CC BY
52
(одна или две) и по наличию или отсутствию кортикальных микротрубочек [57]. Путь формирования интерцентриолярного тельца в сперматидах M. crocea более типичен для неодермат, чем для остальных турбеллярий.
В то же время, к уникальным особенностям спермиев M. crocea можно отнести наличие цепочки электронно-плотных гранул, которые не характерны для Neodermata. Общий ход спермиогенеза (миграция ядра и способ инкорпорирования жгутиков) также сближает калипторинхий со свободноживущими Trepaxonemata.
Таким образом, ультраструктурные особенности сперматозоидов и спермиогенеза M. crocea свидетельствуют, с одной стороны, о филогенетической связи калипторинхий с Neodermata, а с другой - об их положении в системе типа Plathelminthes как сильно уклонившейся в эволюционном развитии ветви турбеллярий.
Литература: 1. Евдонин Л. А. Фауна СССР, турбеллярии: хоботковые ресничные черви Kalyptorhynchia фауны СССР и сопредельных стран -Ленинград: Наука - 1977. - Т. 1, вып. 1. 399 с. 2. Watson N. A., Schockaert E. R. //Hydrobiologia. - 1998. - Vol. 383. - P. 243. 3. Sopott-Ehlers B., Ehlers U.// Zoomorphology. - 1998. - Vol. 118. - P. 169-176. 4. Hendelberg J.//Hydrobiologia. - 1986. - Vol. 132. - P. 52-58. 5. Daddow L. Y. M., Jamieson B. G. M. // Aust. J. Zool. - 1983. - Vol. 31. - P. 1-14. 6. Дроздов А. Л., Иванков В. Н. Морфология гамет животных. Значение для систематики и филогенетики - Москва: Круглый год, 2000. - 460 с. 7. Levron C., Ternengo B., Marchad S. // Parasitol Res - 2004. -Vol. 94. - P. 147-154.
Characteristics of spermiogenesis in Kalyptorhinchia and problems of evolution of gametes in parasitic flatworms. Chernova E.E., Zabotin Y.I.
Summary. In the present work the ultrastructure of spermatozoa and spermiogenesis of flatworm Macrorhynchus crocea (Kalyptorhinchia) is described. The phylogenetic significance of ultrastructure of reproductive system in flatworm is revised and the problem of relationships between turbellarians and parasitic flatworms is discussed.
МИКРОФИЛЯРЕМИЯ У ЧЕЛОВЕКА, ВЫЗВАННАЯ DIROFILARIA REPENS RAILET ET HENRY, 1911
Шайтанов В.М. *, Ракова В.М.'.**, Федянина Л.В.**
*ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина Россельхозакадемии **Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского.
Введение. Человек считается биологическим тупиком для дирофилярий, хотя случаи микрофиляремии описаны [7], но редки чаще обнаруживают
401
микрофилярий в матке дирофилярий [2,8] или в полости капсулы [1]. При обнаружении дирофилярий у человека далеко не всегда проводилось исследование крови.
Описанием этого случая мы хотим рассказать о других подходах к диагностике дирофиляриоза человека.
Описание случая. Пациентка Ш. 1954 года рождения в 2011 году выезжала в Пхукет (Тайланд) с 1 по 10 декабря. Каждый год весной выезжала на 2-3 дня в Орехово-Зуевский район, а летом жила даче в Нарофоминский районе, деревня Жёдочи. В апреле 2012 года обнаружила на правой ноге припухлость в диаметре 2 см. На первый день припухлость была чувствительна при прикосновении, на второй день расплывалась, становясь бледно-розовой, и на третий день не обнаруживалась. Через 5 дней такая же припухлость на 3 см выше. Так повторялась до 5 раз за 1,5 месяца. Через 2-3 недели после исчезновения последней припухлости на ноге, появились припухлости на животе, которые через месяц исчезли. В конце августа припухлость размером 2 см появилась справа на лбу и была болезненна 3 дня. Пациентка сдала общеклинический и биохимический анализ крови, коагулограмму. По клиническому анализу лейкоцитоз до 10 тысяч/мкл, эозинофилия 10%, увеличение СОЭ (21 мм/час). 27 августа пациентка при исследовании капли своей крови методом нативного мазка обнаружила подвижную микрофилярию. В каплях периферической крови обнаруживалось 1 -2 микрофилярии на препарат. Микрофилярии обнаруживались пациенткой в периферической крови с 11:00 до 19:00. Четкого пика не было, наибольшее количество микрофилярий обнаруживалось в 13:00-14:00. С 10 сентября начала принимать доксициклин 2 раза в день по 100 мг, через 20 дней стала принимать по 100 мг 1 раз в день. В специализированную КДЛ по паразитарным болезням Клинического центра Первого МГМУ им. И.М. Сеченова пациентка обратилась в середине сентября. В лаборатории была исследована методом прямой микроскопии нативная капля периферической крови и обнаружена единичная микрофилярия. Была отобрана венозная кровь для полимеразной цепной реакции. Для выделения ДНК использовали «Комплект реагентов для выделения ДНК из клинического материала» - ДНК-сорб-В вариант 100 (ФГУН ЦНИИ Роспотребнадзора). ДНК выделяли из сыворотки крови. Для идентификации ДНК D. repens использовали праймеры: forvard:- 5' -
CCGGTAGACCATGGCATTAT - 3' и revers- 5' -
CGGTCTTGGACGTTTGGTTA - 3'(9). Амплификацию проводили по схеме: 1. 94°С - 5 мин; 2) 48 циклов ( 94°С - 30с; 50°С - 30с; 72°C - 1 мин), 3) 72°C - 5 мин; 4) 10°С. Для идентификации ДНК D. immitis использовали
праймеры: forvard5’ -TGATTGGTGGTTTTGGTAA - 3’ и revers - 5’ -ATAAGTACGAGTATCAATATC -3'(6). Амплификацию проводили по схеме:1)94°С - 30с; 2)30 циклов (94°С - 1 мин; 50°С - 2 мин; 72°С - 3 мин); 3)72°С - 5 мин; 4)10°С. Электрофорез проводился в 1,5% агарозном геле, приготовленном на трис-ацетатном буфере (ТАЕ), подкрашенном бромистым этидием (3,8-диамино-5-этил-6-фенилфенантридиум бромид). В сыворотке
402
крови была обнаружена ДНК D. repens. Проба отобранной крови была сохранена в холодильнике с температурой колеблющейся от -23°С до-25°С.
Через две недели исследование данной пробы методом концентрации с дистиллированной водой [3] выявило подвижных микрофилярий. Выживание микрофилярий Dirofilaria immitis при низких температурах уже упоминалось в зарубежной литературе [5], но в отношении D. repens таких сведений нами в литературе не найдено. Микрофилярии, обнаруженные в пробе, не содержали чехлика, головной их конец был тупым, хвостовой заостренным. Были сделаны тонкие мазки из осадка и окрашены по Diff-Quck. Передний и задний концы тела не содержат ядер. Чтобы точно установить, что микрофилярии относятся к виду D. repens, было проведено гистохимическое окрашивание на кислую фосфатазу [4]. Фермент локализовался у микрофилярий только в области анальной поры, что соответствует D. repens. Было проведено исследование методом концентрации с дистиллированной водой периферической и венозной крови днем (12:00). В венозной крови были обнаружены микрофилярии в количестве 1 лич/мл. В периферической крови 5 микрофилярий в 0,5 мл. Исследование венозной крови вечером (19:00) показало такое же количество, как и днем (1 микроф./мл). В периферической крови исследуемой прямой микроскопией микрофилярии не обнаруживались ни днем, ни ночью. Общеклинический анализ крови показал увеличение лейкоцитов до 11 тысяч/мкл, эозинофилию 13 %, СОЭ в норме (12 мм/ч). При приеме диэтилкарбамазина и албендазола пациентка чувствовала и видела гельминтов, подходящих к поверхности кожи только в ночное время. Пациентка удалила одного гельминта в области груди, другого гельминта в области шеи удалить не удалось. Извлеченный гельминт длиной 14 см определен как самка рода Dirofilaria. В матке содержались микрофилярии. Также еще два гельминта было обнаружено под кожей в области спины. После окончания приема диэтилкарбамазина движения прекратились, но покалывания и зуд сохраняются. При сдаче общеклинического анализа СОЭ увеличилось до 25 мм/ч, эозинофилия - 9%, лейкоциты в норме.
Заключение. Микрофиляремия при паразитировании D. repens встречается и интенсивность ее может быть высока, что фиксируется такими малочувствительными методами как прямая микроскопия нативного мазка крови. Диагностика микрофиляремии у человека обязательно должна осуществляться методами концентрации венозной и периферической крови, так как интенсивность может быть различна и возможно зависит от приема препаратов и времени суток. Идентификация микрофилярий методами рутинного и гистохимического окрашивания, ПЦР дает возможность поставить точный диагноз при смазанных клинических проявлениях и незначительных изменениях общеклинического анализа крови. Способность микрофилярий D. repens выживать при температуре -25°С может использоваться в лабораторной практике и научных целях, но требует дальнейших исследований.
Литература: 1.Супряга В.Г. и др.//Медицинская паразитология и
паразитарные болезни. - 2004. - №4 - С.6-8. 2. Федянина Л.В. и др.//
403
Медицинская паразитология и паразитарные болезни. - 2011. - №4 - С.37-38. 3. Попова Т.П.//Тр. Кировского зовет. ин-та. - 1938. - Т. 3. - С. 47-49. 4. Balbo, T, Abate, O. // Parassitologia - 1972. - Vol 14. P. 239-244. 5. Mazzotti L. // Rev. Inst. Salubr. Enferm. Trop. - 1953. - Vol 13. - P. 289-291. 6. Murata K. et al. //J .Med. Sci. - 2003. - Vol 65. - P. 945-947. 7. Nozais J P, Bain O, Gentilini M. // Bull Soc Pathol Exot. - 1994.- Vol 87. - P. 183-185. 8. Pampiglione S.// Pathologica. - 1992. - Vol 84. - P. 77-81. 9.Vakalis N. et al. //Parasitol. Int.- 1999. - Vol 48. - P.145-150. 8.
Microfilaremia in humans caused Dirofilaria repens Railet et Henry, 1911.
Shaitanov V.M. 1, Rakova V.M. 2, Fedyanina L.V. 2 1All-Russian K.I. Skryabin
Л
Scientific Research Institute of Helminthology, E.I. Martsinovskii Institute of Medical Parasitology and Tropical Medicine.
Summary. Description of the case in microfilaremia humans with Dirofilaria repens Railet et Henry, 1911. Patient in December 2011, Phuket (Thailand) and attended summer was at the cottage in the outside Moscow. In August 2012 found microfilariae in peripheral blood. Identification of microfilariae confirmed morphologically, histochemical staining, PCR. When receiving albendazole and diethylcarbamazine removed gravid female Dirofilaria spp.
РАСПРОСТРАНЕНИЕ И ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ЗАРАЖЕННОСТИ ОВЕЦ И КОЗ АНОПЛОЦЕФАЛЯТАМИ В ПРЕДГОРНОЙ ЗОНЕ ДАГЕСТАНА
Шамхалов В.М., Магомедов О.А., Шамхалов М.В., Максудова А.С., Махиева Б.М., Абдулмагомедов С.Ш.
Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт
Введение. Кишечные цестодозы встречаются в различных регионах России, СНГ, в том числе, в республике Дагестан. Одной из наиболее распространенных инвазий у сельскохозяйственных животных в хозяйствах республики Дагестан являются цестодозы (мониезиоз, тизаниезиоз, авителлиноз) овец. Они ежегодно наносят огромный экономический ущерб животноводству республики. В то же время кишечные цестодозы протекают у овец без четко выраженных клинических признаков. Поэтому успешная борьба с этими инвазиями может быть осуществлена на основе знаний, биоэкологии и особенности эпизоотологии заболеваний применительно к конкретным регионам
Материалы и методы. Работа выполнена в лаборатории паразитологии и хозяйствах предгорной зоны Дагестана, в условиях стационарного и отгоннопастбищного содержания овец и коз в 2011-2012 гг. Всего обследовано 8 хозяйств.
404
