CC BY
81
УДК 616.441-006.04-079.4
С.В. СЕРГИЙКО1, С.А. ЛУКЬЯНОВ1, С.Е. ТИТОВ2-4, Ю.А. ВЕРЯСКИНА2
1Южно-Уральский государственный медицинский университет, г. Челябинск
2Институт молекулярной и клеточной биологии Сибирского отделения Российской академии наук,
г. Новосибирск
Акционерное общество «Вектор-Бест», г. Новосибирск "Новосибирский государственный университет, г. Новосибирск
Молекулярно-генетическое тестирование в дифференциальной диагностике узловых образований щитовидной железы с цитологическим заключением фолликулярная опухоль Bethesda IV
Контактная информация:
Лукьянов Сергей Анатольевич — кандидат медицинских наук, ассистент кафедры общей и детской хирургии Адрес: 454092, г. Челябинск, ул. Воровского, д. 64, тел. +7-950-744-45-95, e-mail: [email protected]
Тонкоигольная аспирационная биопсия (ТАБ) узлов щитовидной железы под УЗ-контролем с последующим цитологическим исследованием является основнымспособом оценки риска злокачественности этих образований. При этом диагностические возможности цитологическогоисследования при фолликулярных опухолях и неоплазиях щитовидной желе-зыимеют диагностические ограничения. «Неопределенные» и подозрительные на опухоль цитологические заключения являются аргументом для направления пациентов на необоснованное, в большинстве случаев, оперативное лечение. В статье рассмотрены диагностические возможности отечественного генетического молекулярного классификатора, разработанного ИМКБ СО РАН для дифференциальной диагностики опухолей щитовидной железы у пациентов с цитологическим заключением фолликулярная опухоль (Bethesda IV, 2017).
Ключевые слова: фолликулярная опухоль щитовидной железы, рак щитовидной железы, молекулярно-генетическое тестирование.
(Для цитирования: Сергийко С.В., Лукьянов С.А., Титов С.Е., Веряскина Ю.А. Информация об источнике поддержки в виде грантов, оборудования, лекарственных препаратов. Практическая медицина. 2019. Том 17, № 4, С. 149-152) DOI: 10.32000/2072-1757-2019-4-149-152
S.V. SERGIYKO1, S.A. LUKYANOV1, S.E. TITOV2-4, Yu.A. VERYASKINA2
1South-Ural State Medical University, Chelyabinsk
institute for Molecular and Cell Biology of Siberian branch of the Russian Academy of Sciences, Novosibirsk
3Vektor-Best JSC, Novosibirsk "Novosibirsk State University, Novosibirsk
Molecular-genetic testing in differential diagnostics of node lesions in thyroid gland with cytological conclusion of «follicular tumor Bethesda IV»
Contact details:
Lukyanov SA — PhD (medicine), Assistant of the Department of General and Children's Surgery
Address: 64 Vorovskiy Str., Chelyabinsk, Russian Federation, 454092, tel. +7-950-744-45-95, e-mail: [email protected]
Fine-needle aspiration biopsy (FNA) of thyroid nodes under US-control with subsequent cytological examination is the main way to assess the risk of malignancy of these formations. At the same time, the diagnostic capabilities of cytological examination in follicular
150 ^tL ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА
Том 17, № 4. 2019
tumors and thyroid neoplasia have diagnostic limitations. «Uncertain» and tumor suspicious cytological findings are an argument for sending patients to unreasonable, in most cases, surgical treatment. The article deals with the diagnostic capabilities of the Russian genetic molecular classifier developed by IMCB of SB RAS for differential diagnosis of thyroid tumors in patients with cytological conclusion «follicular tumor» (Bethesda IV, 2017).
Key words: follicular thyroid tumor, thyroid cancer, molecular genetic testing.
(For citation: Sergiyko S.V., Lukyanov S.A., Titov S.E., Veryaskina Yu.A. Molecular-genetic testing in differential diagnostics of node lesions in thyroid gland with cytological conclusion of «follicular tumor Bethesda IV». Practical medicine. 2019. Vol. 17, № 4, P. 149-152)
В соответствии с Российскими клиническими рекомендациями по диагностике и лечению высоко-дифференцированного рака щитовидной железы у взрослых пациенты с узлами щитовидной железы, имеющими по результатам ТАБ IV группу цитологического заключения (Bethesda, 2017) должны подвергаться хирургическому лечению [1-3]. При этом, по результатам послеоперационного гистологического исследования от 70 до 80% узлов щитовидной железы в конечном итоге оказываются доброкачественными, а сама операция — ненужной [4].
С целью улучшения дооперационной диагности-кирака щитовидной железы, в последние 5 лет за рубежом были разработаны и изучены возможности применения различных молекулярно-генетических панелей. Наиболее известных из них — ААгта-GEC, ThyroSeq v2, Т1^епХ/Т1пугаМт и RosettaGX имеют показатель чувствительности до 90-95%. Специфичность ThyroSeq v2 и ThyGenX/ThyraMIR составила 92% и 85% соответственно. Эти тест-системы показали более высокую специфичность, чем RosettaGX (74%) и ААгта^ЕС (52%). Диапазон предсказательной ценности отрицательного результата (ПЦОР) между четырьмя зарубежными тест-системами составил от 92 до 96% и статистически не различался. Предсказательная ценность положительного результата (ПЦПР) для ThyroSeq v2 и ThyGenX/ThyraMIR показала сопоставимый результат 74-78%, в отличие от ААгта^ЕС и RosettaGX, где этот показатель составил 37 и 43% соответственно, что, конечно недостаточно для принятия решения об операции [5-7].
Опыт применения этих молекулярно-генетиче-ских панелей в РФ минимальный и подразумевает необходимость отправки биологического материала в другую страну, кроме того они имеют высокую стоимость. В настоящее время в России создан оригинальный диагностический молекулярный классификатор, основанный на анализе экспрессии 11 микроРНК, 4 мРНК, мутации V600E в гене BRAF и отношения митохондриальной и ядерной ДНК [8]. Первый опыт использования диагностической панели показал ее высокую информативность, а в качестве материала для анализа использовали нуклеиновые кислоты, выделенные из соскобов окрашенных цитологических препаратов [7].
Цель исследования — оценить возможность отечественного молекулярно-генетического классификатора в дооперационной диагностике рака щитовидной железы при цитологическом заключении фолликулярная опухоль (Bethesda IV, 2017).
Материалы и методы исследования
Для исследования были отобраны окрашенные стекла с цитологическим материалом, полученные при ТАБ под УЗ-контролем из узлов щитовидной же-
лезы, с цитологическим заключением Bethesda IV. Все пациенты были оперированы в 2018 году в Областном центре эндокринной хирургии г. Челябинска, где им был установлен заключительный гистологический диагноз. Стекла с дооперацион-ным цитологическим материалом без указания заключительного послеоперационного диагноза и данных больных были пронумерованы и направлены в ИМКБ СО РАН г. Новосибирск для прове-дениямолекулярно-генетического исследования с использованием оригинального молекулярного классификатора [8]. На основании результатов мо-лекулярно-генетического исследования препараты были разделены на 4 группы: доброкачественный узел (ДУ); фолликулярная опухоль без маркеров злокачественности (ФО-БМЗ); папиллярный рак (ПР); фолликулярная опухоль с маркерами злокачественности (ФО-МЗ). ДУ и ФО-БМЗ вместе составили группу доброкачественных опухолей (ДО), ПР и ФО-МЗ вместе составили группу злокачественных опухолей (ЗО). Результаты молекулярно-генетиче-ских исследований были сопоставлены с послеоперационным гистологическим заключением у 77 пациентов. Самому младшему пациенту было 18 лет, старшему 69, медиана возраста 45 [30 - 53], соотношение мужчин и женщин 1:7,1. Были рассчитаны чувствительность, специфичность, (ПцПр) и предсказательная ценность отрицательного результата (ПЦОР) генетического исследования.
Результаты
Проведен сравнительный анализ результатов до-операционного молекулярно-генетического и послеоперационного гистологического исследований. Заключение доброкачественный узел (ДУ) было получено у 5 (6,5%) пациентов и подтвердилось послеоперационным гистологическим исследованием во всех случаях.
Фолликулярная опухоль без маркеров злокачественности (ФО-БМЗ) диагностирована у 51 (66,2%) пациента. Это молекулярно-генетическое заключение совпадало и соответствовало доброкачественному гистологическому диагнозу в 49 (96,1%) из которых в 32 (62,7%) случаях выявлена фолликулярная аденома, в 16 (31,4%) — узловой коллоидный зоб, в 1 (2%) — неинвазивная фолликулярная опухоль с ядрами папиллярного типа (ШРГР). Заключение ФО-БМЗ по результатам молекулярно-ге-нетического исследования у 2 (3,9%) больных оказалось ошибочным, после операции у них выявлен минимально-инвазивный вариант фолликулярного рака щитовидной железы.
В группу с молекулярно-генетическим заключением папиллярный рак (ПР) попали 6 (7,8%) пациентов. Послеоперационный гистологический диагноз папиллярного рака щитовидной железы в этой группе подтвержден у 5 (83,3%), и не подтвержден
Таблица. Соответствие результатов послеоперационных гистологических исследований до-операционным молекулярно-генетическим заключениям у пациентов с цитологическим заключением Bethesda IV
Table. Correlation between the results of post-operative histological examinations and preoperational molecular-genetic examinations in patients with cytological conclusion of Bethesda IV
Гистологическое заключение Молекулярно-генетическое заключение
ДУ n=5 ФО-БМЗ n = 51 ПР n = 6 ФО-МЗ n = 15
Доброкачественные образования
Коллоидный узел 5 (100%) 16 (31,4%) 0 2 (13,3%)
Фолликулярная аденома 0 32 (62,7%) 0 1 (6,7%)
NIFTP 0 1 (2%) 1 (16,7%) 0
Всего доброкачественных 5 (100%) 49 (96,1%) 1 (16,7%) 3 (20%)
Злокачественные опухоли
Папиллярный рак 0 0 5 (83,3%) 3 (20%)
Фолликулярный рак 0 2 (3,9%) 0 9 (60%)
Всего злокачественных 0 2 (3,9%) 5 (83,3%) 12 (80%)
у 1 (16,7%) пациента, где была диагностирована неинвазивная фолликулярная опухоль с ядрами папиллярного типа (Ы^ТР).
Молекулярно-генетическое заключение фолликулярной опухоли с маркерами злокачественности (ФО-МЗ) было получено в 15 (19,5%) случаях. Послеоперационное гистологическое исследование подтвердило наличие рака у12 (80%) из них, в остальных 3 (20%) случаях были получены доброкачественные заключения (см. табл.).
Таким образом, сопоставляя результаты послеоперационного гистологического и дооперацион-ного молекулярно-генетических исследований, было установлено, что в группе пациентов с цитологическим заключением фолликулярная опухоль (Bethesda IV), диагноз рак ЩЖ на основании генетического исследования был заподозрен у 21 (27,3%). Совпадение результатов дооперацион-ного молекулярно-генетическогои послеоперационного гистологического исследований установлено в 17 случаях (истинно-положительный результат), а расхождение в 4 (ложно-положительный результат). В 54 случаях при доброкачественных узлах щитовидной железы не было выявлено молекуляр-но-генетических маркеров злокачественности (истинно-отрицательный результат), в 2 случаях рак щитовидной железы был пропущен (ложно-отрицательный результат).
Обсуждение
Для клинического применения, молекулярно-генетическое тестирование должно обладать не только значительной чувствительностью и специфичностью, но и высокой предсказательной ценностью отрицательного результата (ПЦОР) и предсказательной ценностью положительного результата (ПЦПР). Статистически, тест должен иметь ПЦОР около 94% с остаточным риском злокачественности менее 6%, как при цитологическом заключении Bethesda II [3]. По сути, этот показатель будет определять, насколько безопасным будет клиническое наблюдение вместо диагностической опера-
ции. В настоящее время нет единого мнения о том, какое минимальное значение должна иметь положительная предсказательная ценность (ПЦПР) для изменения клинического решения в сторону рекомендации хирургического лечения. Считается, что положительная предсказательная ценность генетического тестирования должна превышать 75%, как при заключении Bethesda V [5]. По нашим данным, специфичность отечественного молекулярно-гене-тического классификатора оказалась 96,4%, чувствительность - 80,9%, ПЦОР - 93,1%, ПЦПР -89,5%, что соответствует заявленным требованиям.
Ретроспективно оценивая результаты проведенного исследования, воздержаться от операций можно было бы у 56 (72,7%) из 77 больных с цитологическим заключением Bethesda IV. При этом остаточный риск злокачественности составил 2,6%, что вполне допустимо.
Заключение
Молекулярно-генетическое тестирование цитологических препаратов с заключением Bethesda IV с помощью отечественного молекулярно-генетиче-ского классификатора, разработанного в ИМКБ СО РАН, может с высокой точностью различать злокачественные и доброкачественные узлы щитовидной железы по материалу, взятому из соскоба окрашенного цитологического препарата, полученного при ТАБ узла щитовидной железы. Его применение позволит значительно снизить количество необоснованных операций.
Лукьянов С.А.
http://orcid.org/0000-0001-5559-9872 Сергийко С.В.
http://orcid.org/0000-0001-6694-9030 Титов С.Е.
http://orcid.org/0000-0001-9401-5737 Веряскина Ю.А.
http://orcid.org/0000-0002-3799-9407
152 ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА
Том 17, № 4. 2019
ЛИТЕРАТУРА
1. Бельцевич Д.Г., Ванушко В.Э., Румянцев П.О., и др. Российские клинические рекомендации по диагностике и лечению вы-сокодифференцированного рака щитовидной железы у взрослых, 2017 год // Эндокринная хирургия. — 2017. — Т. 11, №1. — С. 6-27.
2. Hegedus L. 2004 Clinical practice. The thyroid nodule // N. Engl. J. Med. — 2004. — 351. — P. 1764-1771.
3. Ali S., Cibas E. The Bethesda System for Reporting Thyroid Cytopathology: Definitions, Criteria, and Explanatory Notes. — 2nd ed. — New York: Springer, 2018.
4. Baloch Z.W., et al. Diagnostic terminology and morphologic criteria for cytologic diagnosis of thyroid lesions: a synopsis of National Cancer Institute Thyroid Fine-Needle Aspiration State of the Science Conference // Diagn. Cytopathol. — 2008. — 36. — P. 425-437.
5. Genetic testing for indeterminate thyroid cytology: review and meta-analysis / S. Vargas-Salas, José R. Martinez, S. Urra, et al. // Endocr. Relat. Cancer. — 2018 Mar. — 25 (3). — P. R163-R177.
Published online 2017 Dec 18. — doi: 10.1530/ERC-17-0405 PMCID: PMC5799829
6. Duick D.S., et al. The Impact of Benign Gene Expression Classifier Test Results on the Endocrinologist — Patient Decision to Operate on Patients with Thyroid Nodules with Indeterminate Fine-Needle Aspiration Cytopathology // Thyroid. — 2012. — 22 (10). — P. 996-1001.
7. Titov S.E., Ivanov M.K., Karpinskaya E.V., et al. miRNA profiling, detection of BRAF V600E mutation and RET-PTC1 translocation in patients from Novosibirsk oblast (Russia) with different types of thyroid tumors // BMC Cancer. — December 2016. — 16. — P. 201.
8. Колесников Н.Н., Титов С.Е., Ахмерова Л.Г., и др. Способ определения доброкачественных и злокачественных новообразований щитовидной железы человека. Патент на изобретение №2548773. Зарегистрирован в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 24.03.2015
