Вопросы диагностики
Микробиоценоз биотопов новорожденных в условиях отделения реанимации и интенсивной терапии
Т. Д. Примак1, Е. А. Шевчук2, Н. В. Кривошеева2, С. В. Калинина1, Б. С. Эрдынеева1
ГОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия Росздрава1, ГУЗ Краевая клиническая больница2, Чита
Представлены материалы клинико-лабораторного обследования 120 новорожденных, получавших лечение в ОРИТ Перинатального центра ГУЗ «Областная клиническая больница» за 2005—2007 гг. Контрольную группу составили 25 детей детского отделения. Бактериологический контроль отделяемого цервикального канала осуществлен у 45 женщин. Проводилось бактериологическое исследование микробиоты ряда биотопов (ротоглотка, подмышки, пупочная ранка, фекалии) новорожденных на 1, 3, 5, 7 и 10 сутки жизни. Микрофлора новорожденных в ОРИТ и контрольной группе отличались по степени обсеменен-ности и спектру выделяемых микроорганизмов. Среди выделяемых бактерий в различных биотопах новорожденных преобладали штаммы гемолитического стафилококка и энтерококков, резистентных к большинству антибактериальных средств. Ключевые слова: микробиоценоз, новорожденные, беременные женщины, родильницы, бактериологическое исследование
УДК 616-008-053.3
Контактная информация: Примак Татьяна Дмитриевна — зав. каф. микробиологии ГОУ ВПО ЧГМА; 672007 г. Чита-7, ул. Чайковского 35, кв. 27; т. (302) 26-55-64; [email protected]
MiCROBIOCENOSIS OF THE BIOTOPES OF NEWBORNS
IN THE DEPARTMENT OF RESUSCITATION AND INTENSIVE THERAPY
T. D. Primak1, E. A. Shevchuk2, N. V. Krivosheeva2, S. V. Kalinina1, B. S. Erdyneeva1
Chita state medical academy1, Provincial clinical hospital2, Chita
Are represented the materials of the clinical laboratory inspection of 120 newborns, that obtained treatment in DRIT of Perinatal center of the Provincial clinical hospital in 2005—2007. Control group they composed 25 children of children's department. The bacteriological the inspection of the discharge of cervical channel is realized in 45 women. Was conducted a bacteriological study of the micro-biota of the number of the biotopes (the stomatopharynx, armpit, umbilical wound, feces) of newborns for 1, 3, 5, 7 and 10 days of life. Microflora of newborns in DRIT and control group they differed according to the degree of seeding and the spectrum of the microorganisms being isolated. Among the bacteria in different biotopes of newborns being isolated predominated the strains of hemolytic staphylococcus and enterococci, resistance to the majority of antibacterial means.
Key words: microbiocenosis, newborn children, pregnant women, parturient, bacteriological study
В последние годы во всех странах мира отмечается увеличение частоты госпитальных инфекций у новорожденных, особенно детей, находящихся в отделениях реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) [1—4]. Микробиоценоз новорожденного претерпевает в первые дни и недели жизни существенные фазовые изменения [5]. Первыми микроорганизмами, с которыми контактирует плод, являются бактерии, присутствующие в материнском
организме [6, 7]. Целью исследования явилось изучение ряда биотопов организма новорожденных, находящихся в ОРИТ, в разные сроки первых 10 дней жизни.
Материалы и методы исследования
Микробиологический мониторинг проводили при бактериологическом обследовании 120 новорожденных и 45 рожениц. 95 новорожденных находились в ОРИТ с диагнозами: церебральная ишемия — 88 детей (73,3%), врожденная аномалия развития — 25(20,8%), натальная травма шейного отдела позвоночника — 2(1,6%), РДС— 3(2,5%), НСК на уровне ШОП — 2 (1,6%). ВУИ и других инфекционных заболеваний не наблюдалось. По способу родоразрешения среди детей ОРИТ родились естественным путем 12%, путем кесарева сечения 88% новорожденных. Масса при рождении детей, находящихся в ОРИТ, составила менее 3 кг у 63% новорожденных, от 3 до 3,5 кг — у 18,5%, более 3,5 кг — у 1 8,5%. В детском отделении наблюдали группу здоровых детей — 25 человек с диагнозом «Период новорож-денности». В контрольную группу были включены дети в состоянии физиологической ранней неонатальной адаптации, родившиеся при физиологических родах на сроке гестации 37—42 недели при условии активности, адекватного дыхания или громкого крика, удовлетворительного мышечного тонуса, отсутствия выраженного цианоза,
Таблица 1. Микробиоценоз ротоглотки новорожденных ОРИТ по дням жизни
Микроорганизмы I сутки (n = 54) III сутки (n = 62) V сутки (n = 34)
абс. % абс. % абс. %
St. mitis 4 7,4 8 12,9* 5 14,7
St. warneri 2 3,7 4 6,4 3 8,8
Candida - - 3 4,8* 3 8,8
St haemo/yticus 2 3,7 22 35,4 17 50
Enterococcus 3 5,5 8 12,9* 11 32,2*
Klebsiella - - 1 1,6 1 2,9
E. coli - - 2 3,2 2 5,8*
Монокультуры Z 12,9 33 53,2 24 70,5
2 и более ассоцианта 2 3,7 7 11,3 9 26,4
* - р <0,05
■ Т. Д. Примак и ар. Микровиоиеноз Биотопов новорожденных в условиях отделения реанимации и интенсивной терлпии
желтушности кожных покровов, врожденных пороков развития, клинических симптомов внутриутробной инфекции. При этом частота дыхания ребенка составляла 36—60 в минуту, частота сердечных сокращений 100— 160 в минуту, температура тела 36,5—37,5 °С, показатели физического развития и морфо-функциональной зрелости соответствовали гестационному возрасту ребенка.
Результаты и их обсуждение
Установлено, что слизистые оболочки ротоглотки при рождении у большинства новорожденных были стерильными. Колонизация ротоглотки новорожденных ОРИТ на 1 сутки жизни отмечалась в единичных случаях с преобладанием оральных стрептококков (36,6%) и энтерококков (27,2%). К третьим суткам жизни новорожденных при исследовании отделяемого ротоглотки увеличилось количество выделяемых культур микроорганизмов, лишь у 35,4% детей зев был стерильным. Выделялись бактерии разных классификационных групп, включая представителей семейств энтеробактерий, стафилококков, стрептококков. Чаще высевались 5?. Ьаето1уИси$ (45,8%), оральные стрептококки и энтерококки по 16,6% соответственно.
К пятым суткам жизни детей микробный пейзаж ротоглотки сохранялся по основным выделенным видам микроорганизмов, однако, значительно увеличивалось количество обнаруженных ассоциаций, что составило 26,4% среди всех обследованных детей (табл. 1).
К 7-м суткам жизни выявлены значительные особенности формирования микробиоты ротоглотки новорожденных детского отделения в отличие от детей ОРИТ (табл. 2).
Между контрольной группой и новорожденными ОРИТ выявлены различия и в количественных характеристиках микробиоты ротоглотки (табл. 3). При этом в объективном состоянии новорожденных не наблюдалось значимых изменений.
На третьи сутки с пупочной культи удалялась металлическая скобка и проводилась местная антисептическая обработка пупка. При этом происходило обсеменение пупочной ранки микроорганизмами из окружающей среды (табл. 4). Исследование посевов из пупка до и после обработки на седьмые сутки демонстрировало значительный рост частоты высеваемости энтерококков, однако случаев омфалита не наблюдалось.
Микрофлора подмышечных впадин новорожденных ОРИТ и детского отделения отличалась тем, что на третьи сутки в детском отделении в 1 00% случаев высевались КОС (коагулазоотрицательные стафилококки), тогда как в ОРИТ в 78,3% подмышки оказывались стерильными. На седьмые сутки подмышечные впадины оценивались только у новорожденных ОРИТ и оказывались стерильными в 1 00%. Из числа КОС, как в ОРИТ, так и в детском отделении чаще всего высевался St. warner¡ в 15 и 96% соответ-
Таблица 2. Микробиоценоз ротоглотки новорожденных ОРИТ и детского отделения
Микроорганизмы Частота встречаемости
ОРИТ (n =67) Контр. группа (n = 25)
абс. % абс. %
КОС 40 59,7* 6 24
Энтерококки 19 28,3 - -
Оральные стрептококки 12 17,9* 22 88
Энтеробактерии 4 5,9 - -
Грибы рода Candida 6 8,9* 1 4
Грамположитель-ные палочки - - 6 24
Монокультуры м/о 51 76,1 13 52
2 и более ассоци-анта 26 38,8 10 40
* - р <0,05
Таблица 3. Оценка динамики микробного заселения ротоглотки новорожденных
Микроорганизмы M ± m
I сутки (n =54) III сутки (n =62) V сутки (n =34)
St. mitis 4,8 ± 0,2 4,63 ± 0,18 4,13 ± 0,40
St. warneri 4,0 ± 0 4,0 ± 0,6 4,5 ± 0,5
Candida - 4,5 ± 0,5 4,0 ± 0
St. haemolyticus 2,3 ± 0,3 4,05 ± 0,17 4,15 ± 0,19*
Enterococcus 3,6 ± 0,3 3,4 ± 0,68 4,6 ± 0,4*
* - р <0,05
Таблица 4. Микробиоценоз пупочной ранки на 3- и и 7-е сутки жизни
Микроорганизмы III сутки (n = 60) VII сутки (n =29)
абс. % абс. %
St. warneri 5 8,3 3 10,3
St. haemolyticus 3 5 2 6,8
Enterococcus. spp. 16 26,6 16 55,1*
Corynebacterium 1 3,4
Нет роста 38 63,3 8 27,5
* - р <0,05
ственно, микробное число составило 3,8 + 0,4 и 3,9 + ± 0,15 (р>0,05).
У новорожденных ОРИТ проводился посев испражнений на пятые и десятые сутки, при этом чаще всего высевались энтерококки. К десятым суткам в единичных случаях высевались E. coli и Candida albicans по 6,2%. Из энтерококков наиболее часто регистрируемыми оказались
■ Т. Д. Примак и ар. Микровиоиеноз Биотопов новорожденных в условиях отделения реанимации и интенсивной терапии
Таблица 5. Сравнительная характеристика микрофлоры церви-кального канала
Микроорганизмы Частота обнаружения
беременные (n = 60) родильницы (n = 20)
абс. % абс. %
КОС 40 66,6 11 55
Энтерококки 9 15 - -
Энтеробактерии 9 15 5 25*
Кандиды 4 6,6 1 5
Лактобактерии 28 46,6 9 45
Коринебактерии 2 3,3 1 5*
2 и более ассоцианта 31 51 7 35*
* - р <0,05
Таблица 6. Микробное обсеменение половых путей беременных и родильниц
Микроорганизмы Беременные Родильницы
M ± m M ± m
КОС 3,4 ± 0,14 3,6 ± 0,36
Энтерококки 3,55 ± 0,33 -
Энтеробактерии 3,4 ± 0,33 3,6 ± 0,8
Лактобактерии 5,3 ± 0,2 4,25 ± 0,2*
Кандиды 4,5 ± 0,6 3,0 ± 0*
Коринебактерии 3,0 ± 0 3,5 ± 0,5
■ p <0,05
Е Ьвсакв 85,9—87,5% и Е /-аваит 14—12,5% в зависимости от возраста.
Оценка антибиотикорезистентности всех выделенных штаммов позволила определить чувствительность наиболее часто регистрируемых видов бактерий к используемым в детской реанимации антибактериальным средст-
□ Enterococcus
□ St. haemolyticus
□ Streptococcus ■ St. warneri
%100 -9080 -7060 -50 -4030 -20 -10 -0 -
m
CL
ffl
цефало- меро- ванко-спорины пенем мицин
окса- амика-циллин цин
Рисунок 1. Антибиотикочувствительность микроорганизмов, выделенных от новорожденных
вам. Высокая резистентность определялась у энтерококков и гемолитического стафилококка. Все выделенные микроорганизмы показали чувствительность к ванкоми-цину (рис. 1).
При исследовании цервикального канала беременных в третьем триместре чаще всего выделялись КОС (66,6%), лактобактерии (46,6%) и энтерококки (15%), у родильниц — КОС (55%) и энтеробактерии (25%) (табл. 5). Имело место совпадение основного видового пейзажа микроорганизмов у беременных и родильниц. Ассоциации бактерий у беременных женщин наблюдались в 51%, у родильниц в 35% случаев и содержали максимально четыре культуры одновременно. Чаще выделялись КОС с лактобактериями (30,3%) и КОС с энтеро-бактериями (12%).
У беременных женщин количество микроорганизмов в пробах составило 103—105 КОЕ/мл. Непосредственно после родов УПМ обнаружены у 20% родильниц, на третий день частота их обнаружения возросла до 36,7% женщин. Степень обсемененности при этом составила 103 КОЕ/мл (табл. 6).
Заключение
Формирование микробиоты новорожденных в ОРИТ и контрольной группе отличались по степени обсе-мененности и спектру выделяемых микроорганизмов. У детей ОРИТ рост микробной обсемененности ротоглотки наблюдался на 3—5 сутки жизни, пупочной ранки — на 7-е сутки жизни. При этом микробная контаминация УПМ на 7-е сутки была выявлена у трети детей (28,3%), и среди выделяемых бактерий в различных биотопах новорожденных на 3—7 сутки преобладали штаммы гемолитического стафилококка и энтерококков, резистентные к большинству антибактериальных средств. Микробиота половых путей беременных женщин и рожениц значительно отличалась по микробному числу и не содержала микроорганизмы, обнаруживаемые у новорожденных, находящихся в ОРИТ.
Литература:
1. Учайкин В. Ф. Научные и организационные приоритеты инфекционной патологии у детей // Педиатрия. — 2002. — № 3. — С. 6—10.
2. Володин Н. Н. Актуальность проблемы нозокомиальных инфекций в неонатологии / Н. Н. Володин, С. А. Касихина // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. — 2004. — Т. 3, № 1. — С. 74—79.
3. Комплексное лечение бактериальной инфекции у новорожденных / Г. М. Дементьева и др. // Рос. вестник перинатологии и педиатрии. — 2007. — № 1. — С. 9— 16.
4. Запруднов А. М., Мазанкова Л. Н. Микробная флора кишечника и пробиотики. — М.: 1 999. — 48 с.
5. Бочарова И. И. Клинико-иммунологические варианты патологических состояний у новорожденных, родившихся от матерей с урогенитальной инфекцией: Автореф. дис. ... д.м.н. — М., 2008. — 47 с.
6. Бактериальные инфекции плода и новорожденного: Пер. с англ. / Под ред. П. А. Дэвис. — М.: Мед., 1987. — 496 с.
7. Nosocomial infection in neonatal intensive care unit incidence and risk factor / E. Nagata et al. //Am. J. Infection. control.— 2002. — V. 30. — № 1. — Р. 26—31.