CC BY
89
Мониторинг частоты лимфоцитов, мутантных по генам Т-клеточного рецептора, у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС в отдалённый
пострадиационный период
Смирнова С.Г., Орлова Н.В., Замулаева И.А., Ткаченко Н.П., Лозебной Н.И.,
Каплан М.А., Туманов К.А., Кащеев В.В., Иванов В.К., Саенко А.С.
ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, Обнинск
Проведён мониторинг частоты лимфоцитов, несущих мутации по генам Т-клеточного рецептора (TCR), у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС спустя 9-25 лет после радиационного воздействия. Обследовано 355 человек, подавляющее большинство которых было облучено в малых дозах (до 200 мГр). У части (12,5 %) лиц были выявлены повышенные частоты мутантных клеток. Доля таких лиц статистически значимо не менялась со временем после облучения. У 66 человек проведено многократное исследование частоты мутантных клеток с целью индивидуального анализа возможных изменений частоты мутантных клеток в разное время после радиационного воздействия. Установлено, что у 70 % обследованных частота мутантных клеток оставалась неизменной, у 30 % она повышалась или снижалась. Можно полагать, что наблюдаемые эффекты обусловлены возникновением радиационно-индуцированной нестабильности генома у части лиц, подвергшихся облучению, которая может проявляться длительное время после воздействия (в нашем исследовании до 25 лет). При этом величина эффекта не зависит от дозы облучения.
Ключевые слова: ликвидаторы аварии на ЧАЭС, малые дозы облучения, соматический мутагенез, TCR-мутации, радиационно-индуцированная нестабильность генома.
Введение
Как известно, воздействие ионизирующего излучения в малых дозах на биологические объекты способно вызывать отдалённые эффекты, которые могут сохраняться на протяжении длительного времени. При этом, по мнению ряда авторов, ключевую роль играет опосредованное влияние радиации на геном через регуляторные системы [7]. В результате такого влияния могут возникать различные эффекты, одним из которых является радиационно-индуцированная нестабильность генома (РИНГ) [1, 4, 14, 17]. Этот феномен достаточно хорошо исследован в экспериментальных условиях in vitro и in vivo. К настоящему времени накоплен материал, свидетельствующий о возможности возникновения и длительного сохранения нестабильности генома в соматических клетках человека после облучения в малых дозах. В основном это данные по цитогенетическому обследованию людей, подвергшихся такому облучению [5, 7, 10, 12, 18]. Имеются немногочисленные данные и о частоте генных соматических мутаций [13, 16, 19].
Контингент ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС представляет удобную модель для исследования соматического мутагенеза в отдаленные сроки после радиационного воздействия. Начиная с 1995 г., в МРНЦ проводится исследование генных мутаций в соматических клетках ликвидаторов, подавляющее большинство которых подверглось радиационному воздействию в малых дозах. Для мониторинга уровня соматического мутагенеза у ликвидаторов
Смирнова С.Г.* - с.н.с., к.б.нОрлова Н.В. - с.н.с., к.б.н.; Замулаева И.А. - зав. лаб., д.б.н., профессор; Ткаченко Н.П. - в.н.с., к.м.н.;
Лозебной Н.И. - врач-онколог клинической больницы № 8 ФМБА России, заочный аспирант ФгБу МРНЦ Минздравсоцразвития России; Каплан М.А. - зав. отд., д.м.н., профессор; Туманов К.А. - научн. сотр.; Кащеев В.В. - с.н.с., к.б.н.; Иванов В.К. - Председатель РНКРЗ, зам. директора по научн. работе, член-корр. РАМН; Саенко А.С. - зам. директора по научн. работе, д.б.н., профессор. ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России.
*Контакты: 249036, Калужская обл., Обнинск, ул. Королева, 4. Тел.: (48439) 9-71-88, e-mail: sgsmirn@mail.ru.
используется метод определения частоты лимфоцитов, несущих генные мутации по локусу Т-клеточного рецептора (T-cell receptor - TCR). Выбор данного подхода обоснован тем, что в случае РИНГ преобладают небольшие изменения типа точковых мутаций [6], поэтому анализ частоты генных мутаций может быть более чувствительным методом изучения этого феномена по сравнению с анализом хромосомных аберраций. Ранее нами было установлено, что у части ликвидаторов в отдалённые сроки (до 19 лет) после воздействия наблюдаются повышенные частоты мутантных клеток, и доля таких лиц статистически значимо выше, чем в контрольной группе сходного возраста [2, 8, 11]. Для выяснения насколько долго может сохраняться этот эффект и что лежит в его основе, работа в данном направлении продолжалась и в последующие годы.
В данной статье представлен анализ всех результатов, полученных до 2011 г. Значимость проведения исследований в данной области не вызывает сомнений, так как, с одной стороны, установлено, что изменение генетического материала соматических клеток лежит в основе злокачественной трансформации, а, с другой стороны, имеется значительный контингент лиц, подвергшихся облучению в малых дозах. Сложность проведения исследований в этой области заключается в том, что для человека трудно оценить и вычленить все возможные внешние генотоксические воздействия, кроме того, накапливается все больше данных, свидетельствующих о том, что степень проявления отдаленных эффектов действия радиации в малых дозах во многом зависит от генетических факторов. Исходя из этого, очевидно, что при изучении последствий действия ионизирующей радиации в малых дозах на человека, оценку эффектов необходимо проводить на индивидуальном уровне.
Материалы и методы
Анализ частоты мутантных лимфоцитов у ликвидаторов аварии на ЧАЭС проводился в течение трёх интервалов времени, каждый продолжительностью по 4-5 лет: в 1995-1998, 2001 -2004 и 2008-2011 гг. Было обследовано 355 человек (291 мужчина и 64 женщины) в возрасте от 30 до 84 лет (в среднем 55 лет), принимавших участие в ликвидации последствий аварии в 1986-1990 гг.
У 66 ликвидаторов анализ частоты TCR-мутантных лимфоцитов проводился несколько раз (2-5) в промежутке времени от 0,3 до 14 лет. Всего (с повторами) проанализировано 488 образцов периферической крови. Анализ проводили во время госпитализации ликвидаторов в отдел лазерной и фотодинамической терапии МРНЦ для обследования и/или лечения, либо диспансерного обследования в Клинической больнице № 8 (г. Обнинск). Для 202 ликвидаторов имелись данные о дозе, подтверждённые дозиметрической службой «Укрытие» и находящиеся в Российском государственном медико-дозиметрическом регистре. Средняя накопленная доза (±SE) составила 7,7±0,6 сГр, диапазон доз - от 0,1 до 51,0 сГр. Для остальных лиц подтверждённой информации о дозе не имелось, однако их участие в ликвидации аварии подтверждено документально.
Контрольную группу составили 284 здоровых лица, не подвергавшихся зарегистрированным генотоксическим воздействиям, в возрасте от 14 до 77 лет. Из контрольной группы были выбраны лица (п=125), соответствующие по возрасту обследованным ликвидаторам, для группового сравнения частоты ТСЯ-мутантных клеток у облучённых и необлучённых лиц.
Для расчёта возрастной нормы изучаемого показателя соматического мутагенеза была построена линейная зависимость частоты ТСЯ-мутантных клеток от возраста и вычислен 95 % доверительный интервал (рисунок 1), по верхней границе которого для каждого возраста (с шагом 1 год) установлена верхняя граница нормы с точностью до 0,1 10-4 частоты мутантных клеток. Превышение этой величины рассматривалось в качестве критерия повышенной частоты мутантных клеток.
Рис. 1. Зависимость частоты TCR-мутантных клеток от возраста в группе 284 контрольных лиц.
Пунктирные линии показывают границы 95 % доверительного интервала для частоты
мутантных клеток.
Определение частоты TCR-мутантных клеток проводили по методике, разработанной в начале 90-х годов прошлого века японскими авторами [15] и усовершенствованной нами с целью повышения точности метода [3, 9]. Для идентификации мутантных клеток использовали моноклональные антитела к CD4, меченные флуоресцеинизотиоционатом, CD3 и HLA-DR, меченные фикоэритрином (Becton Dickinson Immunocytometry Systems - BDIS, США).
Образцы анализировали на проточном цитофлуориметре FACS Vantage (BDIS, США), оборудованном 488 нм лазером (Spectra-Physics 177, США). Сбор данных и компьютерную обработку проводили с использованием программы CellQuestPro (BDIS, США). Частоту мутантных клеток определяли как отношение числа клеток с фенотипом СD3- HLA-DR- CD4+ к числу СD4+ клеток.
Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программ Statistica
6.0 (StatSoft, Inc., США) и Origin 6.0 (Microcal Software, Inc., США) для персонального компьютера. В связи с тем, что распределение частот мутантных клеток отличалось от нормального (по критерию Колмогорова-Смирнова), для проведения анализа использовали непараметрические методы. Значимость различий частоты мутантных клеток в двух выборках оценивали по критерию Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при р<0,05.
Сравнение доли лиц с повышенными частотами мутантных клеток в двух группах проводили с помощью критерия Фишера. Различия считали статистически значимыми при р<0,05.
Результаты и обсуждение
В группе ликвидаторов частота TCR-мутантных клеток варьировала у разных лиц более чем в 40 раз: от 0,610-4 до 26,010-4. Одной из причин такой вариабельности, вероятно, является генетический полиморфизм в локусах, обеспечивающих поддержание стабильности генома соматических клеток. Медиана частоты TCR-мутантных клеток для всех ликвидаторов, вошедших в объединенную базу данных, составила 3,910-4, границы нижнего и верхнего квартилей 2,810-4 и 5,5-10-4 соответственно. У женщин и мужчин-ликвидаторов частота TCR-мутантных клеток не различалась. Медианные значения (нижний и верхний квартили) составили 3,6-10-4 (2,3-10-4 - 5,0-10-4) и 4,0-10-4 (2,9-10-4 - 5,5-10-4) соответственно.
В контрольной группе медиана, нижний и верхний квартили составили 3,7-10-4 (2,8-10-4 -4,4-10-4). Установлено, что частоты TCR-мутантных клеток у ликвидаторов статистически значимо выше, чем в группе контрольных необлучённых лиц сходного возраста и места жительства (p<0,05, рис. 2). Повышение частоты мутантных лимфоцитов у ликвидаторов в отдалённые сроки после облучения отмечается и в работах других авторов [5, 7, 10, 13, 16, 18, 19].
В группе ликвидаторов у части лиц частоты мутантных клеток превышали возрастную норму; при этом доля таких лиц среди ликвидаторов была статистически значимо выше таковой в контрольной группе: 12,5 % vs 3,2 % (p<0,05). У основной части ликвидаторов частоты мутантных клеток соответствовали возрастному контролю. Мы полагаем, что повышенные частоты мутантных клеток у части ликвидаторов в отдалённые сроки после воздействия являются результатом РИНГ. Это предположение основано на том, что, во-первых, использованный тест на частоту клеток с генными мутациями характеризуется быстрой элиминацией клеток с радиационно-индуцированными TCR-мутациями вследствие естественного обновления популяции зрелых лимфоцитов [20], во-вторых, имеет место большая продолжительность времени, прошедшего с момента облучения, в-третьих, исследования последних лет показывают возможность формирования нестабильности генома соматических клеток после радиационного воздействия в дозах до 200 мЗв [1, 4, 6, 17], в-четвертых, установлено, что генетическая нестабильность проявляется только у части потомков клеток, подвергшихся облучению, и степень проявления зависит от генотипа.
Ликвидаторы
Частота ТСЯ-мутантных лимфоцитов, х 10 -4
Рис. 2. Распределение частоты ТСЯ-мутантных клеток в группах ликвидаторов
и контрольных лиц.
Мониторинг частоты ТСЯ-мутантных клеток у ликвидаторов проводился спустя 9-25 лет после облучения. Для изучения динамики наблюдаемых эффектов все обследованные лица в зависимости от года анализа и от числа обследованных были разделены на 5 групп. В таблице 1 приведены результаты статистического анализа частот мутантных клеток в выделенных группах.
Сравнение частот мутантных клеток в разных группах не выявило статистически значимых различий (р<0,05). Не было также установлено существенных различий по доле лиц с повышенными частотами у ликвидаторов, обследованных в разные годы. Таким образом, результаты анализа частоты ТСЯ-мутантных лимфоцитов в разные годы свидетельствуют о сохранении эффекта радиационного воздействия в малых дозах (повышенной частоты ТСЯ-мутантных клеток у части ликвидаторов) примерно на одинаковом уровне в течение всего периода наблюдения.
Таблица 1
Результаты анализа частот мутантных клеток, полученных в разные годы обследования
Годы Число Возраст, среднееіББ Частота мутантных клеток х 10" Доля лиц с повыш.
анализа лиц (диапазон) медиана квартили частотами (±БЕ), %
1995-1996 68 45,1±1,1 (30-68) 4,0 2,7-5,0 10,3±3,7
1997-1998 85 47,2±1,0 (30-69) 3,8 2,9-5,0 11,7±3,5
2001-2004 57 53,2±1,4 (37-76) 5,2 3,0-6,6 17,5±5,0
2008-2009 213 59,6±0,7 (40-84) 3,8 2,7-5,4 12,7±2,3
2010-2011 40 65,5±1,5 (48-82) 3,9 2,8-5,5 12,5±5,2
Также был проведён анализ возможного изменения частоты ТСЯ-мутантных клеток на индивидуальном уровне по результатам повторных обследований одних и тех же лиц в разные годы. В процессе мониторинга 66 ликвидаторов были обследованы от двух до пяти раз (минимальный промежуток между исследованиями - 4 месяца, максимальный - 14 лет). Для каждого ликвидатора было вычислено среднее значение частоты мутантных клеток. Считали, что частота мутантных клеток не меняется во времени, если результат каждого из выполненных анализов отклоняется от этой величины не более чем на 25 %. По этому критерию было установлено, что у большинства обследованных (70 %) частота мутантных клеток не изменялась за период наблюдения, у 15 % исследуемых она снизилась, у 12 % - увеличилась, и у 3 % наблюдались разнонаправленные изменения частоты мутантных клеток (рис. 3). Таким образом, проведённые исследования показали, что на индивидуальном уровне за период наблюдения у 30 % обследованных частота мутантных клеток изменялась. У одних лиц она увеличивалась и при этом могла перейти из разряда «нормальных» в разряд «повышенных», у других - уменьшалась и могла перейти из «повышенных» в «нормальные». Реже наблюдались разнонаправленные изменения.
□ сохранение на одном уровне
□ увеличение со временем
□ разнонаправленные изменения
□ снижение со временем
Рис. 3. Результаты многократного исследования частоты ТСЯ-мутантных клеток у ликвидаторов аварии на ЧАЭС: распределение обследованных лиц по характеру изменений изучаемого показателя соматического мутагенеза.
Таким образом, выполненный двумя способами анализ возможных изменений частоты TCR-мутантных клеток со временем после воздействия свидетельствует о том, что нестабильность генома у части ликвидаторов сохраняется в течение 9-25 лет после облучения. При этом повышение частоты мутантных клеток может произойти в отдалённые сроки после облучения в малых дозах.
Возможно, одним из проявлений нестабильности генома соматических клеток в отдалённые сроки после облучения в малых дозах является его повышенная чувствительность к факторам окружающей среды, в норме не приводящим к ощутимым генотоксическим эффектам. Это подтверждается данными, полученными И.И. Пелевиной с сотрудниками [7]. Используя тесты на частоту хромосомных аберраций и микроядер, авторы установили, что в отдалённые сроки после облучения наблюдается повышенная чувствительность генома лимфоцитов к дополнительному действию радиации в малых дозах in vitro.
Было проведено также исследование влияния дозы облучения на уровень соматического мутагенеза в отдаленные сроки после воздействия. На рисунке 4 представлен график распределения частоты мутантных клеток в зависимости от полученной дозы. Из рисунка видно, что дозовая зависимость отсутствует. Не наблюдается также зависимости доли лиц с повышенными частотами от дозы облучения.
4,90 14,40 24,10 35,00
Доза облучения, сГр Рис. 4. Зависимость частоты мутантных клеток от дозы облучения.
Кроме того, проведён анализ частоты мутантных клеток у ликвидаторов, работавших в зоне аварии в разные годы. Установлено, что групповая частота ТСЯ-мутантных клеток также была примерно одинакова. Так, для ликвидаторов, работавших в 1986 г., медиана исследуемого показателя соматического мутагенеза составляла 3,810-4, в 1987 г. - 4,010-4, в 1988-1990 гг. - 3,710-4. По доле лиц с повышенными частотами эти группы также не отличаются: 14,0 % сре-
ди работавших в 1986 г., 14,7 % - в 1987 г. и 11,8 % - в 1988-1990 гг. При этом средние дозы облучения (±БЕ) в этих группах, вычисленные по имеющимся данным^ составляют 9,0±0,8;
7,1 ±1,9; 3,2±1,3 сГр соответственно. Эти данные также свидетельствуют об отсутствии зависимости величины эффектов, наблюдаемых в отдалённые сроки после воздействия, от параметров облучения (в пределах выбранных доз). Скорее всего, величина наблюдаемого эффекта определяется генотипом индивида.
Заключение
Таким образом, результаты мониторинга частоты ТСЯ-мутантных клеток у ликвидаторов аварии на ЧАЭС, подавляющее большинство которых подверглось радиационному воздействию в малых дозах, показывают, что в отдалённый период (спустя 9-25 лет после облучения) у части ликвидаторов наблюдаются повышенные частоты мутантных клеток. Доля лиц с повышенными частотами не изменяется со временем. На индивидуальном уровне на протяжении всего периода наблюдения у большинства лиц частота мутантных клеток также не изменялась. Вместе с тем для относительно небольшой части лиц было зарегистрировано повышение или снижение частоты мутантных клеток. Имеются основания полагать, что наблюдаемые эффекты обусловлены возникновением РИНГ у части лиц, подвергшихся облучению. При этом величина эффекта не зависит от дозы облучения.
Следует также отметить, что число лиц с нестабильностью генома может быть больше, чем число лиц с повышенными частотами мутантных клеток, так как в одно и то же время у одних лиц может происходить процесс повышения, а у других - снижения частоты мутантных клеток.
Работа выполнена при поддержке Минобрнауки РФ, госконтракт №14.740.11.0180.
Литература
1. Готлиб В.Я., Пелевина И.И., Конопля Е.Ф. и др. Некоторые аспекты биологического действия малых доз радиации //Радиобиология. 1991. Т. 31, вып. 3. С. 318-325.
2. Замулаева И.А., Орлова Н.В., Смирнова С.Г. и др. Закономерности соматического мутагенеза у ликвидаторов аварии на ЧАЭС в отдалённые сроки после радиационного воздействия //Радиация и риск. 2006. Т. 15, № 1-2. С. 68-76.
3. Замулаева И.А., Саенко А.С., Смирнова С.Г., Орлова Н.В. Способ определения частоты мутантных по Т-клеточному рецептору лимфоцитов периферической крови человека //Патент на изобретение № 2316766, зарегистрирован в 2008 г.
4. Литтл Д.Б. Немишенные эффекты ионизирующих излучений: выводы применительно к низкодозовым воздействиям //Радиационная биология. Радиоэкология. 2007. Т. 47, № 3. С. 262-272.
5. Мазник Н.А., Винников В.А. Ретроспективная цитогенетическая дозиметрия по результатам классического хромосомного анализа у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС //Радиационная биология. Радиоэкология. 2005. Т. 45, № 6. С. 700-708.
6. Мазурик В.К., Михайлов В.Ф. Радиационно-индуцируемая нестабильность генома: феномен, молекулярные механизмы, патогенетическое значение //Радиационная биология. Радиоэкология. 2001. Т. 41, № 3. С. 272-289.
7. Пелевина И.И., Афанасьев Г.Г., Алещенко А.В. и др. Молекулярные и клеточные последствия аварии на ЧАЭС //Радиационная биология. Радиоэкология. 2011. Т. 51, № 1. С. 154-161.
8. Саенко А.С., Замулаева И.А., Смирнова С.Г. и др. Определение частоты мутаций по локусам глико-форина А и Т-клеточного рецептора: обследование ликвидаторов аварии на ЧАЭС //Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 2. С. 181-185.
9. Саенко А.С., Замулаева И.А., Смирнова С.Г. и др. Определение частоты мутаций по локусам глико-форина А и Т-клеточного рецептора: информативность для биологической дозиметрии острого и пролонгированного облучения //Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38, вып. 2. С. 171-180.
10. Сальникова Л.Е., Фомин Д.К., Елисова Т.В. и др. Изучение связи цитогенетических и эпидемиологических показателей с генотипами у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС //Радиационная биология. Радиоэкология. 2008. Т. 48, № 3. С. 303-312.
11. Смирнова С.Г., Орлова Н.В., Замулаева И.А., Саенко А.С. Мутации по локусу Т-клеточного рецептора у людей в отдалённые сроки после острого и пролонгированного облучения //Радиационная биология. Радиоэкология. 2002. Т. 42, № 6. С. 624-627.
12. Шевченко В.А., Снигирева Г.П. Значимость цитогенетического обследования для оценки последствий чернобыльской катастрофы //Радиационная биология. Радиоэкология. 2006. Т. 46, № 2. С. 133-139.
13. Jones I.M., Galick H., Kato P. et al. Three somatic genetic biomarkers and covariates in radiation-exposed Russian cleanup workers of the Chernobyl nuclear reactor 6-13 years after exposure //Radiat. Res. 2002. V. 158, N 4. P. 424-442.
14. Kadhim M.A., Moore S.R., Goodwin E.H. Interrelationships amongst radiation-induced genomic instability, bystander effects, and the adaptive response //Mutat. Res. 2004. V. 568, N. 1. P. 21-32.
15. Kyoizumi S., Akiyama M., Hirai Y. et al. Spontaneous loss and alteration of antigen receptor expression in mature CD4+ T cells //J. Exp. Med. 1990. V. 171. P. 1981-1999.
16. Moore D.H., Tucker J.D., Jones I.M. et al. A study of the effects of exposure on cleanup workers at the Chernobyl nuclear reactor accident using multiple end points //Radiat. Res. 1997. V. 148. P. 463-475.
17. Mullenders L., Atkinson M., Paretzke H. et al. Assessing cancer risks of low-dose radiation //Nature Reviews/Cancer. 2009. V. 9. P. 596-604.
18. Neronova E., Slozina N., Nikiforov A. Chromosome alterations in cleanup workers sampled after the Chernobyl accident //Radiat. Res. 2003. N 1. P. 46-51.
19. Thomas C.B., Nelson D.O., Plechanov P. Elevated frequencies of hypoxanthine phosphoribosyltransferase lymphocyte mutants are detected in Russian liquidators 6 to 10 years after exposure to radiation from the Chernobyl nuclear power plant accident //Mutat. Res. 1999. V. 439. P. 105-119.
20. Umeki S., Kusunoki Y., Endo K. et al. Somatic mutation at the TCR loci as a biological dosimeter of radiation-exposed people //Proc. Int. Conf. Rad. Effects and Protection, Mito, Japan, Japan Atomic Energy Research Institute, Tokyo, 1992. P. 151-154.
Monitoring of the frequency of lymphocytes with mutations at T-cell receptor locus in Chernobyl cleanup workers
Smirnova S.G., Orlova N.V., Zamulaeva I.A., Tkachenko N.P., Lozebnoy N.I.,
Kaplan M.A., Tumanov K.A., Kashcheev V.V., Ivanov V.K., Saenko A.S.
Medical Radiological Research Center of the Russian Ministry of Health and Social Development, Obninsk
Monitoring of the frequency of lymphocytes with mutations at T-cell receptor (TCR) locus in Chernobyl cleanup workers was performed 9-25 years after radiation exposure. Study group consists of 355 persons, most of them were irradiated at low doses (up to 200 mGy). Elevated frequencies of the TCR-mutant cells were found in part (12.5 %) of the persons. The percentage of such persons did not significantly change within period of the examination. Individual analysis of possible changes of the mutant cell frequency was conducted in 66 persons after repeated measurements. It was found that the frequency of the TCR-mutant cells remained constant in 70 % of persons and increased or decreased in 30 %. It is possible to assume that these effects are caused by occurrence of radiation-induced genome instability in the part of irradiated persons. The genome instability can persist for a long time after influence (up to 25 years in our research). The effect doesn't depend on dose of the radiation exposure.
Keywords: Chernobyl cleanup workers, low doses of irradiation, somatic mutagenesis, TCR-mutations, the radiation-induced genome instability.
Smirnova S.G.* - Senior Researcher, C. Sc., Biol.; Orlova N.V. - Senior Researcher, C. Sc., Biol.; Zamulaeva I.A. - Head of Lab., D. Sc., Biol., Prof.; Tkachenko N.P. - Head Researcher, C. Sc., Med.; Lozebnoy N.I. - Oncologist of Clinical Hospital N 8 FMBA of Russia, Post-graduate student of MRRC; Kaplan M.A. - Head of Dep., MD, Prof.; Tumanov K.A. - Research Assistant; Kashcheev V.V. - Senior Researcher,
C. Sc., Biol.; Ivanov V.K. - Chairman of RSCRP, Deputy Director, Corresponding Member of RAMS; Saenko A.S. - Deputy Director,
D. Sc., Biol., Prof. MRRC.
‘Contacts: 4 Korolyov str., Obninsk, Kaluga region, Russia, 249036. Tel.: (48439) 9-71-88, e-mail: sgsmirn@mail.ru.
