CC BY
12
противовоспалительный и иммуномодулирующий эффекты, а также способны дифференцироваться в клетки соединительной ткани.
Цель данного исследования: оценка безопасности и эффективности аутологичной СВФ у пациентов с го-нартрозом, в том числе в комбинации с препаратом гиа-луроновой кислоты.
Материалы и методы. В исследование были рекрутированы 32 пациента с ОА коленных суставов (гонартроз) (Rg стадия 2-3 по Kellgren-Lawrence) (NCT 02967874, clinicaltrials.gov). СВФ выделяли из жировой ткани пациентов. Пациентам выполняли внутрисуставную инъекцию: препарата гиалуроновой кислоты Ферматрон Плюс 1,5% 2,0 мл (ГлК) (группа 1, 10 пациентов), аутологичных клеток СВФ (группа 2, 16 пациентов), СВФ + ГлК (группа 3, 6 пациентов). Оценивали выраженность болевого синдрома по ВАШ и функциональный статус пораженных суставов по шкале KOOS.
Результаты. Пациенты исследуемых групп были сопоставимы по давности и тяжести основного заболевания, характеру сопутствующей патологии, выраженности болевого синдрома, а также нарушению функций коленных суставов. Внутрисуставное введение клеток СВФ было хорошо переносимым и не вызывало развития каких-либо серьезных нежелательных явлений. У пациентов группы 1 введение ГлК приводило к снижению выраженности болевого синдрома и основных симптомов заболевания на протяжении 6 мес после введения ГлК, с постепенным ухудшением состояния до исходного уровня через 12 мес. У пациентов группы 2 улучшение функции суставов по ВАШ и KOOS выявлялось как на ранних сроках (1 мес), так и в отдаленном периоде (12 мес) после терапии. В то же время положительный клинический эффект комбинированного введения СВФ и ГлК у пациентов группы 3 был сопоставим с эффектом СВФ.
Таким образом, внутрисуставное введение аутоло-гичных клеток СВФ у пациентов с выраженными проявлениями ОА приводит к значимо более выраженному и длительному клиническому улучшению основных симптомов заболевания по сравнению с ГлК. Полученные предварительные данные свидетельствуют также об отсутствии значимого влияния Глк на терапевтические эффекты СВФ.
Литература:
1. Honvo G., Reginster J.Y., Rannou F., et al. Drugs Aging. 2019. Vol. 36, N Suppl. 1. P. 101-127.
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ПУЛЬПЫ И ПЕРИОДОНТА
А.В. Котова1, 2 3, А.А. Лобов1, Ю.А. Домбровская2, Е.М. Приходько2, 3, В.И. Санникова1, Н.А. Рюмина3, П. Клаузен1, А.Л. Шаварда4, А.Б. Малашичева1, Н.И. Енукашвили1, 2 3
1 ФГБУН Институт цитологии, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБОУ ВО СЗГМУ им. ИИ. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия
3 ООО «Покровский банк стволовых клеток», Санкт-Петербург, Россия
4 Ресурсный центр РМиКТ, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: anastkotova@gmail.ru
Ключевые слова: стволовые клетки нервного гребня, стволовые клетки пульпы, протеом, остеогенная дифференци-ровка, масс-спектрометрия.
Стволовые клетки (СК) из разных тканей зуба, несмотря на общее происхождение от клеток нервного гребня, гетерогенны по своим свойствам. Они выполняют разные функции и, как следствие, обладают разными функциональными возможностями. Предполагается, что эти различия обусловлены влиянием на клетки их микроокружения — ниши.
Цель работы: оценка различий между СК пульпы (СКП) и СК периодонта (СКПд) по их морфофункциональным характеристикам, экспрессии маркеров плюрипотент-ности, остеогенной/одонтобластной дифференцировки и протеомному профилю в ходе данной диффренцировки.
Объектом исследования выступили пары культур клеток пульпы и периодонта, полученные от каждого из исследуемых доноров (всего 12 пар). Оказалось, что популяции СКП и СКПд обладают сходным набором поверхностных маркёров мезенхимных стволовых клеток, но отличаются по уровню экспрессии мРНК не-стина (маркёра нейроэктодермального происхождения), по уровню экспрессии эмбриональных маркеров, морфологии, скорости пролиферации и транскрипции генов остео-/одонтобластной дифференцировки. мРНК 0СТ4 была обнаружена в СКП и СКПд, в то время как белок 0СТ4 присутствовал только в ядрах СКП. Однако транскрипция мРНК 0СТ4 в СК зубов была в 100010 000 раз ниже, чем в бластоцистах человека. СКП пролиферировали медленнее и обладали формой, близкой к полигональной, но они активнее реагировали на остеогенные стимулы по сравнению со СКПд. мРНК П111\1Х2 была обнаружена с помощью кПЦР в обоих типах стволовых клеток, но в ходе протеомного анализа белок П111\Х2 оказался только в СКПд. Гены-маркёры одонто-бластного типа остеогенной дифференцировки ОБРР и 0МР1 транскрибировались в СКП, но не в СКПд.
Таким образом, мы показали различия стволовых клеток пульпы зуба и периодонта в экспрессии некоторых нейроэпителиальных и эмбриональных маркёров, морфологии клеток, пролиферативной активности, а также описали особенности остеогенной дифференцировки и отличия протеомных профилей во время неё. Поскольку СКП обладают гораздо более выраженным остеогенным потенциалом, они могут использоваться для ускорения восстановительных процессов в костной ткани и пери-одонте, а быстро пролиферирующие СКПд могут стать основой клеточных продуктов для других целей. Работа поддержана Министерством науки и высшего образования РФ (Соглашение № 075-15-2021-1063 от 28.09. 2021).
МОДИФИКАЦИЯ АЛЬГИНАТНОГО ГИДРОГЕЛЯ УГЛЕРОДНЫМИ НАНОТРУБКАМИ
С.В. Кравченко1, В.В. Мясникова1, 2, С.Н. Сахнов1, 2
1 Краснодарский филиал ФГАУ НМИЦ МНТК Микрохирургия глаза им. С.Н. Федорова Минздрава России, Краснодар, Россия
2 ФГБОУ ВО «Кубанский государственный медицинский университет» Минздрава России, Краснодар, Россия
e-mail: ksv.1991@yandex.ru
Ключевые слова: биосовместимые гели, углеродные на-нотрубки, гидрогель, альгинат натрия, токопроводящий биосовместимый гель, альгинатный гидрогель, орган на чипе.
Альгинатные гидрогели применяются в тканевой инженерии и регенеративной медицине благодаря
биосовместимости, способности имитировать механические и структурные свойства тканей, возможности обеспечивать диффузию кислорода и питательных веществ [1]. Токопроводящие биосовместимые гидрогели представляют существенный интерес при разработке биосовместимых имплантируемых электронных устройств [2]. Обладающие электропроводностью углеродные нанотрубки, являются биосовместимым материалом, имеющим потенциал для применения в тканевой инженерии [3].
Цель работы — оценка возможности получения альги-натного гидрогеля, содержащего углеродные нанотрубки.
В ходе работы в водный раствор альгината натрия перед полимеризацией вносились углеродные нанотруб-ки и субстанция тщательно перемешивалась, после чего из нее формировались пленки толщиной 2 мм и подвергались полимеризации хлоридом кальция. Полимерные гидрогелевые пленки, содержащие углеродные нано-трубки, демонстрировали меньшее электрическое сопротивление в сравнение с альгинатным гидрогелем без нанотрубок. Кроме того, нанотрубки не препятствовали полимеризации и не снижали стабильность гидрогеля.
Таким образом, полученные в рамках данной работы гидрогели на основе альгината, модифицированные углеродными нанотрубками, имеют потенциал для создания на их основе токопроводящих скаффолдов, ткане-инженерных конструкций и элементов систем орган-на-чипе для широкого спектра задач, в том числе, в сфере офтальмологии.
Литература:
1. Шамоян Г.М., Трофименко А.И., Каде А.Х. и др. Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. 2018. № 1(65). С. 67-70.
2. Choi Y., Pank K., Choi H. et al. Polymers. 2021. V. 13. № 7. P. 1133.
3. Бобринецкий И.И., Морозов Р.А., Селезнёв А.С. и др. Гены и клетки. 2011. Т. 6. № 1. С. 85-90.
РАЗРАБОТКА КЛЕТОЧНОЙ МОДЕЛИ НА ОСНОВЕ ТРАНСДИФФЕРЕНЦИРОВКИ ДЕРМАЛЬНЫХ ФИБРОБЛАСТОВ В ИНДУЦИРОВАННЫЕ НЕЙРОНЫ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ПАТОГЕНЕЗА БОЛЕЗНИ ХАНТИНГТОНА
Н.А. Красковская1 2, М.Г. Хотин1, Н.А. Михайлова1
1 Институт Цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: ninaknaskovskaya@gmail.com
Ключевые слова: болезнь Хантингтона, трансдифференци-ровка, нейроны, патология, дендритные шипики, мутантный хантингтин.
Поиск эффективных лекарственных препаратов для лечения нейродегенеративных заболеваний, является актуальной задачей современной биологии и медицины. Для разработки эффективной терапии необходимо наиболее полное понимание молекулярно-клеточных основ патогенеза этих заболевания с учетом особенностей течения заболевания у конкретного пациента. Ввиду того, что получить нейроны из мозга конкретного больного для подобных исследований не представляется возможным, актуальным инструментом стало применение методов перепрограммирования клеток. В настоящем
исследовании применялась методика трансдифферен-цировки для изучения патогенеза болезни Хантингтона (БХ). Мы усовершенствовали протокол на основе микроРНК и транскрипциоцциных факторов MYT1L и NeuroD2[1] для получения популяции индуцированных возбуждающих нейронов (иВН) из дермальных фибро-бластов человека с эффективностью трансдифферен-цировки более 80 процентов для изучения когнитивных нарушений при болезни Хантингтона. В конце процедуры перепрограммирования иВН положительно окрашиваются на канонические нейронные маркеры и реагируют на стимуляцию хлоридом калия и глутаматом. Кроме того, иМСН и иВН способны образовывать дендритные шипики, что позволяет изучать дефекты синаптической передачи при развитии патологии БХ. Кроме того, в полученных нейронах от пациентов с БХ могут быть детектированы агрегаты мутантного белка хантингтина, что является отличительным признаком данной нейропатологии.
Усовершенствованный протокол может быть полезен как для изучения молекулярных и клеточных основ патогенеза БХ а так и для разработки персонализированного подхода к терапии данной нейропатологии. Исследование поддержано грантом Российского научного фонда № 22-75-00106
Литература:
1. Richner M, Victor MB, Liu Y, Abernathy D, Yoo AS. Nat Protoc.
2015;10(10):1543-55
ЭПИМОРФНАЯ РЕГЕНЕРАЦИЯ КОСТНОЙ ТКАНИ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ 3D-КРИОГЕЛЕЙ, СОДЕРЖАЩИХ БИОРЕГУЛЯТОР, ВЫДЕЛЕННЫЙ ИЗ СЫВОРОТКИ КРОВИ БЫКА
М.С. Краснов1, А.П. Ильина3, А.И. Шайхалиев2, Е.В. Сидорский1, В.П. Ямскова3, В.И. Лозинский1
1 ФГБУН Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН, Москва, Россия
2 ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Россия
3 ООО «Институт проблем биорегуляции», Москва, Россия.
e-mail: sneegr@gmail.com
Ключевые слова: биорегуляторы, криогели, 3й-технологии, остеогенез.
В настоящее время в травматологии продолжает оставаться актуальной проблема регенерации костной ткани при осложненных переломах конечностей, а также репарации костных дефектов в челюстно-лицевой хирургии как результата нарушения остеогенетических процессов. В настоящем исследовании была предпринята попытка разработки новых биотехнологий, в основе которых лежит дополнительная активация «собственных» клеточных источников регенерации. В этом аспекте новая группа эндогенных биорегуляторов, обнаруженных в межклеточном пространстве тканей животных, представляется исключительно перспективной. Во многих экспериментах in vitro и in vivo было показано, что они стимулируют восстановление и регенерацию в патологически измененных тканях из-за способности дополнительно активировать клеточные источники регенерации. В данном исследовании был изучен биорегулятор,
