CC BY
17
Астраханский медицинский журнал. 2022. Т. 17, № 2. С. 29-35. Astrakhan Medical Journal. 2022. Vol. 17, no. 2. P. 29-35.
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Научная статья
УДК 579.61 1.5.11. - Микробиология (медицинские науки)
doi: 10.48612/agmu/2022.17.2.29.35
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ШТАММОВ BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ПАЦИЕНТОВ С МУКОВИСЦИДОЗОМ, В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Юлия Александровна Бочарова1, Александр Викторович Жестков2, Артем Викторович Лямин2, Ольга Владимировна Кондратенко2, Татьяна Александровна Савинова1, Светлана Вениаминовна Поликарпова3, Наталья ИгоревнаФедорова1, Николай Андреевич Маянский1, Игорь Викторович Чеботарь1
'Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия
2Самарский государственный медицинский университет, Самара, Россия 3Городская клиническая больница № 15 им. О.М. Филатова, Москва, Россия
Аннотация. Представлены выделенные от российских пациентов с муковисцидозом молекулярные характеристики изолятов Burkholderia cepacia complex, включая их клональную принадлежность и носительство генов адаптивной резистентности. Среди представителей Burkholderia cepacia complex, колонизирующих респираторный тракт пациентов с муковисцидозом, преобладающим видом стали изоляты Burkholderia cenocepacia (83 %). Клональная принадлежность буркхолдерий отличалась значительным разнообразием - изоляты принадлежали к 10 сиквенс-типам. Для 3 изолятов Burkholderia cenocepacia были описаны новые сиквенс-типы.
Ключевые слова: Burkholderia cepacia complex, муковисцидоз, антибиотикорезистентность, гены, сиквенс-типы
Для цитирования: Бочарова Ю. А., Жестков А. В., Лямин А. В., Кондратенко О. В., Савинова Т. А., Поликарпова С. В., Федорова Н. И., Маянский Н. А., Чеботарь И. В. Молекулярная эпидемиология штаммов Burkholderia cepacia complex, выделенных от пациентов с муковисцидозом, в Российской Федерации // Астраханский медицинский журнал. 2022. Т. 17, № 2. С. 29-35. doi: 10.48612/agmu/2022.17.2.29.35.
ORIGINAL INVESTIGATIONS
Original article
MOLECULAR EPIDEMIOLOGY OF BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX STRAINS ISOLATED FROM PATIENTS WITH CYSTIC FIBROSIS IN THE RUSSIAN FEDERATION
Yuliya A. Bocharova1, Aleksandr V. Zhestkov2, Artem V. Lyamin2, Olga V. Kondratenko2, Tatiana A. Savinova1, Svetlana V. Polikarpova3, Natalia I. Fedorova1, Nikolay A. Mayansky1, Igor V. Chebotar1
:Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia 2 Samara State Medical University, Samara, Russia 3Filatov Municipal Clinical Hospital, Moscow, Russia
*© Бочарова Ю.А., Жестков А.В., Лямин А.В., Кондратенко О.В., Савинова Т.А., Поликарпова С.В., Федорова Н.И., Маянский Н.А., Чеботарь И.В., 2022
Abstract. Molecular characteristics of Burkholderia cepacia complex isolates isolated from Russian patients with cystic fibrosis are presented, including their clonal affiliation and carrying adaptive resistance genes The most prevalent species of Burkholderia cepacia complex recovered from cystic fibrosis patients was Burkholderia cenocepacia (83 %). Burkholderia strains displayed a high level of clonal diversity - ten sequence types were detected among examined isolates. Three new Burkholderia cenocepacia sequence types were discovered.
Keywords. Burkholderia cepacia complex, cystic fibrosis, antibiotic resistance, genes, sequence type
For citation: Bocharova Yu. A., Zhestkov A. V., Lyamin A. V., Kondratenko O. V., Savinova T. A., Polikarpova S. V., Fedorova N. I., Mayanskiy N. A., Chebotar' I. V. Molecular epidemiology of Burkholderia cepacia complex strains isolated from patients with cystic fibrosis in the Russian Federation. Astrakhan Medical Journal. 2022; 17 (2): 29-35. doi: 10.48612/agmu/2022.17.2.29.35 (In Russ.).
Введение. Бактерии Burkholderia cepacia complex (BCC) принадлежат к числу опасных микроорганизмов, усугубляющих поражение легких при муковисцидозе (МВ) [1]. Часто BCC приводит к развитию смертельно опасного осложнения «cepatiaw-синдрома, которое ассоциировано с прогрессирующим поражением легких и септицемией [2]. Появление BCC-бактерий в респираторных образцах пациентов расценивается в качестве негативного критерия при прогнозировании течения МВ и требует незамедлительной коррекции лечебного процесса [3]. Бактерии BBC способны быстро передаваться от пациента к пациенту, что служит причиной вспышек буркхолдериальной инфекции [4]. Считается, что среди клонов BCC существуют более опасные, так называемые «успешные» клоны, с которыми связано наибольшее количество тяжелых случаев поражения легких при МВ [5]. Именно поэтому исследование молекулярных характеристик, которые являются не только индикаторами тяжести клинического течения и эпидемиологического процесса, но и основой вирулентности и резистентности буркхолдерий, представляет собой актуальную задачу медицинской науки.
Известно, что в странах Западной Европы у пациентов МВ распространены сиквенс-типы (ST) ST218, ST220, ST234, ST280, ST309, ST359, ST363, ST364, глобальное распространение получили ST28 и ST32 [5].
Цель: определить видовую и клональную принадлежность изолятов Burkholderia cepacia complex, выделенных от пациентов с муковисцидозом в Российской Федерации (РФ), а также выявить среди этих изолятов носительство и интегронную организацию генов адаптивной резистентности.
Материалы и методы исследования. Объектами исследования стали штаммы бактерий BCC, выделенные из мокроты и верхних дыхательных путей (мазок со слизистой глубоких отделов задней стенки глотки) пациентов с МВ из 48 регионов РФ в возрасте от 1 года до 33 лет в январе-феврале 2020 г. Общее число обследованных пациентов составило 168 человек, что соответствует 5,3 % от общего числа пациентов с МВ в РФ [6]. Родовую принадлежность штаммов определяли при помощи времяпролетной масс-спектрометрии с матрично-активированной лазерной десорбцией/ионизацией (MALDI-TOFMS, Vitek-MS, bioMereux).
Бактериальную ДНК выделяли из культур исследуемых штаммов BCC, выращенных на кровяном агаре («Becton Dickinson», США), с использованием наборов QIAamp DNA Mini Kit («Qiagen», Нидерланды ) по протоколу фирмы-производителя. Образцы ДНК хранили при -20° C.
ДНК-библиотеки готовили при помощи ультразвуковой фрагментации (Covaris) бактериальной ДНК (400 нг) с последующей репарацией концевых последовательностей и лигированием адаптеров (MGI). Для измерения концентрации бактериальной ДНК и ДНК-библиотек использовали прибор Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific, США). Очистку ДНК-библиотек проводили с применением магнитных частиц Agencourt AMPure XP («Beckman Coulter», США).
Полногеномное секвенирование осуществляли на платформе MGISEQ-2000 (MGI) с длиной прочтений 250 пар оснований. Для сборки бактериального генома использовали программу SPAdes 3.14 [7]. Для контроля полноты сборки и исключения возможности контаминации применяли вебсервер Contest16S и программу CheckM [8, 9]. Оценку качества сборки проводили при помощи QUAST 5.0 [10]. Для анализа геномов использовали сервисы Galaxy, ResFinder и базу данных Integrall (https://cge.cbs.dtu.dk/services/ResFinder; https://usegalaxy.org.au; http://integrall.bio.ua.pt). Видовую идентификацию проводили на основе определения аллелей генов gyrBrnecA [11]. Сиквенс-тип изоля-тов определяли в соответствии со стандартной схемой мультилокусного сиквенс-типирования для бактерий BCC с использованием данных полногеномного секвенирования (https://pubmlst.org/organisms/burkholderia-cepacia-complex).
Результаты исследования и их обсуждение. Бактерии ВСС были обнаружены у 13/168 (7,7 %) пациентов, при этом у 9 пациентов было выделено по 1 изоляту, у 3 обследованных - по 2 изолята, у 1 больного - 3 штамма (табл.).
Таблица. Виды и сиквенс-типы бактерий Burkholderia cepacia complex, выделенных от пациентов с МВ Table. Species and sequence types of Burkholderia cepacia complex bacteria isolated from patients with cystic fibrosis
Номер пациента Номер штамма Вид Сиквенс-тип (ST)
1 321 B. cenocepacia 709
2 698/1 B. cenocepacia 241
3 699/1 B. cenocepacia 862
4 1/1 B. cenocepacia 1880
5 52/2 B. cenocepacia SLV 1742*
6 57/3 B. stabilis 1565
57/4 B. stabilis 1565
7 85/2 B. cenocepacia 208
8 123/3 B. cenocepacia SLV 709*
9 143/2 B. stabilis 627
10 182/1 B. cenocepacia 208
182/2 B. cenocepacia 208
182/3 B. cenocepacia 208
11 261/1 B. cenocepacia 208
12 262/1 B. cenocepacia 643
262/2 B. cenocepacia 643
13 41774/2 B. cenocepacia 709
41774/4 B. cenocepacia 709
Примечание: * - однолокусный вариант
Всего было обнаружено 18 штаммов бактерий ВСС: 15/18 (83%) штаммов принадлежали к виду ВигШоШепа сепосерааа, остальные 3 штамма принадлежали к виду ВигШоШепа stabilis.
Среди исследованных изолятов было выявлено 10 сиквенс-типов: 3 из них обнаружены впервые, 2 из новых сиквенс-типов являлись однолокусными вариантами ^ЦУ) ST709 и ST1742. Один новый ST1880 особенно сильно отличался от известных вариантов, так как его аллельный профиль имел 5 ранее неизвестных последовательностей «hoшe-keepmg»-генов, определяющих ST6: atpD (645), gltB (836), gyrB (1211), phaC (609), ^рВ (764).
Каждый из сиквенс-типов ST1880, ST241, ST627, ST862, SLVST709 и SLVST1742 был представлен одним изолятом, все они были выделены от разных пациентов. ST208 был представлен 5 изолятами, выделенными от 3 пациентов, ST709 - 3 изолятами, выделенными от 2 пациентов (табл.). ST1565 и ST643 были представлены парами изолятов, каждая из которых была выделена от 1 пациента. Число однонуклеотидных полиморфизмов (SNP), выявленных при сравнении геномов штаммов 1 сиквенс-типа, выделенных от 1 пациента, было > 20, что подтверждало штаммовое различие изолятов.
У 4 штаммов (В. сепосерааа 41774/2, 41774/4, 123/3 и 321) были обнаружены гены адаптивной резистентности - гены аминогликозидфосфотрансфераз АРН(3")-Ш и АРН(6)-И. У штамма В. сепосерааа 321, помимо генов аминогликозидфосфотрансфераз, обнаружены гены аминоглико-зидмодифицирующего фермента ANT(2'')-Ia и устойчивой к сульфаниламидам дигидроптероатсин-тазы ^и11). Гены ant(2'')-Ia(aadB) и sul1 находились в составе интегрона класса 1. Интегрон состоял из трех частей: вариабельного региона и 5'- и 3'-консервативных сегментов (рис.). Вариабельный регион был представлен генной кассетой аМ(2'')-1а и имел размер 750 пар оснований; 5'-консервативный сегмент был представлен геном интегразыШ!, 3'-консервативный сегмент - генами дасЕД1, sul1 и открытой рамкой считывания о^5.
intll ant(2")-la > IqacEàl
sull
ORF S
J L
j i_
5'-консервативный Вариабельный регион.
Рис. Строение ап^2'')-1а-несущего интегрона, обнаруженного в геноме штамма Burkholderia cenocepacia 321 Fig. Structure of the ant(2'')-Ia-bearing integron found in the genome of Burkholderia cenocepacia 321 strain
Примечание: серым цветом показаны консервативные сегменты интегрона, белым - вариабельный регион
В проведенном исследовании бактерии BCC были обнаружены у 7,7 % пациентов с МВ, что соответствует данным отечественных и европейских исследований, однако превышает соответствующий показатель, зарегистрированный среди пациентов с МВ в США [6, 12, 13]. Видовой состав исследованных бактерий BCC, хотя и был менее разнообразен, не отличался в количественном отношении от результатов отечественных работ предыдущих лет. По данным российских авторов, преобладающим видом среди бактерий BCC, выделенных от пациентов с МВ, является вид B. cenocepacia (45,3-85,5 %), доля каждого из других видов (Burkholderia stabilis, Burkholderia multivorans, Burkholderia vietnamiensis, Burkholderia contaminans) составляет не более 28 % [14, 15]. В разных странах преобладают разные виды бактерий BCC, например, в Аргентине у пациентов с МВ чаще всего высевают B. contaminans, в Великобритании - B. multivorans [16, 17].
В соответствии с базой данных PubMLST, большинство выявленных сиквенс-типов ранее уже были зарегистрированы у российских пациентов с МВ
(https://pubmlst.org/bigsdb?db=pubmlst_Bcc_isolates&page=query). Исключение составили впервые выявленные на территории РФ ST643, ST1565 и новые сиквенс-типы ST1880, SLV ST709 и SLV ST1742. Один из обнаруженных сиквенс-типов - ST709 - имеет доказанное эпидемическое значение для пациентов с МВ [14].
Примечательным результатом проведенного исследования стало обнаружение у нескольких пациентов более 1 штамма бактерий BCC, при этом штаммы, выделенные от 1 пациента, принадлежали к 1 сиквенс-типу. В исследовании I.N. Silva и соавторов на примере B. multivorans показано, что бактерии BCC непрерывно эволюционируют в дыхательной системе пациентов с МВ [18]. Полученные в представленном исследовании результаты косвенно подтверждают, что выделение нескольких штаммов бактерий BCC от 1 пациента является результатом эволюции внутри дыхательных путей, а не следствием колонизации новыми штаммами из окружающей среды или от других пациентов.
Обнаруженные у исследованных изолятов гены адаптивной резистентности aph(3")-Ib, aph(6)-Id,ant(2'')-Ia (aadB) и sull, в соответствии с базой данных CARD, ранее были описаны у бактерий BCC (https://card.mcmaster.ca/home). Ген ant(2'')-Ia (aadB) был выявлен у штамма BCCNF912624 в составе интегрона класса 1, как и в данном исследовании. Однако, в отличие от обнаруженного интегрона, содержащего только 1 генную кассету ant(2'')-Ia, интегрон, описанный в базе Genbank, содержал 3 генные кассеты ant(2'')-Ia, aac6-II и blaPSE_i (номер GenBank HQ880250.1). Консервативные сегменты интегрона класса 1, выявленного в представленной работе, имели классическое строение. В состав 5'-консервативного сегмента входил ген интегразы intll, 3'-консервативный сегмент состоял из 3 генов: гена qacEА1, продукт которого представляет собой неполную версию белка, обеспечивающего устойчивость к детергентам, гена дигидроптероатсинта-зы, устойчивой к сульфаниламидам (sull), и открытой рамки считывания orf5, предположительно кодирующей ацетилтрансферазу [19]. Наиболее близкий по строению интегрон In7 был детектирован в составе плазмиды pKS77, описанной в исследовании H. Heuer и соавторов [20].
Заключение. Исследование показало, что среди представителей Burkholderia cepacia complex, колонизирующих респираторный тракт пациентов с муковисцидозом, преобладающим видом были изоляты Burkholderia cenocepacia (83 %). Клональная принадлежность Burkholderia cepacia complex отличалась значительным разнообразием - изоляты принадлежали к 10 сиквенс-типам. В работе получены косвенные доказательства дивергентной эволюции буркхолдерии внутри дыхательных путей, приводящей к образованию новых штаммов.
Раскрытие информации. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Disclosure. The authors declare that they have no competing interests.
Вклад авторов. Авторы декларируют соответствие своего авторства международным критериям ICMJE. Все авторы в равной степени участвовали в подготовке публикации: разработка концепции статьи, получение и анализ фактических данных, написание и редактирование текста статьи, проверка и утверждение текста статьи.
Authors' contribution. The authors declare the compliance of their authorship according to the international ICMJE criteria. All authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work.
Источник финансирования. Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства здравоохранения Российской Федерации по Государственному заданию «Молекулярно-генетические механизмы возникновения и утраты антибиотикорезистентности у актуальных оппортунистических патогенов» (ЕГИСУ НИОКТР № 121060200152-8).
Funding source. The study was supported by the Ministry of Health of the Russian Federation (Project ID121060200152-8).
Список источников
1. Jones A. M., Dodd M. E., Govan J. R., Barcus V, Doherty C. J., Morris J., Webb A. K. Burkholderia cenocepacia and Burkholderia multivorans: influence on survival in cystic fibrosis // Thorax. 2004. Vol. 59, no. 11. P. 948-951.
2. Nash E. F., Thomas A., Whitmill R., Rashid R., Barker B., Rayner R. J., Whitehouse J. L., Honeybourne D. «Cepacia syndrome» associated with Burkholderia cepacia (genomovar I) infection in an adolescent with cystic fibrosis // Pediatric pulmonology. 2011. Vol. 46, no. 5. P. 512-514.
3. Lynch J. P. Burkholderia cepacia complex: impact on the cystic fibrosis lung lesion // In Seminars in respiratory and critical care medicine. 2009. Vol. 30, no. 5. P. 596-610.
4. Whiteford M. L., Wilkinson J. D., McColl J. H., Conlon F. M., Michie J. R., Evans T. J., Paton J. Y. Outcome of Burkholderia (Pseudomonas) cepacia colonisation in children with cystic fibrosis following a hospital outbreak // Thorax. 1995. Vol. 50, no. 11. P. 1194-1198.
5. Drevinek P., Mahenthiralingam E. Burkholderia cenocepacia in cystic fibrosis: epidemiology and molecular mechanisms of virulence // Clinical Microbiology and Infection. 2010. Vol. 16, no. 7. P. 821-830.
6. Данные с сайта Всероссийской ассоциации для больных муковисцидозом. Регистр больных муковис-цидозом в РФ. URL:https://mukoviscidoz.org/doc/registr/site_Registre_2019.pdf.
7. Bankevich A., Nurk S., Antipov D., Gurevich A. A., Dvorkin M., Kulikov A. S., Lesin V. M., Nikolenko S. I., Pham S., Prjibelski A. D., Pyshkin A. V., Sirotkin A. V., Vyahhi N., Tesler G, Alekseyev M. A., Pevzner P. A. SPAdes: a new genome assembly algorithm and its applications to single-cell sequencing // Journal of Computational Biology. 2012. Vol. 19, no. 5. P. 455-477.
8. Lee I., Chalita M., Ha S. M., Na S. I., Yoon S. H., Chun J. ContEst16S: an algorithm that identifies contaminated prokaryotic genomes using 16S RNA gene sequences // International Journal of Systematic and Evolutionary microbiology. 2017. Vol. 67, no. 6. P. 2053-2057.
9. Parks D. H., Imelfort M., Skennerton C. T., Hugenholtz P., Tyson G W. CheckM: assessing the quality of microbial genomes recovered from isolates, single cells, and metagenomes // Genome Research. 2015. Vol. 25, no. 7. P. 1043-1055.
10. Gurevich A., Saveliev V., Vyahhi N., Tesler G QUAST: quality assessment tool for genome assemblies // Bioinformatics. 2013. Vol. 29, no. 8. P. 1072-1075.
11. Tabacchioni S., Ferri L., Manno G, Mentasti M., Cocchi P., Campana S., Ravenni N., Taccetti G, Dalmastri C., Chiarini L., Bevivino A., Fani R. Use of the gyrB gene to discriminate among species of the Burkholderia cepacia complex // FEMS Microbiology Letters. 2008. Vol. 281, no. 2. P. 175-182.
12. Cystic Fibrosis Foundation 2019 report. URL: https://www.cff.org/Research/Researcher-Resources/Patient-Registry/2019-Cystic-Fibrosis-Foundation-Patient-Registry-Snapshot.
13. European Cystic Fibrosis Society Patient Registry Annual Data report 2018. URL: https://www.ecfs.eu/sites/default/files/general-content-files/working-groups/ecfs-patient-registry/ECFSPR_Report_2018_v1.4.pdf.
14. Воронина О. Л., Чернуха М. Ю., Шагинян И. А., Кунда М. С., Аветисян Л. Р., Орлова А. А., Лунин В. Г., Авакян Л. В., Капранов Н. И., Амелина Е. Л., Чучалин А. Г., Гинцбург А. Л. Характеристика генотипов штаммов Burkholderia cepacia complex, выделенных от больных в стационарах Российской Федерации // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2013. № 2. С. 22-30.
15. Кондратенко О. В. Гетерогенность популяции штаммов рода Burkholderia, выделенных от пациентов с муковисцидозом в Российской Федерации // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2019. № 3. С. 71-74.
16. Cipolla L., Rocca F., Martinez C., Aguerre L., Barrios R., Prieto M. Prevalence of Burkholderiacepacia complex species in cystic fibrosis patients in Argentina during the period 2011-2015 // Enfermedades infecciosas y microbiologia clinica (English Edition). 2018. Vol. 36, no. 7. P. 431-434.
17. Kenna D. T. D., Lilley D., Coward A., Martin K., Perry C., Pike R., Hill R., Turton J. F. Prevalence of Burkholderia species, including members of Burkholderia cepacia complex, among UK cystic and non-cystic fibrosis patients // Journal of Medical Microbiology. 2017. Vol. 66, no. 4. P. 490-501.
18. Silva I. N., Santos P. M., Santos M. R., Zlosnik J. E., Speert D. P., Buskirk S. W., Bruger E. L., Waters C. M., Cooper V S., Moreira L. M. Long-Term Evolution of Burkholderia multivorans during a Chronic Cystic Fibrosis Infection Reveals Shifting Forces of Selection // mSystems. 2016. Vol. 1, no. 3. e00029-16.
19. Domingues S., da Silva G. J., Nielsen K. M. Integrons: Vehicles and pathways for horizontal dissemination in bacteria // Mobile Genetic Elements. 2012. Vol. 2, no. 5. P. 211-223.
20. Heuer H., Binh C. T., Jechalke S., Kopmann C., Zimmerling U., Krögerrecklenfort E., Ledger T., Gonzalez B., Top E., Smalla K. IncP-1e Plasmids are Important Vectors of Antibiotic Resistance Genes in Agricultural Systems: Diversification Driven by Class 1 Integron Gene Cassettes // Frontiers in Microbiology. 2012. Vol. 3. P. 2.
References
1. Jones A. M., Dodd M. E., Govan J. R., Barcus V, Doherty C. J., Morris J., Webb A. K. Burkholderia cenocepacia and Burkholderia multivorans: influence on survival in cystic fibrosis. Thorax. 2004; 59 (11): 948-951.
2. Nash E. F., Thomas A., Whitmill R., Rashid R., Barker B., Rayner R. J., Whitehouse J. L., Honeybourne D. "Cepacia syndrome" associated with Burkholderia cepacia (genomovar I) infection in an adolescent with cystic fibrosis. Pediatric pulmonology. 2011; 46 (5): 512-514.
3. Lynch J. P. Burkholderia cepacia complex: impact on the cystic fibrosis lung lesion. In Seminars in respiratory and critical care medicine. 2009; 30 (5): 596-610.
4. Whiteford M. L., Wilkinson J. D., McColl J. H., Conlon F. M., Michie J. R., Evans T. J., Paton J. Y. Outcome of Burkholderia (Pseudomonas) cepacia colonisation in children with cystic fibrosis following a hospital outbreak: Thorax. 1995. № 50 (11): 1194-1198.
5. Drevinek P., Mahenthiralingam E. Burkholderia cenocepacia in cystic fibrosis: epidemiology and molecular mechanisms of virulence. Clinical Microbiology and Infection. 2010; 16 (7): 821-830.
6. Russian Association for patients with cystic fibrosis. URL: https://mukoviscidoz.org/doc/registr/site_Registre_2019.pdf. (In Russ.).
7. Bankevich A. Nurk S., Antipov D., Gurevich A. A., Dvorkin M., Kulikov A. S., Lesin V. M., Nikolenko S. I., Pham S., Prjibelski A. D., Pyshkin A. V, Sirotkin A. V., Vyahhi N., Tesler G, Alekseyev M. A., Pevzner P. A. SPAdes: a new genome assembly algorithm and its applications to single-cell sequencing. Journal of Computational Biology. 2012; 19 (5): 455-477.
8. Lee I., Chalita M., Ha S.M., Na S. I., Yoon S. H., Chun J. ContEst16S: an algorithm that identifies contaminated prokaryotic genomes using 16S RNA gene sequences. International Journal of Systematic and Evolutionary microbiology. 2017; 67 (6): 2053-2057.
9. Parks D. H., Imelfort M., Skennerton C. T., Hugenholtz P., Tyson G W. CheckM: assessing the quality of microbial genomes recovered from isolates, single cells, and metagenomes. Genome Research. 2015; 25 (7): 1043-1055.
10. Gurevich A., Saveliev V., Vyahhi N., Tesler G QUAST: quality assessment tool for genome assemblies // Bioinformatics. 2013; 29 (8): 1072-1075.
11. Tabacchioni S., Ferri L., Manno G., Mentasti M., Cocchi P., Campana S., Ravenni N., Taccetti G, Dalmastri C., Chiarini L., Bevivino A., Fani R. Use of the gyrB gene to discriminate among species of the Burkholderia cepacia complex. FEMS Microbiology Letters. 2008; 281 (2): 175-182.
12. Cystic Fibrosis Foundation 2019 report. URL: https://www.cff.org/Research/Researcher-Resources/Patient-Registry/2019-Cystic-Fibrosis-Foundation-Patient-Registry-Snapshot.
13. European Cystic Fibrosis Society Patient Registry Annual Data report 2018. URL: https://www.ecfs.eu/sites/default/files/general-content-files/working-groups/ecfs-patientregistry/ECFSPR_Report_2018_v1.4.pdf.
14. Voronina O. L., Chernukha M. Y., Shaginyan I. A., Kunda M. S., Avetisyan L. R., Orlova A. A., Lunin V G., Avakyan L. V, Kapranov N. I., Amelina E. L., Chuchalin A. G. Gintsburg A. L. Characterization of genotypes for Burkholderia cepacia complex strains isolated from patients in hospitals of the Russian Federation. Molekulyarnaya genetika, mikrobiologiya i virusologiya = Molecular Genetics, Microbiology and Virology. 2013; (2): 22-30. (In Russ.)
15. Kondratenko O. V Heterogeneity of Burkholderia strains isolated from patients with cystic fibrosis in Russian Federation. Immunopatologiya, allergologiya, infektologiya = Immunopathology, Allergology, Infectology. 2019; (3): 71-74. (In Russ.).
16. Cipolla L.,Rocca F., Martinez C., Aguerre L., Barrios R., Prieto M. Prevalence of Burkholderia cepacia complex species in cystic fibrosis patients in Argentina during the period 2011-2015. Enfermedades infecciosas y microbiologia clinica (English Edition). 2018; 36 (7): 431-434.
17. Kenna D. T. D., Lilley D., Coward A., Martin K., Perry C., Pike R., Hill R., Turton J. F. Prevalence of Burkholderia species, including members of Burkholderia cepacia complex, among UK cystic and non-cystic fibrosis patients. Journal of Medical Microbiology. 2017; 66 (4): 490-501.
18. Silva I. N., Santos P. M., Santos M. R., Zlosnik J. E., Speert D. P., Buskirk S. W., Bruger E. L., Waters C. M., Cooper V S., Moreira L. M. Long-Term Evolution of Burkholderia multivorans during a Chronic Cystic Fibrosis Infection Reveals Shifting Forces of Selection. mSystems. 2016; 1 (3): e00029-16.
19. Domingues S., da Silva G. J., Nielsen K. M. Integrons: Vehicles and pathways for horizontal dissemination in bacteria. Mobile Genetic Elements. 2012; 2 (5): 211-223.
20. Heuer H., Binh C. T., Jechalke S., Kopmann C., Zimmerling U., Krögerrecklenfort E., Ledger T., Gonzalez B., Top E., Smalla K. IncP-1e Plasmids are Important Vectors of Antibiotic Resistance Genes in Agricultural Systems: Diversification Driven by Class 1 Integron Gene Cassettes. Frontiers in Microbiology. 2012; 3: 2.
Информация об авторах
Ю.А. Бочарова, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории молекулярной микробиологии, Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия, e-mail: [email protected].
А.В. Жестков, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, Самарский государственный медицинский университет, Самара, Россия, e-mail: [email protected].
А.В. Лямин, доктор медицинских наук, доцент, профессор кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, Самарский государственный медицинский университет, Самара, Россия, e-mail: [email protected].
О.В. Кондратенко, доктор медицинских наук, доцент кафедры общей и клинической микробиологии, иммунологии и аллергологии, Самарский государственный медицинский университет, Самара, Россия, e-mail: [email protected].
Т.А. Савинова, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярной микробиологии, Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия, e-mail: [email protected].
С.В. Поликарпова, кандидат медицинских наук, заведующая бактериологической лабораторией, Городская клиническая больница № 15 им. О.М. Филатова, Москва, Россия, e-mail: spolikarpova@mail. ru.
Н.И. Федорова, кандидат медицинских наук, заведующая лабораторией клинической бактериологии, Российская детская клиническая больница, Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия, e-mail: [email protected].
H.А. Маянский, доктор медицинских наук, профессор РАН, заведующий центром лабораторной диагностики, Российская детская клиническая больница, Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия, e-mail: [email protected].
И.В. Чеботарь, доктор медицинских наук, заведующий лабораторией молекулярной микробиологии, Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия, e-mail: [email protected].
Information about the authors
Yu.A. Bocharova, Cand. Sci. (Med.), Senior researcher, Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia, e-mail: [email protected].
A. V. Zhestkov, Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of the Department, Samara State Medical University, Samara, Russia, e-mail: [email protected].
A. V. Lyamin, Dr. Sci. (Med.), Associate Professor, Professor of Department, Samara State Medical University, Samara, Russia, e-mail: [email protected].
O. V. Kondratenko, Dr. Sci. (Med.), Associate Professor of the Department, Samara State Medical University, Samara, Russia, e-mail: [email protected].
T.A. Savinova, Cand. Sci. (Biol.), Leading researcher, Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia, e-mail: [email protected].
S.V. Polikarpova, Cand. Sci. (Med.), Head of the laboratory of bacteriology, Municipal Clinical Hospital No.15 named after O.M. Filatov, Moscow, Russia, e-mail: [email protected].
N.I. Fedorova, Cand. Sci. (Med.), Head of the laboratory of clinical bacteriology, Russian Children's Clinical Hospital, Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia, e-mail: [email protected].
N.A. Mayansky, Dr. Sci. (Med.), Professor of the RAS, Head of the laboratory and diagnostic Center, Russian Children's Clinical Hospital, Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia, e-mail: [email protected].
I. V. Chebotar, Dr. Sci. (Med.), Head of the Laboratory of Molecular Microbiology, Pirogov Russian National Research Medical University, Moscow, Russia, e-mail: [email protected]. *
Статья поступила в редакцию 08.10.2021; одобрена после рецензирования 27.05.2022; принята к публикации 20.06.2022.
The article was submitted 08.10.2021; approved after reviewing 27.05.2022; accepted for publication 20.06.2022.
