CC BY
39
▲1
5щ
УДК: Б1Б.71Б.8-089.1Б8.1-0Б-092
Код специальности ВАК: 14.03.10; 14.01.14
МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫХ ДЕФЕКТОВ ЧЕЛЮСТИ ПОСЛЕ ПРОВЕДЕНИЯ ЗУБОСОХРАНЯЮШИХ ОПЕРАЦИЙ
М.В. Столяров1, Л.А. Любовцева1, Е.А. Дурново2, А.В. Московский1, В.В. Трубин1,
1ФГБОУ ВО «Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова», г. Чебоксары, 2ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет», г. Н. Новгород
Дата поступления 05.12.2017
Дурново Евгения Александровна - e-mail: evgenia.durnovo@yandex.ru
Цель исследования: провести сравнительный морфофункциональный анализ структур дефекта костной ткани челюсти после проведения зубосохраняюших операций на разных сроках исследования. Материал и методы. В контрольной группе проводилось исследование здоровой костной ткани (четыре человека). Во второй группе после проведения зубосохраняюших операций в ране организовывался кровяной сгусток (восемь пациентов). В третьей группе в дефекте костной ткани применялась аутогенная костная стружка (восемь пациентов). С помошью люминесцентно-гистохимического и иммуногистохимического методов исследован дефект костной ткани челюсти в течение года после проведения зубосохраняюших операций. Результаты. В срезах препарата на CDБ8+ (макрофаги) клетки между костными пластинками определяются ядра костных клеток, нейтральных к этой реакции. С помошью маркера Ю-Б7 была определена выраженность процессов пролиферации в здоровой челюстной костной ткани. Положительную реакцию на присутствие белка Ю-Б7 дают дегранулированные тучные и гранулярные клетки. Заключение. В первые дни после операции в тучных клетках увеличивается содержание серотонина и катехоламинов, а количество гистамина уменьшается. Снижение содержания биогенных аминов объясняется инактивируюшими их факторами, в первую очередь гепарином, что регулирует процесс образования новой костной ткани.
Ключевые слова: биогенные амины, зубосохраняюшая операция, дефект костной ткани, здоровая костная ткань, кровяной сгусток.
The aim of the investigation comparative morphofunctional analysis of the structures of the defect of the jawbone after the holding of the toothkeeping operation at different stages of the study. Material and Methods. In the control group the study was conducted in healthy bone tissue (4). In the second group after the holding of the toothkeeping operation in the wound organized blood clot (8 patients). In the third group the bone defect were used autogenous bone chips (8 patients). Using fluorescent-histochemical and immunohistochemical methods, we study the defect of the jawbone during the year after the holding of the toothkeeping operation. Results. The sections of the drug on CDБ8+ (macrophages) cells between the bone plates are determined by the nucleus of bone cells, neutral to the reaction. Using the marker Ki-Б7 was determined by the severity of the processes of proliferation in healthy jaw bone tissue. A positive reaction for the presence of Ю-Б7 protein give degranulyatsii fat and granular cells. Conclusion. In the first days after surgery in fat cells increases the content of serotonin and catecholamines, and the amount of histamine decreases. The decrease in the content of biogenic amines due to their inactivating factors in the first place heparin that modulates the formation of new bone tissue.
Key words: toothprotecting operation, biogenic amines, the defect of bone tissue,
healthy bone tissue, blood clot.
Самым распространенным хирургическим вмешательством является операция удаления зуба. Потеря зуба неизбежно ведет к атрофии костной ткани челюсти вследствие перераспределения функциональной нагрузки в альвеолярном отростке [1]. Зубосохраняющие операции позволяют спасти от удаления зубы с воспалительнодеструктивными изменениями в периапикальных тканях. Во избежание послеоперационных осложнений требуется оптимизация процессов регенерации в дефектах костной ткани челюсти [2].
Мы считаем, что для понимания процессов остеогенеза требуются гистологические исследования структур дефекта костной ткани на содержание биологически активных веществ (нейроамины и сульфатированные гликозаминогли-каны), так как они участвуют в митотическом делении и дифференцировке клеток, синтезе соответствующих рецепторов [4].
В результате применённых нами методов исследования выявлены причины неполноценного восстановления дефектов челюсти после проведения зубосохраняющих операций, что в итоге позволяет понять структурные перестрой-
ки и нейромедиаторные изменения при заживлении костного дефекта и снизить вероятность послеоперационных осложнений в стоматологической практике. В последнее время учёными уделяется большое внимание похожим ней-роиммуноэндокринным взаимоотношениям [5-8].
Цель исследования: провести сравнительный морфофункциональный анализ структур дефекта костной ткани челюсти после проведения зубосохраняющих операций на разных сроках исследования.
Материал и методы
В исследовании приняли участие 20 пациентов в возрасте от 20 до 45 лет. В материал включались все пациенты с диагнозом «хронический гранулематозный периодонтит». Из исследования исключались пациенты с сопутствующими заболеваниями (сахарный диабет, гипертоническая болезнь и т. д.). Проведено 16 зубосохраняющих операций: 12 грануле-мэктомий с резекцией верхушки корня и 6 гранулёмэктомий (цистэктомий) без резекции верхушки корня. Во время оперативного вмешательства возникал дефект костной ткани в среднем размером около 170 мм3.
В контрольной группе проводилось исследование здоровой костной ткани (четыре человека). Материал был получен во время удаления ретинированных и дистопированных зубов по ортодонтическим показаниям. Во второй группе после проведения зубосохраняющих операций в ране организовывался кровяной сгусток (восемь пациентов). В третьей группе в дефекте костной ткани применялась аутогенная костная стружка (восемь пациентов). Материал получали из внутриротовых донорских зон, чаще всего ближе к углу нижней челюсти.
Исследование материала проводилось на 3-, 7-, 30-, 90-, 120-, 150-, 180- и 360-й день после операции. На 3-й и 7-й день слизистая оболочка на месте разреза еще не зажила, и материал из раны получали с помощью кюретажной ложки. С 30-го дня и в последующих исследованиях проводили пункционную биопсию созревающей костной ткани с помощью иглы набора «Ostycut», производство Bard (США).
Использовались следующие методы исследования срезов дефекта костной ткани:
1. Люминесцентно-гистохимический метод Фалька-Хилларпа в модификации Е.М. Крохиной [11, 12] использовался для избирательного выявления катехоламинов и се-ротонина в структурах дефекта костной ткани челюсти.
2. С целью идентификации гистаминосодержащих структур свежие криостатные срезы обрабатывались люминес-центно-гистохимическим методом Кросса, Евена, Роста [13].
3. Для идентификации и количественного выражения уровней серотонина, катехоламинов и гистамина в структурах костной ткани челюсти человека использовался метод цитоспектрофлуориметрии [14].
4. Иммуногистохимический метод для выявления CD68+-клеток в послеоперационном дефекте костной ткани челюсти. Метод проводился с использованием иммуно-гистохимических автостейнеров AUT0STAINER-360 (THERMO) и с применением микроскопа LEICA DM4000B. В исследовании применялись моноклональные антитела к кластеру дифференцировки 68-го типа (CD68+), клон ED-1 (Abcam, Великобритания) (маркер макрофагов).
5. Иммуногистохимический метод для выявления клеток, экспрессирующих маркер Ki-67 [6-7]. В работе применялись
моноклональные антитела к маркеру клеточной пролиферации Ю-67, клон ММ-1 (NovoCastra, Великобритания).
Обработка данных проводилась с помощью Т-критерия Вилкоксона. Определяли, является ли сдвиг показателей в одном направлении более существенным, чем в другом. Различия считали достоверными при р<0,01.
Научное исследование проводилось в соответствии со стандартами этического комитета Чувашского государственного университета им. И.Н. Ульянова (Протокол № 3/4 от 30.11.2015) и пересмотренного варианта Хельсинкской декларации от 2008 года.
Результаты исследования
При исследовании здоровой костной ткани на гистамин в материале обнаружены неравномерно слабо люминесци-рующие костные пластинки около тёмных Гаверсовых каналов (рис. 1). Между костных пластинок определяются люми-несцирующие макрофаги, в которых светятся в основном ядра. Границы остеонов слабо люминесцируют или вовсе не люминесцируют. Внутри Гаверсова канала имеется соединительная ткань с единичными тучными клетками без признаков дегрануляции. Здесь также пластинчатая кость имеет вид островков, между которыми располагается рыхлая волокнистая соединительная ткань. Она люминесцирует очень сильно (рис. 1).
При исследовании катехоламинов и серотонина на продольном срезе остеона хорошо заметны параллельно расположенные с неравномерной люминесценцией костные пластинки, между которыми имеются тёмные пространства. Внутри костных пластинок заметны слаболюминесцирую-щие остеоциты со светлыми ядрами (рис. 2). В Гаверсовых каналах можно увидеть сосуды, по адвентиции которых проходят адренергические нервные волокна. Волокна тонкие, имеют варикозные расширения, а по их ходу располагаются «пуговки», где, очевидно, происходит накопление биогенных аминов (рис. 2, таблица 1).
В срезах препарата на CD68+(макрофаги)-клетки между костными пластинками определяются ядра костных клеток, нейтральных к этой реакции. Костные пластинки нечёткие, коллагеновые волокна не окрашены. Вместе с костной тканью
РИС. 1.
Люминесцентно-гистохимическая картина здоровой челюстной костной ткани. 1) Остеоноподобная структура. 2) Гаверсов канал. 3) Костные пластинки. 4) Гранулярные люминесцирующие клетки. Метод Кросса на гистамин. Микроскоп «ЛЮМАМ-1». Увеличение х400. Ок. 10.
1
/
РИС. 2.
Люминесцентно-гистохимическая картина двух остеонов в челюстной костной ткани у здоровых пациентов.
1) Адренергические нервные волокна по краю остеона. 2) Остеоцит. 3) Соединительная ткань. 4) Гаверсов канал. Метод Фалька-Хилларпа. Микроскоп «ЛЮМАМ-1». Увеличение х400. Ок. 10.
ТАБЛИЦА 1.
Люминесцентно-гистохимическое исследование числа структур здоровой костной ткани челюсти по методу Фалька-Хилларпа (1969)
Структуры Тучные клетки Макрофаги Плазматические клетки Костные пластинки
Здоровая костная ткань 2,7±0,2* 7±0,3* 0,5±0,2* 12,5±0,5* пластинок образуют один остеон
Примечание: *статистически достоверное изменение показателя (р<0,01). Число клеток указано в 1 поле зрения. Микроскоп «ЛЮМАМ-1». Об. 100. Ок. 10.
ТАБЛИЦА 2.
Анализ числа структур дефекта костной ткани, окрашенных по методу Фалька-Хилларпа, во временном аспекте с применением различных остеотропных материалов
РИС. 3.
Здоровая костная ткань челюсти. 1) Макрофаги. 2) Остеокласт. Иммуногистохимическая реакция к CD68+. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
РИС. 4.
Здоровая костная ткань челюсти. 1) Дегранулированные тучные клетки. 2) ГЛК. Иммуногистохимическая реакция к маркеру Ki-67. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
«СзЯ
— 4
РИС. 5.
Люминесцентно-гистохимическая картина после проведения зубосохраняющей операции с организацией в ране кровяного сгустка.
1) Нейтрофил. 2) Плазматическая клетка. 3) Эозинофил (два ядра). 4) Распавшаяся тучная клетка. Материал взят на 7-й день после операции. Гранулярные люминесцирующие клетки. Метод Кросса на гистамин. Микроскоп «ЛЮМАМ-1». Увеличение х400. Ок. 10.
Структуры дефекта костной ткани Кровяной сгусток Костная стружка
тучные клетки 17,9±0,5 12,8±0,4
:Е 0J макрофаги 13,1±1,1 3,6±0,6*
д 1S m плазматические клетки 8,5±0,1* 4,4±0,3
костные фрагменты
пластинки остеонов
тучные клетки 18,1±0,1* 7,3±0,2*
IE ед макрофаги 10,2±0,8* 3,2±0,4
плазматические клетки 9,2±0,2 5,5±0,5*
костные пластинки то же
тучные клетки 8,5±0,3 5,1±0,3*
:e (D д макрофаги 7,3±0,5 2,3±0,5
CD 3 плазматические клетки 6,5±0,4 2,5±0,4
костные пластинки - то же
тучные клетки 5,3±0,1* 0,6±0,1
IE ед макрофаги 4,1±0,5 1,3±0,4
IS CD C^ плазматические клетки 4,6±0,6 1,1±0,2*
костные тяжи коллагеновых плотные
пластинки волокон люминесцирующие
тучные клетки 2,4±0,1 0,7±0,1
IE (D д макрофаги 2,1±0,1* 0,7±0,1*
IS CD 2 плазматические клетки 3,4±0,4 0,5±0,2
костные пластинки тяжи грубоволокнис-той костной ткани то же
тучные клетки 1,1±0,2 0,6±0,2
IE (D д макрофаги 1,2±0,1 0,4±0,1*
IS CD 5 плазматические клетки 1,5±0,7* 0,5±0,1
костные слаболюми- то же
пластинки несцирующие
тучные клетки 0,5±0,1 0,6±0,1*
IE (D д макрофаги 0,6±0,1* 0,5±0,1*
IS CD CO плазматические клетки 0,4±0,1 0,5±0,1
костные плотные то же
пластинки и люминесцирующие
тучные клетки 0,4±0,1* 0,5±0,2
н OJ д макрофаги 0,5± 0,1 0,5±0,1
CD 3 плазматические клетки 0,5± 0,1 0,6±0,2*
костные пластинки то же то же
Примечание: *статистически достоверное изменение показателя (р<0,01). Число клеток указано в 1 поле зрения. Микроскоп «ЛЮМАМ-1». Об. 100. Ок. 10.
в срез попала плотная и рыхлая соединительная ткань с жировыми клетками. Заметны остеокласты, которые имеют синее окрашивание, но не дают реакции на CD68+ (рис. 3). Обнаружены положительные к этой реакции макрофаги в числе 1 клетки на 1 поле зрения.
Положительную реакцию на присутствие белка Ю-67 дают дегранулированные тучные и гранулярные клетки (рис. 4).
С помощью маркера Ю-67 была определена выраженность процессов пролиферации в здоровой челюстной костной ткани. Митотический индекс составил 25,23±0,82% делящихся клеток от общего числа увиденных клеток.
При исследовании структур дефекта костной ткани с организацией кровяного сгустка на 3-й и 7-й дни при исследовании на гистамин нами было обнаружено скопление рыхлой волокнистой соединительной ткани, где расположено от 7 до 9 распавшихся тучных клеток (рис. 5).
При исследовании материала по методу Фалька-Хиллар-па на 30-й день после операции обнаруживают 6-7 плазматических клеток на 1 поле зрения. Костных пластинок не отмечено. Имеются тяжи коллагеновых волокон с жёлтым свечением. Определяются макрофаги в количестве 7 клеток на 1 поле зрения. Заметно 8 тучных клеток на 1 поле зрения (таблица 2).
При исследовании материала, окрашенного по методу Фалька-Хилларпа, на 120-й день нами было обнаружено, что число плазматических клеток становится меньше: до 3-4 клеток на 1 поле зрения. Формируются тяжи грубово-локнистой костной ткани, которые имеют жёлтое свечение. Тучные клетки и макрофаги определяются в числе двух клеток на 1 поле зрения. При исследовании структур материала к 150-му дню обнаруживают 1-2 плазматические клетки. Заметно формирование слаболюминесцирующих костных пластинок. Обнаруживаются 1-2 клетки макрофага на 1 поле зрения. Определяется 1 тучная клетка на 1 поле зрения (таблица 2).
При исследовании материала, окрашенного по методу Кросса, на 180-й и 360-й день в материале на 2-3 поля зрения микроскопа при увеличении х100 нами была обнаружена одна плазматическая клетка. Костные пластинки имеют плотную структуру и люминесцируют слабо. На 2 поля зрения определяется один макрофаг и одна тучная клетка (рис. 6).
На 3-й и 7-й день послеоперационного периода при исследовании на CD68+клетки положительную реакцию дают: банальные макрофаги с фагоцитированными частицами, дегранулированные тучные клетки и гранулярные клетки, которые при люминесцентной микроскопии дают положительную реакцию (рис. 7).
На ранних сроках исследования число CD68+клеток достигает максимальных значений: 11-12 макрофагов и 14-15 тучных клеток на 1 поле зрения. На 30-й день число CD68+-клеток уменьшается и в среднем составляет 10 макрофагов и 8 тучных клеток на 1 поле зрения (таблица 3).
На сроке 90 дней после операции макрофагов и тучных клеток становится ещё меньше, и их число составляет около 7 и 6 клеток, соответственно. На 120-й день послеоперационного периода число CD68+-клеток продолжает уменьшаться, составляя 4-5 макрофагов и 3-4 тучные клетки на 1 поле зрения (таблица 3).
На 150-й день отмечается продолжение уменьшения числа CD68+-клеток и со 180-го дня их число становится
РИС. 6.
Люминесцентно-гистохимическая картина после проведения зубосохраняющей операции с организацией в ране кровяного сгустка. Материал взят на 180-й день после операции.
1) Остеоноподобная структура. 2) Гаверсов канал. 3) Костные пластинки. 4) ГЛК. Метод Кросса на гистамин. Микроскоп «ЛЮМАМ-1». Увеличение х400. Ок. 10.
РИС. 7.
Иммуногистохимическая реакция на CD68+положительные клетки. Материал получен на 7-й день после операции с организацией в ране кровяного сгустка. 1) Банальный макрофаг с фагоцитированными частицами. 2) Молодые дендритные клетки. 3) Дегранулированные ТК 4) Гранулярные клетки. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
РИС. 8.
Иммуногистохимическая реакция на CD68+-положительные клетки. Материал получен на 180-й день после операции с организацией в ране кровяного сгустка. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
▲1
SSM
ТАБЛИЦА 3.
Динамика распределения иммунокомпетентных клеток ^68+маркер макрофагов) дефекта костной ткани после зубосохраняющих операций
Группы\Сроки 3-й день 7-й день 30-й день 90-й день 120-й день 150-й день 180-й день 360-й день
1-я группа (кров. сгусток) 12,42±1,53 11,02±1,16* 10,02±0,95 7,52±0,87 5,35±0,53 3,12±0,56* 0,63±0,21 0,76±0,23
2-я группа (аутоген. кост. стружка) 4,24±1,02 3,55±0,54 2,14±0,57 0,82±0,44* 0,76±0,23 0,94±0,21 0,87±0,21 0,73±0,35
Примечание: *статистически достоверное изменение показателя (p<0,01). Число клеток указано в 1 поле зрения. Число наблюдений - 10. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
ТАБЛИЦА 4.
Экспрессия Ki-67 в клетках послеоперационного дефекта костной ткани челюсти, %
Группы\Сроки 3-й день 7-й день 30-й день 90-й день 120-й день 150-й день 180-й день 360-й день
1-я группа (кров. сгусток) 70,13±1,24 71,32±1,45 60,53±2,17 47,12±0,96 37,21±1,53* 32,63±1,46 25,12±0,94 24,53±0,55
2-я группа (аутоген. кость) 42,91±2,16 46,85±2,22* 36,33±1,27 26,32±0,75 26,12±0,91 25,22±1,66* 24,32±1,26 25,22±0,85
Примечание: *статистически достоверное изменение показателя (p<0,01). Число клеток указано в 1 поле зрения. Число наблюдений - 10. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
РИС. 9.
Иммуногистохимическая реакция к маркеру Ki-67.
Материал получен на 30-й день после операции с организацией в ране кровяного сгустка. Заметно большое количество клеток экспрессирующих белок Ki-67. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
РИС. 10.
Иммуногистохимическая реакция к маркеру Ki-67.
Материал получен на 180-й день после операции с организацией в ране кровяного сгустка. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
РИС. 11.
Аутогенная костная стружка в дефекте челюсти на 7-й день после операции. Иммуногистохимическая реакция к CD68+.
1) Единичные CD68+-клетки. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
РИС. 12.
Иммуногистохимическая реакция, выявляющая маркер Ki-67.
Материал получен на 30-й день после операции с применением в дефекте аутогенной костной стружки. Заметны клетки экспрессирующие белок Ki-67. Микроскоп «LEICA DM4000B». Увеличение х400.
схожим с числом этих клеток в здоровой челюстной кости, что указывает на завершение процесса образования новой костной ткани (рис. 8).
На ранних сроках исследования в материале с применением кровяного сгустка обнаружен высокий митотический индекс. На присутствие белка Ю-67 положительную реакцию дают тучные клетки, обнаружено 14 клеток на 1 поле зрения. Из всех групп исследования максимальное число клеток, экспрессирующих белок Ю-67, замечено в группе с применением в дефекте кровяного сгустка. Морфологически клетки характеризуются овальной формой с разной степенью окраски ядер. Их число составляет около 70% от общего числа клеток (таблица 4).
На 30-й день число экспрессирующих Ю-67 клеток незначительно снижается и составляет 60,5±2% (рис. 9). На 90-й день число экспрессирующих Ю-67 клеток в среднем становится 47,1±0,9%. Число тучных клеток снизилось до 8 клеток на 1 поле зрения. На 120-й день число экспрессирующих Ю-67 клеток снижается и процентное содержание в дефекте костной ткани составляет 37±1. На 150-й день экспрессия Ю-67 в клетках послеоперационного дефекта костной ткани составляет 32,6±1,4% (таблица 4).
Со 180-го дня в исследуемом материале происходит снижение экспрессии белка Ю-67 и числа тучных клеток. Их значение схоже со значением Ю-67 в здоровой челюстной кости (рис. 10).
При исследовании дефектов костной ткани после проведения зубосохраняющих операций с применением аутогенной костной стружки по методу Фалька-Хилларпа на 3-й и на 7-й день были заметны плазматические клетки, 4-5 клеток на 1 поле зрения. В срезах встречаются макрофаги 3-4 клетки на 1 поле зрения. При этом люминесцируют в них в основном ядра, цитоплазма имеет мелкую зернистость в виде люми-несцирующего облака, которое светится зелёно-желтым цветом. В материале присутствуют остеоны и их фрагменты. Насчитывается до 12 тучных клеток на 1 поле зрения.
Число CD68+-клеток на ранних сроках исследования колеблется от 3-5 клеток на 1 поле зрения (рис. 11). Число экспрессирующих Ю-67 клеток на 3-й день составляет 42,9±2,1%, а на 7-й день происходит статистически значимое её увеличение - 46,8±2,2% (таблица 3).
При исследовании дефекта после заполнения его костной стружкой по методу Фалька-Хилларпа на 30-й день заметны две плазматические клетки в 1 поле зрения. В материале находятся фрагменты остеонов. Встречаются 2 клетки макрофага на 1 поле зрения. Заметно 5 тучных клеток на 1 поле зрения (таблица 2).
На 30-й день исследования число CD68+клеток становится чуть меньше, чем на предыдущих сроках исследования, в среднем составляя 2 клетки на 1 поле зрения. Число проли-ферирующих клеток уменьшается и составляет 36±1% (таблица 3).
При окраске материала по методу Фалька-Хилларпа к 90-му дню после операции заметны единичная тучная клетка, макрофаг и плазматическая клетка на 2 поля зрения, люминесцируют костные пластинки, которые имеют плотную структуру.
На 90-й день после операции в материале дефекта костной ткани с применением аутогенной костной стружки число CD68+-клеток достоверно соответствует числу этих клеток в
здоровой костной ткани челюсти, что в среднем составляет 1 клетку на 2 поля зрения. На более поздних сроках исследованиях ситуация сильно не меняется. Число пролиферирую-щих клеток продолжает уменьшаться и достигает значения показателей здоровой челюстной костной ткани и в последующих исследованиях остается стабильным (таблица 4).
При исследовании структур материала по методу Фалька-Хилларпа на 120-й, 150-й, 180-й и 360-й день наблюдается тусклое свечение костных пластинок, образованная новая костная ткань не отличается от здоровой челюстной кости.
Заключение
Восстановление костного дефекта челюстной кости у пациентов после зубосохраняющих операций с применением в контрольной группе кровяного сгустка завершилось на 180-й день после операции, с применением аутогенной костной стружки на 90-й день после операции, с применением материала «Аллоплант» - на 120-й день послеоперационного периода, с применением остеотропного препарата «Остеоматрикс» - на 150-й день после операции.
Формирование костных пластинок происходит при увеличении катехоламинов и серотонина. Установлено, что в тучных клетках, как основных биоаминосодержащих клетках дефекта костной ткани, в первые дни после операции увеличивается содержание серотонина и катехоламинов, а количество гистамина уменьшается в сравнении с тучными клетками костной ткани здоровых пациентов.
В дефекте костной ткани с течением времени происходит уменьшение числа CD68-позитивных клеток. После зубосохраняющих операций с применением различных остео-тропных материалов происходит уменьшение количества клеток, экспрессирующих маркер пролиферации Ю-67.
Таким образом, проведенное нами исследование дает качественную и количественную характеристику распределению нейроаминов в послеоперационном дефекте костной ткани челюстей, улучшает понимание их биологической роли и влияния на образование новой костной ткани после зубосохраняющих операций. Эти данные дополняют современную теорию морфогенеза челюстной костной ткани человека на этапе формирования костной ткани после удаления патологического процесса около зуба.
ЛИТЕРАТУРА
1. Mardinger O. Challenges associated with reentry maxillary sinus augmentation Original Research Article. Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology, Oral Radiology, and Endodontology. 2010. Vol. 110. Iss. 3. September. P. 287-291.
2. Иорданишвили А.К., Гололобов В.Г., Усиков Д.В. Оценка эффективности применения современных имплантационных материалов. Terra Medical стоматология. 2003. № 2. С. 28-32.
lordanishviliA.K., Gololobov V.G., Usikov D.V. Ocenka effektivnostiprimen-eniya sovremennyx implantacionnyx materialov. Terra Medical stomatologiya. 2003. № 2. S. 28-32.
3. Поворознюк В.В., Мазур И.П. Костная система и заболевания пародонта. Киев: Изд-во ВПЦ Экспресс, 2003. 446 с.
Povoroznyuk V.V., Mazur I.P. Kostnaya sistema i zabolevaniya parodonta. Kiev: Izd-vo VPC Ekspress, 2003.446s.
4. Гемонов В.В., Лавров В.В., Фалин Л.И. Развитие и строение органов полости рта и зубов. Москва: ВУНМЦ МЗ РФ, 2002. 255 с.
Gemonov V.V., Lavrov V.V., Falin L.I. Razvitie i stroenie organov polosti rta i zubov. Moskva: VUNMC MZ RF, 2002.255 s.
5. Артемьева И.Л., Сергеева В.Е. Морфофункциональная характеристика структур тимуса при экспериментальной тестэктомии. Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2012. 95 с.
Artem'eva I.L., Sergeeva V.E. Morfofunkcional'naya xarakteristika struktur timusa pri eksperimental'noj testektomii. Cheboksary: Izd-vo Chuvash. un-ta, 2012. 95s.
6. Диндяев С.В. Функциональная морфология биоаминового обеспечения матки крыс в процессе полового цикла: автореф. дис. ... д. м. н.: 03.00.25. Москва, 2008. 4б с.
Dindyaev S.V. Funkcional'naya morfologiya bioaminovogo obespecheniya matkikrys vprocese polovogo cikla: avtoref. dis.... d. m. n.: 03.00.25. Moskva, 2008.46s.
7. Корнева Е.А. Взаимодействие нервной и иммунной систем. Молеку-лярно-клеточные аспекты. Санкт-Петербург: Наука, 2012. 173 с.
Korneva E.A. Vzaimodejstvie nervnoj i immunnoj system. Molekulyarno-kle-tochnye aspekty. Sankt-Peterburg: Nauka, 2012. 173 s.
8. Яглова Н.В., Яглов В.В. Эндокринные дизрапторы - новое направление исследований в эндокринологии. Вестник Российской академии медицинских наук. 2012. № 3. С. 5б-б1.
Yaglova N.V., Yaglov V.V. Endokrinnye dizraptory- novoe napravlenie issle-dovanij v endokrinologii. Vestnik Rossijskoj akademii medicinskix nauk. 2012. № 3. S. 56-61.
9. Мордашова О.Н., Лукьянова Я.С. Роль катехоламинов и биогенных аминов в развитии бронхиальной астмы. Современные наукоемкие технологии. 2005. № 1. С. 71-72.
Mordashova O.N., Luk'yanova Ya.S. Rol' katexolaminov i biogennyx aminov v razvitii bronxial'noj astmy. Sovremennye naukoemkie texnologii. 2005. № 1. S. 71-72.
10. Быков В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток. Морфология. 2000. Т. 117. № 2. С. 8б-92.
Bykov V.L. Razvitie i geterogennost' tuchnyx kletok. Morfologiya. 2000. Т. 117. № 2. S. 86-92.
11. Крохина Е.М., Александров П.Н. Симпатический (адренергический) компонент эффекторной иннервации сердечной мышцы. Кардиология. 19б9. № 3. С. 97-102.
Kroxina E.M., Aleksandrov P.N. Simpaticheskij (adrenergicheskij) component effektornoj innervaciiserdechnoj myshcy. Kardiologiya. 1969. № 3. S. 97-102.
12. Elenkov I.J. The sympathetic nerve an integrative interface between two supersys tems: the brain and the immune system. Pharmacol. Rev. 2000. Vol. 52. P. 595-638.
13. Cross S.A., Ewen S.W., Rost F.W. A study of methods available for cyto-chemical localization of histamine by fluorescence induced with o-phtaldehyde or acetaldehyde. The Hystochemical journal. 1971. Vol. 3 (6). P. 471-476.
14. Карнаухов В.И. Люминесцентный спектральный анализ клетки. Москва: Наука, 1978. 207 с.
Karnauxov V.I. Lyuminescentnyj spektral'nyj analiz kletki. Moskva: Nauka, 1978. 207 s.
15. Ефремова О.А. Биоаминный статус цитоструктур селезенки под воздействием монохромного светодиодного излучения. Современные проблемы науки и образования. 2015. № 4. С. 518.
Efremova O.A. Bioaminnyj status citostruktur selezenki pod vozdejstviem monochromnogo svetodiodnogo izlucheniya. Sovremennye problem nauki i obrazovaniya. 2015. № 4. S. 518.
16. Лузикова Е.М., Сергеева В.Е. Морфофизиологическая реакция аминосо-держащих структур тимуса на введение АКТГ 1-24: учеб. пособие. Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2008. 124 с.
Luzikova E.M., Sergeeva V.E. Morfofiziologicheskaya reakciya aminosoder-zhachhix struktur timusa na vvedenie AKTG 1-24: ucheb. posobie. Cheboksary: Izd-vo Chuvash. un-ta, 2008. 124 s.
17. Crivellato E. Ultra structural analysis of mast cell recovery after secretion by piecemeal degranulation in B-cell non-Hodgkins lymphoma. Leuk. Lymphoma. 2003. Vol. 44. № 3. P. 517-521.
18. Marone G., Casolaro V., Patella V. Molecular and cellular biology of mast cells and basophils. Int. Arch. Allergy Immunol. 1997. Vol. 114. P. 207-217.
19. Monteleone I. Immunoregulation in the gut: success and failures in human disease. Gut. 2002. Vol. 50. P. 60-64.
20. Соловьев В.Н. Иннервация вилочковой железы кошки. Тр. Ленингр. общ-ва ест. 1971. Т. 77. Вып. 1. С. 137-140.
Solov'ev V.N. Innervaciya vilochkovoy zhelezy koshki. Tr. Leningr. obchh-va est. 1971. Т. 77. Vyp. 1. S. 137-140. \
УДК: Б1Б.71-018.44-002.2:Б15.37
Код специальности ВАК: 03.03.03; 14.03.09; 14.01.17
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ИММУНОМОАУЛИРУЮШЕИ ТЕРАПИИ В ЛЕЧЕНИИ ХРОНИЧЕСКОГО ОСТЕОМИЕЛИТА ДЛИННЫХ ТРУБЧАТЫХ КОСТЕЙ
Е.И. Крестова, М.Ю. Лебедев, О.П. Живцов, В.И. Ашкинази,
ФГБУ «Приволжский федеральный медицинский исследовательский центр», г. Н. Новгород
Дата поступления 25.01.2018
Крестова Екатерина Ивановна - e-mail: katya_rudneva@mail.ru
Введение. Проведена оценка показателей клеточного иммунитета у пациентов с хроническим остеомиелитом длинных трубчатых костей в период ремиссии после проведения стандартного хирургического и медикаментозного лечения, а также у пациентов, получавших стандартное лечение с последуюшей иммунотерапией во время ремиссии. Материал и методы. Определялись следуюшие параметры: CD3+-лимфоциты, CD3+CD4+-лимфоциты, CD3+CD8+-лимфоциты, CD19+-лимфоциты, CD1Б/5Б+-лимфоциты, HI_A-DR+-лимфоциты, отношение CD4+/CD8+, CD3-CD8+-лимфоциты CD3-CD1Б/SБ+-лимфоциты, CD3+CD1Б/5Б+-лимфоциты, CD3-HI_A-DR+-лимфоциты, CD3+HLA-DR+-лимфоциты. Эффективность терапии оценивали путем определения отношения шансов наступления рецидива остеомиелита. Результат и обсуждение. Отмечено статистически значимое снижение содержания CD3+-лимфоцитов и увеличение количества CD3-CD8+-клеток в контрольной группе пациентов через два месяца после выписки из стационара. Показатели пациентов группы наблюдения приблизились к соответствуюшим значениям через 10 месяцев после госпитализации. При этом отмечено, что в группе наблюдения выявлен один рецидив осте-омиелитического процесса, тогда как в группе контроля рецидивы выявлены у семи пациентов. Заключение. Полученные данные позволяют считать эффективным применение иммунотерапии в лечении остеомиелита.
Ключевые слова: остеомиелит, субпопуляции лимфоцитов, полиоксидоний,
иммунотерапия, ремиссия.
