CC BY
49
Сиб^ский медииинский жуpнал. 2011. № 2
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ
© ШОБОЛОВА Н.А., БАЛЬЖИРОВ Д.Б., ПРОКАЕВА Т.А., НАЗАРОВА-РЫГДЫЛОН А.Н., ЖИГАЕВ Г.Ф. — 2011
МИКРОАНГИОПАТИЯ, ИНСУЛИНОВЫЙ СПЕКТР,
ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ У БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА
Надежда Андреевна Шоболова, Доржи Баирович Бальжиров, Татьяна Александровна Прокаева, Алима Николаевна
Назарова-Рыгдылон, Геннадий Федорович Жигаев (Республиканская клиническая больница им. Н.А. Семашко, г. Улан-Удэ, гл. врач — к.м.н. Е.Ю. Лудупова)
Резюме. При сахарном диабете отмечены: высокий уровень иммунореактивного инсулина (ИРИ) и низкое содержание свободного инсулина при высокой концентрации глюкозы. Выявлены значительные нарушения в системе гемостаза и усиление пролиферативных процессов в микроциркуляторном русле (по данным изучения кожных биоптатов). В процессе Зх-месячного лечения «Арура-ТАН-3» и у больных микроангиопатиями отмечено снижение скорости и степени агрегации тромбоцитов, улучшение показателей фибринолиза и клинического течения заболевания. Показано, что у больных диабетической нефропатией усиленны процессы ПОЛ, о чем свидетельствует увеличение содержания в плазме крови малонового диальдегида.
Ключевые слова: инсулиннезависимый сахарный диабет, агрегация тромбоцитов, «Арура-ТАН-3», перекисное окисление липидов.
MICROANGIOPATHY, INSULIN SPECTRUM, LIPID PEROXIDATION IN THE PATIENTS WITH TYPE II DIABETES MELLITUS
N.A. Shobolova., D.B. Balzhirov, T.A. Prokayeva, A.N. Nazarova-Rygdylon, G.F. Zhigaev (Respublican Clinical Hospital, Ulan-Ude)
Summary. The tests showed that DM patients had IRI and low free insulin in high glucose levels; disorders of hemostasis, active proliferation in the microvessels were also revealed. In patients with microangiopathy «Aruro-TAN-З» therapy, conducted during 3 months, reduced the rate and degree of platelet aggregation, improved the indices of fibrinolysis and clinical course of the disease. The patients with renal disorders had noticeable enhancement of LPO processes that was displayed by high plasma levels of malonic dialdehyde.
Key word: non-insulin-dependent diabetes mellitus, platelet aggregation, «Aruro-TAN-З», lipid peroxidation.
Вопрос о патогенезе поражений почек и микроцир-куляторного русла при сахарном диабете — один из актуальных в современной эндокринологии [11,5,13]. Болезнь нередко приобретает тяжелое течение, изобилует серьёзными осложнениями. Так, диабетическая нефропатия протекает с поражениями как почечных клубочков, развитием мезангиальнаго гломерулонефрита, так и почечных канальцев [4,2,14]. Недостаточно изучен механизм, который приводит к подобным изменениям в почках.
По данным ряда авторов, обнаруживаются и такие поражения почек, как дистрофия, некроз, хронический гломерулонефрит, хронический пиелонефрит [1,9,10,12].
Исследователи подтверждают отчетливый параллелизм между степенью нарушения процессов ПОЛ и выраженностью патологии почек у больных сахарным диабетом.
Целью настоящей работы явилось изучение состава секретируемого инсулина и морфологии капилляров, антитромбогенной активности сосудистой стенки, процессов перекисного окисления липидов в патогенезе поражения почек у больных сахарным диабетом 2-го типа.
Материалы и методы
Обследовано 48 больных сахарным диабетом 2-го типа, получавшие пероральные сахароснижающие препараты. У 31-го пациента наблюдалось нефроангиопатия, ретинопатия 1-11 ст.; ангиопатия сосудов нижних конечностей.
Возраст больных от 30 до 60 лет и старше. Женщин было-12 (25,0%), мужчин-36 (75,0%).
Контрольную группу составили 10 здоровых лиц с нормальной массой тела без сахарного диабета в анамнезе.
Состояние микроциркуляторного русла оце-
нивали по результатам изучения кожных биоптатов. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином, толуи-диновым синим, проводили импрегнацию азотнокислым серебром. С помощью окуляр-микрометра измеряли толщину сосудистой стенки и площадь клеточной пролиферации.
Использовали метод определения антитромбоген-ных свойств сосудистой стенки, основанный на создании кратковременной (3-5 мин.) локальной ишемии при накладывание манжеты манометра на плечо пациента («манжеточная проба») и создания в ней давления, превышающее систолическое на 10 мм рт. ст. Это ведет к освобождению из эндотелия сосудов здоровых лиц в кровь простациклина, антитромбина-111, активаторов плазминогена.Уровень свободного, связанного, имму-нореактивного инсулина (ИРИ) и С-пептида определяли натощак и через 10, 30, 60 и 120 мин после в/в введения глюкозы. Интенсивность свободнорадикального окисления липидов оценивали путем спектрофотометрического определения содержания в плазме крови основного конечного продукта ПОЛ— малонового диальдегида (МДА).
Таблица 1
Динамика уровня инсулина, С-пептида и глюкозы крови у лиц контрольной группы (п=10), М± т
Время, мин Инсулин С-пептид, ммоль/л Глюкоза крови, ммоль/л
Свободный мг/мл 1г ткани 1,5 час. Связанный мг/мл 1г ткани 3 час. ИРИ нмоль/л
0 1,92±0,43 2,73±0,82 б7,41±2б,90 2,02±0,54 4.б7±0,83
10 4,02±0,87^ 1,02±0,33^ 208,б0±б4,80^ 4,28±0,92^ 8,80±1,38^
30 1,47±0,б0^ 1,50±0,3б 97,94±18,900 3,14±0,б4 7,15±0,33
б0 2,01±0,51 1,92±0,45 134,82±30,80 2,39±0,4б б,52±1,80
120 1,74±0,бб 1,20±0,39 80,22±27,б1 1,28±0,57 4,35±0.б4
Пpuмeчанue: • — значимое различие от исходных показаний (p<0,05).
Динамика уровня инсулина, С-пептида и глюкозы крови у больных СЭ II (п=48), М±т
Время, мин Инсулин С-пептид ммоль/л Глюкоза крови ммоль/л
Свободный мг/мл 1г ткани 1,5 час. Связанный мг/мл 1г ткани 3 час. ИРИ нмоль/л
0 1,73±0,30 0,78±0,16 150,01±19,20 3,79±0,43 9.90±0,55
10 2,64±0,33^ 0,24±0,010 192,22±32,63 3,34±0,38 14,68±1,30-
30 1,44±0,25- 0,57±0,25 179,20±31,11 3,59±0,24 12,37±0,99
60 2,37±0,39 0,92±0,24 181,83±26,84 3,30±0,45 11,93±0,60
120 1,32±0,27 0,42±0,09 155,10±26,03 3,74±0,41 11,01±0,77
Примечание: • — значимое различие от исходных показателей р<0,05.
Полученные данные обработаны методом вариационной статистики, достоверность различий вычисляли с использованием 1-критерия Стьюдента. Критический уровень значимости при проверке гипотез р=0,05.
Результаты и обсуждение
У 10 здоровых лиц (контрольная группа) после внутривенного введения глюкозы на первой минуте отмечается пик подъема уровня глюкозы, секреции свободного, иммунореактивного инсулина и С-пептида с последующим снижением показателя к 30 мин (табл. 1).
Как следует из таблицы, уровень связного инсулина к 10-й и 30-й мин снижался по сравнению с исходным, на 60-й содержание свободного и связанного инсулина в крови вновь увеличивалось. Для здоровых лиц закономерно совпадение характера кривых, отражающих динамику уровня ИРИ, свободного и связанного инсули-нов, а также содержание глюкозы в крови до нормы после кратковременного его подъема на 10-й минуте, что указывает на эффективность инсулинового ответа, на нагрузку внутривенного введения глюкозы. Динамика уровня инсулина у больных сахарным диабетом 2-го типа отражена в таблице 2.
Как видно из таблицы, у больных СД II секреция инсулина после нагрузки глюкозой неадекватна.
Уровень связанной формы гормона ниже уровня свободного, что обусловлено усиленной мобилизацией такого важного компенсаторного механизма, как освобождение инсулина из связи с белком. Имеется расхождение кривых секреций свободного инсулина, т.е. количество последнего снижено, при этом уровень глюкозы крови остается высоким. Это дает основание говорить о том, что в состав ИРИ входят инсулиноподобные вещества, при диссоциации которых образуются пептиды, обладающие низкой биологической и высокой ра-диоиммунологической активностью. Подтверждением такого предложения служат данные, полученные при анализе биоптатов кожи этих больных: с большой закономерностью выявляются выраженная клеточная пролиферация эпителия и значительно утолщенная сосудистая стенка.
Высокий уровень ИРИ обусловлен появлением ин-сулинподобных веществ — пептидов, которые не влияют на утилизацию глюкозы, но усиливают пролиферативные процессы.
Таким образом, была выявлена прямая связь между частотой, выраженностью микроангиопатией и степенью инсулиновой недостаточности, причем морфологические изменения капилляров проявлялись раньше, чем клинические проявления микроангиопатий.
У больных сахарным диабетом 2-го типа имеются значительные нарушения и в системе гемостаза [1,7,11]. При проведении «Манжеточной пробы» у больных СД II в отличие от здоровых лиц не отмечено снижения агрегационной способности тромбоцитов, однако наблюдалось повышение скорости и степени агрега-
Таблица 2 ции, снижение степени дезагрегации. Вероятно, это связано с отсутствием выброса из эндотелия стенки сосудов простациклина, антикоагулянтов и активаторов фибринолиза, улучшающих реологические свойства крови.
По данным авторов [3,6]. Сама гипергликемия снижает уровень антитромбина III и компонентов фибринолиза. Циркулирующие в составе крови ИРИ инсулиноподобные ростовые факторы, усиливают пролиферацию эндотелия, повреждают его, создают благоприятные условия для усиления агрегационных процессов и снижения антитром-богенных свойств сосудистой стенки.
При комплексном лечении «Арура-ТАН-3» антитромбогенный потенциал сосудистой стенки превосходил таковой до его начала, возрастала общая фибринолитическая активность. По видимому данное лекарственное средство, подавляя агрегацию тромбоцитов, способствовало снижению их антифибринолитической активности. Не исключается и связь улучшения фибринолиза с воздействием этого препарата на эндотелий сосудов.
На фоне лечения наблюдался клинический эффект: уменьшение чувства онемения нижних конечностей, парестезий, болевого синдрома, улучшение зрения у пациентов с диабетической ретинопатией, уменьшение судорог у больных с микроангиопатией сосудов нижних конечностей.
Таким образом можно сделать заключение, что у больных СД II нарушение инсулинового обеспечения, изменения сосудистой стенки и патологические сдвиги в системе гемостаза взаимообусловлены.
Коррекция системы гемостаза путем снижения активности его тромбоцитарного компонента при назначении «Арура-ТАН-3» позволяет существенно ограничить прогрессирование диабетической микроангиопа-тии. Содержание гидроперекисей липидов в пересчете на 1мл липидов значительно повышено у больных с диабетической нефропатией, чем у здоровых лиц, соответственно, 0,49 ± 0,02 ед/мг и 0,36±0,05 ед/мг. Уровень МДА в крови был так же повышенным, соответственно, у больных 3,18±0,13нмоль/л и здоровых лиц — 2,18±0,02 нмоль/л. Активации процессов ПОЛ у пациентов с диабетической нефропатией способствует такие факторы, как гипоксемия, тканевая гипоксия, в том числе, и в ткани почек, дислипидемия. Кроме того, продукты ПОЛ дают вазоконстрикторный эффект [8]. В результате последнего еще более усугубляется гипоксия и сопровождается усилением процессов ПОЛ. Создается порочный круг, который приводит к глубоким функциональным и морфологическим нарушениям в почках и других органах.
Ведущую роль в защите биологических мембран от активации ПОЛ у больных СД II играет каталаза; у них она очень низкая (10,52±0,43 мкат/мл). Следовательно, процессы перекисного окисления липидов у больных ИНСД активизированы.
Все это подтверждает четкий параллелизм между степенью нарушения процессов ПОЛ и выраженностью патологии почек у больных СД II . Это дает основание использовать определение показателя ПОЛ в качестве дополнительных лабораторных тестов для оценки поражения почек при сахарном диабете и для определения прогноза заболевания.
Таким образом, у больных с диабетической нефропатией происходит существенное усиление процессов ПОЛ, о чем свидетельствует увеличение содержания в плазме крови малонового диальдегида. Полагаем, что результаты наших исследований могут служить патогенетическим обоснованием для разработки комплексной терапии и применении лекарственных средств, ока-
зывающих антиоксидантое действие.
ЛИTEPATУPA
1. Балаболкин М.И. Сахарный диабет. — М., 1994 — 340 с.
2. Богданович В.П. Сахарный диабет (лечение и профилактика). — Нижний Новгород, 1997. — 270с.
3. Георгиева С.А., Головченко В.М, Пучиян Д.М. и др. Противотромботическая терапия в клинической практике: Новое в теории, диагностике, лечении — М., 1982. — 64с.
4. Дедов И.И., Шестакова М.В. Лечение диабетической нефропатии: прошлое, настоящее и будущее // IX Пленум правления научного общества нефрологов России и научной конференции, посвященной памяти члена-корреспондента РАМН проф. И.Е. Тареевой. — М., 2001. -С.19-20.
5. Мазуров В.И., Новик А.А., Нагибович О.А., Ромишевский Б.В. и др. Влияние сахароснижающей терапии на функции почек у больных сахарным диабетом II // Клин. мед. — 1998. — №6. — С. 38-41.
6. Мамедгасанов Р.М., Семавен И.Е., Смирнова Л.М. и др. // Клин. мед. — 1998. — №8. — С. 74-76.
7. Соколов Е.И. Сахарный диабет атеросклероз. — М., 1996. — 280 с.
8. Тарасова Н.С. значение ПОЛ у больных хроническим алкоголизмом с поражением почек // Тер. Арх. — 1998. — Т.70.
№6. — С. 23-25.
9. Тареева И.Е. Нефрология: Рук-во для врачей. — М.: Медицина, 1995. — 480 с.
10. Шестакова М.В., Шамхалова, Уханова Т.Ю. и др. Глюренорм при диабетической нефропатии: влияние на функциональное состояние почек и эндотелей сосудов // Пробл. Эндокринологии. — 1996. — Т.42, №2 — C. 8-11.
11. Юданова Л.С., Старосельцева Л.К., Альтшулер М.Ю. Изменение сосудистой стенки, инсулинового спектра крови и системы гемостаза у больных сахарным диабетом II типа и возможности их коррекции // Тер. арх. — 1998. — Т.70. №6. — С. 20-23.
12. Adler S., Nagt С., Artishevsky A. Diabetic nephropathy: pathogenesis and treatment // Апп. Rev.Med. — 1993. — Vol. 44. — P. 303-315.
13. Gross J.L., Stein А.С., et al. Rick factors for development of proteinuria by type II (non— insulin-dependent) diabetic patients // Braz. J.med.biol.Res. — 1993. — Vol. 26. — P. 1269-1278.
14. Mur Marti T., Franch J., Griera N.M., et al. Nephropathy and microalbuminuria in type II diabetes // Atencion Primaria. — 1995. — Vol. 30, № 16(9). — P. 516-524.
Информация об авторах: 670047, Улан-Удэ, ул. Павлова, 12. Республиканская клиническая больница им. Н.А. Семашко тел. (3012) 233624 Шоболова Надежда Андреевна — врач-диабетолог,
Бальжиров Доржи Баирович — аспирант, Прокаева Татьяна Александровна — аспирант, Назарова-Рыгдылон Алима Николаевна — заведующая отделением,
Жигаев Геннадий Федорович — д.м.н., профессор.
в MAPTblHOB A.M. — 2011 УДК 615.322:582.681.26
СОСТАВ И СОДЕРЖАНИЕ ПОЛИФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ В НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ФИАЛКИ ПЕСЧАНОЙ
Aльбepm Muxайлoвuч Mаpmынoв (Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, ректор — д.м.н., проф. В.В. Шпрах, кафедра фармации, зав. — д.ф.н., проф. T.H. Ковальская)
Резюме. Изучен состав фенольных соединений надземной части фиалки песчаной (Viola arenaria DC.), произрастающей в Восточной Сибири. С помощью качественных реакций и хроматографических исследований в растении обнаружены флавоноиды и фенолкарбоновые кислоты. Методом ВЭЖХ идентифицированы 8 соединений: галловая, кофейная, цикоревая и неохлорогеновая кислоты, кемпферол-3-гликозид, витексин, кверцетин, а также о-метоксикумарин. Установлено, что преобладающими среди фенолокислот являются галловая, цикоревая кислоты, из флавоноидных соединений — витексин и кверцетин. Разработана методика спектрофотометрического определения фенольных соединений в пересчете на галловую кислоту. Относительная ошибка не превышает ± 4,63%.
Ключевые слова: фенольные соединения, фиалка песчаная, ВЭЖХ, спектрофотометрия.
COMPOSITION AND CONTENT OF PHENOL COMPOUNDS IN OVERGROUND PART OF SAND VIOLET
A.M. Martynov (Irkutsk State Institute for Postgraduate Medical Education)
Summary. The composition of phenol compounds of overground part of sand violet Viola arenaria DC., being widespread in East Siberia, has been studied. Flavonoids and phenol carbonic acids were detected in the plant with the help of qualitative reactions and chromatography investigations. Using the high-performance liquid chromatography (HPLC) method, eight compounds were identified, such as: gallic, coffee, chicory and neochlorogenic acids, as well as kempherol-3-glikozid, vitexin, quercetin and O-methoxycoumarin. It was found, that gallic, chicori acids, vitexin and quercetin are predominant among phenol acids and flavonoids, respectively. The technique of spectrophotometric determination of phenol compounds using gallic acid equivalent has been developed. The relative error does not exceed 4.63 %.
Key words: phenol compounds, sand violet, HPLC, spectrophotometry.
Виды рода фиалка издавна использовались в качестве лечебных средств при различных заболеваниях. Известно, что многие представители этого семейства применяются в качестве отхаркивающего, обволакивающего, ранозаживляющего, противоаллергического, мочегонного средства и при ряде других патологий [4]. Эти свойства обусловлены наличием различных групп биологически активных соединений: флавоноидов, фе-нолкарбоновых кислот, антоцианов, полисахаридов и других веществ. Химический состав фенольных соединений фиалки песчаной мало изучен [3, 4].
Цель работы: исследование состава полифеноль-ного комплекса и количественная оценка этой группы природных соединений надземной части фиалки песчаной.
Материалы и методы
Объектом исследования служила высушенная надземная часть фиалки песчаной — Viola arenaria DC. семейства фиалковых (Violaceae), заготовленная во время цветения в 2QQ8-2QQ9 гг. в Иркутском сельском районе.
