CC BY
32
V. V. Britko, B. N. Dyusenbekova, M. A. Kinayatov, Ye. S. Tatina, B. T. Yesilbaeva, Sh. Ye. Turysbekova
BIOCHEMICAL PARAMETERS OOGENESIS ADULT RATS EXPOSED UNSYMMETRICAL DIMETHYL HYDRAZINE
Currently not fully understood mechanism of metabolic processes in the body of animals and humans with involvement in a unsymmetrical dimethyl hydrazine and its derivatives. It is known about the role of lipid peroxidation in non-specific mechanisms of membrane damage tissues of vital organs during intoxication by different chemical compounds. Obtained by the authors, data showed that the application of unsymmetrical dimethyl hydrazine can increase the levels of biochemical products of lipid peroxidation. A minor increase in performance in the experimental groups is a consequence of the initial stages of the process of lipid peroxidation. Likely to increase in terms of the experiment will be observed intensification of lipid peroxidation.
В. В. Бритько, Б. Н. Дуйсенбекова, Ш. Е. Турысбекова, Е.С. Татина, А.А. Сейшханова СИММЕТРИЯЛЬЩ ЕМЕС ДИМЕТИЛГИДРАЗИН ЭСЕР1 КЕЗ1НДЕГ1 ЖЫНЫСТЬЩ ЖЕТ1ЛГЕН ЕГЕУК¥ЙРЬЩТАРДЫЦ ОВОГЕНЕЗ1Н1Ц БИОХИМИЯЛЬЩ К0РСЕТК1ШТЕР1
K,a3ipri уакытта адам мен жануардыч арзасына енпзтген симметриялык емес диметилгидразин мен сол тектестердщ метаболикалык процестершщ механизмi толык зерттелмеген. 6ртYрлi химиялык коспала-рдан уланран вмiрлiк мачызды органдар тшдершщ мембранасыныч спецификалык емес закымдалу меха-низмдерiне липидтер аскынтотыры кышкылдануыныч ролi туралы белгiлi. Макала авторлары алран мэлiметтер симметриялык емес диметилгидразин эсершен биохимиялык тарамдарда липидтер аскынтотыры кышкылдануыныч мазмун дечгей взгеретiнiн кврсеткен. Тэжiрибелiк топтардары кврсет-кштердщ шамалап артуы липидтер аскынтотыры кышкылдануы процесшщ бастапкы кезечдер^щ салдары болып табылады. Бэлкiм, эксперимент мерзiмiн арттырура байланысты липидтер аскынтотыры кышкылдануы процесшщ интенсификациясы байкалатын болады.
В. В. Бритько, В. Н. Кислицкая, Б. Т. Есильбаева, Е. С. Татина, М. А. Кинаятов
МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СПЕРМАТОГЕНЕЗА КРЫС-ОТЪЕМЫШЕЙ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НЕСИММЕТРИЧНОГО ДИМ ЕТИЛ ГИДРАЗИНА
Кафедра молекулярной биологии и медицинской генетики Карагандинского государственного медицинского университета
Существование современного общества немыслимо без использования достижений ракетно-космической отрасли в различных областях деятельности человека. Над территорией Центрального Казахстана и граничащих регионов пролегают 2 трассы полета ракет-носителей с общей площадью более 3,5 млн. га, в связи с чем существует проблема загрязнения окружающей среды компонентами ракетного топлива и безопасности жизнедеятельности населения в подтрассовых зонах и в районах аварийного падения ракет-носителей.
В связи с интенсивным развитием ракетно-космической деятельности в Казахстане становятся очевидными многие техногенные риски для здоровья населения, проживающего вблизи космодрома Байконур.
В доступной научной литературе не уделено должного внимания комплексным гигиеническим исследованиям, касающимся влияния техногенных и природных факторов на окружающую среду и состояние здоровья населения в связи с космической деятельностью. При этом недоста-
точно исследованы тенденции состояния репродуктивного здоровья мужского населения, проживающего в экологически неблагоприятных регионах [1].
Вследствие широкого применения несимметричный диметилгидразин (НДМГ) оказывается в различных средах: воздушной, водной, почвенной, он хорошо сорбируется на объектах окружающей среды и передается по пищевым цепочкам. В конечном итоге, преодолевая гематотестику-лярный барьер, НДМГ и его производные попадают в половые железы, оказывая негативное воздействие на процесс формирования половых клеток [2].
Цель исследования - изучение влияния НДМГ на морфофизиологические показатели сперматогенеза крыс-отъемышей в условиях по-дострого и хронического эксперимента.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Эксперимент выполнен на самцах-отъемышах белых беспородных крыс, массой 6070 г., содержавшихся в стандартных условиях вивария Карагандинского государственного медицинского университета. Крысам-отъемышам опытных групп однократно внутрибрюшинно вводился раствор НДМГ из расчета 5 мг/кг массы тела. Контролем служили интактные крысы-отъемыши.
Животных выводили из эксперимента на 30 и 90 сут методом неполной декапитации под легким эфирным наркозом, согласно «Международным рекомендациям по проведению медико-биологических исследований с использованием лабораторных животных» [3]. После забоя, не позднее чем через час, семенники извлекали и
помещали в физиологический раствор. Затем экстрагировали суспензию сперматозоидов. Экстракцию и все манипуляции со сперматозоидами проводили при температуре не ниже +25 С°, подсчет сперматозоидов осуществляли в счетной камере Горяева по модифицированному методу Б. Ж. Култанова и соавт. [4].
Проводился микроскопический обзор исследуемой спермы, который позволяет получить первое впечатление о количестве и качестве спермы, степени подвижности сперматозоидов и характере их движения.
При микроскопировании на чистое предметное стекло наносят каплю спермы и накрывают покровным стеклом. При этом следят, чтобы сперма равномерно растеклась под покровным стеклом. Если не удается обнаружить сперматозоиды, то повторно исследуют сперму в раздавленной капле. При оценке патологических форм сперматозоидов придавали особое значение дефектам головки, шейки, средней части и хвоста.
Количество сперматозоидов подсчитывали следующим образом: сперму разбавляли в смесителе для лейкоцитов физиологическим раствором из расчета 1:20. Для подсчета сперматозоидов брали 0,5 мл хорошо разведенной спермы. Смеситель с разведенной спермой хорошо встряхивали, заполняли счетную камеру и подсчиты-
вали число всех сперматозоидов в 5 больших квадратах камеры Горяева. После установления общего количества сперматозоидов проводили подсчет подвижных и неподвижных сперматозоидов, а так же производящих круговые и колебательные движения, присущие умирающим сперматозоидам.
Подвижность сперматозоидов является основным критерием оценки плодовитости семени. Однако неподвижность сперматозоидов не означает их нежизнеспособность, так как это явление может быть временным.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Изучены морфофизиологические показатели сперматогенеза у крыс-отъемышей после однократного введения НДМГ в дозе 5 мг/кг (табл. 1, 2).
Через 30 сут после однократного введения НДМГ у растущих животных опытной группы достоверно возросло количество мертвых сперматозоидов, которое превышало контроль на 76% (р<0,05). Зафиксировано снижение количества живых клеток у животных опытной группы на 80% (р<0,01) по сравнению с контролем. Выявлено незначительное увеличение атипичных форм сперматозоидов с патологией хвоста и патологией головки в опытной группе по сравнению с показателями в контрольной группе.
Морфофизиологические показатели сперматозоидов крыс-отъемышей на 30 сут после однократного введения НДМГ в дозе 5 мг/кг
Таблица 1.
Показатель Контрольная группа (п=8) Опытная группа (п=12)
Подвижные 65,2±2,0 53,9±0,99
Малоподвижные 22,5±0,48 19,5±0,5*
Неподвижные 12,3±0,04 26,6±0,56*
Живые клетки 62,0±3,6 49,9±1,8*
Мертвые клетки 38,0±0,3 50,1±0,39*
Патология хвоста 10,8±0,35 11,8±0,38
Патология головки 15,0±0,86 16,5±0,89
Показатели Контрольная группа (п=8) Опытная группа (п=12)
Подвижные 80,5±0,55 33,6±0,075*
Малоподвижные 13,4±0,29 2,9±0,06*
Неподвижные 6,1±0,3 63,5±0,59*
Живые клетки 75,8±0,75 43,2±1,52*
Мертвые клетки 24,2±0,77 56,8±1,93*
Патология хвоста 14,8±0,38 60,9±2,96*
Патология головки 12,0±0,29 56,9±0,41*
р<0,05 и ниже по сравнению с контролем 100
* р<0,05 и ниже по сравнению с контролем
Таблица 2.
Морфофизиологические показатели сперматозоидов крыс-отъемышей на 90 сут после однократного введения НДМГ в дозе 5 мг/кг
Через 90 сут после однократного введения НДМГ (табл. 2) зафиксированы выраженные изменения морфофизиологических показателей сперматограммы растущих животных. Наблюдалось снижение содержания подвижных и малоподвижных сперматозоидов у животных опытной группы в 2,4 раза (р<0,01) и 4,6 раза (р<0,001) соответственно по сравнению с контролем. В то же время у животных опытной группы увеличилось количество неподвижных сперматозоидов в 10 раз (р<0,001) по сравнению с контролем.
Зафиксировано достоверное снижение количества живых клеток у животных опытной группы в 1,8 раза (р<0,01) по сравнению с контролем, тогда как количество мертвых клеток достоверно возросло в 2,3 раза (р<0,01).
Анализ количества атипичных форм сперматозоидов у растущих животных опытной группы показал, что через 90 сут достоверно возрастает количество сперматозоидов с патологией хвоста в 4,1 раза и патологией головки в 4,7 раза по сравнению с показателями в контрольной группе самцов крыс-отъемышей.
В опытных группах на 30 и 90 сут у самцов крыс-отъемышей сохранялся дисбаланс по таким показателям, как число подвижных, малоподвижных и неподвижных клеток, а также патологически измененных форм сперматозоидов: с патологией хвоста и патологией головки.
Согласно результатам исследования, на 90 сут достоверно увеличилось количество неподвижных и мертвых сперматозоидов, а также атипичных форм сперматозоидов с патологией хвоста и патологией головки. Таким образом, однократное введение НДМГ в дозе 5 мг/кг ока-
зывает негативный эффект на процесс сперматогенеза у растущих животных.
На 30 сут после однократного введения НДМГ в дозе 5 мг/кг в опытных группах у крыс-отъемышей достоверно увеличивалось количество неподвижных и мертвых клеток при одновременном достоверном снижении количества подвижных и живых клеток.
При однократном введении НДМГ в дозе 5 мг/кг в опытной группе на 90 сут у крыс-отъемышей развивались астенозооспермия и тератозооспермия. Зафиксированные изменения морфофизиологических показателей являются прямым следствием пролонгированного негативного воздействия НДМГ на процессы формирования половых клеток у самцов крыс-отъемышей.
ЛИТЕРАТУРА
1. Токбергенов Е.Т. Медико-экологическая оценка влияния запусков ракет-носителей с космодрома «Байконур»: Автореф. дис. ...д-ра мед. наук. - Караганда, 2006. 38 с.
2. Косенко Т.Ф. Влияние вредных факторов фосфорного производства на инкретную функцию мужских гонад: Автореф. дис. ...канд. мед. наук. - Алма-Ата, 1982.
3. Международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных //Хроника ВОЗ. -1985. - Т.39, №3. - С. 3-9.
4. Култанов Б.Ж., Джангозина Д.М. Комплекс методов для ранней диагностики нарушения сперматогенеза у больных вибрационной болезнью //Информационный листок КазгосИНТИ. -1996. - №1. - С. 4.
Поступила 22.06.2012 г.
V. V. Britko, V. N. Kislitskaya, B. T. Yesilbayeva, Ye. S. Tatina, M. A. Kinayatov MORPHOPHYSIOLOGICAL INDICATORS OF SPERMATOGENESIS OF RATS UNDER THE EXPOSURE OF UNSYMMETRICAL DIMETHYLHYDRAZINE
The study was devoted to studying the effect of unsymmetrical dimethylhydrazine on morphological indices of spermatogenesis weaned rats in subacute and chronic experiments. The authors have obtained data that indicate the negative impact on the process of asymmetric dimethylhydrazine spermatogenesis in rats weaned. In the experimental group there was a significant reduction in the number of moving and living sperm. There was also an increase in the number of abnormal sperm forms in the experimental groups, with the development of adynamic and teratozoospermia.
В. В. Бритько, В. Н. Кислицкая, Б. Т. Есшбаева, Е. С. Татина, М. А. Кинаятов СИММЕТРИЯЛЬЩ ЕМЕС ДИМЕТИЛГИДРАЗИН ЭСЕР1 КЕЗ1НДЕГ1 ЕГЕУК¥ЙРЬЩТАР СПЕРМАТОГЕНЕЗ1Н1Ц МОРФОФИЗИОЛОГИЯЛЬЩ К0РСЕТК1ШТЕР1
Авторлардыч 3eprreyi созылмалы эксперимент жардайында симметриялык емес диметилгидразиныч егеукуйрыктардыч сперматогенез^ч морфофизиологиялык керсетюштерше эсер^ зерттеуге арналран. Авторлар симметриялык емес диметилгидразиныч егеукуйрыктардыч сперматогенез процесше терк эсер етет^ туралы мэлiметтер алран. Тэжiрибелiк топтарда ширак жэне ^i сперматозоидтар саныныч анык темендеуi байкалран. Сол сиякты тэжiрибелiк топтарда астено- жэне тератозооспермияныч дамуымен сперматозоидтардыч типтк емес турлер^ч артуы керiнiс тапкан.
