CC BY
22
УДК 619:616.995.429.1
МОДЕЛИРОВАНИЕ ФАСЦИОЛЕЗА У ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ
Постееой А.Н.
ФГБНУ «ВНИИ фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К.И. Скрябина»
Введение. На территории Российской Федерации инвазия ЕазеЫа кграИеа встречается во всех регионах страны. Заражение крупного и мелкого рогатого скота возбудителем ведет к снижению привесов, удоев молока на 25-40%, настрига шерсти, а также к ухудшению качества животноводческой продукции [1 - 3]. Для успешного оздоровления поголовья крупного рогатого скота следует проводить комплекс мер по ранней диагностике и лечебно-профилактическим мероприятиям. На эффективность диагностических исследований положительное влияние могут оказать и такие показатели, как биохимические, гематологические, иммунологические и другие. Известно, что интенсивное инвазирование трематодами животных вызывает снижение содержания эритроцитов, фосфора, кальция, гемоглобина, повышение лейкоцитов, эозинофилов, уровня ферментов печени в крови [1, 2]. Для изучения вопросов патогенеза, проверки новых разработанных антгельминтиков, подходов к уточнению профилактических мероприятий требуется создание лабораторных моделей. Прежде чем заниматься борьбой с инвазией в условиях животноводческого производства, большую часть необходимой информации по исследовательским вопросам дает моделирование инвазии в условиях лаборатории.
В связи с этим, в сравнительном аспекте, нами проведено модельное исследование паразитологических, гематологических и биохимических показателей при экспериментальном фасциолезе у лабораторных животных.
Материалы и методы. Исследования проводили на 10 головах крупного рогатого скота черно-пестрой породы 6- и 9-ти летнего возраста естественно инвазированных фасциолами, поступивших на мясокобинат Московской области (ООО Оптима) из хозяйства Стародубского района Брянской области. У животных взяли фекалии из прямой кишки, кровь из яремной вены и после убоя и исследовании печени. Сравнительные аспекты инвазии изучили на лабораторной модели. Экспериментально инвазировали 20 лабораторных белых крыс (возраст 3 месяца, масса 250 - 300 г) и 6 кроликов породы Советская Шиншилла (возраст 6 месяцев, масса 3,5 - 3,8 кг) в дозе 10 адолескариев Р. кграИеа на голову. Адолескарии трематод получали путем выплода церкариев из малого прудовика, собранных на выгульных пастбищах Брянской и Московской областей в апреле -мае 2015 - 2016 гг., в кристаллизаторах на фрагменты злаковых трав (порея ползучего и других) размером 4-5 см. Экспериментально инвазированных животных выдерживали 3 - 3,5 месяца согласно условиям содержания и разведения животных в вивариях. Затем, лабораторное поголовье животных повергали эвтаназии, получали от них фекалии, кровь и взрослых трематод. В пробах фекалий объемом 3 г выявляли наличие яиц возбудителя методом
последовательных промываний. В крови определяли количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу общепринятыми методами, активность АЛТ (аланинаминотрансферазы), АСТ (аспартатаминотрансферазы) и ЩФ (щелочной фосфатазы) - на биохимическом анализаторе «НйасЫ-902». Для стабилизации крови был использован гепарин фирмы «Биохим». В качестве контроля показателей крови использовали пробы от неинвазированных фасциолами животных тех же возрастных групп (5 голов крупного рогатого скота, 3 крысы и 3 кролика). Полученные показатели обработали и проанализировали с помощью вариационной статистики и по компьютерной программе «Биометрия».
Результаты. У естественно инвазированных фасциолами животных в пробах фекалий из прямой кишки методом последовательных промываний яйца возбудителя трематодоза регистрировались в 80% случаев (8 положительных из 10 исследованных проб) (табл. 1). При экспериментальном заражении лабораторных грызунов яйца гельминта в пробах фекалий были выявлены в 100% случаев. Число обнаруженных трематод в печени естественно инвазированных животных крупного рогатого скота варьировала от 16 до 58 экземпляров на голову, у экспериментально инвазированных от 2 до 5 экземпляров. В опытном эксперименте приживаемость фасциол составила 35% (у крыс) и 40% (у кроликов). Размер половозрелых гельминтов также отличался. У лабораторных животных он составил 2,8 - 2,9 см, а у крупного рогатого скота - 3,8 см.
Копрологическим методом последовательных промываний при исследовании крупного рогатого скота на фасциолез, не всегда удается диагностировать естественное инвазирование паразитом.
Таблица 1
Показатели фасциолёзной инвазии у животных при вскрытии
Вид животного ЭИ (%) ИИ (экз.) Приживаемость гельминтов,% Размер выделенных марит (см)
Естественное инвазирование (возраст паразитирования неизвестен)
Крупный рогатый скот 8 из 10(80,0) 16-58 - 3,8±0,1
Экспериментальное инвази рование (3-3,5 месяца после инвазии)
Крыса лабораторная 20 из 20(100) 2-5 35 2,8±0,5
Кролик Советская Шиншилла 6 из 6(100) 3-5 40 2,9±0,4
С помощью аналитических исследований крови определили физиологическое состояние и показатели обмена веществ в организме естественно и экспериментально инвазированных животных.
Таблица 2
Гематологические и биохимические показатели крови животных при спонтанном и экспериментальном заражении фасциолами
Вид животного
Показатели крови Крупный рогатый скот Крыса лабораторная Кролик Советская
животных Шиншилла
Опыт Контроль Опыт Контроль Опыт Контроль
Лейкоциты, 11,0±0,5 8,2±0,4 16,1±1,1 14,3±0,9 14,1±3,7 8,0±1,9
109/л Р<0,99 Р<0,95 Р<0,99 Р<0,99 Р<0,99 Р<0,99
Эозинофилы, 12,6±3,9 2,3±0,4 8,3±2,7 1,3±0,2 7,2±1,4 1,8±0,4
% Р<0,99 Р<0,95 Р<0,99 Р<0,99 Р<0,99 Р<0,99
АЛТ, ед/л 36,7±0,3 28,3±0,2 39,6±1,6 25,8±0,7 38,4±2,1 24,0±0,6
ACT, ед/л 51,3±4,7 42,4±0,2 48,9±0,9 39,2±1,2 54,8±3,7 40,1±0,8
ЩФ, ед/л 77,3±0,4 42,6±0,3 81,3±4,7 27,6±1,5 64,7±2,7 32,1±1,3
Гематологические и биохимические показатели крови, естественно и экспериментально зараженных животных возбудителем трематодоза, принципиально не отличаются от контрольной (не инвазированной) группы животных. У больных моделей из гематологических показателей отмечается лейкоцитоз и эозинофилия - 16,1х109 (у крыс), 14,1 х109 (у кроликов); 8,3% (у крыс), 7,2% (у кроликов), соответственно. Завышенные показатели АЛТ и ACT в крови инвазированных животных по сравнению с контролем связано с выделением их через разрушенные плазматические мембраны гепатоцитов, и концентрацией ферментов в крови животных. Увеличение показателя щелочной фосфатазы по сравнению с контролем связано с воспалительным процессом в органе-мишени и разрушением клеток печени. Уровни исследуемых ферментов четко показывают физиологическое (функциональное) состояние гепатоцитов. Этот факт имеет большое значение при терапевтических и профилактических мероприятиях, направленных на ликвидацию инвазии.
Заключение. На основании полученных результатов нам удалось получить модели фасциолезной инвазии на белых крысах и лабораторных кроликах с основными характерными показателями для данной инвазии. Независимо от сезона года и хозяев гельминта можно исследовать многие вопросы инвазирования фасциолами, а также разрабатывать лечебно-профилактические мероприятия в условиях лаборатории. Считаем перспективным диагностировать фасциолезную инвазию у естественно зараженных животных путем дополнительных лабораторных исследований, как паразитологическими, так и общепринятыми методами исследования биологических жидкостей.
Литература: ГВеденеева И.Н.//Российский паразитологический журнал. -2007. - №3. - С. 44-46. 2.Кажаров А.З., Шакбиев И.К., Берсанукаева И.К., Шакбиев К.К., Мантаева С.С., Киштикова Ф.И., Биттиров А.М.//Вестник
Красноярского государственного аграрного университета. - 2013 г. - №2,- С. 124125. З.Паустов В.М.//Физиология. - 2003. -№1,- С. 63-68.
Modeling of Fasciola hepatica infection on laboratory animals. Postevoy A.N. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants.
Summary. One establishes rat and rabbit models of F. hepatica infection maintaining the key characteristic features of that infection. Regardless of season and the hosts of helminth many issues of F. hepatica infection can be investigated as well as develop therapeutic and prophylactic measures in the laboratory conditions.
