МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ МИКРОФЛОРЫ ВОЗДУХА В МНОГОПРОФИЛЬНОМ СТАЦИОНАРЕ Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ МИКРОФЛОРЫ ВОЗДУХА

В МНОГОПРОФИЛЬНОМ СТАЦИОНАРЕ

Акопова Юлия Семеновна

Кандидат биологических наук, Сибирский государственный университет, г. Красноярск

Акопова Ирэна Семеновна

Кандидат биологических наук, врач-бактериолог Филиала Федерального бюджетного учреждения здравоохранения «Центр гигиены и эпидемиологии в Красноярском крае», г. Лесосибирск

MICROBIOLOGICAL MONITORING OF AIR MICROFLORA IN MULTIDISCIPLINARY HOSPITAL Akopova Julia, Candidate of Biological Sciences, Siberian State University, Krasnoyarsk

Akopova Irena, Candidate of Biological Sciences, physician-bacteriologist in the Branch of the Federal State Institution of Health "Center of Hygiene and Epidemiology in the Krasnoyarsk ", Lesosibirsk

АННОТАЦИЯ

Цель исследования - анализ микробного пейзажа воздуха отделений многопрофильного стационара на протяжении 2010-2014 гг.. Исследования проводились бактериологическим методом в соответствии с СанПин 2.1.3.1375-2003. Установлено превышение общего микробного числа за счет увеличения количества условно-патогенных микроорганизмов, обладающих патогенными свойствами и антибиотикорезистентности. В воздушной среде выделены микроорганизмы рода Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Enterobacter, Pseudomonas, Acinetobacter и грибы рода Candidа, Aspergillus и Penicillium.

ABSTRACT

The purpose of research - analysis of the microbial landscape of air multidisciplinary hospital during the 2010-2014. The studies were conducted bacteriological method in accordance with the SanPin 2.1.3.1375-2003. It is established of total count by increasing the number of opportunistic pathogens, which have pathogenic properties and antibiotic resistance. The air isolated microorganisms of the genus Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Enterobacter, Pseudomonas, Acinetobacter and fungi of the genus Candida, Aspergillus and Penicillium.

Ключевые слова: микрофлора воздуха; общее микробное число; микробиологический мониторинг; антибио-тикорезистентность; инфекция; связанная с оказанием медицинской помощи.

Keywords: microflora of air; total microbial number; microbiological monitoring; antimicrobial resistance; health care-associated infections.

К числу приоритетных направлений, обеспечивающих благоприятную эпидемиологическую обстановку в стационарах, относится поиск современных подходов к реализации профилактических мероприятий, в том числе снижение уровня негативного воздействия экзогенного инфицирования пациентов и предупреждение развития внутрибольничных инфекций. Микробиологический мониторинг воздушной среды является наиболее доступным и показательным тестом, характеризующим уровень микробной загрязненности лечебных учреждений и преобладание тех или иных госпитальных штаммов [2, с. 7].

Весомое значение в процессе внутрибольничного распространения инфекций имеет аэрогенный механизм, обусловливающий интенсивное инфицирование абиотической среды, где микроорганизмы сохраняются без утраты своей патогенности на протяжении от нескольких суток до месяцев. Бактериальный аэрозоль от больных и носителей конвекционными потоками воздуха активно перемещается по больничным помещениям в короткие сроки, способствуя распространению госпитальных штаммов. Для многих инфекционных болезней воздух является

основным путем передачи возбудителей, а для внутри-больничных инфекций, вызываемых Aspergillus spp. практически, единственно возможным способом распространения [3, с. 86].

Штаммы бактерий, циркулирующие в стационарах, как правило, более вирулентны и обладают множественной антибиотикорезистентностью [4, с. 25]. Очевидно, что своевременность мониторинга микрофлоры воздуха стационара, является важнейшим условием эффективности профилактических мероприятий.

Цель проводимого исследования - анализ микробного пейзажа воздуха отделений многопрофильного стационара на протяжении 2010-2014 гг..

Микробиологический мониторинг воздуха отделений многопрофильного стационара основывался на определении общего микробного числа (ОМЧ) и видовой идентификации санитарно-показательных микроорганизмов. При этом набор помещений, в которых производился отбор проб, определялся в соответствии с регламентирующим нормативным документом (СанПин 2.1.3.1375-2003 «Гигиенические требования к размещению, устройству, оборудованию и эксплуатации больниц,

родильных домов и других лечебных стационаров»). Отбор проб осуществлялся в течение рабочего времени ас-пирационным методом в трех точках каждого помещения с помощью автоматического устройства для отбора проб биологических аэрозолей воздуха марки ПУ-1Б (ЗАО «Химко») на чашки Петри с питательным агаром, с селективной питательной средой Сабуро и желточно-солевым агаром.

Выделение и учет микроорганизмов проводился общепринятыми методами в соответствии с МУК 4.2.294211 «Методы санитарно-бактериологических исследований объектов окружающей среды, воздуха и контроля стерильности в лечебных организациях» с использованием питательных сред ФГУН «Государственного научного центра прикладной микробиологии и биотехнологии» (г. Оболенск) и фирмы HiMedia (Индия). Идентификация выделенных культур осуществлялась по общепринятым методам с помощью биохимических пластин, дифференцирующих энтеробактерии (ПБДЭ) и стафилококки (ПБДС) (г. Н.-Новгород).

Биологические свойства госпитальных изолятов микроорганизмов изучались на простых и сложных питательных средах. Тестирование гемолитической активности проводилось на чашках Петри с 5%-ным кровяным агаром. Наличие коагулазной активности стафилококков изучалось в отношении цитратной плазмы кролика. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам осуществлялось диско-диффузным методом на среде Мюллер-Хинтона. Выявление резистентности выделенных культур стафилококков к метициллину (оксациллину) - методом скрининга на агаре Мюллер-Хинтон с добавлением 4% №С1 и 6 мг/л оксациллина. Фаготипирование гос_Микробная обсемененность воздуха в поме

питальных изолятов стафилококков исследовалось с помощью Международного набора бактериофагов диагностических типовых (Великобритания). Статистическая обработка проведена с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel с определением средних величин (M) и стандартной ошибки средней (m). Для количественной оценки обсемененности воздуха микроорганизмами определена частота их встречаемости, выраженная в процентах к общему числу проб.

При анализе уровня ОМЧ воздуха установлено, что общее содержание микроорганизмов варьировало в пределах от 320±25 КОЕ/м3 до 1119±113 КОЕ/м3 (таблица). Максимальные уровни обсемененности были обнаружены в перевязочных «гнойной» (1119±113 КОЕ/м3), «чистой» (885±65 КОЕ/м3) и процедурных кабинетах (710±34 КОЕ/м3). При этом общее содержание микроорганизмов в воздухе рабочей зоны «гнойных» перевязочных превышало нормируемые значения для данной категории помещений (до 1000 КОЕ/м3). Минимальные уровни обсемененности воздуха регистрируются в операционных, предоперационных (320±25 КОЕ/м3) и палатах интенсивной терапии (480±32 КОЕ/м3), палатах для недоношенных детей (490±25 КОЕ/м3), что соответствовало гигиеническим нормативам (до 500 КОЕ/м3).

Анализ выявленных тенденций, позволил определить эпидемиологически значимые помещения по общему количеству микроорганизмов в 1 м3 воздуха. Очевидно, что наряду с такими влияющими на распространенность госпитальных факторов, как большая скученность больных в данных помещениях, наличие пациентов с иммуносупрессией, решающим может оказаться наличие постоянного резервуара инфекции.

Таблица 1

;ниях многопрофильного стационара (М±т)_

Помещения Показатели обсемененности

ОМЧ, КОЕ/м3 Staphylococcus, КОЕ/м3 Дрожжеподобные грибы, КОЕ/м3

Операционные, предоперационные 320±25 6±2 5±3

Палаты интенсивной терапии 480±32 56±15 6±3

Палаты для недоношенных детей 490±25 42±12 7±4

Процедурные 710±34 56±15 5±3

Перевязочные «чистые» 885±65 95±18 6±3

Перевязочные «гнойные» 1119±113 670±52 14±8

В стационарах основным источником контаминации воздушной среды являются носители из числа медперсонала, которые инфицируют значительную часть госпитализированных больных во время оказания медицинской помощи, осуществляя преемственность и передачу инфекционных агентов на фоне постоянной смены контингента больных [1, с. 5]. В связи с этим нами изучен состав бактериальной микрофлоры воздуха.

При анализе видового состава микробных изолятов, выделенных из воздушной среды стационара, следует отметить его неоднородность. Доминирующую позицию в перечне микроорганизмов (58,1±10,5%) занимают постоянные обитатели кожных покровов и слизистых оболочек - представители рода Staphylococcus spp. (Рис.1.). Общее содержание микроорганизмов рода Staphylococcus в воздушной среде варьировала от 6±2 КОЕ/м3 (в операционных и предоперационных) до 670±52 КОЕ/м3 («гнойных» перевязочных). Доминировали виды S. Epide-rmidis и S. haemolyticus, которые обнаруживались в

45,6±10,3% и 29,4±8,2%, соответственно. Несколько реже встречался S. aureus (21,3±9,2%) и S. saprophyticus (3,7±2,4%).

Высеваемость бактерий из воздуха рабочей зоны рода Streptococcus spp. (5,1±3,2%) и рода Enterococcus spp. (3,4±2,6%), была невысокой, но в условиях многопрофильного стационара эпидемиологически значимой. Важно отметить, что в пробах воздуха всех помещений обнаруживались возможные возбудители оппортунистических инфекций, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae (Escherichia coli - 9,0±3,7%, Enterobacter spp. - 6,8±2,4%, Citrobacter spp. - 6,4±2,2%). Среди неферментирующих грамотрицательных бактерий были изолированы Pseudomonas spp. - 2,1±2,1% и Acinetobacter spp. -1,7±1,7%). Данные микроорганизмы даже при незначительной обсемененности воздушной среды при определенных условиях способны контаминировать пациентов и вызвать тяжелые инфекционные заболевания верхних дыхательных путей и гнойно-септические заболевания.

Анализ воздуха на наличие плесневых грибов и грибов рода Candida в помещениях стационара показало их содержание в чистых и условно-чистых помещениях. Количество данных представителей в воздухе помещений операционных, предоперационных варьирует от 5±3 КОЕ/м3 до 14±8 КОЕ/м3 в помещениях другого функционального назначения. Максимальное содержание плесневых грибов в воздухе регистрировалось в «гнойных» перевязоч-

ных с видимыми признаками биоповреждений, где основным источником поступления спор в воздух является зараженный отделочный материал. Выделенные плесневые грибы представлены родами Aspergillus - 2,1±2,1%, Penicillium - 1,7±1,7%. Дрожжеподобные грибы представлены родом Candida - 3,4±2,6%. Следует отметить, что содержание грибов рода Candidа, Aspergillus и Penicillium в воздухе помещений лечебных учреждений не допустимо.

Рисунок 1. Микробный пейзаж воздуха многопрофильного стационара

Одной из важных причин формирования госпитальных штаммов является их способность приобретать склонность к паразитированию и устойчивости к неблагоприятным факторам, специфичным для данного лечебного учреждения. Наличие у микроорганизмов субстанций, направленных на деградацию молекул и клеток организма-хозяина, объясняют преимущественную этиологическую роль данных микроорганизмов в инициации воспалительных процессов и инфекционной патологии госпитализированных больных. В связи с этим мы сочли целесообразным изучит гемолитическую активность выделенных культур как фактора патогенности. Анализ полученных данных показал, что гемолитическая активность выявлена у 67% всех выделенных штаммов. При изучении гемолитической активности стафилококков установлено, что 73 % штаммов Staphylococcus spp. обладали данным свойством, 48% штаммов Escherichia coli, 40% - Enterobacter spp., 60% - Citrobacter spp., 100% - Pseudomonas spp., 100% - Acinetobacter spp., 100% - Streptococcus spp. и 100% - Enterococcus spp., соответственно. Наличие гемолитической активности характеризует микроорганизмы как популяцию, обладающую патогенетическими свойствами.

В целях информативности состояния антибиотико-резистентности микроорганизмов, целесообразно, на наш взгляд, кратко охарактеризовать локальную структуру резистентности микроорганизмов.

Резистентность культур к антибактериальным препаратам изучена у эпидемиологически значимых микроорганизмов, выделенных из воздушной среды помещений стационара. Изоляты S. aureus обладали резистентностью к бензилпенициллину (48,92±3,23%), к ампициллину (34,38±4,28%). Данное обстоятельство свидетельствует о нецелесообразности использования антибиотиков для

монотерапии инфекций, вызываемых госпитальными штаммами S. aureus. Резистентность к цефтриаксону и це-фотаксиму не имела значительных отличий, и составила 15,27±1,99% и 16,38±1,98% соответственно. Не менее актуальной проблемой для многопрофильного стационара является появление и распространение метициллинрези-стентных штаммов (MRSA), на долю которых приходится 14,22±2,98% популяции золотистого стафилококка. Необходимо отметить, что фиксируемый уровень частоты резистентности к оксациллину должен вызывать настороженность. Установлена высокая активность ванкомицина и фузидина в отношении тестируемых микроорганизмов. При анализе чувствительности к эритромицину и линко-мицину выявлена относительно невысокая резистентность культур - 6,08% и 3,42% соответственно. Следует отметить, что гемолизирующие штаммы S. epidermidis обладали резистентностью к бензилпенициллину (26,80± 3,13%), ампициллину (24,50±3,12%), цефтриаксону (4,50±1,12%) и цефотаксиму (4,12±0,21%). Установлено, что изоляты E. coli обладали низкой чувствительностью к ампициллину (56,7±5,23%) и цефтриаксону (26,30±1,22%). Штаммы Pseudomonas spp. обладали низкой чувствительностью к карбенициллину (68,94±5,23%), цефотаксиму (62,92±6,23%), цефтриаксону (47,93±5,24%), ципрофлокса-цину (38,23±4,23%). Вызывает особое беспокойство снижение чувствительности штаммов Enterococcus spp. к ген-тамицину (52,92±4,23%), хлорамфениколу (45,26±5,21%) и гентамицину (34,22±6,22%).

В результате проведенных исследований нами установлено, что общее содержание микроорганизмов в воздухе рабочей зоны многопрофильного стационара превышало значения нормируемых показателей. В составе бактериальной флоры преобладали микроорганизмы рода Staphylococcus, при этом отмечено видовое

разнообразие микроорганизмов. Кроме того, в воздушной среде обнаружены условно-патогенные микроорганизмы и грибы рода Candidа, Aspergillus, Penicillium. Анализ состояния гемолитической активности микроорганизмов, выделенных из воздушной среды, многопрофильного стационара, показал стабильность данного свойства для большинства клинических изолятов, свидетельствующее о циркуляции эпидемиологически значимых штаммов микроорганизмов. Обнаруженные патогенные свойства исследуемых штаммов (гемолитическая и коагулаз-ная активность) указывают на несомненную значимость данных признаков при контаминации пациентов и возможном возникновении внутрибольничных инфекций.

Проведенные исследования позволили выявить проблемы антибиотикорезистентности внутрибольничных штаммов и дать рекомендации по их решению. Систематическое наблюдение за циркуляцией микроорганизмов в воздушной среде многопрофильного стационара способствует прогнозированию эпидемиологической обстановки, своевременному выявлению резервуаров потенциально-патогенных бактерий и снижению экономических потерь медицинского учреждения.

Список литературы

1. Акимкин В. Г., Тутельян А.В., Брусина Е.Б. Актуальные направления научных исследований в области неспецифической профилактики, связанных с оказанием медицинской помощи // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2014. №2. С.4-40.

2. Акопова Ю.С., Акопова И.С., Прудникова С.В. Мониторинг внутрибольничных штаммов микроорганизмов, циркулирующих в отделениях многопрофильного стационара // Евразийский Союз Ученых (ЕСУ). 2014. №7. С.7-8.

3. Акопова И.С., Новицкий И.А. Анализ состояния экосистемы многопрофильного стационара с помощью системы микробиологического мониторинга // Вестник КрасГАУ. 2009. №5. С.86-90.

4. Ohl C.A., Ashley D. Antimicrobial stewardship programs in community hospitals: the evidence base and case studies // Clin. Infect. Dis. 2011. Vol. 53. P.23-28.

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ ГИДАТЛИНСКОЙ ДОЛИНЫ

Алиева Патимат Магомедовна

Магистр 1 г. обуч., Дагестанский государственный университет, г. Махачкала

MEDICINAL PLANTS OF THE GIDATLY VALLEY

Alieva Patimat Magomedovna, Master (1 year), Dagestan state university, Makhachkala АННОТАЦИЯ

Флористическое богатство Дагестана обусловлено особыми физико-географическими условиями. В составе дагестанской флоры много полезных растений и местные народы активно используют их в различных целях. Особенно в последнее время лекарственные растения пользуются большим успехом. Данная работа посвящена флоре лекарственных растений густонаселенной Гидатлинской долины во внутригорьях республики. ABSTRACT

The floristic diversity of Dagestan caused special physiographic conditions. In Dagestan flora many useful plants and local people actively use them for different purposes. Especially recently medicinal plants have been very successful. This article is dedicated to the flora of medicinal plants in densely populated of the Gidatly valley (midlands of the republic).

Ключевые слова: Гидатлинская долина, лекарственные растения, классификация лекарственных растений. Keywords: Gidatly valley, medicinal plants, classification of medicinal plants.

Дагестан является уникальным краем по климатическим условиям и природно-хозяйственным показателям. Природные ресурсы - наличие моря, обилие солнца, множество источников минеральных вод и грязей, богатый растительный мир в республике со временем при правильной организации отдыха и туризма могли бы способствовать развитию Дагестана как южной здравницы России.

Именно поэтому в Дагестане необходимо вести изучение полезных растений, особенно лекарственных, которые в настоящее время стали пользоваться большой популярностью как альтернативой искусственно созданным медицинским препаратам.

Изучение лекарственных растений в Дагестане неотрывно связано с этим ресурсоведческим направлением на всем Кавказе. Основным классическим трудом по растительным ресурсам считается книга А.А. Гроссгейма «Растительные богатства Кавказа» (1952) [6], где автор

приводит сведения не только о лекарственных растениях, но и о других их полезных группах.

Среди местных исследователей лекарственных растений следует назвать известного ресурсоведа Б.Д. Алексеева [1-4]. Свой вклад в изучение лекарственных растений внесли дагестанские исследователи М.А. и С.Г. Хархаровы [9], Ш.К. Гусейнов «Лекарственные растения Дагестана» [7], С.А. Эмиров «Краткий справочник лекарственных растений Дагестана» [10]. В настоящее время изучением лекарственных растений, их составом и интродукцией занимаются ученые Горного ботанического сада ДНЦ РАН.

Наши исследования мы посвятили лекарственным растениям Гидатлинской долины на территории Шамиль-ского района и собрали сведения об их использовании среди местного населения. Также провели многосторонний анализ лекарственных растений, о котором пойдет речь в данной статье.