Молекулярно-генетические маркеры агрессивности папиллярного рака щитовидной железы

Лукьянов С. А.; Сергийко С. В.; Титов С. Е.; Веряскина Ю. А.; Важенин А. В.

2019, том 22, № 3 УДК 616.441-008.63

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ АГРЕССИВНОСТИ ПАПИЛЛЯРНОГО РАКА ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Лукьянов С. А.1, Сергийко С. В.1, Титов С. Е.2'3, Веряскина Ю. А. 2, Важенин А. В.4

ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России Южно-Уральский государственный медицинский университет, 454092, ул. Воровского 64, Челябинск, Россия

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной и клеточной биологии Сибирского отделения Российской академии наук (ИМКБ СО РАН), 630090 проспект Академика Лаврентьева д. 8/2, Новосибирск, Россия

3 Акционерное общество «Вектор-Бест», 630117, Научно-производственная зона, корпус 36, Новосибирск, Россия

4 ГБУЗ «Челябинский областной клинический центр онкологии и ядерной медицины», 454092, Воровского 64, Челябинск, Россия Для корреспонденции: Лукьянов Сергей Анатольевич кандидат медицинских наук, ассистент кафедры общей и детской хирургии «Южно-Уральского государственного медицинского университета», e-mail: 111lll@mail.ru

Для корреспонденции: Sergey Lukyanov, PhD., assistant Professor, Department of General and pediatric surgery, South Ural state medical University, Chelyabinsk, Russian Federation, e-mail: 111lll@mail.ru

Information about authors:

Lukyanov S. A., http://orcid.org/0000-0001-5559-9872 Sergiyko S. V., http://orcid.org/0000-0001-6694-9030 Titov S. E., http://orcid.org/0000-0001-9401-5737 Veryaskina Y. A., http://orcid.org/0000-0002-3799-9407 Vazhenin A.V., https://orcid.org/0000-0002-7807-8479

РЕЗЮМЕ

Папиллярный рак щитовидной железы (ПРЩЖ) является клинически гетерогенным заболеванием -встречаются как неагрессивные длительно существующие опухоли, так и карциномы, обладающие экстратиреоидным ростом способные к быстрому метастазированию. В настоящее время установлено, что агрессивность опухолевого процесса во многом зависит не столько от наличия специфических мутаций, сколько от посттранскрипционной регуляции генной экспрессии. Основу этой регуляции составляют различные микроРНК. Информации о связи между особенностями клинического течения ПРЩЖ с экспрессией специфических микроРНК в настоящее время недостаточно. В этом исследовании изучена зависимость между различными микроРНК и наличием мутации BRAF и проведен анализ связи между их уровнями и клиническими характеристики ПРЩЖ. Было установлено, что уровни экспрессии 11 из них связаны с одной или несколькими клиническими характеристиками агрессивности опухоли, такими как экстратиреоидный рост, размеры опухолевого узла, мультицентричность, наличие регионарных и отдаленных метастазов. Две микроРНК - miR-221 и miR-7 ассоциированы со всеми признаками агрессивности ПРЩЖ, что необходимо учитывать при выборе хирургической тактики у больных с интратиреоидными солитарными опухолями щитовидной железы.

Ключевые слова: папиллярный рак щитовидной железы, молекулярно-генетические маркеры, микроРНК

MOLECULAR GENETIC MARKERS OF PAPILLARY THYROID CANCER AGGRESSIVENESS

Lukyanov S. A.\ Sergiyko S. V.\ Titov S. E.M, Veryaskina Y. АЛ Vazhenin A. V.4

'South Ural state medical University, Chelyabinsk, Russia

institute of molecular and cellular biology, Siberian branch of the Russian Academy of science, Chelyabinsk, Russia 3Vector-best company, Chelyabinsk, Russia

4Chelyabinsk regional clinical center of Oncology and nuclear medicine, Chelyabinsk, Russia

SUMMARY

Papillary thyroid cancer (PTC) is a clinically heterogeneous disease - there are both non-aggressive long-existing tumors and carcinomas with extrathyroid growth capable of rapid metastasis. Currently, it is established that the aggressiveness of the tumor process largely depends not so much on the presence of specific mutations, but on the post-transcriptional regulation of gene expression. The basis of this regulation are different microRNAs. Information about the relationship between the clinical course of PTC with the expression of specific miRNAs is not sufficient at present. This study examined the relationship between different microRNAs and the presence of the BRAF mutation and analyzed the relationship between their levels and the clinical characteristics of PTC. Expression levels of 11 of them were found to be associated with one or more clinical characteristics of tumor aggressiveness, such as extrathyroid growth, tumor node size, multicentricity, presence of regional and distant metastases. Two microRNAs-miR-221 and miR-7 are associated with all signs of aggressiveness of PTC, which should be taken into account when choosing surgical tactics in patients with intrathyroid solitary thyroid tumors.

Key words: papillary thyroid cancer, molecular genetic markers, microRNA

Рак щитовидной железы (РЩЖ) является наиболее частой злокачественной опухолью эндокринной системы человека. Папиллярный рак (ПР) составляет около 80% среди всех карцином щитовидной железы [1]. Основным методом лечения ПРЩЖ является хирургический. Несмотря на то, что своевременное адекватное хирургическое лечение обеспечивает 5-летнюю выживаемость от 91 до 98%, в 20-50% случаев после первичной операции выявляется метастатическое поражение регионарных лимфоузлов шеи [2; 3; 4]. У 5-20% пациентов, перенесших тиреоидэктомию, развивается местный рецидив опухоли [5; 6]. Длительно существующий ПРЩЖ может снижать дифферен-цировку или полностью её утрачивать, переходя в агрессивные анапластические формы [6]. Прогнозировать агрессивность ПРЩЖ в настоящее время позволяют различные клинико-морфологические факторы: гистологический подтип, экстратиреоид-ный рост, размеры опухолевого узла, мультицен-тричность, наличие регионарных и отдаленных метастазов. Некоторые из этих данных становятся доступными лишь во время или после операции, что снижает их прогностическую ценность у больных с солитарными интратиреодными опухолями. С целью оценки злокачественного потенциала опухоли до операции обсуждали возможность использования различных биомаркеров, таких как тиреоглобулин [7; 8], галектин-3 [9], СК19, НВМЕ-1 [10] и др., однако их прогностическая ценность оказалась очень низкой.

В последние годы активно обсуждается роль малых некодирующих регуляторных РНК в онко-генезе различных опухолей. МикроРНК играют важную роль в различных биологических процессах, включая развитие, дифференцировку, апоптоз и пролиферацию клеток [11]. В зависимости от биологического действия, микроРНК могут выступать в роли онкогенов или онкосупрессоров. Уже известно более 2000 регуляторных человеческих микроРНК, и скорее всего их количество будет увеличиваться [12].

В зарубежных исследованиях установлено, что некоторые микроРНК (ш1К.) были сверхэкспрес-сированы или подавлены при ПРЩЖ. Уровни экспрессии определенных микроРНК в тканях опухоли щитовидной железы оказались связаны с кли-нико-анатомическими характеристиками, такими как размер опухоли, многофокусность, инвазив-ность, экстратиреоидное распространение, а также с наличием регионарных и отдаленных метастазов [13]. Тем не менее, возможность использования микроРНК в диагностических и лечебных целях в настоящее время все еще находится на этапе изучения [18; 19; 20].

Ранее проведенные исследования подтвердили эффективность отечественного генетического

молекулярного классификатора, разработанного ИМКБ СО РАН, в дооперационной диагностике рака щитовидной железы. Данный метод диагностики основан на определении уровней экспрессии специфических микроРНК в цитологическом материале, полученном при ТАБ из узлов ЩЖ [21]. Настоящее исследование направлено на изучение прогностической ценности молекулярно-генетиче-ского исследования для определения потенциальной агрессивности ПРЩЖ.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Было отобрано 128 гистологических препаратов ПРЩЖ у пациентов, оперированных в Областном центре эндокринной хирургии (МАУЗ ОТКЗ ГКБ№1) и Областном клиническом центре онкологии и ядерной медицины (ЧОКЦО и ЯМ) г. Челябинска в 2018 году. Самому младшему пациенту было 18 лет, старшему 80, медиана возраста 52 (37,8 - 72), соотношение мужчин и женщин 1:7. Информированное согласие на проведение молекуляр-но-генетического исследования было получено от всех пациентов. Протокол исследования утвержден этическим комитетом ФГБОУ ВО ЮУГМУ Минздрава России. Образцы тканей обрабатывали по стандартному протоколу, - фиксировали в 10% нейтральном формалине, обезвоживали в градуированной серии спиртов, очищали в ксилоле и заливали в парафин. Парафиновые срезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Анализ всех образцов проводили штатные врачи-патологоанатомы ГКБ№1 и ЧОКЦО и ЯМ г. Челябинска с помощью световой микроскопии. В зависимости от клинико-анатомических характеристик ПРЩЖ гистологические препараты попарно были разделены на группы сравнения: по размеру - опухолевый узел менее 1,0 см (микрокарциномы п=56, 43,8%) и узел более 1,0 см (п=72, 56,2%); по местной распространенности опухоли - с экстратиреоидным ростом (п=41, 32%) и интратиреоидный рост (п=87, 68%); по многофокусности - многофокусные опухоли (п=21, 16,4%) и солитарные опухоли (п=107, 83,6%); по наличию метастазов - без метастазов (п=70, 54,7%), регионарные метастазы (п=40, 31,3%), отдаленные метастазы (п=18, 14%).

В дальнейшем парафиновый блок с образцом ПРЩЖ отправлялся в Институт молекулярной и клеточной биологии сибирского отделения Российской академии наук (ИМКБ СО РАН), где проводилось молекулярно-генетическое исследование. Выбор набора микроРНК осуществлялся на основании литературных данных и экспериментальных разработок ИМКБ СО РАН [21]. В итоге был сформирован список из 13 микроРНК-маркеров злокачественности рака щитовидной железы (ш1К.-144, -145, -155, -146Ь, -183, -199Ь, -221, -223, -31, -375, -451а, -551Ь, -7). Для каждой микроРНК отдель-

но проводили реакцию обратной транскрипции с последующей ПЦР-РВ [21]. Для каждого образца анализ проводили в одном повторе. Нормировку содержания микроРНК проводили на геометрическое среднее содержание трех референсных микроРНК с помощью метода 2-ACq. В каждой клинической группе пациентов проводили попарное сравнение уровней экспрессии микроРНК. Повышение уровня экспрессии онкогенных микроРНК (miR-146b, miR-221, miR-31, miR-375, miR-551b, miR-155, miR-183 и miR-223) и/или снижение уровня экспрессии онкосупрессорных микроРНК (miR-144, miR-451a, miR-7, miR-145 и miR-199) считали прогностическим фактором агрессивного течения ПРЩЖ. Статистическую обработку данных проводили в программе STATISTICA 9.1 (StatSoft Inc., США). Сравнение двух независимых выборок по количественному признаку проводили при помощи критерия Манна-Уитни. Критический уровень значимости был принят равным 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

При сопоставлении клинико-анатомических характеристик ПРЩЖ с результатами молеку-лярно-генетического анализа были получены статистически значимые различия. Из 13 исследованных микроРНК, уровень экспрессии онко-

генных miR-146b, miR- 221 и miR-375 был выше в опухолях более 1,0 см в диаметре. В них же оказался снижен уровень онконкосупрессорных микроРНК miR-145, miR-199 и miR-7 по сравнению с микрокарциномами щитовидной железы. При многофокусном ПРЩЖ в сравнении с солитар-ными опухолями значительно выше оказалось содержание онкогенных микроРНК miR-221 и miR-31 и снижен уровень онкосупрессорной микроРНК - miR-7. Экстратиреоидный ПРЩЖ сочетался с более высоким уровнем экспрессии miR-146b, miR-221 и miR-551b и более низким уровнем miR-144, miR-155, miR-451а и miR-7. Более высокий уровень онкогенной miR-221 и низкий уровень онкосупрессорных микроРНК miR-144, miR-451а и miR-7 отмечены у больных с регионарными и отдалёнными метастазами (таблица 1).

Уровни экспрессии miR-7 и miR-221 во всех клинических группах ПРЩЖ имели статистически значимые различия. Так, медиана уровня экспрессии онкосупрессорной miR - 7 была в 2,5 раза ниже в крупных узлах (р=0,00017), в 3 раза ниже в многофокусных опухолях (р=0,008), в 3,5 раза ниже при экстратиреодном росте опухоли (р=0,00001) и в 5 раз ниже (р=0,00015) у больных с отдаленными метастазами ПРЩЖ (рисунок 1).

Рис 1. Показатели экспрессии онкосупрессорной т1Р - 7 в зависимости от клиническо-анатомических характеристик ПРЩЖ: 1. Микрокарциномы, 2. Опухоли более 1,0 см в диаметре, 3. Солитарные опухоли, 4. Многофокусные опухоли, 5. Интратиреодная опухоль, 6. Экстратиреоидный рост опухоли, 7. Опухоли Т1-4Ы0М0, 8. опухоли Т1-4Ы1М0, 9. опухоли Т1-4Ы1М1.

Медиана уровня экспрессии онкогенной miR - 221 была в 1,5 раза выше в крупных узлах (карциномы, более 1,0 см, р=0,015), в 1,8 раза выше в многофокусных опухолях (р=0,01), в 1,7 раза выше при экстратиреодном росте (р=0,006) и в 2,5 раз выше (р=0,036) у больных с отдаленными метастазами ПРЩЖ (рисунок 2).

Также было изучено влияние BRAF мутации в опухоли на клинико-анатомические характеристики ПРЩЖ (таблица 2).

Статистически значимых различий по наличию или отсутствие мутации BRAF в зависимости от клинических проявлений ПРЩЖ выявлено не было. Мутация BRAF присутствовала в равной степени (от 63,2% до 75%) во всех сравниваемых группах больных.

ОБСУЖДЕНИЕ

Малые некодирующие регуляторные РНК участвуют в подавлении активности генов - они ком-

Таблица 1

Показатели экспрессии микроРНК при ПРЩЖ в зависимости от клинико-анатомических характеристик

микроРНК Микрокарциномы (менее 1,0 см) Опухоли, размером более 1,0 см Р

т1М45 0,27 [0,14-0,44] 0,15 [0,06-0,23] 0,001

т1М46Ь 3,58 [1,4-5,8] 8,24 [3,4-13,1] 0,000015

т1М99 0,09 [0,04-0,14] 0,065 [0,02-0,11] 0,036

т1В-221 0,56 [0,19-0,95] 0,85 [0,41-1,34] 0,015

т1В-375 0,09 [0,02-0,14] 0,16 [0,07-0,3] 0,002

т1В-7 0,1 [0,03-0,27] 0,04 [0,01-0,09] 0,00017

микроРНК Одиночная опухоль Многофокусная опухоль

т1В-221 0,67 [0,26-1,03] 1,25 [0,6-1,7] 0,01

т1В-31 0,3 [0,16-0,75] 0,55 [0,4-1,0] 0,002

т1В-7 0,06 [0,02-0,27] 0,02 [0,01-0,19] 0,008

микроРНК экстратиреодного роста нет экстратиреоидный рост есть

т1М44 0,003 [0,001-0,16] 0,001 [0,0006-0,004] 0,008

т1М4бЬ 4,43 [1,8-7,3] 8,93 [4,45-12,5] 0,006

т1М55 0,14 [0,04-0,25] 0,05 [0,03-0,1] 0,003

т1В-221 0,58 [0,22-0,98] 0,98 [0,47-1,38] 0,006

т1В-451а 2,2 [0,0-163] 1,35 [0,42-5,1] 0,014

т^-551Ь 0,04 [0,01-0,09] 0,07 [0,04-0,12] 0,03

т1В-7 0,07 [0,03-0,25] 0,02 [0,009-0,05] 0,00001

микроРНК 1. нет метастазов 2. регио нарные мтс 3. отда ленные мтс р1,2 р13 р23

т1М44 0,003 [0,001-0,2] 0,002 [0,00080,009] 0,001 [0,00060,002] 0,018 0,00001 0,02

т1В-221 0,5 [0,20,9] 0,9 [0,4-1,2] 1,32 [0,81,6] 0,012 0,036 0,15

т1В-451а 2,53[1,0-270] 1,4 [0,6-7,3] 1,3 [0,4-2,0] 0,019 0,009 0,22

т1В-7 0,1 [0,0350,26] 0,04 [0,010,06] 0,02 [0,0080,03] 0,0001 0,00015 0,14

плементарно спариваются с участками матричной РНК и ингибируют их трансляцию. Тщательное изучение степени, в которой микроРНК выступают в роли онкогена или онкосупрссора, имеет решающее значение для определения их глобальной роли в развитии любой опухоли, в том числе и ПРЩЖ [14].

В настоящее время установлено, что размер опухоли связан с уровнем экспрессии онкогенной ш1К.-221 [14]. По нашим данным, высокое содержание ш1К.-221 было связано не только с размером

опухоли, но и с экстратиреодным ростом, много-фокусностью и наличием метастазов.

Также было показано, что высокие уровни ш1К.-146а демонстрируют положительную корреляцию с высокой стадией ТЫМ и ассоциируются с мультицентричным характером роста и наличием метастазов ПРЩЖ [13, 16]. В нашем исследовании повышение уровня ш1К.-14бЬ ассоциировалось с большим размером и экстратиреоидным ростом опухоли, при этом статистически значимых различий по мультицентричности и наличию мета-

Рис 2. Повышение экспрессии онкогенной т1Р - 221 в зависимости от клиническо-анатомических характеристик ПРЩЖ: 1. Микрокарциномы, 2. Опухоли более 1,0 см в диаметре, 3. Солитарные опухоли, 4. Многофокусные опухоли, 5. Интратиреодная опухоль, 6. Экстратиреоидный рост опухоли, 7. Опухоли Т1-4Ы0М0, 8. опухоли Т1-4Ы1М0, 9. опухоли Т1-4Ы1М1.

Таблица 2

Количество «BRAF положительного» ПРЩЖ в сравниваемых клинико-анатомических группах

Характеристика опухоли BRAF+ абс (%) Характеристика опухоли BRAF+ абс (%)

Микрокарциномы (узел менее 1,0 см) 36 (64,3%) Эксгратиреойдный рост 30 (73,2%)

Опухолевый узел более 1,0 см 53 (73,6%) Интратиреодная опухоль 55 (63,2%)

Многофокусные опухоли 14 (66,7%) Опухоль без метастазов 47 (67,1%)

Солитарная опухоль 76 (71%) Опухоль с регионарны метастазированием 30 (75%)

Опухоль с отдаленными метастазами 12 (67%)

стазов, в отличии от зарубежных авторов, мы не нашли.

Экстратиреоидный рост опухоли и наличие ло-корегионарных метастазов по данным Peng Y (2014 г.) ассоциирован с более высокими уровнями miR-199b [15]. Мы не получили убедительных данных о влиянии miR-199b на распространенность опухоли и наличие регионарных метастазов.

Неожиданно информативным в качестве прогностического маркера агрессивности ПРЩЖ оказалось значительное снижение уровня miR-7. По зарубежным данным, эта микроРНК был положительно связана лишь с более высоким риском рециидива [17]. По нашим данным эта микроРНК отрицательно коррелировала с размером, экстра-тиреоидным ростом опухоли, и агрессивностью опухоли, наличием метастазов и мультицентрич-ным ПРЩЖ.

miR-144 и miR-375 считаются онкогенами при медуллярном раке щитовидной железы [11]. В на-

шем исследовании уровень miR-375 при ПРЩЖ оказался статистически выше в узлах более 1,0 см, а уровень miR-144 был снижен при экстратиреоид-ном росте опухоли и с регионарными метастазами.

miR-145, miR-31 и miR-551b в настоящее время описаны лишь в качестве биомаркеров ПРЩЖ [17]. Результаты проведенного анализа дополнительно указывают и на прогностическую ценность этих микроРНК для оценки агрессивности ПРЩЖ. Так, уровень экспрессии miR-145 оказался выше в микрокарцномах, miR-31 в многофокусных опухолях, а miR-551b при экстратиреодном росте опухоли.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящем исследовании, изучено 13 различных микроРНК и наличие мутации BRAF и проведен анализ связи между их уровнями и клиническими характеристики ПРЩЖ. Было установлено, что уровни экспрессии онкогенных miR-146b,

miR-221, miR-31, miR-155, miR-375, miR-551b и он-косупрессорных miR-145, miR-199, miR-7, miR-451a в тканях ПРЩЖ связаны с одной или несколькими клиническими характеристиками агрессивности опухоли, такими как экстратиреоидный рост, размеры опухолевого узла, мультицентричность, наличие регионарных и отдаленных метастазов. Две из них - miR-221 и miR-7 ассоциированы со всеми признаками агрессивности ПРЩЖ, что необходимо учитывать при выборе хирургической тактики у больных с интратиреоидными солитарными опухолями щитовидной железы.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.

ЛИТЕРАТУРА

1. Pillai S., Gopalan V., Smith R, Lam A. Diffuse sclerosing variant of papillary thyroid carcinoma - an update of its clinicopathological features and molecular biology. Crit Rev Oncol Hematol. 2015 Apr;94(1):64-73. doi: 10.1016/j.critrevonc.2014.12.001.

2. Goldfarb M., Casillas J. Unmet information and support needs in newly diagnosed thyroid cancer: comparison of adolescents/young adults (AYA) and older patients, J Cancer Surviv. 2014 Sep;8(3):394-401. doi: 10.1007/s11764-014-0345-7.

3. Donatini G., Castagnet M., Desurmont T., Rudolph N., Othman D., Kraimps L. Partial thyroidectomy for papillary thyroid microcarcinoma: Is completion total thyroidectomy indicated? World J Surg. 2016 Mar;40(3):510-5. doi: 10.1007/s00268-015-3327-7.

4. Lee Y.S., Lim H., Chang H.S., Park C.S. Papillary thyroid microcarcinomas are different from latent papillary thyroid carcinomas at autopsy, J Korean Med Sci. 2014 May;29(5):676-9. doi: 10.3346/ jkms.2014.29.5.676.

5. Grant C.S., Papillary thyroid cancer: strategies for optimal individualized surgical management, Clin Ther. 2014 Jul 1;36(7):1117-26. doi: 10.1016/j. clinthera.2014.03.016.

6. Zhu W., Zhong M., Ai Z., Systematic evaluation of prophylactic neck dissection for the treatment of papillary thyroid carcinoma, Jpn J Clin Oncol. 2013 Sep;43(9):883-8. doi: 10.1093/jjco/hyt087.

7. Mourao G.F., Rosario P.W., Calsolari M.R., Low postoperative nonstimulated thyro-globulin as a criterion to spare radioiodine ablation, Endocr Relat Cancer. 2016 Jan;23(1):47-52. doi: 10.1530/ERC-15-0458.

8. Rosario P.W., Furtado S., Mourao G.F., Calsolari M.R., Patients with papillary thyroid carcinoma at intermediate risk of recurrence according to american thyroid association criteria can be reclassified as low risk when the postoperative

thyroglobulin is low, Thyroid. 2015 Nov;25(11):1243-8. doi: 10.1089/thy.2015.0294.

9. Tang W., Huang C., Tang C., Xu J., Wang H., Galectin-3 may serve as a potential marker for diagnosis and prognosis in papillary thyroid carcinoma: a metaanalysis, Onco Targets Ther. 2016 Jan 22;9:455-60. doi: 10.2147/0TT.S94514.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

10. Liu Z., Yu P., Xiong Y., Zeng W., Li X., Maiaiti Y., Wang S., Song H., Shi L., Liu C., Cheng B., Zhang B., Ming J., Dong F., Ge H., Nie X., Huang T. Significance of CK19, TPO, and HBME-1 expression for diagnosis of papillary thyroid carcinoma, Int J Clin Exp Med. 2015 Mar 15;8(3):4369-74

11. Mansoori B, Mohammadi A, Shirjang S, Baradaran B., Micro-RNAs: The new potential biomarkers in cancer diagnosis, prognosis and cancer therapy, Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2015 Oct 16;61(5):1-10.

12. He H., Jazdzewski K., Li W., Liyanarachchi S., Nagy R., Volinia S., Calin G.A., Liu C.G., Franssila K., Suster S., Kloos R.T., Croce C.M. The role of microRNA genes in papillary thyroid carcinoma. Proc Natl Acad Sci U S A. 2005 Dec 27;102(52):19075-80.

13. Acibucu F., Dokmetas H. S., Tutar Y., Elagoz §., Kilicli F. Correlations between the expression levels of micro-RNA146b, 221, 222 and p27Kip1 protein mRNA and the clinicopathologic parameters in papillary thyroid cancers. Experimental and Clinical Endocrinology & Diabetes. 2014;122:137-143. doi: 10.1055/s-0034-1367025.

14. Sun M., Fang S., Li W., Li C., Wang L., Wang F., Wang Y. Associations of miR-146a and miR-146b expression and clinical characteristics in papillary thyroid carcinoma. Cancer Biomarkers. 2015;15:33-40. doi: 10.3233/CBM-140431.

15. Peng Y., Li C., Luo D. C., Ding J. W., Zhang W., Pan G. Expression profile and clinical significance of microRNAs in papillary thyroid carcinoma. Molecules. 2014;19:11586-11599. doi: 10.3390/ molecules190811586.

16. Chou C.K., Yang K.D., Chou F.F., Huang C.C., Lan Y.W., Lee Y.F, Kang H.Y., Liu R.T. Prognostic implications of miR-146b expression and its functional role in papillary thyroid carcinoma. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 2013;98:E196-E205. doi: 10.1210/jc.2012-2666.

17. Geraldo M. V., Kimura E. T. Integrated analysis of thyroid cancer public datasets reveals role of post-transcriptional regulation on tumor progression by targeting of immune system mediators. PLoS One. 2015;10:1-21. doi: 10.1371/journal.pone.0141726.

18. Mansoori B, Mohammadi A, Shirjang S, Baradaran B., Micro-RNAs: The new potential biomarkers in cancer diagnosis, prognosis and cancer therapy, Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2015 Oct 16;61(5):1-10.

19. Juanchich A, Bardou P, Rué O, Gabillard JC, Gaspin C, Bobe J, Guiguen Y., Characterization of an extensive rainbow trout miRNA transcriptome by next generation sequencing, BMC Genomics. 2016 Mar 1;17:164. doi: 10.1186/s12864-016-2505-9.

20. Mangolini A., Ferracin M., Zanzi M.V., Saccenti E., Ebnaof S.O., Poma V.V., Sanz J.M., Passaro A., Pedriali M., Frassoldati A., Querzoli P., Sabbioni S., Carcoforo P., Hollingsworth A., Negrini M. Diagnostic and prognostic microRNAs in the serum of breast cancer patients measured by droplet digital PCR, Biomark Res. 2015 Jun 6;3:12. doi: 10.1186/s40364-015-0037-0.

21. Titov S.E., Ivanov M.K., Karpinskaya E.V., Tsivlikova E.V., Shevchenko S.P., Veryaskina Y.A., Akhmerova L.G., Poloz T.L., Klimova O.A., Gulyaeva L.F., Zhimulev I.F., Kolesnikov N.N. miRNA profiling, detection of BRAF V600E mutation and RET-PTC1 translocation in patients from Novosibirsk oblast (Russia) with different types of thyroid tumors, BMC Cancer. 2016; 16: 201. doi: 10.1186/s12885-016-2240-2

REFERENCES

1. Pillai S., Gopalan V., Smith R, Lam A. Diffuse sclerosing variant of papillary thyroid carcinoma - an update of its clinicopathological features and molecular biology. Crit Rev Oncol Hematol. 2015 Apr;94(1):64-73. doi: 10.1016/j.critrevonc.2014.12.001.

2. Goldfarb M., Casillas J. Unmet information and support needs in newly diagnosed thyroid cancer: comparison of adolescents/young adults (AYA) and older patients, J Cancer Surviv. 2014 Sep;8(3):394-401. doi: 10.1007/s11764-014-0345-7.

3. Donatini G., Castagnet M., Desurmont T., Rudolph N., Othman D., Kraimps L. Partial thyroidectomy for papillary thyroid microcarcinoma: Is completion total thyroidectomy indicated? World J Surg. 2016 Mar;40(3):510-5. doi: 10.1007/s00268-015-3327-7.

4. Lee Y.S., Lim H., Chang H.S., Park C.S. Papillary thyroid microcarcinomas are different from latent papillary thyroid carcinomas at autopsy, J Korean Med Sci. 2014 May;29(5):676-9. doi: 10.3346/ jkms.2014.29.5.676.

5. Grant C.S., Papillary thyroid cancer: strategies for optimal individualized surgical management, Clin Ther. 2014 Jul 1;36(7):1117-26. doi: 10.1016/j. clinthera.2014.03.016.

6. Zhu W., Zhong M., Ai Z., Systematic evaluation of prophylactic neck dissection for the treatment of papillary thyroid carcinoma, Jpn J Clin Oncol. 2013 Sep;43(9):883-8. doi: 10.1093/jjco/hyt087.

7. Mourao G.F., Rosario P.W., Calsolari M.R., Low postoperative nonstimulated thyro-globulin as a criterion to spare radioiodine ablation, Endocr Relat Cancer. 2016 Jan;23(1):47-52. doi: 10.1530/ERC-15-0458.

8. Rosario P.W., Furtado S., Mourao G.F., Calsolari M.R., Patients with papillary thyroid carcinoma at intermediate risk of recurrence according to american thyroid association criteria can be reclassified as low risk when the postoperative thyroglobulin is low, Thyroid. 2015 Nov;25(11):1243-8. doi: 10.1089/thy.2015.0294.

9. Tang W., Huang C., Tang C., Xu J., Wang H., Galectin-3 may serve as a potential marker for diagnosis and prognosis in papillary thyroid carcinoma: a meta-analysis, Onco Targets Ther. 2016 Jan 22;9:455-60. doi: 10.2147/0TT.S94514.