гируют при периодическом перемешивании 500—1000 мл дистиллированной воды (в зависимости от предполагаемого содержания ртути) в течение суток. Экстракт пропускают через беззольный фильтр под вакуумом до получения прозрачного и бесцветного фильтрата.
Отбирают 100—500 мл экстракта и далее определение ртути проводят так, как и в воде.
Точность и воспроизводимость методик проверена на образцах различных материалов методом добавок. Ошибка измерений не превышала 2—4%.
Выводы
1. Предложен метод экстракционно-фотометрического определения микроколичеств ртути, основанный на экстракции бензолом ионного ассоциата, образованного анионным йодидным комплексом ртути с катионом КФ. Метод отличается высокой чувствительностью (£=10,3-104) и позволяет проводить одновременное концентрирование и определение ртути из сильно разбавленных растворов, содержащих до 0,002 мкг/мл.
2. Определению ртути не мешают 2п, Сс1, Мп, Со, Си, Ре, А1, РЬ, Сг и некоторые другие элементы. Метод отличается хорошей воспроизводимостью и точностью.
ЛИТЕРАТУРА. Киш П. П., Витенко Г. М., Б у л е ц а В. И. Способ экстракционного концентрирования ртути. Авт. свид. СССР № 411043. — »Открытия изобрети, 1974, № 2. — Киш П. П., Зимомря И. И. Экстракционно-фотометрическое определение ультрамалых содержаний цинка в воде и щелочах. — «Заводск. лабор.», 1969, т. 35, № 5, с. 541—543. — Крылова А. Н., Рубцова. Ускоренное определение ртути в моче. — «Вопр. суд. мед.», 1969, № 3, с. 24—27,— (Б а п с1 е 1 1 Е.). Сен-дел Е. Колориметрические методы определения следов металлов. М., 1964.
Поступила 12/1 1975 г.
УДК в12.017.1-0в:в!3.6+ 613.6-07:612.017.1
Н. Ф. Жигунов
МЕТОДИКА ИЗУЧЕНИЯ ФАКТОРОВ ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ СРЕДЫ НА ГЕТЕРОГЕННОСТЬ О- и У1-АНТИТЕЛ
Городская санэпидстанция, Могилев
Многие исследователи относят антителообразование к чувствительным тестам для обнаружения иммунологических сдвигов в организме в результате воздействия профессионально-производственных вредностей (М. М. Кочанов; В. К. Навроцкий; А. Ф. Стояновский и Т. В. Рассказова; Л. М. Шмутер, и др.). Однако при оценке характера и степени иммунологических изменений не всегда достаточно суммарного определения уровня антител. В последнее время все больший интерес проявляется к использованию показателей дифференцированного выявления различных классов иммунных глобулинов, в основе которого лежит физико-химическая неоднородность антител. Установлено, что на ранних стадиях иммунного ответа продуцируются макроглобулины (195), а при последующей иммунизации появляются и 75-антитела. Существуют различия и в функциональном отношении. 195-антитела являются антибактериальными, обладают большей авидностью к антигену, выраженными бактерицидными и опсонизи-рующими свойствами, они более эффективны в реакции агглютинации. 75-антитела активны к микробным ядам. Нашей задачей было изучить в динамике характер специфических иммунологических изменений при действии на организм комплекса веществ относительно небольших концентраций в промышленности химических волокон.
Исследования проводили в течение 3 лет в прядильном (127 человек) и химическом цехах (47 человек) вискозного производства завода искусственного волокна, прядильном (57 человек) и химическом (99 человек)
цехах комбината синтетического волокна, выпускающего полиэфирное волокно лавсан. О) стажем работы до 5 лет было 41 и 7 наблюдаемых, 10—14 лет — 29 и 18 наблюдаемых, 15 лет и более — 57 и 22 наблюдаемых соответственно из прядильного и химического цехов вискозного производства. Рабочие производства волокна лавсан имели относительно малый профессиональный стаж. В прядильном цехе стаж от 2 до 6 мес имели 20 человек, от 6 мес до 1 года—21, от 1 года до 2 лет —16, в химическом цехе стаж до 2 нед имели 16 человек, от 2 до 6 мес — 67, от 6 мес до 2 лет— 16. Всего обследовано 330 рабочих-химиков и 229 лиц контрольной группы в возрасте 20—40 лет. Контрольную группу составили рабочие строительных профессий и работники предприятий общественного питания, торговли, школ и детских дошкольных учреждений. Возрастно-половой состав обследуемых был примерно одинаковым, некоторое преобладание мужчин отмечалось в производстве синтетического волокна.
Обследование проводили до плановой двукратной первичной иммунизации гретой брюшнотифозной моновакциной через месяц после первой прививки, через год после вакцинации (перед ревакцинацией) и через месяц после ревакцинации. Изучали продукцию О-антител в реакции агглютинации по общепринятому объемному методу с О-диагностикумом, продукцию Vi-антител — в реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) с эрит-роцитарным Vi-диагностикумом. Для определения гетерогенности антител сыворотки обрабатывали 0,2 М раствором солянокислого цистеина (Е. В. Чернохвостова), что давало возможность ориентировочно относить антитела к тому или иному типу иммуноглобулинов (цистеинустойчивые к 75-антителам и цистеинчувствительные к ЮБ-антителам). Результаты исследований подвергли статистической обработке. Вычисляли средние геометрические титров (в десятичном логарифме) и их доверительные интервалы.
Одновременно изучали санитарно-гигиенические условия труда. Основную профессиональную вредность вискозного производства — сероуглерод обнаруживали в воздухе прядильных цехов в среднем в концентрациях на уровне предельно допустимых, сероводород— в концентрациях ниже предельно допустимых. Выделение сероуглерода в рабочую зону на уровне ПДК наблюдалось в течение 8 лет, предшествовавших исследованию. До этого загазованность им была в 5—10 раз выше ПДК. В химическом цехе концентрации сероуглерода колебались от 0,7 до 16 мг/м3, в отделении мерсеризации они равнялись 0,7 мг/м3, в отделении турборастворителей — 1,2 мг/м3, отделении смесителей вискозы — 8,9 мг/м3, вискозном погребе — до 12 мг/м3 и отделении аппаратов «ВА» — 16 мг/м3. Содержание сероводорода было намного ниже ПДК.
Воздушная среда прядильного и химического цехов производства синтетического волокна постоянно загрязнялась сложным комплексом химических соединений с различным соотношением ингредиентов. В прядильном цехе преимущественно обнаруживались терефталевая кислота и ацетальде-гид, превышавшие ПДК соответственно в 3 и 2 раза. Средние концентрации диметилтерефталата, этиленгликоля, метанола, окиси углерода и кро-тонового альдегида были значительно ниже допустимых и составляли соответственно 0,02, 0,25, 0,09, 11 и 0,003 мг/м3. В химическом цехе преобладающими факторами вредности являлись днметиловый эфир терефталевой кислоты (ZIMT) и метанол, которые превышали ПДК в течение всего периода исследования в среднем в 9 и 11/8—2 раза. Концентрация этиленгликоля и динила составляла в среднем 2,4 и 3,2 мг/м3 (ПДК 2 и 10 мг/м3). В 85% проб теплоноситель не определялся. Что касается микроклимата, то в прядильном цехе вискозного производства отмечалась повышенная температура и влажность воздуха, а в обоих цехах производства лавсана — повышенное тепловыделение.
Исследованием установлено, что реакция на вакцину (при оценке по суммарному уровню антител) у рабочих контрольной и всех опытных групп.
ч»
Процент сывороток с 7БО и Унантителами у лиц исследуемых групп в зависимости
от срока иммунизации. / — сыворотки с О-антителами; II — сыворотки с У1-антитела-ми.
/—контрольная группа; 2 и 3— прядильный и химический иехн вискозного производства; 4 и5 — прядильный и химический цехи производства синтетического волокна. По оси ординат — логарифмы средней геометрической титров, по оси абсцисс — сроки исследования: а — до вакцинации; б — после первичной однократной вакцинации; в — перед ревакцинацией; г — после ревакцинации.
за исключением рабочих химического цеха вискозного производства (Р>0,05), характеризовалась статистически значимым увеличением (Рг^О.Об) над исходными титров О- и Уьантител через месяц после первичной вакцинации и через месяц после ревакцинации. При этом наблюдалась одновременная активация цистеинустойчивых и цистеинчувствительных антител только в ответ на первичное введение антигена. На последующих этапах иммунизации была активной продукция 75-агглютининов и обнаруживалось снижение выработки антител типа 195. Спедует отметить, что подобные изменения в структуре антител можно было выявить при сравнении не только средних величин титра, но и количества сывороток с 195-и 75-антителами (см. рисунок).
Обращают на себя внимание и другие особенности гетерогенности О-и У1-антител. Даже через месяц после первичного введения брюшнотифозного антигена 19 50-антитела составляли меньшую часть всех О-антител; в дальнейшем их уровень существенно не менялся. В то же время 195 VI-антитела, составлявшие после первичной вакцинации большинство У1-ан-тител, на более поздних этапах иммунизации обнаруживались в более низких титрах.
Кроме общих закономерностей динамики цистеинчувствительных и ци-стеинрезистентных антител, наблюдавшихся у лиц контрольной и опытных групп в процессе иммунизации, у последних выявлялись и некоторые отклонения. Так, в прядильном цехе выскозного производства (2-я группа) и химическом цехе производства волокна лавсан (5-я группа) отмечались относительно более высокие уровни макроглобулинов (195) и отставание прироста титров 75-антител не только после первичной вакцинации, но и после ревакцинации. Особенно отчетливо это сказывалось в отношении У1-антител (Я=^0,05). Следовательно, у рабочих указанных групп вторичный иммунный ответ на введение антигена по характеру специфических иммуноглобулинов в известной мере напоминал первичный ответ. Вместе с тем заметно усиливалось образование мелкодисперсных глобулинов обоих типов у рабочих химического цеха вискозного производства (3-я группа). Более выраженным было повышение \П-антител (Р^0,05) через год после вакцинации (перед ревакцинацией).
Отмеченные отклонения динамики иммуноглобулинов обоих классов зависели от стажа работы обследованных, т. е. интенсивности и длительности действия токсического агента. Так, снижение уровня 75 У1-антител у рабочих-прядильщиков вискозного производства обнаруживалось в основном за счет лиц с большим профессиональным стажем (10—14 лег, 15 лет и более), у рабочих химического цеха производства синтетического волокна, наоборот, за счет малостажированпых лиц (до 2 нед, от 2 до 6 мес). В первом случае замедленный прирост 7 5 УЬантител при одновременном
усилении продукции 19Б У1-антител, вероятно, следует рассматривать как нарастание признаков истощения компенсаторно-приспособительных возможностей организма при длительном контакте с токсическими веществами, во втором — как проявление первичной реакции организма на воздействие. Некоторое усиление синтеза 75-антител у рабочих химического цеха вискозного производства происходило за счет лиц с большим профессиональным стажем (10—14 лет, 15 лет и более).
Таким образом, можно полагать, что различия в характере специфических иммуноглобулинов определялись интенсивностью и длительностью влияния токсических веществ на организмы. Антигенная нагрузка в этих условиях, являющаяся дополнительным раздражителем, оказывала стимулирующее влияние на синтез мелкодисперсных глобулинов у рабочих химического цеха вискозного производства, подвергавшихся неодинаковому воздействию малых концентраций сероуглерода и незначительных концентраций сероводорода. У рабочих-прядильщиков вискозного производства, организм которых постоянно и длительно подвергался воздействию сероуглерода на уровне ПДК (8 лет назад в 5—10 раз выше ПДК) и сероводорода в концентрации 2,2 мг/м3, а также повышенной температуры и влажности, выявлялось угнетение продукции 75-антител. У рабочих химического цеха производства лавсана при действии комплекса токсических веществ с содержанием диметилового эфира терефталевой кислоты и метанола, превышавшим ПДК в 9 и 11/5—2 раза, в сочетании с повышенной температурой наступали изменения в соотношении разных классов иммуноглобулинов уже через несколько месяцев от начала воздействия.
Выводы
1. Действие химических веществ исследуемых производств существенно не отражалось на общей закономерности смены макроглобулиновых антител на 75-антитела.
2. Однако скорость и выраженность замены макроглобулинов антителами типа 7Б зависели от интенсивности и характера воздействия вредных факторов производства.
3. Дифференцированное определение антител в условиях действия на организм профессиональных вредностей позволяет обнаружить иммунологические изменения, не выявляемые обычными серологическими методами.
ЛИТЕРАТУРА. Кочанов М. М. Титр антител в крови как показатель хронического действия химических веществ, встречающихся в промышленности пластических масс. — «Гиг. труда», 1965, № 8, с. 27—31. — Навроцкий В. К. Роль факторов производственной среды в иммунобиологической реактивности организма. — «Вестн. АМН СССР», 1960, № 3, с. 57—69. —Стояновский А. Ф., Рассказова Т.В. Влияние внешних условии на иммунобиологическую реактивность организма. Киев, «Здо-ров'я», 1966, с. 172.—Черно хвостова Е. В. О методике дифференцирования макроглобулиновых (195) и у-г л обул и новых (7Б) антител.—сЛабор. дело», 1965, № 6, с. 323—327. — Ш м у т е р Л. М. Влияние хронического воздействия малых концентраций хлорированных углеводородов на выработку различных классов иммуноглобулинов.— «Гиг. и сан.», 1972, № 2, с. 36—40.
Поступила 31/1 1975 г.