CC BY
31
УДК 612.428:616.36-002
И.Ю. Ищенко, С.В. Мичурина
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ТКАНЕВОМ МИКРОРАЙОНЕ ПЕЧЕНИ И РЕГИОНАРНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛАХ У КРЫС ВИСТАР С МОДЕЛЬЮ ХРОНИЧЕСКОГО ТОКСИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА, СОЗДАННОГО КОМБИНИРОВАННЫМ ДЕЙСТВИЕМ ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТОГО УГЛЕРОДА И ЭТАНОЛА
ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, Новосибирск
Результаты морфофункционального анализа тканевого микрорайона печени показали, что комбинированное воздействие четыреххлористого углерода и этанола приводит к развитию хронического токсического гепатита с проявлениями жировой и баллонной дистрофии гепатоцитов, некрозом печеночных клеток, нарушением крово- и лимфообращения, активацией фиброгенеза вокруг центральных вен, клеточной инфильтрацией с преимущественным содержанием лимфоцитов. Для повреждений характерна центролобулярная локализация. Изменения в регионарных лимфатических узлах являются результатом суммарного эффекта иммуносупрессивного действия четыреххлористого углерода и иммуностимулирующего влияния этанола. При этом дренажная функция лимфоузлов усилена. Результатами нашего исследования еще раз подтверждается концепция о лимфатическом регионе, в котором дренируемый орган и регионарный лимфатический узел представляют собой единую функциональную гомеостатическую систему.
Ключевые слова: четыреххлористый углерод, этанол, печень, лимфатические узлы
Ведущим синдромом при различных диффузных заболеваниях печени является синдром эндогенной интоксикации организма, что обусловлено распадом клеток печеночной паренхимы. Накопление в околоклеточном пространстве токсических продуктов приводит к нарушению клеточного метаболизма и ослаблению регуляторных и адаптационных функций как самой печени, так и всего организма в целом. В этих условиях особую значимость приобретает лимфатическая система, выполняющая дренажно-детоксикационную функцию. Согласно концепции Ю.И. Бородина о лимфатическом регионе [3], дренируемый орган и регионарные лимфатические узлы представляют собой единую функциональную гомеостатичес-кую систему. Последние выполняют иммунную функцию, являются важнейшим звеном тканевого дренажа и детоксикации. Таким образом, если печень осуществляет детоксикационную функцию на организменном уровне, то регионарные лимфатические узлы обеспечивают лимфодетокси-кацию самого органа. Необходимо учитывать, что состояние органа и его лимфатического аппарата находятся не только в прямой, но и в обратной зависимости. От эффективности естественной лимфодетоксикации зависит реализация процессов пато- и саногенеза, постоянно протекающих
в организме [4, 5]. Кроме того, комбинированное воздействие патогенных факторов обусловливает смешанный характер патологических изменений в печени. При этом суммарное действие четыреххлористого углерода и этанола на функции лимфатических узлов не исследовано.
В связи с этим представляется целесообразным изучить морфофункциональные изменения в тканевом микрорайоне печени и регионарных лимфатических узлах у крыс Вистар с моделью хронического токсического гепатита, созданного сочетанным действием четыреххлористого углерода и этанола.
Методы. В эксперименте использовали половозрелых крыс-самцов Вистар весом 150-180 г. Животные были получены из вивария Института цитологии и генетики СО РАН. Хронический токсический гепатит (ХТГ-28) у животных создавали путем введения 25%-го масляного раствора четыреххлористого углерода через желудочный зонд в дозе 0,1 мл на 100 г веса тела два раза в неделю за 30 минут до кормления в течение 28 суток; в качестве питья (вместо воды) животным давали 5% раствор этилового спирта ad libitum в течение четырех недель создания модели [11].
Животных декапитировали под эфирным наркозом. Для светооптического и морфометри-
ческого исследования забирали образцы печени и ее регионарные лимфатические узлы, располагающиеся в гепато-дуоденальной связке. Кусочки печени и лимфоузлы фиксировали в растворе Телесницкого. Гистологический материал проводили по общепринятой методике, окрашивали гематоксилином Майера и эозином. Для морфо-метрического анализа структурно-функциональных зон лимфоузлов применен стереологический метод точечного счета с использованием морфо-метрической сетки [1]. Статистическую обработку данных проводили с использованием t критерия Стьюдента. Различия сравниваемых величин считали статистически значимыми при р<0,05.
Результаты. Морфологическое исследование тканевого микрорайона печени показало, что у животных с полученной моделью хронического токсического гепатита наблюдаются значительные нарушения: изменение балочной структуры печеночных долек, выраженный полиморфизм паренхиматозных клеток, жировая и баллонная дистрофия гепатоцитов, кариорексис, кариоли-зис, некроз гепатоцитов (фото 1,2). Нарушения в печени выявляли в центре печеночных долек, где имеются наихудшие условия снабжения кислородом и питательными веществами (фото 2).
Сложная иерархия морфофизиологических процессов, происходящих в органе, определяется тесными взаимоотношениями стромы и паренхимы. Роль связующего звена, осуществляющего постоянный обмен информацией между паренхимой и стромой, выполняет микроциркуляторное русло, где наряду с кровью рассматривается и лимфа [7]. У крыс с моделью ХТГ-28 обнаружены признаки нарушения крово- и лимфообращения: исчезновение привычной сети синусоидов, расширение лимфатических щелей в областях портальных трактов, появление извилистости у центральных вен, о которой мы можем судить по частому появлению косых срезов этих сосудов на препаратах (фото 2). Вокруг центральных вен отмечено разрастание фиброзной ткани (фото 3), что характерно при алкогольных поражениях печени [10]. Известно, что центральным событием в фиброгенезе является активация одного из видов синусоидных клеток печени — клеток Ито, превращение их из «пассивных», накапливающих витамин А, в клетки пролиферирующие и фиброгенные [8].
В областях портальных трактов нами обнаружено появление воспалительных инфильтратов с преимущественным содержанием лимфоцитов. Из литературных источников известно, что введение четыреххлористого углерода стимулирует повышение концентрации в плазме крови воспалительных цитокинов — медиаторов повреждения — ин-
Фото 1. Тканевой микрорайон печени крыс с ХТГ-28: жировая и баллонная дистрофия гепатоцитов; некроз паренхиматозных клеток.
Окраска гематоксилином и эозином. Объектив 40, окуляр 10.
Фото 2. Преимущественные повреждения печеночной паренхимы в областях центральных вен, свидетельствующие о наличии извилистости у последних.
Окраска гематоксилином и эозином. Объектив 10, окуляр 10.
Фото 3. Активный фиброгенез вокруг центральных вен у крыс с ХТГ-28.
Окраска гематоксилином и эозином. Объектив 40, окуляр 10.
терлейкина-1р и а-фактора некроза опухоли [15]. Клетки Ито поддерживают воспаление в печени, секретируя молекулы клеточной адгезии и тем самым усиливая миграцию мононуклеарных клеток через перисинусоидальное пространство [13].
Наши морфологические наблюдения подтверждаются биохимическими данными Башки-ровой Ю.В. [2] и Колпакова М.А. [9], которые на 28-е сутки сочетанного воздействия четыреххлористого углерода и этанола наблюдали наиболее выраженные проявления цитолитического, хо-лестатического, мезенхимально-воспалительного синдрома, а также угнетение активности ферментных систем биотрансформации ксенобиотиков и увеличение активности процессов липидной пероксидации.
Морфометрический анализ регионарных лимфатических узлов печени у данной группы (таблица) животных показал, что изменения относительных объемных плотностей исследованных зон (коркового и мозгового вещества, пара-кортекса, лимфоидных узелков, герминативных центров, мозговых тяжей и синусов) происходят на уровне тенденций. Наблюдалось подавление Т-зависимой зоны (паракортекса) и стимуляция В-зависимых зон (мозговых тяжей и лимфоид-ных узелков). На фоне роста объемной плотности лимфоидных узелков выявляли снижение этого параметра для герминативных центров.
Отсутствие достоверных различий в наблюдаемых изменениях, по-видимому, можно объяснить суммарным эффектом иммуносупрессивного воздействия четыреххлористого углерода [12 ] и иммуностимулирующим влиянием этанола [6, 14].
Морфометрический анализ печеночных лим-
Таблица
Объемные плотности структурно-функциональных зон регионарных лимфатических узлов печени (V, %; M±m)
фоузлов выявил тенденцию к увеличению размеров мозговых синусов, что говорит об усилении дренажной функции данных органов.
Заключение. Таким образом, комбинированное воздействие четыреххлористого углерода и этанола приводит к развитию хронического токсического гепатита с проявлениями жировой и баллонной дистрофии гепатоцитов, некрозом печеночных клеток, нарушением крово- и лимфообращения, активацией фиброгенеза вокруг центральных вен, клеточной инфильтрацией с преимущественным содержанием лимфоцитов. Для повреждений характерна центролобулярная локализация. Изменения в регионарных лимфатических узлах являются результатом суммарного эффекта иммуносупрессивного действия четыреххлористого углерода и иммуностимулирующего влияния этанола. При этом дренажная функция лимфоузлов усилена. Результатами нашего исследования еще раз подтверждается концепция о лимфатическом регионе, в котором дренируемый орган и регионарный лимфатический узел представляют собой единую функциональную гомеостатическую систему.
Morphofunctional changes in liver tissue microregion and in the regional lymph nodes in Wistar rats with chronic toxic hepatitis model created by combined carbon tetrachloride and ethanol action I.Yu. Ischenko, S.V. Michurina
Morphofunctional analysis findings of liver tissue microregion have shown, that the combined carbon tetrachloride and ethanol action results in development chronic toxic hepatitis with manifestations of fatty and bulbous he-patocyte dystrophy, parenhyma cell necrosis, haemo- and lymphocirculation changes, fibrogenesis activation around of venae centralis, cell infiltration with the primary lymphocyte content. The centrolobular localization is characteristic for these lesions. The changes in the regional lymp nodes result of total effect of immunosuppressional CCl4 action and immunostimulational C2H5OH influence. In addition there is drainage function intensification of hepatic lymph nodes. The results of our investigation once again corroborate the lymphatic region conception, stating that a drainaged organ and a regional lymph node represant the uniform functional homoeostatic system.
Литература
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия / Г.Г. Автандилов. — М., 1990. — 384 с.
2. Башкирова Ю.В. Показатели функциональной активности печени под влиянием энтеросор-бентов при хроническом токсическом гепатите: Автореф. дис. ... канд. мед. наук / Ю.В. Башкирова. — Новосибирск, 1999. —18 с.
3. Бородин Ю.И. Лимфология в Сибири: теория, клиника, профилактика / Ю.И. Бородин //
Показатели Контроль Животные с ХТГ28
Корково-мозговой индекс 2,65±0,57 2,8±1,56
V краевого синуса 2,83±0,41 4,3±1,54
V коры 71,04±4,52 62,35±13,19
V паракортекса 53,95±3,3 45,2±6,96
V лимфоидных узелков 10,61±2,08 16,14±4,84
V герминативных центров 2,15±0,34 1,57±0,11
V мозгового вещества 28,96±4,52 37,65±13,19
V мозговых тяжей 20,85±2,89 23,61±8,17
V мозговых синусов 8,11±2,36 14,04±5,21
Бюлл. СО РАМН, 1996. — № 2. — С. 30-37.
4. Бородин Ю.И. Лимфатический регион печени как маркер экологического прессинга на организм / Ю.И. Бородин, С.В. Мичурина // Морфология, 1998. — Т. 113. — № 3. — С. 27 .
5. Бородин Ю.И. Проблемы лимфодетоксика-ции и лимфосанации / Ю.И. Бородин // Проблемы экспериментальной и клинической лимфоло-гии: Труды НИИКЭЛ СО РАМН. — Новосибирск, 2000. — Т. 8. — С. 5-9.
6. Быкова А.А. Иммунные и аутоиммунные эффекты этанола / А.А. Быкова, Н.С. Сединина // Эксперим. и клин. фармакол., 2002. — Т. 65. — № 6. — С. 60-63.
7. Казначеев В.П. Этюды к теории общей патологии / В.П. Казначеев, М.Я. Субботин. — Новосибирск, 1971. — 229 с.
8. Киясов А.П. Закономерности активации клеток Ито / А.П. Киясов,А.А. Гумерова // Морфология, 2002. — Т. 121. — № 3-4. — С. 71.
9. Колпаков М.А. Восстановительные процессы в печени при лимфотропной терапии хронических гепатитов (экспериментально-клиническое исследование): Автореф. дис. ... д-ра мед. наук / М.А. Колпаков. — Новосибирск, 2001.
10. Подымова С.Д. Болезни печени: Руководство для врачей / С.Д. Подымова. — М., 1998. — 704 с.
11. Скакун Н.П. Эффективность витогепата и сирепара в сочетании с карсилом при хроническом поражении печени / Н.П. Скакун, И.П. Мо-сейчук, Я.Я. Гиль // Эксперим. и клин. фармакол., 1992. — Т. 55. — № 1. — С. 61-63.
12. Carbon tetrachloride is immunosuppressive and decreases host resistance to Listeria monocytogenes and Streptococcus pneumoniae in female B6C3F1 mice / T.L. Guo, J.A. McCay, R.D. Brown et al. // Toxicology, 2000. — Vol. 154. — № 1-3. — P. 85-101.
13. Expression and regulation of cell adhesion molecules by hepatic stellate cells (HSC) of rat liver: involvement of HSC in recruitment of inflammatory cells during hepatic tissue repair / T. Knittel, C. Dinter, D. Kobold et al. // Am. J. Pathol., 1999.
— Vol. 154. — № 1. — P. 153-167.
14. Nagy L.E. Molecular aspects of alcohol metabolism: transcription factors involved in early eth-anol-induced liver injury / L.E. Nagy // Ann. Rev. Nutr., 2004. — № 24. — P. 55-78.
15. Serum and liver concentrations of tumor necrosis factor alpha and interleukin-1beta following administration of carbon tetrachloride to male rats / L.A. DeCicco, L.E. Rikanse, G.G. Tutor, K.R. Hornbrook // Toxicol. Lett., 1998. — Vol. 98. — № 1-2.
— P. 115-121.
