CC BY
40
Малиновская Наталия Александровна, канд. мед. наук, научный сотрудник НИИ молекулярной медицины и патобиохимии, доцент кафедры биохимии с курсами медицинской, фармацевтической и токсикологической химии Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого. E-mail: reg.kgmu@gmail.com
Область научных интересов: молекулярная медицина, биохимия, клеточная биология, нейрохимия, патологическая физиология, молекулярные механизмы межклеточной коммуникации.
Морозова Галина Александровна, канд. мед. наук, научный сотрудник НИИ молекулярной медицины и патобиохимии Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого.
E-mail: galechka_@inbox.ru Область научных интересов: диабетология, диагностика разных форм нейропатий, неврология, нейрогенетика.
Салмина Алла Борисовна, д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой биохимии с курсами медицинской, фармацевтической и токсикологической химии Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого.
E-mail: allasalmina@mail.ru Область научных интересов: молекулярные механизмы сигнальной трансдукции и межклеточной коммуникации, регуляция апоптоза при типовых патологических процессах, метаболизм НАД+ в норме и при патологии, молекулярная патология нервной системы, методы оптической биопсии.
УДК 57.042
МОДУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ АДФ-РИБОЗИЛЦИКЛАЗЫ ПРИ ИШЕМИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА
Н.А. Малиновская, Г.А. Морозова, А.Б. Салмина, М.М. Петрова, Ю.А. Панина, Н.В. Кувачева,
О.В. Фролова, Э.Д. Гасымлы, О.В. Баглаева
Красноярский государственный медицинский университет имени проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого E-mail: konsuelo81@mail.ru, reg.kgmu@gmail.com
Второе место среди причин смертности и инвалидизации больных занимают острые нарушения мозгового кровообращения. Цель исследования - оценить влияние модуляторов активности АДФ-рибозилциклазы/CD38 в нейронах и клетках нейроглиаль-ной природы в физиологических условиях и при ишемии головного мозга. Объект исследования - ткань головного мозга крыс-самцов Wistar с моделью глобальной ишемии головного мозга путем двухсторонней перевязки общих сонных артерий. У животных осуществлен забор ткани из регионов головного мозга обоих полушарий, в гомогенатах ткани определена активность АДФ-рибозилциклазы/CD38 флуориметрическим методом до и после приложения модуляторов. Получены данные, свидетельствующие о регулируемой P2X7 рецепторами клеток глии активности CD38/АДФ-рибозилциклазы при ишемии головного мозга.
Ключевые слова:
АДФ-рибозилциклаза, CD38, АТФ, оАТФ, НАД+, гамма-интерферон, ишемия головного мозга.
Введение
Актуальность проблемы поражения головного мозга обусловлена высокой частотой встречаемости ишемии головного мозга, ее затрудненной диагностикой, недостаточной эффективностью терапии, высоким уровнем смертности и значительным ограничением жизнедеятельности больных, ухудшением качества их жизни.
На современном этапе тормозится прогресс в способах эффективной диагностики и лечения поражений центральной нервной системы вследствие недостаточной изученности клеточно-молекулярных механизмов повреждения головного мозга. В частности, слабо изучены молекулярно-метаболические механизмы патогенеза ишемии головного мозга. В то же время, сравнительно недавно были высказаны предположения о новых механизмах, играющих критическую роль в активации и функционировании нейроглиальных клеток в ответ на различные стимулы, с участием НАД+-зависимых путей метаболизма (пуринергические рецепторы, НАД+-метаболизирующие ферменты, протеинкиназы и др.). В настоящее время идентифицированы некоторые регуляторы экспрессии
НАД+-гликогидролазы/С038 в клетках различной природы, синтезированы ингибиторы фермента и аналоги циклической АДФ-рибозы, тестируемые в настоящее время с целью направленной регуляции физиологических и патологических процессов [1, 2].
В числе факторов, определяющих чувствительность клеток к действию различных индукторов - метаболизм никотинамидадениндинуклеотида (НАД+) и состояние внутриклеточного гомеостаза кальция. НАД+ функционирует не только в качестве кофермента, но и субстрата для ряда НАД+-конвертирующих ферментов.
НАД+ используется во многих метаболических реакциях, поэтому его внутриклеточный уровень может значительно изменяться при различных физиологических и патологических условиях. Внутриклеточное содержание НАД+ 1 мМ, его содержание в крови - лишь 0,13 мкМ. Даже низкая концентрация (1 мкМ) во внеклеточном пространстве может оказать биологический эффект на клетки-мишени. Кроме того, необходим секундный контакт с НАД+ для появления очевидных эффектов [3,4].
Уровень НАД+ в нейроглиальных клетках определяется активностью НАД+-синтезирующих ферментов, НАД+-регенерирующих метаболических путей и НАД+-конвертирующих ферментов: АДФ-рибозилтрансфераз, поли(АДФ)-рибозилполимеразы (ПАРП [5] и АДФ-рибозилциклазы/НАД+-гликогидролазы/С038, представляющей собой компонент клеточных сигнальных систем, сопряженных с рецепторами ряда нейротрансмиттеров (брадикининовые, адренергические, пуринергические, гистаминовые, мускариновые ацетилхолиновые и другие), катализирующей образования циклической АДФ-рибозы (цАДФР) и адениндинуклеотидфосфата никотиновой кислоты, выполяющих функцию кальциевых мобилизаторов и модуляторов активности калиевых ионных каналов М-типа [6, 7]. В настоящее время описана патогенетическая роль нарушения экспрессии или активности АДФ-р иб о з ил 11 и к л аз ы/С Э 3 8 в развитии ряда заболеваний, в частности, сахарного диабета, вирусных инфекций, гематологических онкологических заболеваний, цирроза печени, перитонита, ВИЧ-инфекции [8, 9]. Противоречивыми остаются данные об изменении активности фермента в электро-возбудимых тканях при ишемии и реперфузии [10, 11].
В клетках центральной нервной системы (нейроны и клетки нейроглии, главным образом астроциты) АДФ-рибозилциклаза экспрессируется в различных клеточных
__________________________ компартментах (ядро, цитозоль, митохондрии), а также на
плазматической мембране [12, 13]. Ранее мы продемонстрировали характер изменения экспрессии фермента при перинатальном ишемически-гипоксическом поражении головного мозга, а также при унилатеральной окклюзии
общей сонной артерии [14-17].
Направленная модуляция активности НАД+-конвертирующих ферментов является перспективным направлением развития фармакотерапии при ишемическом повреждении тканей [5]. Вместе с тем, остаются неизученными вопросы, касающиеся возможности направленной
Петрова Марина Михайловна, д-р мед. наук, профессор, зав. кафедрой поликлинической терапии, семейной медицины и ЗОЖ с курсом ПО Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого. E-mail: stk99@yandex.ru Область научных интересов: психосоматические соотношения при артериальной гипертонии, ишемической болезни сердца, язвенной болезни и подагре, когнитивные расстройства при соматических заболеваниях.
Кувачева Наталья Валерьевна, канд. мед. наук, доцент кафедры биохимии с курсами медицинской, фармацевтической и токсикологической химии Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого.
E-mail:
natalya.kuvacheva@gmail.com Область научных интересов: молекулярная медицина, фармакология, нейробиология, клеточные технологии. Фролова Ольга Васильевна, ассистент кафедры биохимии с курсами медицинской, фармацевтической и токсикологической химии, научный сотрудник НИИ молекулярной медицины и патобиохимии Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого. E-mail: frolova_olga86@mail.ru Область научных интересов: патологическая физиология, патогенез нейродегенератив-ных процессов, оптическая биопсия.
модуляции АДФ-рибозилциклазы/CD38 для достижения нейропротекторного и корригирующего действия при повреждении клеток центральной нервной системы.
Цель исследования на крысах Wistar - оценить влияние модуляторов активности АДФ-
рибозилциклазы/CD38 в клетках нейроглиальной природы в физиологических условиях и при ишемии головного мозга.
Методы исследования
Объектом исследования являлись аутбредные крысы-самцы Wistar c массой 180...200 г в количестве 50 шт. Эксперименты на животных проводились согласно «Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. № 755). Животные содержались в виварии НИИ молекулярной медицины и патобиохимии в хорошо вентилируемом, освещенном, отапливаемом помещении со своевременной уборкой, не более пяти крыс в одной клетке и имели свободный доступ к пище и водопроводной воде. Животные были разделены на 5 групп по 10 крыс: контрольная группа 1 (К1) - интактные крысы, контрольная группа 2 (К2) -крысы с проведением «ложной операции» (для выявления эффектов наркоза и операционного стресса) с забором материала через 24 часа с момента проведения «ложной операции», контрольная группа 3 (К3) - крысы с проведением «ложной операции» с забором материала через 48 часов с момента проведения «ложной операции», экспериментальная группа 1 (Э1) - моделирование ишемии головного мозга с забором материала через 24 часа с момента проведения операции, экспериментальная группа 2 (Э2) - моделирование ишемии головного мозга с забором материала через 48 часов с момента проведения операции.
Моделирование острой глобальной неполной ишемии головного мозга крыс [18] осуществлялось анестезированным животным (фторотан ингаляционно) путем экстравазальной билатеральной окклюзии (перевязки лигатурой) общих сонных артерий (ОСА) по методу Ек1оГ и 81е8]о 1972 [19] с последующей оценкой всех тестируемых параметров через 24 и 48 часов после моделирования ишемии.
О тяжести ишемического повреждения судили в баллах по степени неврологического дефицита, оцениваемого по шкале NSS. Смертность крыс в группах вычислялась в процентах от общего числа крыс в группе. Степень выраженности постишемической когнитивной дисфункции у крыс оценивалась с использованием стандартного теста «Водный лабиринт Морриса». Критерием нормального состояния когнитивных функций у крыс при использовании теста «Водный лабиринт Морриса» было достижение скрытой под водой платформы за 15 и менее секунд при осуществлении четвертой попытки четвертого дня тренировки до моделирования ишемии головного мозга и четвертой попытки в день забора материала (24 или 48 часов с момента моделирования ишемии головного мозга) после моделирования ишемии головного мозга.
Животных декапитировали под фторотановым наркозом и на льду производили забор лобных долей обоих полушарий головного мозга. Г омогенат ткани получали путем механической гомогенизации материала.
Оценка ферментативной активности АДФ-рибозилциклазы/CD38 осуществлялась флу-ориметрическим методом с использованием флуорогенного субстрата - никотинамидгуанин-
Панина Юлия Анатольевна,
студентка лечебного факультета Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого.
E-mail: elving-girl@list.ru Область научных интересов: молекулярные механизмы патогенеза болезни Паркинсона и ишемии головного мозга. Баглаева Ольга Владимировна, студентка лечебного факультета Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого.
E-mail: olga_med555@mail.ru
Область научных интересов: НАД+-зависимые механизмы патогенеза болезни Паркинсона и ишемии головного мозга.
Гасымлы Эльтадж Джамил кызы, студентка лечебного факультета Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого.
E-mail: elya_qasimli@mail.ru
Область научных интересов: НАД+-зависимые механизмы патогенеза ишемии головного мозга и перитонита.
динуклеотида (НГД) согласно стандартному протоколу R.M. Graeff и др. В полученном гомогенате определялась концентрация белка микрометодом Лоури без осаждения белка по стандартному протоколу (MicroLowry test, Sigma, USA). Активность фермента оценивалась после инкубации 100 мкл гомогената ткани с реакционной смесью, содержащей 100 мкм НГД в 20 мМ трис-HCl (рН 7,4) в спектрофлуориметре СМ2203 (Solar, Belarus) при длине волны возбуждения 300 нм и длине волны испускания 410 нм в режиме измерения кинетики флуоресценции в течение 15 минут при 37°С. Активность АДФ-рибозилциклазы вычислялась по формуле, включающей отношение разницы максимальной амплитуды флуоресценции и флуоресценции в 0 минуте к мг белка ткани в минуту с учетом разведения образца.
Модуляция АДФ-рибозилциклазной активности осуществлялась непосредственно перед флуориметрическим анализом лигандом Р2Х7 рецепторов аденозинтрифосфатом (АТФ, 1 мМ), селективным блокатором Р2Х7 рецепторов - окисленной формой АТФ (оАТФ, 100 мкМ), субстратом и лигандом CD38 никотинамидадениндинуклеотидом (НАД+, 1 мМ) и гамма-интерфероном (препарат «Ингарон», 1000 МЕ/1 мл гомогената).
Статистический анализ полученных результатов включал методы описательной статистики и проверки статистических гипотез с использованием программ Stаtplus 2006 Professional Сборка 3.9.0.0 и SPSS. Сравнение средних осуществляли с помощью непараметрического теста Манна-Уитни для независимых выборок и непараметрического теста Уилкоксона для зависимых выборок (сравнение значений до и после приложения модуляторов внутри каждой группы).
Все результаты представлены в виде M±m, где М - среднее значение, m - ошибка среднего, p - уровень значимости: p < 0,05 - приемлемая граница статистической значимости; p <
0,01 - результат статистически значим; p < 0,005 и p < 0,001 - результат высоко значим.
Результаты и их обсуждение
Анализ неврологического статуса экспериментальных животных по стандартной шкале NSS, водному лабиринту Морриса и анализу смертности крыс (табл. 1-4) подтвердил эффективность используемой модели для достижения эффекта острой глобальной ишемии головного мозга и последующего развития моторной и когнитивной дисфункции в связи со статистически значимым нарастанием неврологического дефицита по шкале NSS в обеих экспериментальных группах в сравнении с исходными значениями неврологического статуса этих же групп до проведения оперативных вмешательств (табл. 1), в сравнении с группой интактных животных К1 (табл. 2) и с группами К2 (табл. 3) и КЗ (табл. 4) в соответствующие временные сроки с момента проведения операций.
Подобные различия наблюдались и в отношении когнитивной дисфункции, однако не наблюдалось статистически значимого усугубления когнитивной дисфункции в группе Э2 в сравнении с группой К1. В группах К2 и КЗ («ложная операция»), оцениваемых через 24 и 48 часов с момента проведения «ложной операции», не наблюдалось появления когнитивной дисфункции и смертности, в группе К2 наблюдался даже временный значимый эффект усиления показателей когнитивной функции в сравнении с исходными показателями в этой же группе до проведения операции. Также наблюдался отсроченный эффект статистически значимого усиления неврологического дефицита при проведении NSS теста в группе КЗ через 48 часов с момента проведения «ложной операции» в сравнении с неврологическим состоянием этих же крыс до проведения операции, что может быть связано с влиянием операционного стресса или наркоза. Однако, в сравнении с группами Э1 и Э2, это влияние менее выражено. В сравнении же с группой интактных животных К1 значимых различий по указанным параметрам в группах К2 и К3 не наблюдалось. Таким образом, в работе достигнута модель острой глобальной ишемии головного мозга и последующего развития моторной и когнитивной дисфункции.
Таблица 1. Результаты сравнения оценки неврологического статуса крыс в группах до и после эксперимента________________________________________________________________________________
Группы животных Смертность животных после моделирования ишемии, % Шкала N88, баллы Когнитивная функция, сек
до операции после операции до операции после операции
К1 (интактные крысы, п = 10) - 1,20±0,5 13,40±3,8
К2 («ложная операция», 24 ч, п = 10) 0 % 1,90±0,7 1,60±0,5 12,00±1,9 6,30±1,4*
КЗ («ложная операция», 48 ч, п = 10) 0 % 1,10±0,6 1,90±0,1** 16,00±5,5 14,80±5,4
Э1 (ишемия, 24 ч, п = 10) 50 % 0,20±0,1 10,00±3,5*** 16,70±4,9 40,50±19,5***
Э2 (ишемия, 48 ч, п = 10) 50 % 1,00±0,6 13,30±0,6‘" 9,60±2,6 24,70±17,8***
Примечание: - уровень статистической значимости различий (р<0,05) до и после операции, - уровень статистической значимости различий (р<0,005) до и после операции, - уровень статистической значимости различий (р<0,001) до и после операции
Таблица 2. Результаты сравнения оценки неврологического статуса крыс в группах К2, К3, Э1 и Э2 с группой К1___________________________________________________________________________
Группы животных Шкала N88, баллы Когнитивная функция, сек
до операции после операции до операции после операции
К1 (интактные крысы, п = 10) 1,20±0,5 13,40±3,8
К2 («ложная операция», 24 ч, п = 10) 1,90±0,7 1,60±0,5 12,00±1,9 6,30±1,4
КЗ («ложная операция», 48 ч, п = 10) 1,10±0,6 1,90±0,1 16,00±5,5 14,80±5,4
Э1 (ишемия, 24 ч, п = 10) 0,20±0,1 $ 10,00±3,5 16,70±4,9 40,50±19,5
Э2 (ишемия, 48 ч, п = 10) 1,00±0,6 13,30±0,6‘" 9,60±2,6 24,70±17,8
Примечание: - уровень статистической значимости различий (р<0,05) в сравнении с интактными животными, - уровень статистической значимости различий (р<0,001) в сравнении с интактными живот-
ными
Таблица 3. Результаты сравнения оценки неврологического статуса крыс в группах Э1 с группой К2
Группы животных Шкала N88, баллы Когнитивная функция, сек
до операции после операции до операции после операции
К2 («ложная операция», 24 ч, п = 10) 1,90±0,7 1,60±0,5 12,00±1,9 6,30±1,4
Э1 (ишемия, 24 ч, п = 10) 0,20±0,1 10,00±3,5*** 16,70±4,9 40,50±19,5***
Примечание: - уровень статистической значимости различий (р<0,001) между группами
Таблица 4. Результаты сравнения оценки неврологического статуса крыс в группах Э2 с группой К3
Группы животных Шкала N88, баллы Когнитивная функция, сек
до операции после операции до операции после операции
КЗ («ложная операция», 48 ч, п=10) 1,10±0,6 1,90±0,1 16,00±5,5 14,80±5,4
Э2 (ишемия, 48 ч, п=10) 1,00±0,6 13,30±0,6‘" 9,60±2,6 24,70±17,8***
Примечание: - уровень статистической значимости различий (р<0,001) между группами
Исследование изменения активности АДФР-циклазы при развитии глобальной ишемии головного мозга (табл. 5) выявило статистически значимое снижение активности этого фермента через 48 часов с момента развития ишемии головного мозга в группе Э2 в сравнении с группой К1. Эти данные согласуются с полученными нами ранее данными о динамическом харак-
тере изменения активности этого фермента при ишемии головного мозга у крыс с односторонней перевязкой общей сонной артерии [20]. Характер постепенного снижения активности CD38 при развитии ишемии головного мозга, скорее всего, связан со снижением содержания НАД+ вследствие гиперактивации поли(АДФ)-рибозилполимеразы в ишемизированных клетках.
Таблица 5. АДФР-циклазная активность СР38 нейронов и нейроглии
Группы животных Активность АДФР-циклазы, ед/мин/мг белка
К1 (п = 10) 0,42±0,3
К2 (п = 10) 0,07±0,1
КЗ (п = 10) 0,02±0,0
Э1 (п = 5) 0,04±0,0
Э2 (п = 5) $ 0,01±0,0
Примечание: - уровень статистической значимости различий (р<0,05) в сравнении с группой К1
При приложении модуляторов (табл. 6) нуклеотидных рецепторов (АТФ и оАТФ), лиганда и субстрата CD38 (НАД+) и гамма-интерферона (у-ИФ) к гомогенату ткани контрольных групп К1, К2, К3 и групп с ишемией Э1 и Э2 наблюдались следующие эффекты: статистически значимым было увеличение активности АДФР-циклазы только под действием селективного блокатора нуклеотидных рецепторов Р2Х7 подтипа. Указанный факт свидетельствует, вероятнее всего, о том, что активация АДФР-циклазы клеток нейроглии при ишемии головного мозга может быть связана как с блокадой с нуклеотидных рецепторов Р2Х7 подтипа, так и с активацией нуклеотидных рецепторов других подтипов или других механизмов внутриклеточной сигнализации.
Таблица 6. АДФР-циклазная активность после приложении модуляторов (АТФ, оАТФ, НАД+, у-интерферон)________________________________________________
Группы животных Активность АДФР-циклазы, ед/мин/мг белка
+АТФ +оАТФ +НАД+ +у-интерферон
К1 (п = 10) 0,08±0,1 0,05±0,0 0,23±0,2 0,03±0,0
К2 (п = 10) 0,03±0,0 0,03±0,0 0,06±0,0 0,03±0,0
КЗ (п = 10) 0,05±0,0 0,01±0,0 0,16±0,1 0,11±0,1
Э1 (п = 5) 0,03±0,0 0,04±0,0 0,02±0,0 0,08±0,1
Э2 (п = 5) 0,01±0,0 $ 0,03±0,0 0,02±0,0 0,03±0,0
Примечание: - уровень статистической значимости различий (р<0,05) до и после приложения оАТФ в
группе Э2
Известно, что Р2Х7 рецепторы экспрессируются на клетках глиальной или макро-фагальной природы в головном мозге, таким образом, уменьшение активности АДФР-циклазы к 48 часу ишемии может быть, по крайней мере частично объяснено увеличением суммарной экспрессии и активности Р2Х7 в очагах воспаления, сопровождающего ишемическое повреждение ткани.
Заключение
На основании полученных результатов можно сформулировать следующие выводы:
1. При глобальной ишемии головного мозга наблюдается динамическое снижение активности CD38/АДФ-рибозилциклазы клеток головного мозга.
2. Выявлена взаимосвязь между активностью нуклеотидных рецепторов Р2Х7 подтипа и CD38/АДФ-рибозилциклазы в динамике ишемии головного мозга.
Исследование выполнено при поддержке гранта индивидуальных проектов молодых ученых КГАУ «ККФПНи НТД».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Brough D. Ca2+ stores and Ca2+ entry differentially contribute to the release of IL-1 beta and IL-
1 alpha from murine macrophages // J. Immunol. - 2003. - V. 170. - № 6. - P. 3029-3036.
2. Higashida H. Muscarinic receptor - mediated dual regulation of ADP-ribosyl cyclase in NG108-15 neuronal cell membranes // J. Biol. Chem. - 1997. - V. 272. - P. 31272-31277.
3. Kawamura H. P2X7 Receptor-Dependent and -Independent T Cell Death Is Induced by Nicotinamide Adenine Dinucleotide // J. Immunol. - 2005. - V. 174. - P. 1971-1979.
4. Lee H.C. Cyclic ADP-ribose and its metabolic enzymes // Biochimie. - 1995. - V. 77. - № 5. -P. 345-355.
5. Virag L. The therapeutic potential of poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors // Pharmacol. Rev. -2002. - V. 54. - № 3. - P. 375-430.
6. Berthelier V. Human CD38 is an authentic NAD(P)+ glycohydrolase // Biochem. J. - 1998. -V. 330. - P. 1383-1390.
7. Nata K. Human gene encoding CD38 (ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase): organization, nucleotide sequence and alternative splicing // Gene. - 1997. - V. 186. - P. 285-292.
8. Higashida H. Cyclic ADP-ribose as a second messenger revisited from a new aspect of signal transduction from receptors to ADP-ribosyl cyclase // Phramacol. & Therapeutics. - 2001. - V. 90. - P. 283-296.
9. Mamik M.K. HIV-1 and IL-1b regulate astrocytic CD38 through mitogen-activated protein kinases and nuclear factor-B signaling mechanisms // J. Neuroinflammation. - 2011. - V. 8. - № 145. -P. 1-13.
10. Choe C-u. CD38 Exacerbates Focal Cytokine Production, Postischemic Inflammation and Brain Injury after Focal Cerebral Ischemia // PLoS ONE. - 2011. - V. 6. - № 5. URL: http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0019046 (дата обращения: 12.05.2012).
11. Sun L. A novel mechanism for coupling cellular intermediary metabolism to cytosolic Ca2+ signaling via CD38/ADP-ribosyl cyclase putative intracellular NAD+ sensor // FASEB J. - 2002. -V. 16. - P. 302-314.
12. Ceni C. Evidence for an intracellular ADP-ribosyl cyclase/NAD glycohydrolase in brain from CD38-deficient mice // J. Biol. Chem. - 2003. - V. 278. - № 42. - P. 40670-40678.
13. Yamada M. Ultrastructural localization of CD38 immunoreactivity in rat brain // Brain Res. -
1997. - V. 756. - № 1-2. - P. 52-60.
14. Киричкова Г. А. Соэкспрессия CD38 и Pgp на клетках нейроваскулярной единицы при фокальной ишемии головного мозга крыс // Научные труды III съезда физиологов СНГ. - Ялта, 1-6 октября 2011. - Ялта: Медицина-Здоровье, 2011. - С. 46.
15. Салмина А.Б. Изменение экспреcсии и активности CD38 в клетках астроглиальной природы при нарушениях нейрон-глиальных взаимодействий при перинатальном гипоксически-ишемическом поражении головного мозга // Нейрохимия. - 2009. - № 3 (Т. 26). - С. 237-244.
16. Салмина А.Б. Перинатальное гипоксически-ишемическое поражение головного мозга вызывает нарушение глутаматергической сигнальной трансдукции, сопряженной с активностью АДФ-рибозилциклазы в нейронах // Бюл. экспер. биол. и мед. - 2010. - Т. 150. № 11. -С. 511-515.
17. Салмина А.Б. Перинатальное гипоксически-ишемическое поражение нервной системы вызывает изменение экспрессии коннексина43, CD38 и активности АДФ-риболзилциклазы в клетках головного мозга // Бюл. экспер. биол. и мед. - 2008. - Т. 146. - № 12. - С. 641-645.
18. Hossmann K.A. Experimental models for the investigation of brain ischemia // Cardiovasc. Res. -
1998. - V. 39. - P. 106-120.
19. Traystman R.J. Animal models of focal and global cerebral ischemia // ILAR J. - 2003. - V. 44. -№ 2. - P. 85-95.
20. Фурсов А.А. Профилактика постишемического неврологического дефицита путем модуляции экспрессии АДФ-рибозилциклазы в клетках головного мозга // Общ. реаниматол. -2007. - Т. 3. - № 5-6. - С. 109-113.
Поступила 11.05.2012 г.
