CC BY
124
КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ
clinical pharmacology
□
ВОЗМОЖНОСТИ ВЫСОКИХ ДОЗ СТАНДАРТИЗИРОВАННОГО СИЛИМАРИНА ПРИ ТОКСИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЯХ ПЕЧЕНИ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ
Горчаков В.Н.,1 Гаскина Т.К.,2 Горчакова О.В.,1
1 ФГБУ «НИИКЭЛ» СО РАМН, г. Новосибирск
2 ФГБУ «НИИ терапии» СО РАМН, г. Новосибирск
Гаскина Тамара Константиновна
e-mail: tkgaskina@yandex.ru
РЕЗЮМЕ
В статье представлены современные данные о механизме действия и клинических эффектах силима-рина (Легалона) при патологии печени различной этиологии. В эксперименте показаны протективные эффекты применения силимарина при экспериментальном остром токсическом гепатите в отношении печени, микрососудов и лимфатического узла, что подтверждено биохимическими, морфологическими методами исследования. Обсуждены перспективы использования силимарина в клинической практике.
Ключевые слова: острое повреждение печени, четыреххлористый углерод, силимарин, Легалон, тучная клетка, микроциркуляция, лимфатический узел
RESUME
In article the modern data about the mechanism of action and clinical effects of silymarin (Legalon) are shown at the pathology of liver of various aetiology. In experiment protective effects of application silymarin are shown at an experimental sharp toxic hepatitis concerning a liver, microvessels and a lymph node, there is confirmed by biochemical, morphological methods of research. Prospects of use of silymarin in clinical practice are discussed.
Keywords: acute damage of liver, four-chloride carbon, silymarin, Legalon, mast cell, microcirculation, lymph node
ВВЕДЕНИЕ
Лекарственные препараты на основе естественных или полусинтетических флавоноидов расто-ропши пятнистой широко применяются при заболеваниях печени. Основным компонентом экстракта расторопши является силимарин, представляющий собой комплекс флавонолигнанов: силибинина (A и B), силикристина, силидианина, изосилибинина (A и B), изосиликристина и флавоноида — так-сифолина [1]. Лечебная активность силимарина определяется силибинином. Легалон (Madaus GtbH, Германия) содержит более 60% силибинина и считается единственным стандартизованный по содержанию силибинина препаратом из этой группы
гепатопротекторов. Легалон наряду с силибинином А и В последние годы используется в экспериментальных работах для изучения механизма действия в качестве «эталона» под названием силимарин [2, 3, 4]. Фармакопейное признание в США и странах Европы Легалон получил более 40 лет назад после многочисленных экспериментальных и клинических исследований, показавших антиоксидантное действие препарата, антифибротический эффект через блокаду пролиферации купферовских клеток и снижение накопления коллагена. [5, 6]. Увеличение интереса к Легалону вызвано обнаруженным в 2008 г. противовирусным действием силибинина. [4, 5, 7, 11,
OJ
15, 16]. Противовоспалительное действие силимари-на связано со способностью подавлять активацию ОТ-кВ и его киназ (4). Привлекательным со стороны Легалона является его способность тормозить фи-брогенез с нормализацией сывороточного маркера фиброза — проколлагена III пептида (Р-Ш^Р) на фоне повышения содержание глутатиона при хронических заболеваниями печени, включая цирроз печени [9]. В связи с коротким периодом полувыведения силимарина (около 6 часов при пероральном приеме) для получения противовоспалительного эффекта необходимо применение высоких доз си-либинина на протяжении длительного времени (16). Учитывая многолетний положительный опыт клинического применения препарата при гепатитах различной этиологии (5-16), позволяет его использовать для одновременного воздействия на процессы воспаления и фиброгенеза, обеспечивать регенерацию гепатоцитов.
Представляется важным уточнение действия препарата на структуру и функцию поврежденной печени с характеристикой системы микроциркуляции периферических тканей и регионарных лимфатических узлов при экспериментальном гепатите, вызванном четыреххлористым углеродом. Новым является подход к изучению расширенных эффектов действия силимарина, который строится на изучении сочетанной деятельности печени и ее регионарного лимфатического узла, где реализуется дренажно-детоксикационная функция системного комплекса — лимфатический региона печени, который включает тканевой микрорайон органа с микрососудами, лимфатический узел. При этом степень ответа на прием силимарина каждой морфофункциональной структуры лимфатического региона печени и, соответственно, их роль в обеспечении тканевого гомеостаза при гепатите не получили должного рассмотрения в медицинской практике.
Изложенное предопределило необходимость расширенного изучения влияния силимарина на печень и регионарный лимфатический узел, как компонента интегративной системы, в условиях экспериментального гепатита, что позволило сформулировать цель исследования.
Цель исследования — оценить действие сили-марина на структуру и функцию тканевого микрорайона печени с микрососудами и регионарный лимфатический узел в условиях экспериментального токсического гепатита.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперимент выполнен на 80 крысах-самцах линии Вистар массой 200-250 г. Животные получали при свободном доступе к воде стандартную диету (экструдированный комбикорм ПК-120-1). Эксперимент проведен в соответствии с «Международными рекомендациями по
проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985) и в соответствии с приказом МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г. Модель острого поражения печени создавали путем внутрибрюшинного введения четыреххло-ристого углерода в дозе 1мг/кг (40 животных). Четыреххлористый углерод (СС14) — гепатотроп-ный яд, приводящий к развитию гепатита и цирроза печени. Половине животных предварительно вводили перорально силимарин 20-30 мг/кг (120 мг/сут на 20 крыс) в течение 2 недель. Контрольную группу составили 20 интактных крыс и 20 животных, которые получали только силимарин в той же дозе. Оценку действия препарата на состояние печени и микроциркуляции проводили через 24 часа после введения четыреххлористого углерода. Биохимическими методами определяли концентрацию общего холестерина (ОХС), тригли-церидов (ТГ), холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛВП), скорость эстерификации холестерина в сыворотке крови (ЛХАТ-реакция), активность АЛТ, АСТ. Гистологические срезы печени окрашивали гематоксилином и эозином, ШИФФ-реактивом. За структурно-функциональную единицу печени при морфометрии был принят ацинус. В ацинусе подсчитывали количество некротических гепатоцитов и высчитывалась их площадь по отношению ко всей площади ацинуса. На пленчатых препаратах серповидной связки печени, импрегнированных нитратом серебра и окрашенных красителем Романовского-Гимза, проводили микроангиометрию с определением объемной плотности микроциркуляторного русла и оценкой состояния тучно-клеточной популяции с выделением разной степени дегрануляции тучных клеток (0, I, II, III).
Лимфатические узлы исследовали гистологическим методом. Забранные кусочки регионарного лимфатического узла фиксировали в 10% нейтральном формалине. Далее следовала классическая схема проводки и заливки материала в парафин с последующим приготовлением гистологических срезов с окраской их гематоксилином и эозином, азуром и эозином. Морфометрический анализ структурных компонентов лимфатического узла осуществляли с помощью морфометрической сетки, которая накладывалась на срез лимфатического узла. Подсчитывали количество узлов или пересечений сетки, приходящихся на весь срез в целом и раздельно на каждый из структурных компонентов лимфатического узла с перерасчетом в проценты.
Полученные данные подвергали статистической обработке с определением средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (±m) и достоверности различий по Стъюденту, в операционной системе Windows при использовании программы статистического анализа StatPlus Pro 2009, AnalystSoft Inc.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Использование экспериментальной модели острого повреждения печени четыреххлористым углеродом позволило уточнить действие силимарина. Токсический эффект четыреххлористого углерода обусловлен внутриклеточным накоплением свободных радикалов, которые вызывают цепную реакцию перекисного окисления липидов. В первую очередь страдают мембраны эндоплазматического ретикулюма гепатоцитов. Повреждение ферментов микросомальной системы свободнорадикального окисления ведет к нарушению белково-синтетиче-ской функции гепатоцитов и последующей гибели клеток. В основе поражения клеток печени после введения четыреххлористого углерода лежит дис-координация деятельности ферментных систем и нарушение целостности мембран — деструкция их при синдроме цитолиза. После введение четыреххлористого углерода в печени появились
Рис. 1. Широкая площадь некроза гепатоцитов после введения четыреххлористого углерода. Срок исследования — 24 час. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ок. 7. об. 10
дистрофические изменения в гепатоцитах и центролобулярные некрозы, площадь некроза гепатоцитов составила 16,4 ± 2,8 % (рис. 1). Избирательное накопление радикалов четыреххлористого углерода в гепатоцитах с высоким содержанием ферментов системы Р-450, объясняет центролобулярную локализацию некроза гепатоцитов. Вместе с тем многие печеночные клетки не разрушаются, а набухают, их цитоплазма подвергается гидропической вакуолизации. Активность цитоплазматических ферментов (АЛТ и АСТ), которые являются маркерами повреждения печени, повышается в сыворотке крови крыс в несколько раз.
Токсическое повреждение печени сопровождается изменением липидных показателей крови — увеличилась концентрация ОХС до 40,7 ± 2,05 мг/дл по сравнению 27,3 ± 1,80 мг/дл в контроле (р < 0,001) (табл. 1). Одновременно происходило достоверное снижение скорости эстерификации холестерина и снижалась концентрация ХС ЛВП. Корреляционный анализ выявил обратную сильную связь скорости ЛХАТ-реакции с площадью некроза гепатоцитов (г = - 0,588, р < 0,01). у крыс в отличие от человека пул эфиров холестерина (ЭХС) в сыворотке крови образуется при участии двух ферментных систем ЛХАТ и ацетил-СоА-холестеринацил-трансферазы (АХАТ). АХАТ катализирует образование ЭХС внутри клеток печени, затем ЭХС секретируются в ток крови в составе преимущественно липопротеинов очень низкой плотности (ЛОНП). ЛХАТ синтезируется печенью и секретируется в кровь, где фермент катализирует перенос жирных кислот с лецитина на ХС ЛВП с образованием ЭХС и лизолицитина. Реакция эстерификации холестерина протекает при участии апопроте-инов апо-А1, апо-А11. Использованный метод определения ЛХАТ отражает состояние всей
I- Е ft
л
О г
V о.
Л Е 2|
а
ID
■е
Б
га
V Ü Ш J S X
s
<
Таблица 1.
ОСНОВНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЛИПИДОВ КРОВИ КРЫС ПОД ВЛИЯНИЕМ СИЛИМАРИНА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ, ВЫЗВАННОМ ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТЫМ УГЛЕРОДОМ
Показатели контроль силимарин СС1 4 СС14 + силимарин
1 2 3 4
ОХС, мг/дл 85 ± 3,5 82 ± 6,0 80 ± 15,7 86 ± 15,8
ХС ЛВП, мг/дл 34 ± 2,5 33 ± 2,0 12 ± 0,9* 16 ± 1,1**
ТГ, мг/дл 58 ± 7,7 40 ± 5,8 54 ± 9,1 67 ± 4,2
скорость ЛХАТ-реакции, % /ч 4,9 ± 0,38 4,8 ± 0,17 2,0 ± 0,11* 2,6 ± 0,18**
Примечание: ОХС — общий холестерин сыворотки, ХС ЛВП — холестерин липопротеидов высокой плотности ТГ — триглицериды, ЛХАТ — лецитинхолестеролацилтрансфераза, *P1 234 < 0,001 — достоверность различий с контролем; **P3 < 0,001 — достоверность различий показателей при введении четыреххлористого углерода от животных, предварительно получавших силимарин
m
системы ЛХАТ-реакции. Значительной снижение ^ концентрации ХС ЛВП, скорости ЛХАТ-реакции
S ^^ при введении четыреххлористого углерода связано
^ с поражением клеток печени.
1 Введение силимарина интактным животным не = изменило концентрацию липидов, фракционную ¡! и молярную скорость ЛХАТ-реакции сыворотки i крови. На исходном уровне оставалось содержание ^ 5 фракций ХС ЛВП. Предварительный прием сили-i § марина предотвращал развитие гиперхолестерине-s z мии, (за счет сохранения уровня ЭХС на контроль-£ г ном уровне) и снижения скорости ЛХАТ-реакции, ¡3 ° уровня ХС ЛВП в сравнении с животными, не m I получавших силимарин. Силимарин способство-* вал уменьшению площади некроза клеток печени, I что отражено в снижении в 2,2 раза показателя | отношения площади некроза к площади ацинуса ^ £ в данной группе животных (6,8 ± 2,2 %). В свою ™ очередь прием силимарина уменьшает активность ° а_ в 1,5 раза АСТ и в 3 раза АЛТ в ответ на введение четыреххлористого углерода. Уменьшение активности трансаминаз доказывает протективное действие силимарина и свидетельствует об уменьшении интенсивности повреждения гепатоцитов. Аналогичный факт снижения активности сывороточных трансаминаз после приема Легалона наблюдали при хронических заболеваниях печени, неалкогольном стеатогепатите, а также отмечено повышение выживаемости больных алкогольным циррозом печени [5-7, 10-14]. Многочисленными экспериментальными и клиническими исследованиями доказаны антиоксидантное действие препарата силимарина (Легалон) и антифибротический эффект через блокаду пролиферации купферов-ских клеток и снижение накопления коллагена [5, 6]. Гепатопротективные свойства препарата определяются сочетанием его антитоксического эффекта с мембраностабилизирующим, противовоспалительными свойствами (7, 8). В свое время это сыграло определенную роль в выборе легалона как специфического антидота при отравлении бледной поганкой (Amanita phalloides) [13].
Наше исследование подтвердило гепатопро-тективное свойство силимарина - уменьшение площади некроза клеток печени после введения четыреххлористого углерода и падение скорости эстерификации холестерина. Фармакокинетика силимарина характеризуется более высокой концентрацией препарата в паренхиме печени, чем в плазме [17]. Основное действие силимарина реализуется в печени, силимарин взаимодействует с мембранными рецепторами гепатоцитов, где конкурирует с токсинами и превращает их в менее агрессивные соединения [18]. Силимарин может рассматриваться в качестве гепатопротектора, так как он снижает процессы липопероксидации, стабилизирует мембраны клеток. Способность силимарина предот-I вращать и уменьшать проявления интоксикации тетрахлоридом углерода были продемонстрированы _J в целом ряде экспериментальных работах [18, 19, 20,
21]. Силибинин оказывает антиоксидантный эффект, быстро взаимодействует со свободными радикалами и прерывает цикл перекисного окисления липидов, что предупреждает дальнейшее разрушение клеточных структур [9, 20, 21]. Силимарин стимулирует биосинтез структурных и функциональных белков и фосфолипидов, что обеспечивает стабилизацию мембран и функций клеточных органелл, ускорение регенерации поврежденных гепатоцитов. Силимарин стимулирует РНК-полимеразу, повышая транскрипцию и скорость синтеза РНК в клетках печени, что приводит к увеличению количества рибосом и повышенному синтезу структурных функциональных белков [18, 19].
Токсическое повреждение печени нарушает гомеостаз и кровообращение в тканях. Это проявляется в колебаниях количества крови, протекающей через печень, в перераспределении ее между компонентами сосудистого русла. После введения четыреххлористого углерода венуло-артериальный коэффициент (ВАК) уменьшался в среднем до 0,3 (в контроле 0,46), как свидетельство диспропорции притока и оттока крови в тканевом микрорайоне органа. Отражением этого были морфологические изменения в микрососудистом русле серозных оболочек. Происходило расширение сосудов, появлялась их извитость, внутри сосудов наблюдали агрегацию эритроцитов. В большей степени изменения касались венулярного звена микрососудистого русла. После введения четыреххлори-стого углерода зафиксировано увеличение диаметра микрососудов: капилляров до 9,6 ± 0,34 мкм (у интактных животных 6,4 ± 0,34 мкм), посткапилляров до 24,7+0,48 мкм (у интактных животных 10,2+0,48 мкм), венул до 42,9 ± 2,69 мкм (у интактных животных — 27,6 ± 1,37 мкм). Изменение просвета микрососудов свидетельствует о критическом напряжении в системе микроциркуляции. Наиболее реактивны в этом отношении микрососуды капил-ляро-венулярного отдела. Диаметр артериол и ме-тартериол изменялся мало. Отмечается локальный спазм прекапиллярных сфинктеров, диаметр пре-капилляров составляет 5,0 ± 0,42 мкм, что 1,2 раза меньше, чем в контроле.
Нарушение гемодинамики сопровождается изменением объемной плотности микрососудистого русла. После введения четыреххлористого углерода происходит увеличение объемной плотности капиллярно-венулярного отдела микроцир-куляторного русла (рис. 2 на цветной вклейке). Изменение объемной плотности разных отделов микроциркуляторного русла вызвано трансформацией микроангиоархитектоники и увеличением просвета микрососудов. Перестройка сосудистой сети выражалась в обеднении капиллярной сети, увеличении венулярных анастомозов и образовании юкста-капиллярного шунтирования.
Предварительное введение силимарина выравнивало соотношение артериального притока и венозного оттока. Значение ВАК приблизилось
к контрольному уровню и составляло 0,44-0,46. Диаметр микрососудов капилляро-венулярно-го отдела микроциркуляторного русла оказалась меньше, чем у группы животных, не получавших силимарин, хотя и не достигал исходных величин. Флавоноиды оказывают антигистаминное действие, повышают тонус прекапиллярных сфинктеров, предотвращают гемолиз [22, 23], вызывают трансформацию микрососудистой сети. В целом данные литературы о действии на микрососуды крайне противоречивы, высказываются диаметрально противоположные мнения. Изменение диаметра микрососудов объясняют влиянием флавоноидов на гладкомышечные клетки сосудистых сфинктеров или через действие метаболитов катехолами-нов. Прием силимарина стабилизирует пропускную способность микрососудов на оптимальном уровне в измененных условиях гемодинамики при токсическом гепатите. Силимарин увеличивал объемную плотность капиллярного русла до 7,2 ± 0,34 % (у ин-тактных животных 3,7 ± 0,40 %) при сниженной объемной плотности артериального и венозного русел (рис. 2). Острое повреждение печени после предварительного введения силимарина сохраняло высокие показатели объемной плотности капиллярного русла — 6,5 ± 0,41 % (без введения силимарина — 5,2 ± 0,52 %) при относительно сниженной объемной плотности венозного русла. После введения силимарина наблюдается развитие капиллярного русла, уменьшение юкста-капил-лярного шунтирования. Результаты исследований показали, что силимарин действует на сосудистое русло либо непосредственно, либо через тучные клетки — универсального регулятора гомеостаза микроциркуляции.
Важным компонентом в обеспечении резистентности к действию разных токсинов могут быть тучные клетки, способные синтезировать,
депонировать и высвобождать биогенные амины. Изучение механизма их мобилизации при разных токсических воздействиях указывает на важность этого процесса в организме. Тучные клетки оказывают наибольшее влияние на микроциркуляцию за счет выброса биоактивных веществ. После введения четыреххлористого углерода отмечается выраженная дегрануляция тучных клеток, о чем свидетельствует высокий индекс де-грануляции (табл. 2). Столь интенсивная перестройка тучноклеточного аппарата ведет к расстройству гемодинамики и перестройке микрососудистой сети. Происходит изменения процентного соотношения основных форм тучных клеток в популяции: уменьшения количества «нулевых» форм тучных клеток с увеличением числа клеток разной степени дегрануляции (I, II, III — формы тучных клеток). После введения четыреххлористого углерода преобладают III — форма тучных клеток. Предварительное введение силимарина до создания острого поражения печени снижает интенсивность дегрануляции тучных клеток. Силимарин увеличивал число «нулевых» форм тучных клеток, что наглядно демонстрируют полученные данные (табл. 2). Эффект стабилизации мембран тучных клеток после введения силимарина стоек и не ослабевает при действии четыреххлористого углерода. Влияние силимарина на процессы дегрануляции может быть связано с предотвращением нарушения структуры и состава клеточных мембран, стабилизицией клеточные мембран, влиянием на метаболизм фосфолипидов [7]. Согласно гипотезе «эндогенного аминового фона резистентности» эти явления чрезвычайно важны
I- Е
О ru
л
О г
V о.
Л Е 2|
а
л ■&
Б Л
V Ü Ш J S X
s
л
Таблица 2
ИЗМЕНЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА ПОПУЛЯЦИИ ТУЧНЫХ КЛЕТОК И ИНДЕКСА ДЕГРАНУЛЯЦИИ ТУЧНЫХ КЛЕТОК В ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ СИЛИМАРИНА, ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТОГО УГЛЕРОДА
Показатели контроль силимарин сс14 CCl4 + силимарин
1 2 3 4
Количество тучных клеток на 1 мм2 62,3 ± 2,28 68,8 ± 2,43 66,2 ±2,32 92,9 ±1,71
Р 1 — 2, 3, 4 > 0,05 > 0,05 < 0,001
Р 2 — 3, 4 > 0,05 < 0,001
Р 3 — 4 < 0,001
Индекс дегрануляции тучных клеток 1,05 ± 0,02 0,52 ± 0,03 2,20 ± 0,05 0,41 ± 0,04
Р 1 — 2, 3, 4 < 0,001 < 0,001 < 0,001
Р 2 — 3, 4 < 0,001 < 0,05
Р 3 — 4 < 0,001
LH
в формировании повышенной устойчивости к действию токсических веществ.
После введения четыреххлористого углерода токсическое поражение печени приводит к развитию эндотоксикоза, отражающего на состоянии регионарного лимфатического аппарата печени. Представляется важным изучить морфологический эквивалент реактивных процессов, развивающихся в лимфатическом узле в ответ на патологию печени. В остром периоде токсического гепатита происходят структурные изменения лимфатического узла в сравнении с интактными животными. При этом общая площадь лимфатического узла уменьшается в 1,24 раза с 26,33 ± 1,92 % до 21,25 ± 1,94 % через 24 часа после создания гепатита. При этом показатели площади структурно-функциональных зон лимфатического узла имеют более низкие показатели (табл. 3). Это связано с увеличением корково-мозго-вого индекса, который составил 1,56-1,54 (в контроле 1,40 ± 0,08), что свидетельствует об определенной компактизации лимфатического узла. Уменьшение основных В- и Т-зависимых зон лимфатического узла указывает на снижение эффективности гуморального и клеточного звеньев иммунитета. Имеет место относительная «минимизация» структур лимфатического узла в ответ на введение четыреххлористого углерода (табл. 3). Происходит уменьшение мозгового синуса и, следовательно, пропускной
способности лимфатического узла. Наблюдаемые морфологические изменения лимфатического узла свидетельствуют о развитии дренажно-детоксика-ционной и иммунной недостаточности, обусловленной развитием острого токсического гепатита.
Превентивный прием силимарина изменяет реакцию структурно-функциональных зон лимфатического узла на развитие токсического гепатита (табл. 3). На 2 сутки после введения четыреххлори-стого углерода в сравнении с контролем и группой животных с острым гепатитом без коррекции отмечено статистически значимое увеличение в 1,21,3 раза площади паракортекса, принадлежащего к клеточной (Т-зависимой) системе иммунитета, и 1,2-1,56 раза площади мозгового синуса, выполняющего дренажную функцию в лимфатическом узле (рис. 3 на цветной вклейке). Размеры других структурно-функциональных зон лимфатического узла остались в пределах контрольных значений. Очевидно, что заметный эффект от воздействия силимарина может быть зафиксирован в регионарном лимфатическом узле как периферическом органе иммунитета, контролирующего дренируемую область поврежденной печени. Полагаем, что силимарин оказывает протективное действие с усилением иммунного потенциала и дренажной функции лимфатического узла и обладает лимфо-тропными свойствами.
Таблица 3
•о
ПЛОЩАДЬ СТРУКТУР ЛИМФАТИЧЕСКОГО УЗЛА В УСЛОВИЯХ ОСТРОГО ГЕПАТИТА И КОРРЕКЦИИ СИЛИМАРИНОМ, %
Структура лимфоузла Контроль Сроки исследования после создания токсического гепатита и его коррекции силимарином
24 час 7 сутки 14 сутки
CC1 4 Силима-рин + CCl4 CC1 4 Силима-рин + CCl4 CC1 4 Силима-рин + CCI4
1 2 3 4 5 6 7
Капсула 1,35 ±0,13 1,33±0,12 1,21±0,17 0,98±0,08 1,02±0,04 1,12±0,08 1,17±0,08
Субкапсулярный синус 0,70 ±0,08 0,63±0,08 0,74±0,08 0,43±0,08* 0,74±0,08° 0,56±0,04* 0,74±0,08°
Корковое плато 1,28±0,25 0,86±0,13 1,02±0,13 0,82±0,18 0,82±0,17 1,22±0,08 0,90±0,08
Лимфоидный узелок без герминативного центра 1,59±0,11 1,17±0,17 1,48±0,17 0,94±0,17* 1,64±0,20° 1,51±0,18 1,52±0,13
Лимфоидный узелок с герминативным центром 2,73±0,27 2,03±0,14 1,84±0,25* 2,27±0,30 2,34±0,38 3,08±0,24 2,15±0,17°
Паракортекс 8,28±0,29 7,46±0,23 9,88±0,31*° 5,70±0,49* 5,01±0,40* 6,30±0,33* 6,25±0,43*
Мякотные тяжи 6,82±0,23 4,96±0,27* 6,88±0,25° 4,69±0,16* 5,98±0,18° 6,01±0,25 6,43±0,33*
Мозговой синус 3,57±0,21 2,81±0,19* 4,38±0,16*° 1,91±0,25* 3,13±0,26° 3,03±0,17 3,38±0,25
Индекс К/М 1,40±0,08 1,56±0,05 1,33±0,06 1,54±0,03 1,16±0,04*° 1,41±0,02 1,38±0,09
Примечание: 44 s , 7 < 0,05 *р2Л 4_5:„ < 005;
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
При остром токсическом гепатите достаточно сложен механизм действия силимарина, который складывается из позитивных эффектов его на структуры печени, состояние гемомикроциркуляции и дре-нажно-детоксикационную функцию регионарного лимфатического узла, что формирует резистентность к действию токсического вещества. В условиях острого токсического повреждения печени показано благоприятное действие силимарина на состав метаболизма липидов через уменьшение гепатонекроза и улучшение гемомикроциркуляции в печени. Имеет место ангиопротективный эффект силимарина, реализующийся через непосредственное действие на сосуды или через изменение функциональной активности тучных клеток, что приводит к выравниванию соотношения притока и оттока крови через печень, стабилизации диаметра микрососудов при увеличении объемной плотности капиллярного русла в условиях снижения дегрануляции тучных
клеток. Силимарин обладает лимфотроп-ными свойствами за счет усиления дренаж-но-детоксикационной и иммунной функции лимфатического узла, что объясняет его способность предотвращать прогрессирование воспаления и фиброза печени при вирусном гепатите. Наблюдаемые эффекты силимарина расширяют представления о его механизме действия и позволяют его более широко применять в клинической практике.
Наше исследование подтверждает высокую безопасность и эффективность стандартизированного силимарина при токсических, алкогольных, лекарственных поражениях печени. Рекомендовано назначение высоких доз стандартизированного силимарина (Легалона) пациентам с хроническими заболеваниями печени, признаками фиброза и сопутствующей сосудистой патологией.
I- Е
0 ru
1 É О г
V о.
Л Е 2|
а
л ■&
Б Л
V Ü Ш J S X
s
л
ЛИТЕРАТУРА
1. Lee D. Y., Liu Y. Molecular structure and stereochemistry of silybin A, silybin B, isosilybin A, and isosilybin B, isolated from Silybum marianum (milk thistle) // J. Nat. Prod et al. 2003. - Vol. 66. - P.1171-1174.
2. Ahmed-Belkacem A., Ahnou N., BarbotteL. et al. Silibinin and related compounds are direct inhibitors of hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase // Gastroenterology, 2010. - Vol.138. - Р.1112-1122.
3. Morishima C., ShuhartM.C., Wang C.C. et al. Inhibition of silymarin T-cell production and induced cytokines hepatitis C //Gastroenterology, 2010. - Vol.138. - P.671-681.
4. Polyak S. J., Morishima C., ShiHart M.C. et al. Inhibition of T-cell inflammatory cytokines, hepatocyte NF-kB signaling, and HCV infection by standardized silymarin // Gastroenterology, 2007. - Vol. 132. — P.
1925-1936.
5. Feher J., Deak G., Muzes G. et al. Liver-protective action of silymarin therapy chronic alcoholic liver disease // Orv. Hetin., 1989 .- Vol.130.-P.2723-2727.
6. Rockey D.C. Antifibrotic therapy in chronic liver disease // Clin. Gastroenterology Hepatol., 2005. - Vol.3. - P.98-107.
7. Ferenci P., Dragosics B., Dittrich H. et al. Randomized controlled trial of silymarin treatment in patient with cirrhosis of the liver. // J. Hepatol., 1989. - Vol.9. - P.105-113.
8. Muzes G., Deak G., LangI. et al. Effect of silymarin (Legalon) therapy on the antioxidant defense mechanism and lipid peroxidation in alcoholic liver disease (double blind protocol) // Orv.Hetil., 1990. - Vol.131. -P.863-866.
9. Lucena M.I., Andrade R.J., Cruz J.P. et al. Effect of silymarin MZ-80 on oxidative stress in patients with alcoholic cirrhosis/ Results of a randomized, double-blind, placebo-controlled clinical study. // Int. J. Clin. Parmacol. Ther., 2002. - Vol. 40. - P.2-8.
10. Flora K., Hahn M., Rosen H., Benner K. Milk Thistle (Silybum marianum) for the therapy of liver disease // Am. J. Gastroenterol.,
1998. - Vol. 93 (N2). - P.139-43.
11. Schrieber S., Wen Z., Vourvahis M. et al. The pharmacokinetic of silymarin is altered in patients with hepatitis C virus and nonalcoholic fatty liver disease and correlates with plasma caspase activity // Drug Metab Dispos., 2008. - Vol. 36. - P.1909-1916.
12. Буторова Л.И., Цибизова Т.А., Калинин А.В. Возможности использования легалона при неалкогольной жировой болезни печени // Экспер. и клинич. гастроэнтерология, 2010. - №3. - С.85-91.
13. Hruby K., Csomos G., Fuhrmann M. et al. Chemotherapy of Amanita phalloides poisoning with intravenous silibinin // Hum. Toxicol., 1983. - Vol. 2. — P.183-195.
14. Rambaldi A., Jacobs B., Iaquinto G. et al. Milk thistle for alcoholic and/or hepatitis B or C liver disease — a systematic Cochrane hepato-biliary group review with meta-analyses of randomized clinical trials // Am. J. Gastroenterology, 2005. -Vol. 100. - P.2583-2591.
15. Ferenci P., Scherzer T. -M., Kerschner H. et al. Silibinin is a potent antiviral agent in patients with chronic hepatitis c not responding to pegylated interferon / ribavirin therapy // Gastroenterology, 2008. - Vol.135. - P.1561-1567.
16. LorenzD.,LuckerP.W., Mennicke W.H.etal. Pharmacokinetic studies with silymarin in human serum and bile // Exp. Clin. Pharmacol., 1984. - Vol.6. - P.655-66
17. Wu J.W., Lin L.C., Hung S.C et al. Analysis of silymarin in rat plasma and bile for hepatobiliary excretion and oral bioavailability application. // J. Pharm. Biomed. Anal., 2007. -Vol.45. - P.635-641.
18. Muriel P., Mourelle M. Prevention by silymarin of membrane alterations in acute carbon tetrachloride liver damage // J. Appl. Toxicol., 1990. — V.10. — P.275-279.
19. FavariL., Perez-Alvarez V. Comparative effects of colchicines and silymarin on carbon tetrachloride chronic liver damage in rats. // Arch.Med.Res., 1997. — V.28. - P.11-17.
20. MourelleM., Franco M. T. Erythrocyte defects precede the onset of carbon tetrachloride-induced liver cirrhosis: protection by silymarin // Life Sci., 1991. — V.48. - P.1083-1090.
21. Mourelle M., Muriel P., Favari L. et al. Prevention of carbon tetrachloride-induced liver cirrhosis by silymarin. // Fundam Clin. Pharmacol., 1989. V. 3. — P.183-191.
22. Valenzuela A., GuerraR., Garrido A. Silybin dihemisuccinate protects rat erythrocytes against phenylhydrazine-induced lipid peroxidation and hemolysis // Planta Med., 1987. — V. 53. — P.402-405.
23. Valezuela A., Barria T., Guerra R. et al. Inhibitory effect of the flavonoid silymarin on the erythrocyte hemolysis induced by phenylhydrazine. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1985. — V.126. — P.712-718.
ИЛЛЮСТРАЦИИ К СТАТЬЕ
ВОЗМОЖНОСТИ ВЫСОКИХ ДОЗ СТАНДАРТИЗИРОВАННОГО СИЛИМАРИНА ПРИ ТОКСИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЯХ ПЕЧЕНИ В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ
Рис. 2. Изменение объемной плотности капиллярного, венозного и артериального русла при экспериментальном остром повреждении печени четыреххлористого углерода и лечении силимарином. *Р<0,05 - достоверность различий с контролем, °Р<0,05 достоверность различий показателей при гепатите с показателями после коррекции силимарином
Рис. 3. Увеличение паракортекса (п) и мозгового синуса (мс) в лимфатическом узле. Коррекция силимарином токсического гепатита Срок исследования - 24 час. Окраска гематоксилином и эозином. Увеличение ок. 7, об. 8.
