doi.org/10.26787/ nydha-2686-6838-2020-22-1-80-85. - Rezhim dostu-pa: svobodnyj. - ISSN 2686-6838.
2. Nikolaev S.M. Sistemnaya fitofarmakologiya -osnova racional'noj fitofarmakoterapii i fitofarmako-profilaktiki zabolevanij / S.M. Nikolaev. - Tekst :
С.М. Николаев. - Текст : электронный // Вестник Бурятского государственного университета. Медицина и фармация. - 2011. - № 12. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/sistemnaya-fitofarma-kologiya-osnova-ratsionalnoy-fitofarmakoterapii-i-fi-tofarmakoprofilaktiki-zabolevaniy (дата обращения: 06.10.2020). - Режим доступа: свободный. - ISSN 1994-0866.
3. Веретенникова В. С. Фитопрепараты и фитотерапия в ветеринарии / В.С. Веретенникова, К.В. Варфоломеева, Н.А. Бузмакова, Т.В. Бойко. -Текст : непосредственный // Вестник Омского государственного аграрного университета. - 2019. -№ 3(35). - С. 37-45. - ISSN 2222-0364.
4. Патент № 2719225 Российская Федерация, МПК A61K 36/185(2006.01), A61K 36/28(2006.01), A61K 36/88(2006.01), A61K 47/10(2006.01), A61P 15/00(2006.01). Средство для лечения и профилактики послеродовых заболеваний у коров : № 2019119969 : заявлено 25.06.2019 : опубликовано 17.04.2020 / Т.В. Бойко, В.С. Веретенникова, Е.А. Лукша. - Текст : непосредственный.
5. Веретенникова В.С. Терапевтическая и профилактическая эффективность биологически активного комплекса растительного происхождения «Уртикостим» при гинекологических заболеваниях послеродового периода у коров / В.С. Веретенникова, Т.В. Бойко, К.В. Варфоломеева. - Текст : электронный // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - 2020. - № 3. -С. 98-106. - ISSN 1996-4277.
6. Веретенникова В.С. Влияние комплексного препарата растительного происхождения «Ур-тикостим» на биохимический статус коров с послеродовыми осложнениями (экспериментальные исследования) / В.С. Веретенникова, Т.В. Бойко, К.В. Варфоломеева. - Текст : электронный // Приоритетные направления научно-технологического развития агропромышленного комплекса России : материалы Национальной научно-практической конференции. - 2019. - С. 70-73. - URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=37257559 (дата обращения 05.11.2020). - Режим доступа: для заре-гистрир. пользователей. - ISBN 978-5-98660-332-2.
7. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под редакцией А.Н. Миронова. - Часть первая. - Москва : Гриф и К, 2012. - 944 с. - Текст : непосредственный.
8. Волков В.П. Новый алгоритм морфомет-рической оценки функциональной иммуноморфо-логии селезенки / В.П. Волков. - Текст : электронный // Universum: медицина и фармакология. -2015. - № 5-6(18). - URL: https://cyber-leninka.ru/article/n/novyy-algoritm-morfometriches-koy-otsenki-funktsionalnoy-immunomorfologii-sele-zyonki (дата обращения: 06.10.2020). - Режим доступа: свободный. - ISSN 2311-6129.
elektronnyj // Vestnik Buryatskogo gosudarstvennogo universiteta. Medicina i farmaciya. - 2011. - № 12. -URL: https://cyberleninka.ru/article/n/sistemnaya-fitofarmakologiya-osnova-ratsionalnoy-fitofarmakote-rapii-i-fitofarmakoprofilaktiki-zabolevaniy (data ob-rashcheniya: 06.10.2020). - Rezhim dostupa: svobod-nyj. - ISSN 1994-0866.
3. Veretennikova V.S. Fitopreparaty i fitotera-piya v veterinarii / V.S. Veretennikova, K.V. Varfolo-meeva, N.A. Buzmakova, T.V. Bojko. - Tekst : nepo-sredstvennyj // Vestnik Omskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. - 2019. - № 3(35). - S. 37-45. -ISSN 2222-0364.
4. Patent № 2719225 Rossijskaya Federaciya, MPK A61K 36/185(2006.01), A61K 36/28(2006.01), A61K 36/88(2006.01), A61K 47/10(2006.01), A61P 15/00(2006.01). Sredstvo dlya lecheniya i profilaktiki poslerodovyh zabolevanij u korov : № 2019119969 : zayavleno 25.06.2019 : opublikovano 17.04.2020 / T.V. Bojko, V.S. Veretennikova, E.A. Luksha. - Tekst : neposredstvennyj.
5. Veretennikova V.S. Terapevticheskaya i pro-filakticheskaya effektivnost' biologicheski aktivnogo kompleksa rastitel'nogo proiskhozhdeniya "Urtikos-tim" pri ginekologicheskih zabolevaniyah poslerodo-vogo perioda u korov / V.S. Veretennikova, T.V. Bojko, K.V. Varfolomeeva. - Tekst : elektronnyj // Vestnik Altajskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. - 2020. - № 3. - S. 98-106. - ISSN 1996-4277.
6. Veretennikova V.S. Vliyanie kompleksnogo preparata rastitel'nogo proiskhozhdeniya "Urtikostim" na biohimicheskij status korov s poslerodovymi os-lozhneniyami (eksperimental'nye issledovaniya) / V.S. Veretennikova, T.V. Bojko, K.V. Varfolomeeva. -Tekst : elektronnyj // Prioritetnye napravleniya nauch-no-tekhnologicheskogo razvitiya agropromyshlennogo kompleksa Rossii : materialy Nacional'noj nauchno-prakticheskoj konferencii. - 2019. - S. 70-73. - URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=37257559 (data obrashcheniya 05.11.2020). - Rezhim dostupa: dlya zaregistrir. pol'zovatelej. - ISBN 978-5-98660-332-2.
7. Rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskih issledovanij lekarstvennyh sredstv / pod redakciej A.N. Mironova. - Chast' pervaya. - Moskva : Grif i K, 2012. - 944 s. - Tekst : neposredstvennyj.
8. Volkov V.P. Novyj algoritm morfometri-cheskoj ocenki funkcional'noj immunomorfologii se-lezenki / V.P. Volkov. - Tekst : elektronnyj // Universum: medicina i farmakologiya. - 2015. - № 5-6(18). -URL: https ://cyberleninka. ru/article/n/novyy -algoritm-morfometricheskoy-otsenki-funktsionalnoy-immunomo-rologii-selezyonki (data obrashcheniya: 06.10.2020). -Rezhim dostupa: svobodnyj. - ISSN 2311-6129.
9. Soshnikova O.V. Izuchenie himicheskogo sostava i biologicheskoj aktivnosti rastenij roda krapi-va : dissertaciya na soiskanie uchenoj stepeni kandida-ta farmacevticheskih nauk : special'nost' 15.00.02 / O.V. Soshnikova. - Kursk, 2006. - Tekst : nepo-sredstvennyj.
9. Сошникова О.В. Изучение химического состава и биологической активности растений рода крапива : диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук : специальность 15.00.02 / О.В. Сошникова. - Курск, 2006. -Текст : непосредственный.
10. Genevieve M. Spleen: Development, anatomy and reactive lymphoid proliferations / Genevieve M., Cranе Yen-ChunLiu, Amy Chadburn // Seminars in Diagnostic Pathology. Available online 16 June 2020. -URL: https://doi.org/10.1053/j.semdp.2020.06.003. -ISSN 0740-2570.
10. Genevieve M. Spleen: Development, anatomy and reactive lymphoid proliferations / Genevieve M., Crane Yen-ChunLiu, Amy Chadburn // Seminars in Diagnostic Pathology. Available online 16 June 2020. -URL: https://doi.org/10.1053/j.semdp.2020.06.003. -ISSN 0740-2570.
Веретенникова Валентина Сергеевна, аспирант, Омский ГАУ, vs.vodolaga36.06.01@om-gau.org; Бойко Татьяна Владимировна, д-р вет. наук, доцент, Омский ГАУ, tv.boyko@omgau.org; Гонохова Марина Николаевна, канд. вет. наук, доцент, Омский ГАУ, mn.gonokhova@omgau.org.
Veretennikova Valentina Sergeevna, Postgraduate Student, Omsk SAU, vs.vodola-ga36.06.01@omgau.org; Bojko Tatyana Vladimi-rovna, Dr. Vet. Sci., Ass. Prof., Omsk SAU, tv.boyko@omgau.org; Gonokhova Marina Niko-laevna, Cand. Vet. Sci., Ass. Prof., Omsk SAU, mn. gonokhova@omgau. org.
УДК 619:616.98.42-071
А.А. НОВИЦКИЙ, В.И. ПЛЕШАКОВА, НА. ЛЕЩЁВА, Т.И. ЛОРЕНГЕЛЬ
Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина, Омск
НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ПРИМЕНЕНИЮ РОЗ БЕНГАЛ ПРОБЫ ПРИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ БРУЦЕЛЛЕЗА
В настоящее время поствакцинальная диагностика бруцеллеза основана на двух серологических методах - РА и РСК. Слабые агглютиногенные свойства вакцины из штамма B. abortus 82 позволяют проводить диагностические исследования в стадах коров не ранее 6-месячного срока после иммунизации. Для уточнения эпизоотической ситуации при подозрении на бруцеллез применяется РИД с О-ПС антигеном. При подтверждении бруцеллеза возникает проблема, связанная с дифференциацией животных, реагирующих на вакцину или инфекцию. Учитывая простоту выполнения, высокую специфичность и чувствительность РБП, с нашим участием отработана возможность ее применения при оздоровлении стад крупного рогатого скота в короткие сроки после иммунизации. Исходя из наставления, показатели роз бенгал пробы учитывают только как «положительные» и «отрицательные», использовать ее в качестве дифференцирующего теста в стадах иммунного поголовья не представляется возможным. В то же время при учете результатов РБП мы обратили внимание на существующую параллель с пробирочной РА. Установлено, что показатели выраженности реакции, оцениваемой в крестах, полностью совпадают с показателями РА. Показатели РБП «+++» и «++++» соответствуют РА в титрах 200 МЕ и выше. Более того, высокие показатели РБП поглощают показатели РСК в разведении 1 : 20 и выше РИД. По полученным данным обоснована возможность использования РБП взамен РА и громоздкой РСК. Применение РБП оказалось наиболее эффективным при выявлении латентно больных животных с положительной реакцией после их провокации вакциной из штамма 82. Это позволило сделать вывод о возможности включения в систему оздоровительных мероприятий при бруцеллезе взамен РА, РСК высокочувствительной легко выполнимой роз бенгал пробы в комплексе с реакцией иммунодиффузии с О-полисахарадным антигеном как индикатором присутствия бруцеллеза в стаде.
Ключевые слова: диагностика бруцеллеза, РА, РСК, РИД, РБП.
© Новицкий А.А., Плешакова В.И., Лещёва Н.А., Лоренгель Т.И., 2020
