CC BY
18
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ПЕЙЗАЖ И УРОВЕНЬ
ЛИПОПОЛИСАХАРИДСВЯЗЫВАЮЩЕГО ПРОТЕИНА (ЛПС-СП) ПРИ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССАХ
MICROBIOLOGICAL SCENERY AND THE LEVEL OF LIPOPOLYSACCHARIDE-BINDING PROTEIN (LPS-BP) IN THE PYOINFLAMMATORY PROCESSES
Жевлакова Ю.А., Устьянцева И.М., Петухова О.В.
Федеральное государственное лечебно-профилактическое учреждение «Научно-клинический центр охраны здоровья шахтеров», г. Ленинск-Кузнецкий, Россия
Несмотря на прогресс мировой медицины в поиске новых эффективных антибактериальных препаратов, проблема гнойно-инфекционных процессов, вызванных условно-патогенными микроорганизмами, остается актуальной. В России ежегодно регистрируется около 60 тыс. случаев гнойно-воспалительных процессов, хотя их предполагаемое число составляет 2,5 млн. В данной статье были рассмотрены особенности видового состава возбудителей гнойно-воспалительных инфекций, спектра их резистентности к антибактериальным препаратам, с учетом уровня липополисахаридсвязы-вающего протеина (ЛПС-СП) в сыворотке крови больных с гнойно-воспалительными процессами, для определения профилактических мероприятий по предупреждению циркуляции возбудителей гнойно-воспалительных инфекций в стационаре. Всего обследованы 122 пациента с гнойно-воспалительными инфекциями, находившихся на стационарном лечении в ФГ ЛПУ «Научно-клинический центр охраны здоровья шахтеров» города Ленинска-Кузнецкого с 12.01.04 г. по 12.07.04 г.
Ключевые слова: липополисахаридсвязывающий протеин (ЛПС-СП), гнойно-воспалительный процесс.
Zhevlakova J.A., Ustyantseva I.M., Petukhova O.V.
Federal state medical prophylactic institution «Scientific clinical center of the miners' health protection», Leninsk-Kuznetsky, Russia
Despite the progress of the world medicine concerning the search of the new effective antibacterial drugs, the problem of pyoinflammatory processes caused by opportunistic microorganisms remains actual. About 60000 pyoinflammatory processes are registered in Russia every year, although the supposed amount is 2,5 mln. This article reviewed the features of the species composition of the germs of pyoinflammatory infections, the spectrum of their antimicrobial resistance, taking into account the level of lipopolysaccharide-binding protein (LPS-BP) in the serum of the patients with the pyoinflammatory processes for defying of prophylactic measures for prevention of circulation of the germs of the pyoinflammatory infections in the in-patient department. There was an examination of 122 patients with the pyoinflammatory infections who underwent the hospital treatment in the Federal state medical prophylactic institution "Scientific clinical center of miners' health protection" in Leninsk-Kuzne-tsky, from January, 12, 2004 till July, 12, 2004.
Key words: lipopolysaccharide-binding protein (LPS-BP), pyoinflamma-tory process.
Несмотря на прогресс мировой медицины в поиске новых эффективных антибактериальных препаратов, проблема гнойно-инфекционных процессов, вызванных условно-патогенными микроорганизмами, остается актуальной. Следует отметить, что в 90-х годах большинство авторов связывали рост частоты гнойно-воспалительных процессов с неоправданно широким использованием антибиотиков и увеличением контингента больных с высоким риском инфицирования. Многие заболевания у госпитализированных больных явились следствием аутоинфекции или были вызваны госпитальными штаммами микроорганизмов. После госпитализации микрофлора стационара быстро колонизирует
пациентов и становится частью их аутофлоры. В последующем, при определенных обстоятельствах, эти микроорганизмы могут вызывать так называемые эндогенные инфекции [1]. В России ежегодно регистрируется около 60 тыс. случаев гнойно-воспалительных процессов, хотя их предполагаемое число составляет 2,5 млн. [2].
Цель исследования — изучение особенностей видового состава возбудителей гнойно-воспалительных инфекций, спектра их резистентности к антибактериальным препаратам, с учетом уровня липопо-лисахаридсвязывающего протеина (ЛПС-СП) в сыворотке крови больных с гнойно-воспалительными процессами, для определения профилактических мероприятий по
предупреждению циркуляции возбудителей гнойно-воспалительных инфекций в стационаре.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Всего обследованы 122 пациента с гнойно-воспалительными инфекциями, находившихся на стационарном лечении в ФГ ЛПУ «Научно-клинический центр охраны здоровья шахтеров» г. Ленинска-Куз-нецкого с 12.01.04 г. по 12.07.04 г. Из них, с флегмонами — 40 человек, абсцессами мягких тканей — 37, свищами — 20, послеоперационными инфильтратами брюшной полости — 5, сепсисом — 5.
Материал для исследования доставляли в лабораторию не позднее 2 часов после взятия образца
с соблюдением правил антисептики. Изучение морфологических особенностей микроорганизмов в материале от больных проводили с использованием биологического микроскопа. Выделение чистых культур микроорганизмов проводили на 5 % кровяном агаре (КА) с кровью человека и средой обогащения (тиогликолевая). Факультативно-анаэробные бактериальные культуры выращивали в термостате при температуре 36-37 градусов в соответствии с действующим приказом № 535 Минздрава СССР от 22.04.85 г.
Идентификацию выделенных штаммов осуществляли на автоматическом анализаторе «Labsystems» Reader MF. Для определения чувствительности к антибактериальным препаратам использовали метод серийных разведений; тест на МИК (минимально ингибирующую концентрацию); количественный тест, результат которого представляет собой минимальную концентрацию антибиотика, при которой не отмечается роста микроорганизма в питательной среде [3].
В эти же сроки в периферической крови у 20 больных с гнойно-воспалительными процессами с обсе-мененностью раны 102-107 определяли липополисахаридсвязываю-щий протеин (ЛПС-СП) на имму-нохемилюминесцентной автоматической системе «Immulite One» с использованием реагентов «DPC». Данные, полученные в ходе исследования, обрабатывали статистически с использованием Т- критерия Вилкоксона.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Возбудители гнойно-воспалительных процессов выделены у 102 из 122 обследованных больных.
Микробный пейзаж ран при гнойно-воспалительных процессах, полученный при использовании традиционных методов, представлен в таблице. У 42 % больных выделялся St. Aureus. В 31,3 % случаев наблюдался рост неферментирующих бактерий (Ps. Aeruginosa, A. Calcoaceticus), в 14,6 % выделялись энтеробакте-рии (Kl. Oxytoka, Pr. Vulgaris, Ent. Agglomerans). St.Epidermidis выделялся в 2,9%, Str. Viridans
Таблица Видовой состав микроорганизмов, выделенных из ран, в отделении хирургического профиля
Микроорганизмы Количество выделенных штаммов у больных (%)
St. Aureus 42
Ps. Aeruginosa 16,6
A. Calcoaceticus 16,6
Ent. Agglomerans 9,8
Pr. Vulgaris 2,9
St. Epidermidis 2,9
Str. Viridans 2,9
Kl. Oxytoka 1,9
Прочие 4,4
В 2,9%, прочие микроорганизмы выделялись в 4,4% .
Таким образом, у больных с гнойно-воспалительными процессами в отделениях хирургического профиля наиболее преобладали: St. Aureus, Ps. Aeruginosa, A. Calcoa-ceticus.
При сопоставлении микробного спектра в смывах с объектов, находящихся в отделениях, и микробного пейзажа ран видно, что преобладает наиболее St. Aureus, Ps. Aeruginosa, A. Calcoaceticus, что может стать одной из причин микробной флоры у больных (рис. 1). Основными химиотерапевтически-ми препаратами для лечения и профилактики гнойно-воспалительных процессов являются антибиотики, выбор антибактериального препарата для эмпирической терапии и профилактики гнойно-воспалитель-
ных процессов в каждом отделении может быть различен. Успех анти-биотикотерапии во многом связан с правильным выбором препарата, а для этого необходимо знать спектр действия существующих антибиотиков, который должен охватывать как грамм(+), так и грамм(-) флору. Выбор того или иного антибиотика, а также рациональных комбинаций, диктуется, прежде всего, возбудителем заболевания, поэтому идентификация его является основной задачей.
Безусловно, с целью профилактики и эмпирической терапии выбор антибиотика для больного, находящегося в том или ином отделении, должен основываться не только на характере преобладающей микрофлоры в конкретном отделении, но и на чувствительности ее к антибиотикам. Не исключено поэтому, что
Рис. 1. Сравнительная характеристика микробного пейзажа и уровня обсемененности отделяемого ран и смывов в отделениях хирургического профиля.
Смывы Раны
ЮМ 0е
Ps.aeruginosa A.calcoaceticus
ЮМ О5 ЮМ О5 Ю3
Уровень обсемененности (КОЕ/мл)
Ю2
Ю2
^ 64
ПОЛИТРАВМА
в разных отделениях, стационарах необходимо применять и разные антибиотики.
При исследовании чувствительности микроорганизмов, выделенных из ран, в отделениях хирургического профиля к 10 антибиотикам нами установлено, что St. Aureus наиболее был чувствителен к цефотаксиму — 95 %, ципролету
— 95 %, амикацину — 95 %, чем к ампициллину, гентамицину, цефа-золину, доксициклину, кетоцефу, линкомицину — 90 %, оксициллину
- 88 %.
Ps. Aeruginosa оказалась чувствительна к амикацину - 90 %, ципро-лету — 90 %, гентамицину — 60 %, цефотаксиму — 46 %, оксициллину — 4 0%, ампициллину — 40 %. Абсолютно резистентна Ps. Aeruginosa к цефазолину, доксициклину, кето-цефу — до 100 %.
A. Calcoaceticus чувствителен к доксициклину — 92 %, амикацину, ципролету — 71 %, цефотаксиму, кетоцефу, линкомицину — 50 %, оксициллину — 21 %. Во всех отделениях остается резистентен к ген-тамицину, цефазолину — до 100 %.
Enterobacter aglomerans резистентен к цефазолину, кетоцефу, линкомицину — 100 %; чувствителен к доксициклину, цефотаксиму, амикацину, ампициллину, гентами-цину — 60 %, оксициллину — 40 %, ципролету — 20 %.
В целом, было поставлено 102 чувствительности к антибиотикам и, по полученным результатам исследований выделенных культур, можно сказать, что наибольшей способностью подавлять рост бактерий обладают следующие антибиотики: амикацин, ципролет, ген-тамицин, доксициклин (рис. 2).
Однако следует учитывать, что длительное применение в стационаре одних и тех же антибиотиков создает благоприятные условия для формирования антибиотикоре-зистентности [4]. Эффективность одних и тех же антибиотиков ограничена 1-2 годами их применения, так как возрастает число устойчивых вариантов бактерий [5].
Следует учитывать, что в течение заболевания отмечается как смена возбудителя, так и уменьшение чувствительности к антибиотикам, поэтому и необходимо системати-
чески определять чувствительность возбудителей к антибактериальным препаратам. Игнорирование указанного приводит к нерациональному применению антибиотиков.
Таким образом, установлено, что в этиологической структуре возбудителей гнойно-воспалительных процессов в хирургических стационарах возрастает доля антибиоти-корезистентных штаммов микроорганизмов, что значительно услож-
выявления циркуляции антибио-тикорезистентных штаммов в больничных учреждениях.
Известно, что уровень ЛПС-СП в крови повышается при бактериальной инфекции и эндотоксимии
[4].
Результаты исследования ЛПС-СП в сыворотке крови больных с гнойно-воспалительными процессами показали отсутствие достоверных различий значений этого по-
Рис. 2.
Результаты антибиотикочувствительности выделенных культур.
Абс.
49
50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0
47
Амикацин Ципролет Гентамицин Доксициклин Цефотаксим Цефазолин
Рис. 3.
Уровень липополисахаридсвязывающего протеина (ЛПС-СП) в сыворотке крови у больных с различной степенью обсемененности раны.
Уровень (ЛПС-СП) мкг/мл
200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0
200
180
_ _
87.6 ZH р
zE ЕЕ
I 1
102-103 104-105 Обсемененность раны КОЕ/мл.
106-107
няет проведение эффективной антибактериальной терапии, ухудшает прогноз заболеваний, а также увеличивает стоимость лечения.
Антибиотикограммы выделяемых культур могут быть использованы для внутривидовой дифференциации выделяемых возбудителей и
казателя между группами больных с микробной обсемененностью ран 104-105 КОЕ/мл и 106-107 КОЕ/ мл (рис. 3). В то же время, концентрация ЛПС-СП в сыворотке крови больных этих двух групп, в среднем, в 2 раза (Р < 0,01) превышала таковую в группе пациен-
тов с микробной обсемененностью ран 102-103 КОЕ/мл. В данном случае концентрация ЛПС-СП в сыворотке крови пациентов с гнойно-воспалительными процессами отражает выраженность бактериальной инвазии и токсемии и, возможно, может служить критерием развития осложнений заболевания и прогрессирования болезни.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 1. Среди возбудителей гнойно-воспалительных процессов в отде-
лениях хирургического профиля преобладают Ps. Aeruginosa, St. Aureus, A. Calcoaceticus.
2.Увеличение уровня липополи-сахаридсвязывающего протеина в сыворотке крови у больных с гнойно-воспалительными процессами прямо пропорционально степени увеличения обсемененно-сти ран.
3.Наибольшей способностью подавлять рост бактерий Ps. Aerugi-nosa, St. Aureus, A. Calcoaceticus обладают антибиотики: ами-
кацин, ципролет, гентамицин, доксициклин, в порядке убывания.
4.Определение видового состава микроорганизмов необходимо для оценки резистентности к антибактериальным препаратам возбудителей гнойно-воспалительных процессов, что дает возможность изучения циркуляции госпитальных штаммов в больничных учреждениях и разработки своевременных профилактических мероприятий.
Литература:
1. Назаров, П.Г. Реактанты острой фазы воспаления /П.Г. Назаров. - СПб., 2001. - 400 с.
2. Руководство по инфекционному контролю в стационаре. Пер. с англ. /под ред. Р. Венцеля, Т. Бревера, Ж-П. Бутцлера. - Смоленск, 2003. - 272 с.
3. Практические аспекты современной клинической микробиологии /Скала Л.З., Сидоренко С.В., Нехорошева А.Г. и др. - М., 1997. - 178 с.
4. Wenzel, R.P. Managing Antibiotic Resistance /Wenzel R.P., Edmond M.B. //N. Engl. J. Med. - 2000. - N 343. - Р. 1961-1963.
5. Этиология гнойных инфекций в Тюменской области по данным больничного стационара /Тимохина Т.Х., Хохлявина Р.М., Остапенко И.В. и др. //Клин. лаб. диагн. - 2003. - № 8. - С. 46-49.
т
