CC BY
698
,,„ „„„,„,„,„„,„„. Jj Ставрополья
научно-практическии журнал
УДК 616. 4
Даниленко А. Л., Козлов В. Н., Байматов В. Н., Даутова Л. А., Максютов Р. Р. Danilenko A. L., Kozlov V. N., Baymatov V. N., Dautova L. A., Maksyutov R. R.
МИКРОСТРУКТУРА ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГИПОТИРЕОЗЕ И ЕГО КОРРЕКЦИИ
ЙОДБИОРГАНИЧЕСКИМИ СОЕДИНЕНИЯМИ
MICROSTRUCTURE OF THYROID IN EXPERIMENTAL HYPOTHYROIDISM AND ITS CORRECTION BY IODINEBIORGANIC COMPOUNDS
В статье представлены результаты исследования механизмов комплексообразования анионов йода с полифрук-тозаном. Изучена эффективность использования йодор-ганических соединений на моделях экспериментального гипотиреоза у лабораторных крыс при помощи методов гистологического и иммуноферментного анализа.
Ключевые слова: экспериментальный гипотиреоз, йодорганические соединения, микроструктура щитовидной железы, гормоны гипофизарно-тиреоидной системы.
The article presents the results of studies of the mechanisms of complexation of iodine anions with polyfructosan. The efficiency of the use of iodine organic compounds on models of experimental hypothyroidism of laboratory rats using histological methods and enzyme-linked immunosorbent assay has been studied.
Key words: experimental hypothyroidism, iodine organic compounds, microstructure of thyroid, hormones of the pituitary-thyroid system.
Даниленко Андрей Львович -
аспирант кафедры технология пищевых производств ФГБОУ ВО «Московский государственный университет технологий и управления им. К. Г. Разумовского» г. Москва
Тел.: 8(903)1364001
Е-mail: danilenko@souzmoloko.ru
Козлов Валерий Николаевич -
доктор биологических наук, профессор, руководитель научно-исследовательского центра, филиал ФГБОУ ВО «Московский государственный университет технологий и управления имени К. Г. Разумовского» г. Мелеуз
Тел.: 8(34764) 5-13-63 Е-mail: bioritom@mail.ru
Байматов Валерий Нурмухаметович -
доктор ветеринарных наук, профессор кафедры общей патологии им. В. М. Коропова, ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина» г. Москва
Тел.: 8 (495) 377-93-44
Е-^^к baymatovvaleriy@rambler.ru
Даутова Лилиана Анасовна -
кандидат медицинских наук, доцент кафедры акушерства и гинекологии ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» г. Уфа
Тел.: 8-917-755-62-62 Е-^^к lili.d@mail.ru
Максютов Руслан Ринатович -
кандидат технических наук, доцент кафедры машины и аппараты пищевых производств, филиал ФГБОУ ВО Московский государственный университет технологий и управления имени К.Г. Разумовского г. Мелеуз
Тел.: 8(34764) 3-17-52
Е-^^!: ruslan.maxiutov@yandex.ru
Danilenko Andrew Lvovich -
PhD student, Department of Food Technology, Moscow State University of Technologies and Management named after K. G. Razumovsky Moscow
Tel.: 8(903)1364001
Е-mail: danilenko@souzmoloko.ru
Kozlov Valery Nikolaevich -
Doctor of Biological Science, Professor,
Head of Scientific-Research Center,
Moscow State University of Technologies
and Management named after K. G. Razumovsky,
branch in Meleuz
Tel: 8(34764) 5-13-63
Е-mail: bioritom@mail.ru
Baymatov Valeriy Nurmuhametovich -
Doctor of Veterinary Science, Professor, Department of General Pathology named after V. M. Koropov, Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology named after K. I. Scraybin, Moscow
Tel.: 8 (495) 377-93-44
Е-mail: baymatovvaleriy@rambler.ru
Dautova Liliana Anasovna -
PhD in Medicine, Associate Professor, Department of Obstetrics and Gynecology, Bashkir State Medical University Ufa
Tel.: 8-917-755-62-62 E-mail: lili.d@mail.ru
Maksyutov Ruslan Rinatovich -
PhD in Technical, Associate Professor, Department
of Food Production Machines and Equipment,
Moscow State University of Technologies
аnd Management named after K. G. Razumovsky,
branch in Meleuz
Tel.: 8(34764) 3-17-52
E-mail: ruslan.maxiutov@yandex.ru
ногочисленность органов и систем, логии в сферу интересов представителей реагирующих на тиреоидные гор- различных научных дисциплин. Несмотря моны, включает проблемы тиреодо- на длительное и успешное изучение про-
№ 2(18), 2015
блем клинической и экспериментальной тиреоидологии, многие аспекты фармакологического действия йодсодержащих препаратов требуют дальнейшего изучения [1]. Гипотиреоидное состояние по современным представлениям приводит к дефициту энергии и поражению практически всех органов и систем [2]. Так, на моделях тиамазолового гипотиреоза(3-х недельное введение тиреостатика в дозе 2,5 мг/100 г массы тела) показано, что при гипотиреозе снижается активность тире-оидзависимых ферментов - малатде-гидрогеназы, глутаматдегидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы и аргиназы на фоне активации супероксиддис-мутазы [3]. В настоящее время разработан широкий спектр способов стабилизации неорганических форм йода в биосовместимых матрицах как животного, так и растительного генеза. Альтернативой белковым матрицам могут служить полисахариды, разнообразие которых определяется как происхождением, так и молекулярным строением. Органические матрицы, используемые для «встраивания» летучих неорганических соединений йода, должны обеспечивать стабилизацию йода, обладать хорошей растворимостью, т.е. характеризоваться гидрофильностью, эффективно диспергировать в жидких средах, быть устойчивыми к седиментации и обеспечивать пролонгированное высвобождение ионов йода из состава матриц [4].
Рядом авторов представлены результаты экспериментальных исследований, в которых реализована оценка биодоступности йодор-ганических соединений - йодпектина, йодхи-тозана [5]. Экспериментально доказано, что йодполисахаридные комплексы при ежедневном пероральном введении белым крысам в состоянии гипотиреоза (из расчета 2-3 мкг йода на 100 г массы тела животного) нормализуют в печени активность ферментов энергетического обмена и мочевинобразования, повышают уровень АТФ, никотинамидных ну-клеотидов и активность ферментов антиок-сидантной системы - супероксиддисмутазы, каталазы и селензависимой глутатионперок-сидазы [6].
Цель исследования состояла в изучении ти-реотропной активности йодорганических комплексов - йодполифруктозана и йодказеина.
Материалы и методы исследований. Спектры ЯМР 13С и 1Н записывали на спектрометре Bruker AV500 с рабочей частотой 125,76 МГц и 500 МГц. Редактирование спектров 13С проводилось с помощью методики DEPT. Для отнесения сигналов использовались также двумерные спектры гомо- (1H-1H COSY) и гетероядерной (1H-13C HSQC, HMBC) корреляции. Внутренний стандарт - ТМС. Пробы готовились в концентрации 30 мг на 0,5 мл растворителя. Химические сдвиги в спек-
трах ЯМР 13С, 1Н приведены в м.д. (миллионные доли).
Экспериментальный гипотиреоз моделировали на половозрелых крысах-самцах с массой тела (МТ) 180-220 г путем внутриже-лудочного введения через специальный зонд фармакопейного тиреостатика мерказоли-ла. Тиреостатик вводили в течение 3-х недель ежедневно из расчета 2,5 мг/100 г МТ. Лабораторных животных делили на 5 групп (п=60, по 12 в каждой: 1-я группа - контрольная, у крыс 2-й, 3-й, 4-й и 5-й групп индуцировали мерказолиловый гипотиреоз. Животных 2-й группы после последнего введения мерказо-лила под эфирным наркозом декапитировали (22-е сутки опыта), а крыс 3-й, 4-й и 5-й групп
- на 30-е сутки. При этом крысы 3-й группы после окончания введения мерказолила находились на общевиварном питании, в рацион 4-й группы добавляли йодобогащенный молочный напиток с йод-казеином, а в рацион 5-й группы - молочный напиток, обогащенный йод-полифруктозаном, обеспечивающими суточную потребность крыс в йоде
- в среднем от 2,0 до 3,0 мкг/100 г МТ. В сыворотке крови крыс определяли содержание гормонов щитовидной железы - свободного тироксина (сТ4), общего 3,5,3' - трийодтиро-нина (оТ3) и тиреотропного гормона (ТТГ) методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием стандартных наборов тест-систем «Свободный Т4-ИФА-Бест», «Т3-ИФА-Бест-стрип» и «ТТГ-ИФА-Бест-стрип». Образцы щитовидной железы размерами 0,5х0,5 см фиксировали в 10 %-м растворе формалина. Срезы толщиной 7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином по общепринятой методике [7]. Эксперимент проводился с соблюдением требований Европейской конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными, а также выводу их из эксперимента и последующей утилизации. Применяемые методы обезболивания животных при взятии крови и декапита-ции проводили в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 № 755 и приложение к приказу Министерства высшего и среднего специального образования СССР от 13.11.1984 № 742).
Результаты собственных исследований. Технология производства рассматриваемого комплекса - йодполифруктозана - разработана в научно-исследовательском центре филиала ФГБОУ ВО «МГУТУ им. К. Г Разумовского» в г. Мелеуз [8]. Полифруктозан представляет собой органическое вещество из группы полисахаридов - полимер D-фруктозы. Для изучения механизмов комплексообразования анионов йода с биоматрицей были сняты спектры ЯМР полифруктозана и его соединений с йодидом калия в дейтерированной воде Р20). Зафиксированы изменения химических сдвигов для
100
,,„ „„„,„,„,„„,„„. Ставрополья
научно-практическии журнал
ряда сигналов молекулы полифруктозана при образовании комплекса с йодидом калия. Как видно из представленных в таблице данных, взаимодействие с К1 происходит в основном при участии первичной и вторичной гидрокси-групп у С4 и С6 фруктозного фрагмента. Отмечен также существенный сдвиг сигнала С1, связанного с атомом кислорода в эфирной цепочке. Определенный вклад в образование соединения вносит, вероятно, и взаимодействие через первичную гидрокси-группу шестичлен-ного цикла (химические сдвиги у атомов С4', С5' и С6' (рис. 1).
Рисунок 1 - Формула комплекса полифруктозан-К1
Таблица - Отнесение сигналов в спектрах ЯМР 13С полифруктозана и йод-полифруктозана,
D2O, 5 м.д., 125,76 МГц, Вгикег АУ500
Химический сдвиг, 5 м.д.
а С1 С2 С3 С4 С5 С6 С1' С2' С3' С4' С5' С6'
поли фруктозан 61.24 103.61 77.21 74.19 80.99 60.79 92.41 73.78 72.50 70.99 73.89 60.03
йод-поли фруктозан 62.37 104.44 77.43 75.16 82.19 61.87 92.71 73.31 72.18 70.28 74.42 60.97
А5 м.д. 1.13 0.75 0.22 0.97 1.20 1.08 0.30 0.47 0.32 0.73 0.63 0.94
В результате исследований микроморфологическими методами верификации гипотиреоза было установлено, что у контрольной группы крыс щитовидная железа покрыта соединительнотканной капсулой, от которой вглубь отходят трабеку-лы (рис. 2). Стенка фолликулов образована из ти-роцитов кубической формы, расположенных на базальной мембране. Просвет фолликулов, имеющих неодинаковые размеры, заполнен коллоидом, окрашенным оксифильно. Вокруг фолликулов определяется рыхлая соединительная ткань, состоящая из клеток и межклеточного вещества. Клеточные элементы представлены фибробла-стами, тогда как межклеточное вещество - преимущественно коллагеновыми волокнами. В рыхлой волокнистой неоформленной соединительной ткани проходят кровеносные капилляры, окружающие фолликулы щитовидной железы. При окраске препаратом гематоксилин-эозином парафол-ликулярные клетки не определяются.
Рисунок 2 - Фолликулы щитовидной железы: тироциты (1), коллоид (2) и интерфолли-кулярные клетки (3) у крыс контрольной группы. Гематоксилин и эозин. Ок. 10, об. 20.
Рисунок 3 - Фолликулы щитовидной железы у крыс при гипотиреозе. Полнокровие в микроциркуляторном русле (2).
Гематоксилин и эозин. Ок. 10, об. 40.
При экспериментальном гипотиреозе у животных (2-я группа) определяются выраженные изменения в гистоструктуре щитовидной железы: в фолликулах коллоид отсутствует или наблюдается в небольшом количестве (рис. 3). Общая структура эндокринной железы сохранена: тироциты имеют кубическую форму, плотно прилегают друг к другу. Цитоплазма окрашивается оксифильно, ядро округлой или овальной формы, хроматин мелкозернистый. Ядра части тироцитов подвержены кариопик-нозу, а отдельные ядра и тироциты свободно располагаются в интрафолликулярной полости. На фоне деструктивных явлений в фолликулах щитовидной железы отмечается выраженное полнокровие в сети кровеносных капилляров, окружающих фолликулы щитовидной железы. Деструктивные процессы в щитовидной железе сопровождаются активацией макрофагов и
в
естник АПК
Ставрополья
№ 2(18), 2015
тучных клеток, вырабатывающих вазоктивные вещества. В свою очередь вазоактивные вещества, способствуя усиленной экссудации жидкой части крови, вызывают явления периваску-лярного отека.
Результаты ИФА свидетельствовали о гипо-функциональном состоянии тиреоидной системы у крыс 2-й группы: концентрация сТ4 составляла 7,82 ± 0,31 пмоль/л (р < 0,001) против 14,53 ± 0,48 пмоль/л в контрольной группе, а концентрация оТ3 - 2,44 ± 0,13 нмоль/л (р < 0,05) и 1,98 ± 0,08 нмоль/л соответственно. При этом уровень ТТГ при гипотиреозе составил 0,205 ± 0,02 мкМЕ/мл (р < 0,01), а в контроле - 0,114 ± 0,01 мкМЕ/мл.
У крыс 3-й группы, содержавшихся на об-щевиварном рационе, в гистологических препаратах щитовидной железы сохранялись микроморфологические признаки тиреоидной трансформации. Как видно из рис. 4, в интра-фолликулярных полостях наблюдаются сво-
бодно расположенные тироциты; незначительная часть фолликулов, расположенных в участках усиленной васкуляризации, частично заполнена коллоидом. В структуре щитовидной железы отмечается полиморфизм строения с преобладанием признаков гипофункци-онального состояния на фоне сохраняющихся дистрофически-деструктивных процессов в тиреоидной паренхиме. В данной группе животных отмечался пониженный уровень сТ4 и относительно высокие уровни оТ3 и ТТГ относительно контроля. Концентрация общего 3,5,3' - трий-одтиронина в сыворотке крови у крыс 3-группы составила 2,94 ± 0,19 нмоль/л (р < 0,001) против 1,98 ± 0,08 нмоль/л в контроле, а свободного тироксина - 10,91 ± 0,89 пмоль/л (р < 0,01) и 14,53 ± 0,48 пмоль/л соответственно. При этом уровень ТТГ у крыс, содержавшихся на общевивар-ном рационе, составил 0,196 ± 0,03 мкМЕ/мл (р < 0,05), а в контроле - 0,114 ± 0,01 мкМЕ/мл.
.¿г .V :
"•-'т.' I
Рисунок 4 - Фолликулы щитовидной железы с незначительным количеством коллоида (1) у крыс, содержавшихся на общевиварном
рационе. Опущенные тироциты (2). Гемокапилляры (3). Гематоксилин и эозин.
Ок. 10, об. 20.
У крыс 4-й группы, которым в восстановительный период к общевиварному рациону добавляли молочный напиток, обогащенный йод-казеином, наблюдались позитивные изменения в гистоструктуре исследованных органов. В щитовидной железе отмечались признаки восстановления функциональной активности тиро-цитов, проявляющиеся накоплением коллоида в фолликулах (рис. 5). Тироциты располагаются на базальной мембране, встречаются отдельные клеточные структуры в просвете фолликулов. В части фолликулов идентифицируется незначительное количество коллоида. Отмечается постепенное восстановление кровоснабжения щитовидной железы: ослабевает венозная гиперемия и полнокровие микроциркуляторно-го русла, сеть капилляров плотно охватывает фолликулы, уменьшается периваскулярный отек. Морфологически регистрируется структура с неоднородным состоянием коллоида.
У крыс 4-й группы наблюдали повышение уровня оТ3 и сТ4 относительно аналогичных показателей во 2-й группе животных. Так, концентрация оТ3 в 4-й группе составила 3,22 ± 0,08 нмоль/л
Рисунок 5 - Восстановление микроструктуры
фолликулов щитовидной железы у крыс 4-й группы (общевиварный рацион + молочный
напиток, обогащенный йодказеином): коллоид (1), интерфолликулярный эпителий (2).
Гематоксилин и эозин. Ок. 10, об. 40.
(р < 0,001), сТ4 - 18,21 ± 0,43 пмоль/л (р < 0,001) против 2,44 ± 0,13 нмоль/л (р < 0,05) и 7,82 ± 0,31 пмоль/л (р < 0,001) соответственно в 2-й группе.
В щитовидной железе у крыс 5-й группы, дополнительно получавших к основному рациону молочный напиток, обогащенный «йод-полифруктозаном», определялись микрофо-мологические признаки восстановления функциональной активности гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной системы. Микроструктура щитовидной железы у данной группы крыс характеризуется наличием фолликулов с относительно большим содержанием плотного коллоида (рис. 6). В центральной и периферических зонах щитовидной железы идентифицируются диффузно расположенные лимфоидные клетки. Тироциты характеризуются кубической или призматической формой, что свидетельствует о возрастании функциональной активности щитовидной железы. Ге-мокапилляры щитовидной железы характеризуются умеренным кровенаполнением. Как видно из представленных данных, исследуемый органоми-неральный комплекс «йод-полифруктозан» в составе молочного напитка характеризуется биодо-
Ежеквартальный
научно-практический
журнал
ступностью, т.к. появление интрафолликулярного коллоида есть морфологический признак восстановления функциональной активности щитовидной железы. Кроме того, между соседними фолликулами на микропрепаратах обнаруживаются небольшие скопления тиреоидных эпителиальных клеток - интерфолликулярный эпителий, который под действием адекватного стимула, в частности йода, приходит в состояние функциональной активности, вступает в дифференцировку и начинает синтезировать тиреоглобулин с образованием новых фолликулов.
Рисунок 6 - Восстановление микроструктуры
щитовидной железы у крыс 5-й группы (общевиварный рацион + молочный напиток, обогащенный «йод-полифруктозаном»). Интрафолликулярный коллоид (1); интерфолликулярный эпителий (2); тироциты
призматической формы (3). Гематоксилин и эозином. Ок. 10, об. 40.
Литература
1. Особенности влияния йодида калия на функциональные параметры тиреоид-ной и репродуктивной систем самок-крыс / Н. Л. Басалаева, В. К. Стрижиков, Н. Т. Мифтахутдинов, Г. В. Сычугов, Ю. М. Кузнецова, Т. В. Таужанова // Вестник ЮУрГУ. 2010. № 19.
2. Структура печени при стрессе у животных с гипотиреозом / Н. Г. Макарова, Л. С. Васильева, И. С. Выборова, Д. В. Гар-маева // Сибирский медицинский журнал. 2011. № 2. С. 69-71.
3. Лобырева О. В. Активность тиреоидза-висимых ферментов, энергетический обмен при гипотиреозе и его коррекции органоминеральным комплексом йодпектин : автореф. дис. ... канд. биол. наук. Казань, 2013. 21 с.
4. Оценка нанодисперсности и спектральных характеристик йодбиоорганических соединений / А. Н. Мамцев, В. Н. Козлов, Е. Е. Пономарёв, Р. Р. Максютов, С. П. Иванов, А. Н. Лобов, Н. Н. Егорова // Хранение и переработка сельхоз сырья. 2013. № 8. С. 39-41.
5. Пат. 2265377 Российская Федерация, МПК С1 А23 L 1/30, 1/304. Биологически активная добавка к пище для профилак-
Концентрация сТ4 у животных 5-й группы составила 22,13 ± 0,92 пмоль/л (р < 0,001), оТ3 - 2,88 ± 0,15 нмоль/л, ТТГ - 0,104 ± 0,02 мкМЕ/ мл (р < 0,05), а в 3-й - 10,91 ± 0,89 пмоль/л (р < 0,01), 2,94 ± 0,19 нмоль/л (р < 0,001) и 0,196 ± 0,03 мкМЕ/мл (р < 0,05) соответственно.
Следует отметить, что в ходе экспериментальных исследований была воспроизведена химическая модель тиреоидной дисфункции по типу эндемического эффекта, когда на фоне гиперпродукции тиреотропного гормона и выраженного дефицита свободного тироксина активизируются процессы конверсии Т4 в Т3 с повышением общего 3,5,3'трийодтиронина с целью поддержания эутиреоидного статуса. Экспериментальный гипотиреоз у крыс характеризуется комплексом патоморфологических изменений, включающих явления периваску-лярного отека, выраженной реакции макрофа-гической системы и дистрофические процессы. Включение в рацион крыс 4-й и 5-й групп йодорганических соединений в регламентированной суточной дозе сопровождается активацией функций щитовидной железы, что на микроструктурном уровне выражается накоплением коллоида в фолликулах. Восстановление гормонопродуцирующей функции щитовидной железы у крыс 5-й группы понижение уровня ТТГ на фоне увеличения оТ3 и сТ4 объективные признаки, отражающие биодоступность исследуемого вещества, где йод стабилизирован за счет механизмов клатратного взаимодействия с функциональными группами полифруктозана.
References
1. Basalaeva N.L. Features of influence of potassium iodide on thyroid function parameters and reproductive system of female rats / N.L. Basalaeva, V.K. Strizhikov, N.T. Miftahutdinov, G.V. Sychugov, Y.M. Kuznetsova, T.V. Tauzhanova // Vestnik of SU State University. 2010. № 19.
2. Makarova N.G. The structure of the liver under stress in animals with hypothyroidism / N.G. Makarova, L.S. Vasilieva, I.S. Vyborova, D.V. Garmaeva // Siberian Medical Journal. 2011. № 2. pp. 69-71.
3. Lobyreva O.V. Activity of thyroid dependent enzymes, energy metabolism in hypothyroidism and its correction by means of organomineral complex of yodpektin: thesis abstract... Cand. Biol. Sciences. Kazan, 2013. p. 21.
4. Mamtsev A.N. Evaluation of nanodisperse and spectral characteristics of the iodinebiorganic compounds / A.N. Mamtsev, V.N. Kozlov, E.E. Ponomarev, R.R. Maksyutov, S.P. Ivanov, A.N. Lobov, N.N. Egorova // Storage and processing of agricultural raw materials. 2013. № 8. pp. 39-41.
5. Pat. 22653777 Russian Federation C1 A23 L 1/30, 1/304. Biologically active food
№ 2(18), 2015
тики йодной недостаточности и способ ее получения / А. Н. Мамцев, И. А. Бондарева, В. Н. Козлов, Ф. Х. Камилов, В. Н. Байматов, Р. Р. Фархутдинов ; патентообладатель Мамцев А. Н., Бондарева И.
A., Козлов В. Н. Камилов Ф. Х., Байматов
B. Н., Фархутдинов Р. Р. № 2004122332/13 ; заявл. 20.07.2004 ; опубл. 10.12.2005, Бюл. № 34. 5 с.
6. Активность антиоксидантных ферментов и процессы свободнорадикально-го окисления при экспериментальном гипотиреозе и коррекции тиреоидных сдвигов йодированным полисахарид-ным комплексом / Ф. Х. Камилов, А. Н. Мамцев, В. Н. Козлов, Г. М. Абдуллина, О. В. Лобырева // Казанский медицинский журнал. 2012. Т 93, № 1. С. 116-119.
7. В. Г. Елисеева Гистология / под ред. В. Г. Елисеева, Ю. И. Афанасьева, Н. А. Юри-ной. 3-е изд. М. : Медицина, 1983. С. 390-394.
8. Пат. 2496347 Российская Федерация, МПК С 2 А23 L 1/30, 1/304. Биологически активная добавка к пище для профилактики йодной недостаточности /
A. Н. Мамцев, Ф. Х. Камилов, Е. Е. Пономарев, Е. П. Мехоношин, М. В. Сокольников, С. П. Иванов, Л. Ф. Пономарева,
B. Н. Козлов, Р. Р. Максютов ; патентообладатель Общество с ограниченной ответственностью "Технопарк МГУТУ". № 2011147656/13 ; заявл. 23.11.2011; опубл. 27.10.2013. Бюл. № 30. 15 с.
supplement for the prevention of iodine deficiency and its method of preparation / A.N. Mamtsev, I.A. Bondareva, V.N. Kozlov, F.H. Kamilov, V.N. Baymatov, R.R. Farkhutdinov. - Appl. 20.07.2004; Publ. 10.12.2005 // Bull. - 2005. - № 34.
6. Kamilov F.H. The activity of antioxidant enzymes and processes of free radical oxidation in experimental hypothyroidism and thyroid shifts correction by iodinated polysaccharide complex / F.H. Kamilov, A.N. Mamtsev, V.N. Kozlov, G.M. Abdullina, O.V. Lobyreva // Kazan Medical Journal. 2012. V. 93. № 1. pp. 116-119.
7. Eliseev, V.G. Histology / Ed. V.G. Eliseev, Y.I. Afanasyev, N.A. Yurina 3rd ed. - M .: Medicine, 1983. pp. 390-394.
8. Pat. 2496347 Russian Federation, C2 A23 L 1/30, 1/304. Biologically active food supplement for the prevention of iodine deficiency /A.N. Mamtsev, F.H. Kamilov, E.E. Ponomarev, E.P. Mekhonoshin, M.V. Sokolnikov, S.P. Ivanov, L.F. Ponomareva, V.N. Kozlov, R.R. Maksyutov. - Appl. 23.11.2011; Publ. 27/10/2013 // Bull. - 2013. - № 30.
