Микрореологические характеристики эритроцитов у поросят в течение фазы молочного питания Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК [616-005.1-08:331.1]:615.22

Ключевые слова: эритроциты, агрегация, цитоархитектоника, свертывание крови, поросята, фаза молочного питания

Key words: erythrocytes, aggregation, cytoarchitecture, blood clotting, piglets, suckling period Парахневич А. В., Медведев И. Н., Максимов В. И.

МИКРОРЕОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЭРИТРОЦИТОВ У ПОРОСЯТ В ТЕЧЕНИЕ ФАЗЫ МОЛОЧНОГО ПИТАНИЯ

MICRORHEOLOGICAL CHARACTERISTICS OF ERYTHROCYTES INPIGIETS

DURING THE SUCKLING PERIOD

'Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина

Адрес: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23

'К. I. Scryabin Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology Address: 109472, Russia, Moscow, Akademik Skryabin street, 23 2Курский институт социального образования (филиал) РГСУ Адрес: 305029, г. Курск, ул. К. Маркса, 53 2Kursk Institute of Social Education (branch of the Russian State Social University) Address: 305035, Russia, Kursk, Karl Marx street, 53

Парахневич Андрей Владимирович, к. б. н., соискатель кафедры физиологии животных1

Parakhnevich Andrey V., Ph.D., Competitor for Science Degree of the Dept. of Animal Physiology' Медведев Илья Николаевич, д. б. н., проф., зав. каф. адаптивной физической культуры

и медико-биологических наук2 Medvedev Ilya N., Doctor of Biology Science, Professor, Head of the Dept. of Adapted Physical Education

and Biomedical Science2 Максимов Владимир Ильич, д. б. н., проф. каф. физиологии животных1 Maksimov Vladimir I., Doctor of Biology Science, Professor of the Dept. of Animal Physiology1

Аннотация. Под наблюдением находились 32 здоровых поросенка молочного питания породы крупная белая, обследованные на 6-е, 10-е, 15-е и 20-е сутки жизни. У поросят к концу фазы зарегистрирована тенденция к повышению количества дискоцитов до 86,5±0,26 %, понижению уровня обратимо измененных эритроцитов до 8,8±0,06 % и необратимо измененных - до 4,7±0,05 %. В крови поросят молочного питания отмечено небольшое повышение уровня суммарного вовлечения эритроцитов в агрегаты (на 2,5 %) и количества самих агрегатов (на 4,1 %) при понижении на 3,5 % свободно перемещающихся эритроцитов.

Summary. 32 healthy suckling piglets of Large White breed being under observation were examined on 6th, 10th, 15th and 20th days of age. The upward drift in discocyte count up to 86.5±0.26 %, the downward drift in reversibly transformed red blood cell count down to 8.8±0.06 % and the downward drift in irreversibly transformed red blood cell count down to 4.7±0.05 % were registered at the end of suckling period. Slightly increased level (by 2.5 %) of total involvement of erythrocytes in aggregates and aggregate count themselves (by 4.1 %) along with decreased number of floating erythrocytes (by 3.5 %) were registered in suckling piglets' blood.

Введение

Гемоциркуляция по сосудам в значительной мере влияет на общую функциональную активность организма продуктивных животных, в т. ч. поросят, поддерживая все процессы тканевого обмена. Важнейшими компонентами реологии крови, необходимыми для сохранения оптимума внутренней среды поросят на начальных этапах онтогенеза, являются эритроциты, во многом определяющие жидкостные свойства крови за счет их адекватной агрегационной активности и состояния их поверхностной геометрии. Становится ясно, что возрастная динамика

функциональных особенностей микрореологических свойств эритроцитов у различных биологических объектов, в т. ч. у продуктивных животных, является серьезным физиологическим элементом поддержания у них процессов анаболизма в тканях, обеспечивая протекание онтогенеза в сложившихся условиях их существования [6, 7]. Вместе с тем особенности цитоархитектоники и агрегации эритроцитов у здоровых поросят в отдельные фазы онтогенеза остаются исследованными весьма недостаточно.

В этой связи в настоящей работе была поставлена цель: установить особенности рео-

логических свойств эритроцитов у здоровых поросят молочного питания.

Материалы и методы

32 здоровых поросенка породы крупная белая обследовано на 6-е, 10-е, 15-е и 20-е сутки жизни. У всех животных оценивалась активность перекисного окисления липидов (ПОЛ) плазмы по количеству в ней ацилги-дроперекисей (АГП) [2], тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов набором «Агат-Мед», регистрировалась антиокислительная активность (АОА) жидкой части крови [1].

Для оценки интенсивности биохимических процессов в эритроцитах производились их отмытие и ресуспендирование. Выраженность ПОЛ, протекающего внутри эритроцитов, регистрировали по количеству в них АГП [2] и по уровню малонового ди-альдегида (МДА) в реакции восстановления тиобарбитуровой кислоты [5]. С помощью набора «Витал Диагностикум» в эритроцитах количественно было определено содержание холестерина (ХС), а по уровню в их мембранах фосфора был оценен уровень общих фосфолипидов (ОФЛ)[4] с вычислением на основе полученных данных соотношения ОХС/ОФЛ. Функциональная активность вну-триэритроцитарных ферментов антиокисления определялась для каталазы и суперок-сиддисмутазы (СОД) [8].

У поросят оценивалась цитоархитекто-ника эритроцитов с применением световой фазовоконтрастной микроскопии. Регистрируемые эритроциты типировались по следующим разновидностям: дискоциты, дискоци-ты с одним выростом, дискоциты с гребнем, дискоциты с множественными выростами, эритроциты в виде тутовой ягоды, куполообразные эритроциты (стоматоциты), сферо-циты с гладкой поверхностью, сфероциты с шипиками на поверхности, эритроциты в виде «спущенного мяча», дегенеративные формы эритроцитов. Первые пять классов эритроцитов (с признаками эхиноцитар-ной трансформации) считались обратимо деформированными ввиду их способности спонтанно восстанавливать форму. Остальные классы эритроцитов относили к группе

необратимо деформированных или предге-молитических форм [3].

С учетом соотношения обратимо и необратимо измененных форм эритроцитов рассчитывали ряд индексов [6]:

• индекс трансформации (ИТ): ИТ = (ОД + НД) / Д, где Д - процент диско-цитов; ОД - процент обратимо деформированных эритроцитов; НД - процент необратимо деформированных эритроцитов;

• индекс обратимой трансформации (ИОТ): ИОТ = ОД / Д;

• индекс необратимой трансформации (ИНОТ): ИНОТ = НД / Д;

• индекс обратимости (ИО): ИО = ОД / НД.

Агрегационную активность эритроцитов регистрировали с помощью светового микроскопа путем подсчета в камере Горяева агрегированных и неагрегированных эритроцитов и количества самих агрегатов во взвеси отмытых эритроцитов в плазме крови с вычислением среднего размера агрегата (СРА): СРА = СЭА/КА, где СЭА - сумма всех эритроцитов в агрегате; КА - количество агрегатов. Также рассчитывался показатель агрегации (ПА): ПА = (СРА х КА + КСЭ) / (КА + КСЭ), где КСЭ - количество свободных эритроцитов. Процент неагрегиро-ванных эритроцитов (ПНА) определяли: ПНА = (КСЭ х 100) / (СРА х КА + КСЭ) [6].

Для статистической обработки полученных результатов применен t-критерий Стью-дента.

Результаты исследования

На протяжении фазы молочного питания у здоровых поросят регистрируется небольшое постепенное усиление АОА плазмы (с 36,9±0,16 % в начале до 38,2±0,12 % в ее конце), способствующее ослаблению активности в ней ПОЛ. Так, количественное содержание в жидкой части крови первичных продуктов ПОЛ-АГП составляло в начале фазы 1,34±0,10 Д233/1мл, в ее конце -1,29±0,16 Д233/1мл, вторичных продуктов пероксидации липидов - ТБК-активных соединений - 3,10±0,13 мкмоль/л и 2,95±0,08 мкмоль/л, соответственно.

У наблюдаемых поросят в течение фазы молочного питания в мембранах эритроцитов отмечена тенденция к нарастанию количества холестерина с 0,90±0,005 мкмоль/1012 эр. до 0,92±0,005 мкмоль/1012 эр. при незначительном понижении ОФЛ с 0,70±0,006 мкмоль/1012эр. до 0,69±0,008 мкмоль/1012эр.

Количество АГП в эритроцитах здоровых шестисуточных поросят составляло 2,90± 0,07 Д233/1012эр., постепенно уменьшаясь в 20-суточном возрасте (2,82±0,04 Д233/10 12эр.). При этом уровень МДА в эритроцитах -конечного продукта ПОЛ также испытывал тенденцию к понижению с 1,01±0,02 нмоль/1012эр. до 0,98±0,07 нмоль/1012 эр. Выявленная динамика уровня ПОЛ в эритроцитах здоровых поросят молочного питания обеспечивалась тенденцией к усилению их антиоксидантной системы, оцененной по функциональной активности ка-талазы, составившей в начале фазы 11040,0± 10,8 МЕ/1012эр. и 1750,0±9,24 МЕ/1012эр. в ее конце, и СОД, функциональные возможности которой достигали 11190,0±17,6 МЕ/1012эр. в начале фазы и 1788,4±6,82 МЕ/1012эр., соответственно, в ее конце.

У поросят молочного питания зарегистрировано оптимальное количество дис-коцитов в крови с тенденцией их к повышению до 86,5±0,26 %, обеспечив к концу фазы невысокий уровень ИТ - 0,16±0,009 (табл. 1). При этом, у животных с 6 до 20 суток жизни отмечено легкое понижение содержания в крови обратимо измененных эритроцитов до 8,8±0,06 % и их необратимо трансформированных форм до 4,7±0,05 %. Выявленная динамика цитоархитектоники эритроцитов обеспечила у поросят молочного питания тенденцию к уменьшению у них ИОТ до 0,10±0,003 при достижении ИНОТ 0,05±0,005 и ИО - 1,87±0,010.

У поросят в течение фазы молочного питания отмечено постепенное усиление агрега-ционной способности эритроцитов (табл. 1) с повышением уровня суммарного вовлечения эритроцитов в агрегаты (на 2,5 %), нарастанием количества этих агрегатов в кровотоке (на 4,1 %), понижением на 3,5 % содержания в крови свободно перемещаю-

щихся эритроцитов при постоянстве СРА (в среднем 4,4±0,04 клеток) и ПА (в среднем 1,09±0,05) и легком уменьшении ПНА (в среднем 89,0±0,13).

Таким образом, для здоровых поросят молочного питания свойственно повышение цитоархитектоники и агрегации эритроцитов при невыраженном усилении активности факторов свертывания и ускорении основных коагуляционных тестов, что, видимо, является необходимым элементом процесса их адаптации к условиям внешней среды во вторую фазу раннего онтогенеза.

Обсуждение

У всех продуктивных животных онтогенез облигатно знаменуется рядом гематологических изменений, неизбежно влияющих на реологические свойства крови [7]. Существующая у поросят молочного питания высокая активность ферментов антиокисления красных кровяных телец способствует стабилизации на невысоком уровне процессов ПОЛ, что в сочетании с пониженным содержанием в их мембранах ХС обеспечивает оптимальные микрореологические свойства эритроцитов. Несомненно, это является физиологической основой поддержания в кровотоке у поросят низкого уровня обратимо и необратимо измененных разновидностей эритроцитов при стойком превалировании в крови их неизмененных форм. Это обеспечивает наилучшие реологические свойства крови, достаточную перфузию внутренних органов и в этой связи оптимальность процесса роста животного.

Отмеченная в исследовании тенденция к усилению агрегации эритроцитов у поросят в течение фазы молочного питания во многом связана с возрастным изменением заряда эритроцитов вследствие маскировки отрицательно заряженных протеинов [6] на фоне выявленного в них увеличения количества ХС. Это неизбежно повышает силу сцепления данных белков эритроцитарной мембраны с глобулярными протеинами плазмы, выполняющими роль «мостиков» между красными кровяными тельцами в агрегатах.

Оптимальные микрореологические свойства эритроцитов у поросят молочного

Таблица 1.

Микрореологические свойства эритроцитов у здоровых поросят молочного питания

Параметры Фаза молочного питания, п=32, М±т

6 сут. жизни 10 сут. жизни 15 сут. жизни 20 сут. жизни Средние значения

Дискоциты, % 85,5±0,14 85,8±0,17 86,1±0,12 86,5±0,26 86,0±0,17

Обратимо изм. эритроциты, % 9,3±0,07 9,1±0,03 9,0±0,05 8,8±0,06 9,1±0,05

Необратимо изм. эритроциты, % 5,2±0,02 5,1±0,04 4,9±0,03 р<0,05 4,7±0,05 р<0,05 5,0±0,04

Индекс трансформации 0,17±0,007 0,16±0,005 р<0,05 0,16±0,007 0,16±0,009 0,16±0,007

Индекс обратимой трансформации 0,11±0,002 0,11±0,006 0,10±0,007 0,10±0,003 0,11±0,005

Индекс необратимой трансформации 0,06±0,005 0,06±0,006 0,06±0,009 0,05±0,005 р<0,05 0,06±0,006

Индекс обратимости 1,78±0,008 1,78±0,005 1,83±0,007 р<0,05 1,87±0,010 р<0,05 1,82±0,008

Сумма всех эритроцитов в агрегате 32,4±0,14 32,6±0,12 32,9±0,08 33,2±0,07 32,8±0,10

Количество агрегатов 7,3±0,05 7,4±0,02 7,5±0,06 7,6±0,05 7,5±0,05

Количество свободных эритроцитов 280,1±0,19 278,1±0,25 276,3±0,17 270,6±0,23 276,3±0,21

Показатель агрегации 1,09±0,07 1,09±0,03 1,09±0,06 1,09±0,04 1,09±0,05

Процент не агрегированных эритроцитов 89,7±0,09 89,5±0,14 89,3±0,16 89,0±0,13 89,4±0,13

Средний размер агрегата, клеток 4,4±0,06 4,4±0,05 4,4±0,03 4,4±0,02 4,4±0,04

Применение: р - достоверность возрастной динамики учитываемых показателей.

питания во многом обеспечивают необходимые для данного этапа онтогенеза жидкостные свойства крови и тем самым достаточную перфузию внутренних органов. Это позволяет поддерживать у них необходимый для организма уровень обмена в клетках, способствуя дальнейшему росту и развитию животного. Несомненно, что выявленные особенности цитоархитектоники и агрегации эритроцитов поросят молочного питания в значительной мере обеспечивают переход организма к питанию растительными кормами.

Заключение

Для здоровых поросят молочного питания характерен оптимальный липидный состав эритроцитов и невысокая активность в них перекисного окисления липидов при легком повышении агрегации эритроцитов и невыраженном увеличении в крови содержания

их дискоцитов в результате понижения обратимо и необратимо измененных их форм.

Список литературы

1. Волчегорский, И. А. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма / И. А. Волчегорский, И. И. Долгушин, О. Л. Колесников, В. Э. Цейликман. - Челябинск: изд-во ЧГПУ 2000. - 167 с.

2. Гаврилов, В. Б. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови / В. Б. Гаврилов, М. И. Мишкорудная // Лабораторное дело. - 1983. - № 3. - С. 33-36.

3. Козинец, Г. И. Поверхностная цитоархитек-тоника клеток периферической крови в норме и при заболеваниях системы клеток / Г. И. Козинец, Ю. А. Симоварт. - Таллин, 1984. - 116 с.

4. Колб, В. Г. Справочник по клинической химии / В. Г. Колб, В. С. Камышников. - Минск : Беларусь, 1982. - 367 с.

5. Кубатиев А. А. Перекиси липидов и тромбоз / А. А. Кубатиев, А. А. Андреев // Бюлл. эксперим. биол. и медицины. - 1979. - № 5. - С. 414-417.

6. Медведев, И. Н. Методические подходы к исследованию реологических свойств крови при различных состояниях / И. Н. Медведев, А. П. Савченко, С. Ю. Завалишина и др. // Российский кардиологический журнал. - 2009. - № 5. - С. 42-45.

7. Медведев, И. Н. Плазменный гемостаз у новорожденных телят и роль корректоров при его наруше-

нии / И. Н. Медведев, С. Ю. Завалишина // Зоотехния. -2009. - № 2. - С. 9-11.

8. Чевари, С. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте / С. Чевари, Т. Андял, Я. Штренгер // Лабораторное дело. - 1991. - № 10. -С. 9-13.

Новинка! Вышла в свет книга проф. Кудряшова А.А.

«ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНЕЙ ЛОШАДЕЙ»

Данная книга является второй в серии «Ветеринарная патологическая анатомия», выпускаемой НОУ ДО «Институт Ветеринарной Биологии». Как и первая книга «Патологоанатомическая диагностика болезней собак и кошек» (www.invetbio.spb.ru/Kudryashov-2011.htm), настоящее издание является учебным пособием как для студентов ветеринарных факультетов, так и для врачей-иппологов.

В книге изложены порядок вскрытия лошадей, составления протоколов, правила отбора материала для дальнейших исследований, даны детальные описания 40 наиболее часто встречающихся заболеваний лошадей. Подробно освещены этиология, патогенез, клинические проявления и патологоанатоми-ческие изменения. Особое внимание уделено дифференциальной диагностике. Книга иллюстрирована большим количеством авторских фотографий, а также рисунками со схемами.

Тираж: 1000 экз. Формат: А5 (145 х 205 мм), мягкий переплет, 184 с. с илл.

Розничная цена книги - 800 руб. (с учетом почтовых расходов - 1040 руб.).

По вопросу приобретения обращайтесь по тел. +7 921 095-89-27, e-mail: [email protected]

Форма on-line заказа: www.invetbio.spb.ru/form_kniga_Kudryashov-loshadi.htm

-НН1-Н-Н-Н-Н-ННН-Н-Н4НН1-Н-Н-К

ПРЕДИСЛОВИЕ

ВСКРЫТИЕ ТРУПОВ ЛОШАДЕЙ

1. Место вскрытия и инструментарий

2. Техника безопасности

3. Некоторые анатомические особенности лошади

4. Определение возраста лошади

5. Масть лошади

6. Порядок вскрытия

7. Техника исследования отдельных органов

8. Протоколирование вскрытия (протокол вскрытия)

9. Отбор и сохранение патологического материала, предназначенного для лабораторных исследований

ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНЕЙ ЛОШАДЕЙ

ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ

1. Сибирская язва

2. Злокачественный отек

3. Некробактериоз

4. Столбняк

5. Ботулизм

6. Сальмонеллез

7. Листериоз

8. Лептоспироз

9. Моноцитарный эрлихиоз

10. Эпизоотический лимфангит

11. Язвенный лимфангит

12. Мыт

13. Кровопятнистая болезнь

ОГЛАВЛЕНИЕ

14. Сап

15. Туберкулез

16. Бруцеллез

17. Инфекционная анемия

18. Герпесвирусные болезни

19. Грипп лошадей

20. Аденовирусная инфекция

21. Вирусные энцефалиты и энцефаломиелиты

22. Африканская чума однокопытных

23. Вирусный артериит

24. Бешенство

25. Болезнь Ауески

26. Оспа лошадей

27. Везикулярный стоматит

28. Коринебактериоз жеребят

29. Микотоксикозы

30. Идиопатический колит

ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ

1. Бабезиоз

2. Трипаносомозы

3. Параскариоз

4. Деляфондиоз

5. Гастрофилез

НЕЗАРАЗНЫЕ БОЛЕЗНИ

1. Паралитическая миоглобинурия

2. Острое расширение желудка

3. Метеоризм кишечника

4. Перекручивание и заворот кишок

5. Амилоидоз печени

ИЛЛЮСТРАЦИИ