CC BY
50
УДК 616.329-009.12.001.6-089.8
МОДИФИКАЦИЯ МЕТОДА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ АХАЛАЗИИ У КРЫС И АНАЛИЗ ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТИ
Алексей Германович Сабиров', Михаил Владимирович Бурмистров', Марат Александрович Мухамедьяров2, Мурад Магомедович Насруллаев', Андрей Львович Зефиров2, Магомед Нухкадиевич Насруллаев4, Иван Сергеевич Рагинов3
'Клинический онкологический диспансер (главврач — проф. Р.Ш. Хасанов) МЗ РТ, г. Казань, 2кафедра нормальной физиологии (зав. — проф. Ю. А. Зефиров), 3кафедра гистологии (зав. — проф. Ю. А. Челышев) Казанского государственного медицинского университета, 4 кафедра клинической анатомии и амбулаторно-поликлинической хирургии (зав. — проф. В. В. Фаттахов) Казанской государственной медицинской академий последипломного образования
Реферат
Разработан метод экспериментальной ахалазии у крыс, позволивший значительно снизить летальность в раннем послеоперационном периоде по сравнению со способами, описанными ранее в литературе. Предложены способы оценки течения экспериментальной ахалазии.
Ключевые слова: пищевод, ахалазия, экспериментальная модель заболевания, нижний эзофагеальный сфинктер.
Одно из первых мест в структуре патологии желудочно-кишечного тракта занимают заболевания пищевода. Ахалазия (Ах) — прогрессирующее расстройство моторики пищевода, заключающееся в нарушении расслабления нижнего эзофа-геального сфинктера (НЭС) и в снижении пропульсивной моторики пищевода [2, 4]. В основе этиологии Ах лежат дегенеративные изменения нейронов межмышечного (ауэрбАховского) нервного сплетения, отвечающие за релаксацию гладкой мускулатуры НЭС во время акта глотания. В 100% случаев Ах наблюдается уменьшение количества нейронов в межмышечном сплетении, в большей степени в средней и нижней трети пищевода по сравнению с верхней [5]. Этиология Ах до настоящего времени не выяснена, однако в наибольшем количестве работ предполагается участие в её возникновении нейротропных вирусов (простого герпеса, цитомегаловиру-са, опоясывающего лишая), генетическая предрасположенность, нервно-психическая травма [1, 3, 7, 8].
На сегодняшний день основное лечение больных Ах включает медикаментозную терапию, пневматическую баллонную дилатацию НЭС, эндоскопическое внутрисфинктерное введение ботулиново-282
го токсина А и хирургическую кардиомио-томию. Каждый из этих методов имеет ряд недостатков, что диктует необходимость поиска новых способов лечения Ах. Для этого необходимы адекватная экспериментальная модель Ах и точные критерии оценки выраженности заболевания, что позволит расширить знания об его этиологии и патогенезе, а также разрабатывать альтернативные методы лечения. Предварительно проведенные нами эксперименты с использованием модели Ах, описанной в зарубежной литературе, сопровождались гибелью большинства животных.
Целью данной работы являлась модификация общепринятой методики экспериментальной Ах у крыс с разработкой критериев оценки развития этого заболевания.
Эксперименты выполнялись на 35 белых крысах-самцах массой 180-200 г. Все хирургические манипуляции с животными производили под уретановым наркозом (600 мг/кг внутрибрюшинно). У 10 животных осуществляли индукцию Ах согласно описанной ранее методике [6]. В асептических условиях выполняли верхнюю срединную лапаротомию с доступом к нижней трети пищевода, затем аппликацию на выделенную часть пищевода марлевой турунды, которую смачивали 0,2%-м раствором бензалкония хлорида (БХ) в течение 30 минут из инсулинового шприца. После этого брюшную полость зашивали однослойным швом. 10 животным проводилась усовершенствованная операция экспериментальной Ах. После введения животных в наркоз выполнялись верхняя срединная лапаротомия, мобилизация нижней трети пищевода, под которую под-кладывали протектор (отрезок из плотного
120-, 10080 6040 200-
0 5 10 15 20
Дни послеоперационного периода
Рис. 1. Динамика массы тела крыс при экспериментальной Ах. На графике показана усредненная динамика массы тела крыс, подвергнутых улучшенной операции экспериментальной Ах (черные квадраты), а также ложнооперированной (белые кружки) и ин-тактной (белые треугольники) групп. Ось Х — день послеоперационного периода, по оси Y — нормированная масса крыс. * р<0,05 в сравнении с контролем.
полиэтилена размером 4 х 1,5 см), предотвращающий растекание БХ по брюшной полости. На выделенный участок пищевода на 30 минут апплицировали марлевую турунду, смоченную БХ. Контрольную «ложнооперированную» группу составили 10 животных, у которых при прочих аналогичных условиях раствор БХ заменяли на физиологический раствор.
С первого дня эксперимента ежедневно взвешивали крыс, переведенных на зерновой корм. На 41-е сутки после операции крысам производили верхнюю срединную лапаротомию и измеряли давление в нижней трети пищевода и в области НЭС с помощью двухмиллиметрового балло-нометрического датчика. Исследование было одобрено этическим комитетом Республики Татарстан.
При использовании предложенного Goto and Grosfeld в 1989 г. варианта методики экспериментальной Ах [6] в раннем послеоперационном периоде (первые 3 сут) летальность в экспериментальной группе составила 50%, к 5-му дню — 70%. При аутопсии у крыс, умерших на 5-е сутки, был диагностирован разлитой фибринозный перитонит. При использовании улучшенной нами методики экспериментальной Ах летальность к 5-м суткам после операции составила 10%, что в 7 раз меньше, чем при методике Goto и Grosfeld.
C 3-4-го дня послеоперационного периода стала наблюдаться потеря массы тела крыс, подвергнутых усовершенствованной операции экспериментальной Ах.
К 20-му дню их масса составила 71,6±1,8% от значений, полученных до операции (п=9; р<0,05). В то же время масса «ложно-оперированных» и интактных животных несколько увеличилась, составив к 20-му дню 104,4±0,5% (п=10) и 107,9±0,5% (п=5) от исходных значений соответственно (рис. 1).
Баллонометрическое измерение показало, что давление в области НЭС и нижней трети пищевода у крыс экспериментальной группы выше, чем у интактных
А
Нижний эзофагеапьный сфинктер
Норма
Экспериментальная ахала зия
Б
Нижняя треть пищевода
Норма
Экспериментальная
Рис. 2. Давление в пищеводе на фоне экспериментальной Ах. Представлены значения давления в НЭС (А) и нижней трети пищевода (Б) у интактных животных (норма) и на 41-й день после улучшенной операции экспериментальной Ах. * р<0,05 в сравнении с контролем.
животных на 14% (п=5; р<0,05) и 12% (п=5; р<0,05) соответственно (рис.2)
Предложенная нами модифицированная методика экспериментальной Ах позволяет значительно снизить послеоперационную смертность животных. Вероятно, причина высокой летальности при ранее описанной методике заключается в растекании БХ по брюшной полости, при-
283
водящем к парезу кишечника и гибели животных. За счет использования протектора при операции нам удалось добиться гораздо лучшей выживаемости животных.
Использование простых, но информативных методов мониторинга развития экспериментальной Ах — взвешивания и баллонометрического измерения давления в пищеводе позволило выявить у животных развитие симптомов снижения моторики пищевода и повышения тонуса НЭС. Разработанная нами операция может быть успешно использована для создания экспериментальной модели Ах на крысах. Вместе с тем необходимо учитывать и ограниченную применимость данной модели, поскольку у людей данное заболевание развивается в течение многих лет, т. е. гораздо дольше, чем в предложенной нами модели. Усовершенствованная нами модель Ах пищевода является адекватной и перспективной для дальнейшего изучения этиологии, патогенеза и разработки подходов к лечению данного заболевания.
Работа поддержана грантом «Ведущие научные школы» № НШ-3368.2008.4.
ЛИТЕРАТУРА
1. Василенко В.Х., Суворова Т.А., Гребенев А.Л. Ахала-зия кардии. — М.: Медицина, 1976.
2. Шулутко А. М., Моисеев А.Ю., Казарян А.М. Эндо-
УДК 617.55-089.844
скопическая хирургия в лечении Ахалазии пищевода // Эндоскопическая хирургия. — 2001. — Т. 5. — С.16-21.
3. Castagliuolo I., Brun P., CostantiniM. et al. Esophageal achalasia: is the herpes simplex virus really innocent? // J. Gastrointest Surg. — 2004. — Vol.8, № 1. — P. 24-30.
4. Farrokhi F., VaeziM.F. Idiopathic (primary) achalasia // Orphanet J. Rare Dis. — 2007. — Vol. 26, № 2. — P.38.
5. Goldblum J.R., Whyte R.I., OrringerM.B., Appelman H.D. Achalasia. A morphologic study of 42 resected specimens // Am. J. Surg. Pathol. — 1994. — Vol. 18, № 4 — P.327-337.
6. Goto S., Grosfeld J.L. The effect of a neurotoxin (benzalkonium chloride) on the lower esophagus // J. Surg. Res. — 1989. — Vol.47, № 2. — P. 117-119.
7. Niwamoto H., Okamoto E., Fujimoto J. et al. Are human herpes viruses or measles virus associated with esophageal achalasia? // Dig. Dis. Sci. — 1995. — Vol.40, № 4. — P. 859-864.
8. Sachdev A., Sandhu B.S., D'cruz S. et al. Achalasia cardia in mother and son // Indian J. Gastroenterol.—2004. — Vol.23, № 3. — P.109.
Поступила 09.12.08.
MODIFICATION OF THE METHOD OF
EXPERIMENTAL ACHALASIA IN RATS AND ANALYSIS OF ITS EFFECTIVENESS
A.G. Sabirov, M.V. Burmistrov, M.A. Mukhamedyarov, M.M. Nasrullaev, A.L. Zefirov, M.N. Nasrullaev, I.S. Raginov
Summary
Developed was a method of experimental achalasia in rats, which allowed reducing significantly the mortality in the early postoperative period compared with the methods described previously in the literature. Proposed were methods of evaluation of the course of experimental achalasia.
Keywords: esophagus; achalasia; experimental model; inferior esophageal sphincter.
ФИЗИКО-МАТЕМАТИЧЕСКАЯ МОДЕЛЬ ДУБЛИКАТУРНОГО ШВА
Абрамов Владимир Александрович2, Мухин Алексей Станиславович2, Измайлов Александр Геннадьевич'
'Кафедра общей хирургии (зав. — проф. С.В. Доброквашин) Казанского государственного медицинского университета, 2кафедра факультета повышения квалификации (зав. — докт. мед. наук А.С. Мухин) Нижегородской государственной медицинской академии
Реферат
Представлены результаты разработки и исследования физико-математической модели предлагаемого дубликатурного шва и его аналога — способа Сапежко. Анализ показал преимущество дубликатурного шва: величина напряжения, возникающего при его применении, достоверно меньше, чем при использовании способа Сапежко.
Ключевые слова: физико-математическая модель, дубликатурный шов.
Несмотря на то что на сегодняшний день предложено множество способов ушивания передней брюшной стенки и
герниопластик, проблема послеоперационных вентральных грыж продолжает оставаться весьма актуальной. Многие из современных способов либо достаточно сложны и требуют определённой подготовки и временных затрат, либо необходимо применение специальной, как правило, дорогостоящей аппаратуры или материалов, что снижает их преимущества и резко ограничивает использование в большинстве стационаров, особенно в ургентной хирургии. Поэтому нами был
