CC BY
37
BASIC RESEARCH - PRACTICAL MEDICINE
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016
УДК 616.36-006.04-089:616.13-005.7-021.6:615.277.3]-092.9
Трещалина Е.М., ЯкунинаМ.Н., Фадеев А.Ю., СмирноваГ.Б., БорисоваЮ.А., Калишьян М.С., Долгушин Б.И., Виршке Э.Р., Косырев В.Ю.
МОДЕЛИРОВАНИЕ ТРАНСАРТЕРИАЛЬНОй ХИМИОЭМБОЛИЗАЦИИ НА КРЫСАХ С ПЕРЕВИВАЕМЫМ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНЫМ РАКОМ ПЕчЕНИ
ФГБУ «Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, 115478, г. Москва, Россия
Моделирование трансартериальной химиоэмболизации (transarterial chemoembolization - TACE) проведено на крысах (n = 6) с чувствительным к доксорубицину (МПД 12 мг/кг) гепатоцеллюлярным раком печени РС1, развившимся в мышцах бедра (в/м) (Vcp 4,5 см3). ТАСЕ выполнена с эластичными микросферами (МС) d = 0,2 мм из поливинилового спирта, нагруженными доксорубицином (MC/cDOX) с высвобождением 7 дней. MC/cDOX 0,034-0,1 мл (кумулятивная доза cDOX 3,3-10,5 мг/кг) вводили однократно в бедренную артерию d ~ 0,16 мм под контролем эмболизации (МС, лигирование артерии) и химиотерапии (cDOX). ТАСЕ приводила к циторедукции на 67% (Т/С 33%, p = 0,0004) с единичной регрессией опухоли и развитием лечебного патоморфоза 1-й степени. Терапевтический выигрыш MC/cDOX выразился в сопряженном с циторедукцией уменьшении скорости роста опухоли (т 11-16 дней против 1,9-2,0 дня в группах контроля) при меньшей на 20% дозе cDOX против МПД. Побочные эффекты ТАСЕ (некроз мягких тканей, 7-16-й день) не связаны с ТАСЕ и связаны с полным выключением регионарного кровотока из-за несоответствия МС и диаметра артерии. Совокупность выявленных эффектов позволила считать модель на крысах с в/м опухолью пригодной для скрининга специфической активности агентов для ТАСЕ. Доклиническое изучение метода целесообразно выполнять на соответствующей модели у крупных животных с регионарной артерией достаточного сечения, позволяющей адекватно выполнять ТАСЕ.
Ключевые слова: гепатоцеллюлярный рак печени; крысы; трансартериальная химиоэмболизация; эффективность; побочные эффекты.
Для цитирования: Трещалина Е.М., Якунина М.Н., Фадеев А.Ю., Смирнова Г.Б., Борисова Ю.А., Калишьян М.С., Долгушин Б.И., Виршке Э.Р., Косырев В.Ю. Моделирование трансартериальной химиоэмболизации на крысах с перевиваемым гепатоцеллюлярным раком печени. Российский онкологический журнал. 2016; 21(5): 259-263. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2016-21-5-259-263 Для корреспонденции: Трещалина Елена Михайловна, д-р мед. наук, проф., руководитель лаборатории комбинированной терапии опухолей НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей; 115478, г. Москва, Каширское шоссе, д. 24; E-mail: treshalina@yandex.ru.
TreshalinaH.M., YakuninaM.N., FadeevA.Yu., Smirnova G.B., Borisova Ju.A., KalishyanM.S., Dolgushin B.I., Virshke E.R., Kosirev V.Yu.
RESULTS OF TRANSARTERIAL CHEMOEMBOLIZATION ON RATS WITH GRAFTED HEPATOCELLULAR CANCER OF LIVER
N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center, Moscow, 115478, Russian Federation
Modeling of a transarterial chemoembolization (TACE) is carried out on rats (n = 6) with hepatocellular cancer of liver RS1 (Vcp = 4.5 cm3) which has developed in muscles of the leg (i.m.). Sensitivity of a tumor to the single introduction of substance of doxorubicine (sDOX) in maximum tolerated doses (MTD) of 5-12 mg/kg with the achievement of significantly tumor growth inhibition on 55-77% (р = 0.001) is previously shown. TACE is executed with the elastic polyvinyl alcohol microspheres in size of 0.2 mm in diameter loaded with doxorubicine (MS/sDOX) with the release within 7 days. MS/sDOX in the volume of 0.034-0.1 ml (a cumulative dose of sDOX of 3.3-10.5 mg/kg) was introduced into a femoral artery (i/a) with a diameter of 0.16 mm under control of an embolization (MS or arterial ligature) and chemotherapy (sDOX). TACE gave rise in the cytoreductive effect of the tumor nodule by 67% (T/C = 33%, p = 0.0004) with the single regression and the development of the grade 1 therapeutical patho-morphosis (TP). The therapeutic gain of MC/sDOX manifested in coupled with the cytoreduction the decline of the tumor growth rate («т» = 11-16 against 1.9-2.0 days in the control group) and at the equal inhibiting action with sDOX dose reduced by 20% against MTD. Side effects of TACE (a necrosis of soft tissues, 7,h-16,h days) were not associated with the full stagnation of a regional blood flow due to the discrepancy of MS to diameter of the artery. The whole of the revealed effects has allowed to consider the modeling of i/m tumor on rats to be suitable for the screening of the specific activity of agents clients for TACE. The preclinical study of the method is rational to execute on the corresponding model on large animals with regional artery of the sufficient cross section of the vessel permitting to perform TACE satisfactory.
Keywords: hepatocellular cancer of liver; rats; transarterial chemoembolization; efficacy; side effects.
For citation: Treshalina H.M., Yakunina M.N., Fadeev A.Yu., Smirnova G.B., Borisova Ju.A., Kalishyan M.S., Dolgushin B.I., Virshke E.R., Kosirev V.Yu. Results of transarterial chemoembolization on rats with grafted hepatocellular cancer of liver. Rossiiskii onkologicheskii zhurnal. (Russian Journal of Oncology). 2016; 21(5): 259-263. (In Russ.). DOI: http://dx.doi.org/10.18821/1028-9984-2016-21-5-259-263 For correspondence: Helena M. Treshalina, MD, PhD, DSc, Prof., Head of the Laboratory of combination
ФУНДАМЕНТАЛЬНАЯ НАУКА - ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗДРАВООХРАНЕНИЮ
therapy of tumors of the Research Institute of Experimental diagnostics and therapy of tumors; Moscow, 115478, Russian Federation, E-mail: treshalina@yandex.ru. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Acknowledgements. The authors express their gratitude to Ltd «Drugs Formulation» (Moscow) for the financial support and the provision of materials for research.
Received 09 June 2016 Accepted 23 June 2016
Трансартериальная (внутриартериальная, в/а) хи-миоэмболизация (transarterial chemoembolization -TACE) относится к малоинвазивным интервенцион-но-радиологическим методам лечения неоперабельных опухолей, в том числе рака печени. Первичные злокачественные опухоли печени составляют 3-5% в структуре онкологических заболеваний, при этом 70% остаются неоперабельными и требуют паллиативной противоопухолевой терапии. ТАСЕ позволяет адресно доставить цитостатик и выключить кровоток в опухоли, в результате чего солитарные опухолевые узлы сокращаются вплоть до полного исчезновения [1-3]. Для проведения ТАСЕ используют микросферы (МС), нагруженные различными цитостатика-ми, в частности доксорубицином, DOX, МС/DOX. В клинической практике ТАСЕ с МС/DOX (DC-Bead, «Biocompatibles UK Ltd», Великобритания) показали значимую эффективность при относительно низкой токсичности [4]. В России для этого метода создаются различные МС, пригодные для ТАСЕ, в частности при опухолях печени [5, 6]. В коллекции ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России имеется пригодный для моделирования ТАСЕ, чувствительный к противоопухолевым цитостатикам штамм перевиваемого солидного гепатоцеллюлярного рака печени с хорошим регионарным кровоснабжением [7]. Настоящее исследование посвящено разработке адекватных доклинических опухолевых моделей для изучения ТАСЕ, соответственно сформулированы цель и задачи исследования.
Цель исследования: разработка доклинической модели на крысах с внутримышечно трансплантированным гепатоцеллюлярным раком печени для изучения ТАСЕ.
Задачи: 1. Оценить чувствительность гепатоцеллю-лярного рака печени крыс РС1 к доксорубицину.
2. На крысах с внутримышечно (в/м) трансплантированным РС1 определить эффективность и побочные эффекты ТАСЕ с помощью нагруженных доксорубицином МС.
Материал и методы
Для экспериментов использованы 80 особей 8-не-дельных половозрелых крыс-самцов массой тела 80-100 г из разведения ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Бло-хина» Минздрава России: 6 крыс для поддержания штамма опухоли, 74 особи для эксперимента.
Исследование проводили на модели гепатоцел-люлярного рака печени крыс РС1 из Банка РОНЦ [7], трансплантированного подкожно (п/к) и в/м крысам по 0,5 мл 10-20% взвеси опухолевой ткани в растворе Хенкса [8]. Чувствительность модели к DOX оценена на п/к РС1 при раннем однократном внутрибрюшинном (в/б) лечении через 48 ч после трансплантации с использованием контроля роста опухоли (КРО). Сравнительное изучение в/а хими-оэмболизации проведено на развившемся в/м РС1 Уср 4,5 см3, что гарантировало наличие регионарного
кровотока. В качестве объектов сравнения использованы КРО, лКРО с лигированной артерией, рКРО с введением разбавителя для МС или МС/DOX, «пустые» МС (контроль эмболизации) и с субстанцией DOX (cDOX).
Для в/а химиоэмболизации/эмболизации использованы МС/cDOX d = 0,2 мм на основе крио-геля поливинилового спирта с мол. массой 86 кДа и степенью дезацелирования 100%, а также «пустые» МС (контроль эмболизации), полученные из лаборатории криохимии биополимеров Института элемен-тоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН. МС/cDOX были нагружены субстанцией DOX («Сикор Сосиэта Италиана Кортикостероиди С.р.л.», Италия) по методике криогранулирования при -12°C из 9% водного раствора указанного полимера [5, 6].
МС/cDOX и МС получены в пробирках Эппен-дорф сухими и для получения инъекционной взвеси МС/cDOX и МС разбавлены ex tempore разбавителем, состоящим из физиологического раствора и рентгеноконтрастного препарата йодпромид-370 в соотношении 1:1. С учетом высвобождения 60% DOX в группах, подвергнутых лечению МС/cDOX, определена кумулятивная доза (КД) высвободившегося за 7 дней цитостатика.
Агенты вводили крысам трансартериально (вну-триартериально, в/а) струйно с помощью инфузи-онной системы, составленной из внутривенного периферического катетера «бабочка» размера до G27 (Troge, Германия) и пластикового шприца 2,0 мл без иглы по описанной методике [9]. Хирургический доступ к бедренной артерии (a. femoralis) крыс выполняли под наркозом с помощью препарата золе-тил-100 (Virbac, Франция) при использовании соответствующего инструментария.
Крыс с п/к РС1 (n = 25) делили на 4 группы: первые 3 группы (n = 6) получали в/б DOX в диапазоне доз 5,0-7,5 - 12 мг/кг, 4-я группа (n = 7) получала в/б 0,5 мл физиологического раствора и использована для КРО без лечения.
Крыс с в/м РС1 (n = 49) делили на 7 групп по 6 крыс: 1-я группа МС/cDOX-0,034 получала в/а лечение с КД = 3,3 мг/кг; 2-я группа МС/cDOX-0,05 получала в/а лечение с КД = 5,4 мг/кг; 3-я группа МС/ cDOX-0,1 получала в/а лечение с КД = 10,5 мг/кг; 4-я группа cDOX получала в/а DOX 12 мг/кг; 5-я группа МС получала в/а МС 0,05 мл; 6-я группа лКРО получала лигатуру на бедренную артерию; 7-я группа рКРО получала в/а 0,5 мл разбавителя для МС.
Эффективность воздействий оценивали по стандартному показателю торможения роста опухоли ТРО% = (Vk- VH00 или T/C% = (V0/VH00, где У0 и Vk средний объем опухоли в опыте или контроле Уср = (a • b • c). В качестве критериев эффективности использовали показатель ТРО > 50% и Т/С < 42% [8]. О результативности химиоэмболизации/ эмболизации в сравниваемых группах судили также по дополнительным показателям, а именно по
BASIC RESEARCH - PRACTICAL MEDICINE
Рис. 2. Скорость роста в/м РС-1 в группах сравнения (лКРО, рКРО, МС, cDOX).
Рис. 1. Чувствительность подкожно трансплантированного гепато-целлюлярного рака печени РС1 к в/б xDOX в диапазоне доз 5,0, 7,5 и 12,0 мг/кг.
Сроки наблюдения в группах cDOX соответствуют 12, 17 и 20-м суткам после лечения, в группе КРО — 14, 19 и 22-м суткам после трансплантации опухоли.
уменьшению скорости роста РС1 через 7 дней после воздействия, рассчитанной по соотношению конечного и исходного объемов опухолевых узлов в динамике (У/у), времени удвоения объема опухоли т и коэффициенту эффективности K (топыта/ т ). Верификацию ингибирующего действия
контроля7 г т ^
выполняли с помощью патоморфологической оценки лечебного патоморфоза (ЛП) в ткани РС1 после в/а лечения в соответствии с известными критериями [10].
Результаты подвергнуты статистической обработке с помощью компьютерной программы Exel 2013 и Exel для Windows 2007 с использованием критерия Г-test Фишера, значимыми считали различия при p < 0,05.
После завершения экспериментов животных умерщвляли путем передозировки эфирного наркоза при соблюдении гуманных методов обращения, принятых в РФ [11].
Результаты
Показано, что п/к РС1 чувствителен к в/б DOX, введенному однократно в диапазоне переносимых доз 5-12 мг/кг, ТРО 54-77% (p < 0,05) (рис. 1). Лучшие результаты в сравнении с группой КРО получены на 20-е сутки после лечения при максимальной дозе 12 мг/кг, Уср 6463 ± 831 мм3 против Уср 16749 ± 6080 мм3.
При оценке эффективности объектов сравнения при изучении в/а химиоэмболизации с помощью МС/cDOX получены следующие данные. В группах без специфического лечения (Т/С 100%) лиги-рование артерии (лКРО) и в/а введение разбавителя (рКРО) практически не влияют на скорость роста опухоли, что описывается соотношением У/У 2,5 и 2,3 (21-е сутки) и У/У0 3,8 и 3,4 (25-е сутки) без достоверных различий между группами. Это позволяет равнозначно использовать эти группы в качестве КРО без лечения. Эффективность эмболизации пустыми МС или проведение в/а монохимиотерапии DOX в разовой дозе 12 мг/кг практически равнозначно ингибируют рост опухоли.
На 21-е и 25-е сутки скорость роста опухоли в
Таблица 1
Скорость роста в/м РС1 в группах сравнения
Группа V/V по отношению к воздействию на сутки роста опухоли т, дни* к**
0-е 21-е 25-е
лКРО 1,0 2,5 3,8 2,0 1,0
МС 1,0 1,2 1,4 8,0 4,0
cDOX 1,0 1,3 1,6 8,5 4,3
Примечание: * - время удвоения объема опухоли, дни; ** ■ коэффициент задержки роста опухоли, т в опыте/т в контроле.
группе МС описывается соотношением VIV 1,2 и V/V 1,4, соответственно Т/С = 53% (p = 0,03) и 40% (p = 0,004), K = 4,0. В группе cDOX - V/V0 1,3 и VI V0 1,6, соответственно Т/С = 51-42% (p = 0,03), K= 4,3 (рис. 2, табл. 1). Относительные показатели роста опухоли в контрольных группах представлены в табл. 1.
Изучение эффективности МС/DOX при в/а хи-миоэмболизации крыс показало, что при объемах 0,034 и 0,05 мл терапия относительно малоэффективна. Ингибирование роста опухоли составляет T/Cmin 41% (p = 0,03) и Т/С 38% (p = 0,0001) соответственно, но не сопровождается регрессией. На 21-е и 25-е сутки скорость роста опухоли в этих группах идентична и описывается соотношением V/V 1,2 и 1,5 против у/у 2,5 и 3,8 в группах контроля, т = 11 дней против 2 дней в группе КРО, K= 5,5.
Выраженное ингибирование роста опухоли отмечено только в группе МСЮ0Х-0,1 (КД = 10,5 мг/кг), T/Cmin 33% (p = 0,00004). Через 3 дня после лечения у одной крысы получена частичная регрессия на 11%, Vt4 4811 мм3 против Vt3 5347 мм3. Скорость роста опухоли на 21-е и 25-е сутки относительно снижена и описывается соотношением V/V0 1,1 и 1,2 против V/У 2,5 и 3,8 в группах контроля, т = 16,0 против т = 2,0 в группах контроля, K= 8,0 (табл. 2, рис. 3).
Анализ патоморфологических изменений в опухолевом материале после в/а химиоэмболизации показал, что в группах MdcD0X-0,034 и МС/cDOX-0,05 показатели ЛП не отличались от контролей.
Сравнительный анализ показателей ЛП в группах MC/cD0X-0,1 (КД 10,5 мг/кг) и cDOX 12 мг/кг показал, что в этих группах все значения не различаются между собой, но отличаются от контрольных: число
ФУНДАМЕНТАЛЬНАЯ НАУКА - ПРАКТИЧЕСКОМУ ЗДРАВООХРАНЕНИЮ
Таблица 2
Относительные показатели роста в/м РС1 под действием МС/ cDOX в диапазоне доз
Группа V(/V0 на сутки лечения** Эффективность
1-е 3-и 7-е т, дни** к*** Группа сравнения
КРО* 1,0 2,5 3,8 2,0 1,0 лКРО
MC/cD0X-0,034 1,0 1,2 1,5 11,0 5,5 лКРО
MC/cD0X-0,05 1,0 1,2 1,5 11,0 5,5 лКРО
8,0 лКРО
MC/cD0X-0,14* 1,0 1,1 1,2 16,0 1,9 cDOX
2 МС
* - контроль роста опухоли у крыс с лигиро-** - время удвоения объема опухоли, дни; ***
Примечание. ванной артерией - коэффициент задержки роста опухоли, равный т в опыте/т в контроле; 4* - кумулятивная доза cDOX КД 10,5 мг/кг.
^ 20000п 2
I 15000
&
□
° 10000
ш £ о
° 5000
>s
s
0
2 а.
0 лКРО [1 рКРО МС Ш cDOX Щ MC/cDOX-0,034 0 MC/cDOX-0,05 g MC/cDOX-0,1
Рис. 3. Сравнительный анализ циторедуктивного эффекта в/а химиоэмболизации с помощью МС/cDOX на развившемся в/м гепато-целлюлярном раке крыс РС1.
клеток в митозе 2-4% против 3-5%, клеток с признаками апоптоза 0,3-0,5 и 0,3-0,7% против 0,2-0,5%, площадь некроза - до 10-12% против 8-10% (табл.
3).
Переносимость лечения МС/cDOX при всех использованных объемах была удовлетворительной. Побочные эффекты при в/а химиоэмболизации МС/ cDOX проявлялись у части крыс через 7-16 дней некрозом различной интенсивности мягких тканей лапки и были вызваны полным выключением регионарного кровотока из-за несоответствия диаметру артерии. Указанные побочные эффекты являются неспецифическими для химиоэмболизации с цитоста-тиком. В течение 7 дней наблюдения характерных проявлений побочного действия cDOX не отмечено.
Заключение
Моделирование трансартериальной химиоэм-болизации (transarterial chemoembolization - TACE) проведено на крысах (n = 6) с чувствительным к док-
Таблица 3
Сравнительная характеристика показателей лечебного пато-морфоза в в/м РС1 под действием в/а химиоэмболизации с помощью МС/cDOX
Группа Процент в срезе
клеток с признаками митоза клеток с признаками апоптоза площади некроза
MC/cDOX-0,034 3-5 0,2-0,5 8-10
MC/cDOX-0,05 3-5 0,2-0,5 8-10
MC/cDOX-0,1 2-4 0,3-0,5 10-12
MC 3-5 0,2-0,5 8-10
DOC 2-4 0,3-0,7 10-12
лКРО, рКРО 3-5 0,2-0,5 8-10
сорубицину (МПД = 12 мг/кг) гепатоцеллюлярным раком печени РС1, развившимся в мышцах бедра (в/м) ^сР 4,5 см3). ТАСЕ выполнена с эластичными микросферами d = 0,2 мм из поливинилового спирта, нагруженными доксорубицином (MC/cDOX) с высвобождением 7 дней. MC/cDOX - 0,034-0,1 мл (кумулятивная доза cDOX -3,3-10,5 мг/кг) вводили однократно в бедренную артерию (в/а) d ~ 0,16 мм под контролем эмболизации (МС, лигирование артерии) и химиотерапии ^DOX). ТАСЕ приводила к циторе-дукции на 67% (Т/С 33%, p = 0,0004) с единичной регрессией опухоли и развитием лечебного патомор-фоза 1-й степени. Терапевтический выигрыш MC/ cDOX выразился в сопряженном с циторедукцией уменьшении скорости роста опухоли (т 11-16 дней против 1,9-2 дней в группах контроля) при меньшей на 20% дозе cDOX против МПД. Побочные эффекты ТАСЕ (некроз мягких тканей, 7-16-й день) не связаны с ТАСЕ и связаны с полным выключением регионарного кровотока из-за несоответствия МС и диаметра артерии. Совокупность выявленных эффектов позволила считать модель на крысах с в/м опухолью пригодной для скрининга специфической активности агентов для ТАСЕ. Доклиническое изучение метода целесообразно выполнять на соответствующей модели у крупных животных с регионарной артерией достаточного сечения, позволяющей адекватно выполнять ТАСЕ.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование. Авторы выражают благодарность ООО «Технология лекарств» (г. Москва) за финансовую поддержку и предоставленные материалы для исследования.
ЛИТЕРАТУРА
1. Долгушин Б.И., Виршке Э.Р., Косырев В.Ю. Трансартериальная химиоэмболизация микросферами с доксорубицином в лечении неоперабельных больных гепатоцеллюлярным раком (отдаленные результаты). Анналы хирургической гепато-логии. 2013; (4):10-16.
2. Wang Y.X., De Baere T., Ide J.M., Ballet S.Ch. Transcatheter embolization therapy in liver cancer: an update of clinical evidences. J. Cancer Res. 2015; 2: 96-121.
3. Tsochatzis E.A., Germani G., Burroughs A.K. Transarterial che-
moembolization, Transarterial chemotherapy, and intra-arterial chemotherapy for hepatocellular carcinoma treatment. Semin. Oncol. 2010; 37(2): 89-93.
4. Долгушин Б.И., Патютко Ю.И., Виршке Э.Р. Артериальная химиоэмболизация микросферами с доксорубицином (DC BEAD™) в лечении больных гепатоцеллюлярным раком (предварительные результаты). Анналы хирургической гепа-тологии. 2009; (2): 53-8.
5. Лозинский В.И. Криотропное гелеобразование растворов поливинилового спирта. Успехи химии. 1998; 67(7): 641-55.
6. Savina I.N., Hanora A., Plieva F.M., Galaev I.Yu., Mattiasson B., Lozinsky V.I. Study of cryostructuration of polymer systems. XXIV. Poly(vinyl alcohol) cryogels filled with particles of strong anion-exchanger: properties of the composite materials and potential application. J. Appl. Polym. Sci. 2005; 95(3): 529-38.
7. Райхлин Н.Т., Андронова Н.А., Герасимова Г.К. Морфологическая и биохимическая характеристика холангиоцеллюляр-ного рака РС-1 при подкожной и внутрипеченочной трансплантации. Экспериментальная онкология. 2001; (2): 126-30.
8. Трещалина Е.М., Андронова Н.В., Гарин А.М. Доклиническое изучение противоопухолевых препаратов. В кн.: Рациональная фармакотерапия в онкологии. М.: Литтерра; 2015: 75-82.
9. Якунина М.Н., Фадеев А.С., Калишьян М.С., Трещалина Е.М Особенности проведения эмболизации крупными микросферами бедренной артерии крыс и кроликов. Российский онкологический журнал. 2015; (5): 40-3.
10. Лавникова Г.А. Гистологический метод количественной оценки терапевтического повреждения опухоли. Методические рекомендации. М: 1979.
11. Большаков О.П., Незнанов Н.Г., Бабаханян Р.В. Дидактические и этические аспекты проведения исследований на биомоделях и на лабораторных животных ВОЗ. Качественная клиническая практика. 2002; (9): 1-15.
REFERENCES
1. Dolgushin B.I., Virshke E.R., Kosyrev V.Yu. Transarterial che-moembolization with doxorubicin microspheres in the treatment of patients with unresectable hepatocellular carcinoma (long-term results). Annaly khirurgicheskoy gepatologii. 2013; (4):
BASIC RESEARCH - PRACTICAL MEDICINE
10-6. (in Russian)
2. Wang Y.X., De Baere T., Ide J.M., Ballet S.Ch. Transcatheter embolization therapy in liver cancer: an update of clinical evidences. J. Cancer Res. 2015; 2: 96-121.
3. Tsochatzis E.A., Germani G., Burroughs A.K. Transarterial che-moembolization, Transarterial chemotherapy, and intra-arterial chemotherapy for hepatocellular carcinoma treatment. Semin. Oncol. 2010; 37(2): 89-93.
4. Dolgushin B.I., Patyutko Yu.I., Virshke E.R. Arterial chemoem-bolization with doxorubicin microspheres (DC BEAD™) in the treatment of patients with hepatocellular carcinoma (preliminary results). Annaly khirurgicheskoy gepatologii. 2009; (2): 53-8. (in Russian)
5. Lozinskiy V.I. Barotropic gelation of polyvinyl alcohol solutions. Uspekhi khimii. 1998; 67(7): 641-55. (in Russian)
6. Savina I.N., Hanora A., Plieva F.M., Galaev I.Yu., Mattiasson B., Lozinsky V.I. Study of cryostructuration of polymer systems. XXIV. Poly(vinyl alcohol) cryogels filled with particles of strong anion-exchanger: properties of the composite materials and potential application. J. Appl. Polym. Sci. 2005; 95(3): 529-38.
7. Raykhlin N.T., Andronova N.A., Gerasimova G.K. Morphological and biochemical characteristics cholangiocellular cancer PC-1 after subcutaneous and intrahepatic transplantation. Eksperimental'naya onkologiya. 2001; (2): 126-30. (in Russian)
8. Treshalina E.M., Andronova N.V., Garin A.M. Preclinical studies of anticancer drugs. In: Rational pharmacotherapy in Oncology. Moscow: Litterra; 2015: 75-82. (in Russian)
9. Yakunina M.N., Fadeev A.S., Kalish'yan M.S., Treshhalina E.M. Features of the large microspheres embolization femoral artery in rats and rabbits. Rossiyskiy onkologicheskiy zhurnal. 2015; (5): 40-3. (in Russian)
10. Lavnikova G.A. Histological Quantification Method Therapeutic Tumor Lesions: Methodical recommendations. Moscow; 1979. (in Russian)
11. Bol'shakov O.P., Neznanov N.G., Babakhanyan R.V. Didactic and ethical aspects of research on biomodels and WHO laboratory animals. Kachestvennaya klinicheskaya praktika. 2002; (9): 1-15. (in Russian)
Поступила 09.06.16 Принята к печати 23.06.16
ПОДПИСКА НА «РОССИИСКИИ ОНКОЛОГИЧЕСКИМ ЖУРНАЛ» ОАО «ИЗДАТЕЛЬСТВО «МЕДИЦИНА» ПРЕДЛАГАЕТ ВАМ ЛЮБОЙ УДОБНЫЙ ДЛЯ ВАС СПОСОБ ПОДПИСКИ: Подписка через интернет: www.akc.ru www.pressa-rf.ru Подписка на электронную версию журнала: www.elibrary.ru В любом почтовом отделении РФ по действующим каталогам Индекс по каталогу «Роспечать»: 72159 Индекс по каталогу «Пресса России»: 41415 Форма подписки - полугодовая: На 1-е полугодие подписка принимается с 1 сентября На 2-е полугодие - с 1 апреля Подписка оканчивается в сроки, определяемые распространителем (Агентством «Роспечать») самостоятельно. По всем вопросам, связанным с подпиской на журнал, Вы можете обратиться в отдел реализации периодической литературы: @ +7(495)678-6562 е-тэИ: strashko.mila@yandex.ru
