Научная статья на тему 'Метод деконтаминации патологического материала от мышей, заражённых Rhodococcus equi'

Метод деконтаминации патологического материала от мышей, заражённых Rhodococcus equi Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
105
24
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Лискова Елена Афанасьевна, Слинина Клавдия Николаевна

Разработан метод предпосевной обработки патологического материала от мышей, заражённых культурой Rhodococcus equi. При этом установлено, что обработка патологического материала 0,1% раствором средства «Септустин» с экспозицией 3 часа позволяет выделять в посевах считываемое количество родококков, что обеспечивает достоверность проводимых опытов

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Лискова Елена Афанасьевна, Слинина Клавдия Николаевна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

in vivo.The article deals with the method for presowing treatment of pathological material from mice infected with Rhodococcus equi culture using 0,1% solution of “Septustin”, exposition 3 hours. This method makes it possible to allocate rhodococci in readable numbers, meets the modern requirements when working with infectious material, safe and effective at work. Ключевые слова: мыши, R.equi, средство Септустин, патологический материал, питательные среды. Key-words: mice, R.equi, preparation “Septustin”, pathological material, cultural media

Текст научной работы на тему «Метод деконтаминации патологического материала от мышей, заражённых Rhodococcus equi»

держащиеся группами, заражены короновирусом. Процент кошек, реагирующих положительно при серологическом исследовании, составляет: [10]

• 78% на выставках кошек

• 61% породистых кошек

• 26% домашних кошек, содержащихся группами

• около 14% домашних кошек, содержащихся поодиночке

Лечение. Из числа опрошенных частных клиниках города Омска лечение сводится к симптоматическому и не редко с подтверждением лабораторным данных. Лечение зависит от состояния животного: для послабления общего состояния животного делают пункции и удаляют собравшеюся в брюшной (или грудной) полости экссудат. Одновременно применяют мочегонные средства (лазикс, веро-шпирон, и др.) в терапевтических дозах. Для подавления патогенной микрофлоры назначаются антибиотики (амоксициллин, энрофлоксацин, тилозин, ампиокс). Целесообразное применение иммуномодуляторов (фоспре-нил), витамины группы В и С (гамавит, катозал). Для поддержания сердечной мышцы вводят сульфокамфокаин.

На сегодняшний день существует лишь только одна вакцина против короновируса, разработана в США, доступная в странах Европы и редко используется в России. Примуцел FIP принцип действия, котором в том, что она индуцирует иммунитет в первой точке воздействия вируса, то есть ротоглотке, таким образом, препятствуя расселению короновируса по организму. Индуцирует местный (^А), общий гуморальный (кошки начинают

реагировать положительно в серологических тестах) и клеточный иммунитет. Вакцина неэффективна в случаях, когда кошка уже заразилась и у нее начал развиваться инфекционный перитонит. Эффективность вакцины составляет 50-75. [11]

Список литературы

1. Addie D.D., Kennedy L.J., Ryvar R. et al. Feline leucocyte antigen class II polymorphism and susceptibility to feline infectious peritonitis.// Feline Med. Surg.- 2004.-6.-.59-62.

2. Кошачий инфекционный перитонит. ABCD рекомендации по профилактики и лечению. Eddid D., Belak S., Boucraut-Baralon C. и др. J Feline Med Surq 11:. 594-604, 2009

3. Кошачий инфекционный перитонит. Goodson TL, Myp. LE Сборник 31: Е1-Е8, 2009.

4. Рахманина Н.А., Уласов В.И. Клинические признаки инфекционного перитонита кошек. // Ветеринария. - 2005.- 1. - С. 29 -31

5. Чандлер Э. А., К. Дж. Гаскелл, Р. М. Гаскелл Практика ветеринарного врача. Болезни кошек Москва «Аквариум» 2002С.687

6. http ://rostovvet. ru/lethal-infection-of-cats/

7. http ://vet-na-dom.by/articles/item/206

8. http://webmvc.com/show/show.php?art=48&sec=4

9. http://www.veterinarka.ru/for-vet/fip.html

10. http ://zoomip.ru/disease/vg/2374-virusnyy-peritonit-koshek.html

МЕТОД ДЕКОНТАМИНАЦИИ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ОТ МЫШЕЙ,

ЗАРАЖЁННЫХ RHODOCOCCUS EQUI

Лискова Елена Афанасьевна

Кандидат ветеринарных наук, ст. научный сотрудник ФГБНУ «НИВИНЗ России», г.Н.Новгород

Слинина Клавдия Николаевна

Доктор ветеринарных наук, ст. научный сотрудник ФГБНУ «НИВИ НЗ России», г.Н.Новгород

АННОТАЦИЯ

Разработан метод предпосевной обработки патологического материала от мышей, заражённых культурой Rhodococcus equi. При этом установлено, что обработка патологического материала 0,1% раствором средства «Сеп-тустин» с экспозицией 3 часа позволяет выделять в посевах считываемое количество родококков, что обеспечивает достоверность проводимых опытов in vivo. ABSTRACT

The article deals with the method for presowing treatment ofpathological material from mice infected with Rhodococcus equi culture using 0,1% solution of "Septustin", exposition 3 hours. This method makes it possible to allocate rhodococci in readable numbers, meets the modern requirements when working with infectious material, safe and effective at work.

Ключевые слова: мыши, R.equi, средство Септустин, патологический материал, питательные среды.

Key-words: mice, R.equi, preparation "Septustin", pathological material, cultural media

Жёсткая обработка посевного материала уничтожает слабокислотоустойчивые микобактерии, нокар-диоформные актиномицеты (родококки, нокардии) и ко-ринебактерии, которые нередко являются причиной положительных туберкулиновых реакций у сельскохозяйственных животных.

Ранее А.Л. Лазовской с соавторами был предложен способ бактериологического выявления нокардиоформ-ных актиномицетов, включающий предпосевную обработку патологического материала водным раствором препарата «Лесептик» [4, 5, с.19-21]. В связи с прекращением изготовления данного препарата и с недостатками существующих методов предпосевной обработки материала

перед нами встала задача по разработке метода деконта-минации патологического материала от положительно реагирующих на туберкулин сельскохозяйственных животных для выявления нокардиоформных актиномицетов и коринебактерий.

Для разработки метода деконтаминации использовали материал от лабораторных животных (беспородных белых мышей живой массой 18-20 г), заражали однократно внутрибрюшинным введением суспензии 2- суточной культуры R. equi в дозе 0,2 мл, содержащей 30х106 КОЕ. На 8 день опыта проводили эвтаназию мышей в соответствии с методическими рекомендациями «Лабораторная диагностика туберкулеза» [1, с.24].

В ходе опытов отрабатывали метод предпосевной обработки материала от мышей средством «Септустин» в сравнении с традиционным методом А.П.Аликаевой и аналогом для выявления нокардиоформных актиномице-тов - 0,5% раствором Лесептика в экспозиции 3 часа.

Средство «Септустин» (изготовитель ООО «Урал-стинол Био», Россия) [3, с.5] испытывался в форме водных растворов от 0,1% до 0,5% концентрации с экспозициями от 15 до 180 минут.

Внутренние органы мышей заливали в соотношении 1:2 водным раствором средства «Септустин» (экспозиции и концентрации выбирались опытным путём).

По окончании экспозиции деконтаминантов органы мышей подвергали двукратному отмыванию физиологическим раствором с последующим приготовлением из них суспензий для посевов на среду Левенштейна-Йен-сена (по 10 пробирок от каждой мыши). Посевы инкубировали в термостате при температуре + 37 0С.

Оценку антимикробного действия средства «Сеп-тустин» проводили по количеству колоний родококков,

Сравнительная эффективность предпосевной обработки

выросших при посеве суспензии органов на среду Левен-штейна-Йенсена, с учётом концентрации и экспозиции препарата.

На основании данных, полученных in vitro [2, с.65-66], 0,1% раствор средства «Септустин» оказывал бактерицидное действие на условно-патогенную микрофлору при экспозиции 30 минут. При этой концентрации и экспозиции рост родококков не изменялся, поэтому данный вариант обработки является начальным для выделения родококков из патологического материала от мышей.

Результаты исследований по обработке патологического материала от мышей представлены в таблице 1.

Из данных таблицы 1 видно, что в посевах от мышей (обработка раствором средства «Септустин» в концентрации 0,1% с экспозициями 30, 60 и 120 минут) наблюдался сплошной рост родококков. При обработке материала 0,1% раствором средства «Септустин» в экспозиции 180 минут рост родоккоков на среде Левенштейна-Йенсена составил в среднем 65 колоний на одну пробирку.

Таблица 1

Показатели Средство «Септустин» 0,5% -180 м. р-р Ле-септика М-д А.П.Ал икае-вой

0,1% -30 м. 0,1% -60 м. 0,1% -120 м. 0,1% -180 м. 0,25 %-15 м. 0,25 %-30 м. 0,25 %-60 м. 0,25 %- 120 м. 0,25 %- 180 м. 0, 5%-15 м. 0,5% -30 м.

Среднее кол-во колоний на 1 пробирку + + + 65 15 8 5 2 1 1 - 62 -

Рост, сутки 1 1 1 1 1 1 2 2 5 5 - 1 -

Примечание: «+»-сплошной рост, «-»-рост отсутствует

Данное количество колоний является считываемым и аналогичным обработке материала 0,5% раствором Лесептика в экспозиции 3 часа. В посевах от мышей при обработке 0,25% раствором в экспозициях15 и 30 минут были единичные колонии, а при обработке 0,25% раствором в экспозиции от 60 до 180 минут и 0,5% раствором в экспозиции 15 минут наблюдалась задержка роста родококков от 2 до 5 дней, что осложняла проведение опытов in vivo.

Бактерицидное действие на родококки в патологическом материале от мышей оказывал 6% раствор серной кислоты.

Таким образом, оптимальным (соответствующим аналогу - 0,5% раствор Лесептика в экспозиции 3 часа) вариантом обработки материала от мышей является 0,1% концентрация средства «Септустин» в экспозиции 3 часа для выделения родококков; для элиминации родококков -0,5% раствор в экспозиции 30 минут.

Разработан метод предпосевной обработки 0,1% раствором средства «Септустин» с экспозицией 3 часа патологического материала от мышей, заражённых культурой Rhodococcus equi, который позволяет выделять в посевах считываемое количество родококков, что обеспечивает достоверность проводимых опытов in vivo.

Впервые установлены оптимальные параметры предпосевной обработки патологического материала от

мышей средством «Септустин», которые могут применяться для изучения антагонистической активности про-биотических препаратов по отношению к родококкам in vivo и выделения их из патологического материала сельскохозяйственных животных.

Список литературы

1. Лабораторная диагностика туберкулеза: Методические рекомендации. - Омск.- 1988. - 30с.

2. Лискова Е.А., Слинина К.Н. Антимикробная активность Септустина in vitro в отношении микроорганизмов III и IV групп патогенности/ Е.А. Лискова, К.Н. Слинина К.Н. //Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии.-Санкт-Петербург - 2014, №2.- С. 65-66.

3. Наставление по применению препарата «Септустин» для дезинфекции объектов ветнадзора. Уралстинол.- БИО. - 2002. - 28с.

4. Пат. РФ 2321636С1 Способ бактериологического выявления нокардиоформных актиномице-тов/К.Н.Слинина [и др.]; опубл.10.04.2008.

5. Слинина К.Н. Новый способ деконтаминации образцов патологического материала от животных положительно реагирующих на туберкулин / К.Н. Слинина // Ветеринарная практика.- Санкт-Петербург, № 1, 2007. - С. 19-21.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.