CC BY
12
М. А. СУРАЖЕВСКАЯ, Е. В. ДИАНОВА и А. А. ВОРОШИЛОВА
Многократное применение мембранных фильтров при исследовании воды на кишечную палочку
Из бактериологического отделения Санитарного института им. Эрисмана
Мембранные фильтры в последнее время приобрели большое значение при бактериологическом исследовании воды.
Способ бактериологического обследования различных водоисточников при помощи этих фильтров не уступает способу Эйкмана. Применение их особенно ценно в настоящее время ввиду дефицита реактивов (глюкоза и пептон), необходимых для исследования воды по способу Эйкмана.
В связи с массовым употреблением мембранных фильтров нами было поставлено испытание многократного употребления одного и того же фильтра при определении кишечной палочки в воде.
Неоднократное использование мембранных фильтров для выращивания микробов может повести к накоплению в фильтрах продуктов жизнедеятельности микробов. Кроме того, при выращивании кишечной палочки на мембранных фильтрах последние адсорбируют краски, входящие в состав различных сред, употребляемых для выращивания кишечной палочки. Накопляясь в многократно используемых фильтрах, эти краски могут угнетать развитие кишечной палочки.' При перекладывании фильтра с одной среды (Эндо) на другую (Левина) он, адсорбируя новую краску, приобретает цвет, не свойственный ни той, ни другой; полученная новая краска может оказать нежелательное влияние на рост кишечной палочки. *
Исходя из этих соображений, мы (сопоставляли развитие бактерий на мембранных фильтрах, бывших в употреблении, и совершенно новы«. Для этого мы отфильтровывали 100 см8 водопроводной воды через новые и через, использованные фильтры, которые затем помещались на мясо-пептонный агар-агар и на среду Левина. Результаты наших опытов иллюстрируются табл. 1.
Таблица 1. Количество колоний, выросших на фильтрах
Количество профильтрованной водопроводной воды в см3 Фильтр выращен на мясо-пептонном агаре Фильтр выращен на среде Левина
первичный вторичный первичный 4 вторичный
100 55 97 55 25
100 130 122 54 92
100 65 25 47 68
Как видно из таблицы, количество колоний микробов, выросших на' первичных фильтрах на простом агаре и на среде Левина, не отличается по своему количеству от выросших на вторичных фильтрах. Колебания в ту и другую сторону одинаковы как на первичных, так и на вторичных фильтрах.
Для выяснения влияния адсорбированной краски на рост микробов мы производили подсчет колоний, выросших на фильтрах после двукратного и троекратного их употребления. Мы выращивали микробов на
среде Эндо и Левина и перекладывали фильтры после вторичного и третичного их употребления со среды Эндо на среду Левина и обратно. Для опыта водопроводная вода заражалась различным количеством кишеч-«ой палочки. Результаты предста-влены в табл. 2.
Таблица 2. Количество колоний, выросших на фильтрах
Количество водопроводной воды в СИ3 \ Количество добавленных Фильтр ы Фильтры переложены на среду Эндо со среды Левина
кишечных палвчек первичный вторичный третичный вторично третично
Рост Н а среде Энд О
100 100 100 100 50 25 25 25 76 19 24 17 72 27 25 23 28 13 84 29 97 25 33 19
Рост на с р е Л е в и н а
>— *—' О ООО О ООО 50 25 25 25 80 13 28 21 62 15 20 9 24 21 62 35 71 34 Сливной рост 21
Из табл. 2 видно,! что при вторичном и третичном употреблении фильтра количество колоний не снижается независимо от того, выращен ли фильтр вторично на той же среде, на которой выращивались микробы в первый раз при его употреблении, или для вторичного и третичного выращивания взята другая среда.
Также не дает разницы при подсчете колоний зараженная кишечной палочкой колодезная вода после фильтрации через первичные, вторичные и третичные мембранные фильтры при непосредственном выращивании на той же среде или после перекладывания фильтра с одной среды на другую. Фильтры выращивались в термостате при 43° в увлажненной камере (табл. 3).
Таблица 3. Количество колоний, выросших на фильтрах
Количество к 'лодезной воды в см3 Количество добавленных кишечных палочек 4 первичный и л ь т р вторичный ы третичный Втот ичный фильтр, переложенный со среды Левина на среду Эндо
Рост на среде Эндо
25 ■ 3 30 38 27 40
Рост на среде Л евина
25 13 20 1 20 21 29
Хотя двух- и троекратное употребление мембранных фильтров для выращивания на них бактерий не влияет, как видно из приведенных работ, на развитие последних, но при многократном употреблении фильтров могут возникнуть подозрения о вредном действии краски и продуктов обмена, адсорбированных фильтрами. Кроме того, поры фильтра мо-
гут постепенно забиваться. В таких случаях можно прибегнуть к обработке фильтров. При этом надо учесть, что хотя фильтры и состоят из нитроклетчатки, вещества очень стойкого к химическим воздействиям, но от продолжительного соприкосновения с сильными кислотами и щелочам« они могут разрушиться. Поэтому для обработки мембранных фильтров можно применять либо крепкие растворы, но на короткий срок и без нагревания, либо слабые растворы, но на более продолжительное время и также без нагревания!.
Нами было испытано действие уксусной, соляной и азотной кислоты,, хлорной извести в смеси с азотной кислотой и хлорной извести в смеси с кислым сернокислым натрием. Наиболее эффективным оказалось применение крепкой азотной кислоты, хлорной извести в смеси с азотной кислотой и хлорной извести с кислым сернокислым натрием. При такой обработке фильтры, снятые со среды Эндо, обесцвечиваются полностью, если на них не было колоний кишечной .палочки. От этих колоний на фильтре остаются ржавые точки. Скорость обесцвечивания фильтра зависит как от степени окрашенности его, так и от концентрации применяемых для их обработки растворов.
Размеры пор у обработанных фильтров нами не определялись, но, судя по тому, что обработка не изменяет скорости фильтрации и фильтрующую способность обработанных фильтров, можно думать, что применяемая нами методика обработки не влияет на структуру фильтров. Профильтровывая бактериальную взвесь через новый фильтр и через фильтры, обработанные девятью различными способами, мы получали при последующем культивировании этих фильтров на питательной среде одинаковые количества и одинаково развившиеся колонии бактерий {табл. 4 и 5).
Техника обработки мембранных фильтров крайне проста и требует только осторожности во избежание их механических повреждений. Использованный фильтр, снятый с питательной среды с чашки Петри,
Таблица 4. Количество колоний, выросших на фильтрах
Способ обработки, Новый фильтр Обряботано азотной кислотой Обработано хлорной из-ве 1 ью азотная кислота Обработано хлорной известью 4- кислый с.рнокислый натрии
Концентрация 5°/о 10% 25% 50% 0,1% 0,5% 0,1% 0,5% 1%
растворов з V,
Продолжитель- — 30 2'/г 20 40 7 ' 30 30 15
ность обра- часов часа часа минут минут минут минут минут минут
ботки
Количество вы- 43 40 34 33 43 31 41 42 39 28
росших коло-
нии
Таблица 5. Количество колоний, выросших на фильтре, обработанном крепкой азотной кислотой
На какой среде выращено Ночый фильтр Фильтр, 1 бработан-ный крепкой азотной кислотой, в течение 15 минут | 2 часов
Среда Эндо ......... 24 28 28
» » ......... 17 20 20
Среда Левина ........ 28 24 11
» » ........ 21 17 19
промывают в нескольких водах, высушивают на бумаге, затем! обрабатывают одним из следующих способов:
1. Фильтр погружают в широкий бюко (или в баночку с пробкой) с крепкой азотной кислотой на 3—10—30 минут или с разбавленной кислотой на более длительный срок, до обесцвечивания.
2. Фильтр опускают в смесь хлорной извести и азотной кислоты в равном процентном соотношении. Концентрации их могут колебаться от 0,1 до 1%. При 0,1% концентрации растворов обесцвечивание продолжают от 40 минут до 5 часов, при 0,5°/о концентрации — от 7 минут до 3 чяоов,
3. Фильтр обрабатывают смесью хлорной извести и кислого сернокислого натрия также в равном процентном! соотношении от 0,1 до 1°/о в течение от 15 минут (при 1%) до 3—4 часов (при 0,1 %>).
Обесцвеченные фильтры вынимают {следы от колоний кишечной па- -лочки (полностью не исчезают), промывают в нескольких водах или же под краном в струе воды в течение дня и кипятят 5—6 минут. Сохранять обесцвеченные фильтры можно сухими. Одна и та же азотная кислота» может быть употреблена много раз. Растворы* с хлорной известью следует приготовлять перед употреблением. При такой обработке фильтров после каждого их употребления ими можно пользоваться до 9—10 раз.
Приводим сравнительный результат выращивания кишечной палочки на новом мембранном! фильтре и на фильтре, который употреблялся 9 раз, подвергаясь после каждого употребления обработке 0,5% хлорной извести в смеси с 0,5% кислым сернокислым натрием (табл. 6). Через фильтр отфильтровывалась вода, содержавшая культуру кишечной палочки.
Таблица 6. Количество колоний на фильтре
Дзта опита Новый фильтр Повторный фильтр Повторность употребления фильтра
14.VIII...... • ■ А ■ 620 600 2
17. VIII...... Нигде колонии не раз- 3
.вились. Было внесено
мало бактерий
19.VIII...... 1 500 1 600 4
20.VIII..... 1 800 * 1 500 5
21. VIII...... 1 400 1 500 6
22.VIII...... Нигде колонии не 7
развились
25.VIII...... 760 800 8
26.VIII . • .... 64 86 9
Как видно из табл. 6, многократность использования фильтров не влияет на их пористость и не придает им никаких отрицательных свойств, которые тормозили бы развитие бактерий. Девяти-десятикратное употребление делает фильтр хрупким, что и ограничивает его дальнейшее употребление. '
Выводы
1. Многократное употребление фильтров не влияет .на развитие на них микробов вообще и в частности кишечной палочки.
2. Фильтры можно употреблять для повторного выращивания кишечной палочки независимо от того, на какой среде было произведено первичное выращивание. 1 ; ' 1 • 1 1
3. Обесцвечивание мембранных фильтров возможно азотной кислотой, хлорной известью с азотной кислотой и хлорной известью с кислым сернокислым натрием.
4. При обработке фильтра после каждого его употребления им можно пользоваться 9—10 раз.
В. С. ЧЕТВЕРИКОВ
Санитарное дело в СССР во время первых
двух лет войны
1. Санитарные кадры
НКЗдрав СССР за последние два года перед Великой отечественной войной провел ряд мероприятий по укреплению санитарных кадров в стране. Приказом наркома здравоохранения от 8.Ш.1940 было установлено, что на должность госсанинспекторов союзной республики, АССР, края, области и города могут назначаться только медицинские работники с высшим образованием. Для систематического укомплектования вакантных мест санитарных врачей и санитарных фельдшеров широко проводилась подготовка специальных санитарных, (врачебных и фельдшерских кадров на санитарных факультетах медвузов и в средних медицинских школах по специально разработанным учебным планам и программам. Преподавательские кадры медвузов и школ были укомплектованы квалифицированными преподавателями. С 1938 по 1940 г. на сани-тарно-противоэпидемическую работу было направлено 3 976 человек из числа врачей, окончивших санитарно-гигиенические и лечебные факультеты медицинских институтов, а в 1941 г. 1 500 врачей.
Несмотря на это, в последние годы рост санитарных кадров все же резко отставал от темпов роста сети санитарных учреждений и общей численности врачей по Союзу ССР. В то время как с 1936 по 1940 г. общее количество врачей увеличилось на 22 000, число санитарных врачей осталось без изменений, так как значительная часть их (самовольно или с разрешения органов здравоохранения) переходила на лечебную и административную работу. Санитарные кадры таяли.
Для борьбы с этим НКЗдрав СССР приказом № 104 от 12.111.1941 предложил наркомздравам союзных республик возвратить на санитарную и противоэпидемическую работу: а) всех врачей, окончивших санитарно-гигиенические факультеты, а также направленных по окончании медицинских институтов на санитарно-противоэпидемическую работу, и б) всех врачей, окончивших лечебные факультеты в 1939 и 1940 гг. и направленных по путевкам на санитарную и противоэпидемическую работу. Это мероприятие позволило возвратить на санитарную работу сотни врачей.
Вместе с тем районным, городским, краевым и областным отделам здравоохранения было запрещено врачей, направляемых в санитарно-противоэпидемические учреждения, переводить на другую работу без разрешения народного комиссара здравоохранения союзной республики.
Кандидатуры госсанинспекторов союзных республик, АССР и областных (краевых) здравотделов в настоящее время утверждаются народными комиссарами здравоохранения союзных республик после предварительного согласования с НКЗдравом СССР. Установлено, далее, что увольнение, назначение и перемещение госсанинспекторов района, округа и города могут производиться только по согласовании с народным комиссаром здравоохранения союзной республики. Главным государ-
