CC BY
14УДК: 577.121.2:57.004:612.43:612.617 DOI: 10.37279/2224-6444-2022-12-1-55-60
МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ В ОРГАНАХ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ КРЫС ПРИ ОСТРОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ НА ФОНЕ ИНТЕНСИВНЫХ ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗОК
Чигринский Е. А.1, Конвай В. Д.1, Герунов Т. В.2, Герунова Л. К.2
'Кафедра биохимии, ФГБОУ ВО «Омский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 644099, ул. Ленина 12, Омск, Россия
2Кафедра диагностики, внутренних незаразных болезней, фармакологии, хирургии и акушерства ФГБОУ ВО «Омский государственный аграрный университет им. П.А. Столыпина», 644008, Институтская площадь 1, Омск, Россия
Для корреспонденции: Чигринский Евгений Александрович, кандидат биологических наук, доцент кафедры биохимии ФГБОУ ВО «Омский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, [email protected]
For correspondence: Eugene A. Chigrinski, PhD, Department of Biochemistry, Omsk State Medical University, e-mail: [email protected]
Information about authors:
Chigrinski E. A., http://orcid.org/0000-0002-0844-4090 Konvay V. D., http://orcid.org/0000-0002-9082-3507 Gerunov T. V., http://orcid.org/0000-0002-5594-2666 Gerunova L. K., http://orcid.org/0000-0003-0835-9352
РЕЗЮМЕ
Авторами изучены метаболические нарушения в органах репродуктивной системы крыс при острой алкогольной интоксикации этанолом на фоне интенсивных физических нагрузок. Эксперимент проводили на 64 крысах-самцах с массой тела 200-220 г, которых делили на 6 групп. У крыс моделировали состояние утомления при воздействии интенсивных физических нагрузок, этанола и сочетанном действии указанных факторов. После завершения опыта в сыворотке крови определяли концентрацию молочной и мочевой кислот и общего тестостерона, а в гомогенатах репродуктивных органов - содержание мочевой кислоты и малонового диальдегида, активность супероксиддисмутазы и каталазы. Метаболические нарушения в органах репродуктивной системы экспериментальных животных при сочетанном воздействии интенсивных физических нагрузок и острой алкогольной интоксикации характеризуются накоплением молочной и мочевой кислот, а также малонового диальдегида на фоне снижения эффективности антиоксидантной системы, о чем свидетельствует угнетение супероксиддисмутазы и каталазы, которые являются первым звеном антиоксидантной защиты. Данные биохимические сдвиги указывают на развитие острого нарушения метаболизма пуринов и окислительного стресса в органах репродуктивной системы, что ведет к снижению уровня общего тестостерона в сыворотке крови.
Ключевые слова: интенсивные физические нагрузки, алкогольная интоксикация, репродуктивная система, окислительный стресс, крысы.
METABOLIC DISORDERS IN THE ORGANS OF THE REPRODUCTIVE SYSTEM IN RATS DURING ACUTE ALCOHOL INTOXICATION UNDER EXCESSIVE EXERCISE
Chigrinski E. A.1, Konvay V. D.1, Gerunov T. V.2, Gerunova L. K.2
'Omsk State Medical University, Omsk, Russia 2Omsk State Agricultural University, Omsk, Russia
SUMMARY
The authors studied metabolic disorders induced with ethanol in the organs of the reproductive system of rats during acute alcohol intoxication under intense physical stress. The experiment was carried out on 64 male rats weighing 200-220 g, which were divided into 6 groups. On completion of the experiment, the concentration of lactic and uric acids and total testosterone as well was determined in the blood serum, whereas in homogenates of the reproductive organs there were evaluated the content of both uric acid and malondialdehyde, as well as the activity of superoxide dismutase and catalase. Metabolic disorders in the reproductive organs of experimental animals which have been exposed to the combined effect of intense physical exertion and acute alcohol intoxication are characterized by the accumulation of lactic and uric acids, as well as malondialdehyde with decline in the efficiency of the antioxidant system. Those biochemical shifts indicate the development of oxidative stress in the organs of the reproductive system, which leads to a decrease in testosterone production.
Keywords: excessive exercise, alcohol intoxication, reproductive system, oxidative stress, rats
Многочисленные исследования доказывают, что физические нагрузки высокой интенсивности способны оказывать влияние на функцию половых желез [1 - 5]. Однако крайне мало исследований, направленных на выявление особенностей сочетанного действия на организм человека интенсивных физических нагрузок (ИФН) и других факторов. Одним из таких факторов может быть острая алкогольная интоксикация (ОАИ), так как злоупотреблению спиртными напитками нередко предшествуют ИФН. В связи с этим актуальным является изучение биохимических процессов, происходящих в организме и органах репродуктивной системы, в частности, при одновременном действии на организм ИФН и ОАИ.
Цель данной работы - установить метаболические нарушения в органах репродуктивной системы крыс при острой алкогольной интоксикации этанолом на фоне интенсивных физических нагрузок.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Эксперимент был проведен на 64 белых крысах-самцах с массой тела 200-220 г. Методом случайной выборки крыс делили на 6 групп: 1-ю группу составили интактные крысы (п=15); 2-ю группу -контрольные животные, которые плавали без груза по усредненному времени (п=15); 3-ю - контрольные крысы, получавшие физраствор вместо этилового спирта (п=15); 4-ю - крысы, подвергнутые ИФН по методу В.В. Корняковой с соавт., 2009 [6], плававшие с грузом 10% от массы тела (п=12); 5-ю - крысы, получавшие этанол (п=10); 6-ю - крысы, подвергнутые ИФН в сочетании с ОАИ (п=12). Введение этанола крысам 5 и 6-й групп осуществлялось внутрижелудочно в дозе 4 г/кг массы тела. При этом необходимо отметить, что крысы 6-й группы получали этиловый спирт после воздействия на них ИФН. Спустя два часа после введения этанола, животных выводили из опыта.
Выведение крыс из эксперимента осуществляли при помощи ингаляционного наркоза со взятием крови из сердца, а внутренние органы прижизненно фиксировали в жидком азоте. В сыворотке крови определяли концентрацию молочной и мочевой кислот унифицированными методами исследования, а также концентрацию общего тестостерона иммуноферментным методом анализа. В гомогенатах семенников, эпи-дидимиса и простаты определяли содержание мочевой кислоты и малонового диальдегида [7], а также активность ферментов антиоксидант-ной системы: супероксиддисмутазы (СОД; КФ 1.15.1.1) [8] и каталазы (КАТ; КФ 1.11.1.6) [9].
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием непараметри-
ческих критериев H-Краскела-Уоллиса и U-кри-терия Манна-Уитни. Результаты представлены как Ме - медиана, Q1 - нижний квартиль, Q3 -верхний квартиль. С учетом поправки Бонфер-рони при парных сравнениях различия считали статистически значимыми при р<0,0125.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Анализируя данные, полученные в ходе эксперимента, можно отметить, что крысы, подвергнутые ИФН (3-я группа) имели высокий уровень лактата и урата на фоне снижения концентрации тестостерона в сравнении с 1-й группой (табл. 1). В семенниках крыс 3-й группы отмечается статистически значимое увеличение содержания мочевой кислоты и малонового диальде-гида на фоне снижения активности СОД и КАТ (табл. 2). Это может свидетельствовать о нарушении функции семенников, что могло способствовать отмеченному выше снижению уровня тестостерона в крови животных. Похожие изменения биохимических показателей отмечаются и в других репродуктивных органах у животных, подвергнутых ИФН (табл. 3 и табл.4).
Воздействие на организм крыс 4-й группы ОАИ сопровождалось увеличением в крови молочной и мочевой кислот в сравнении со 2-й группой (табл. 1). Кроме того, у крыс, перенесших ОАИ, отмечалось снижение уровня общего тестостерона. В семенниках у животных повышается содержание мочевой кислоты, а уровень малонового диальдегида статистически значимо не отличается от контроля (2-й группы). Аналогичная картина отмечается в простате (табл. 4), а в эпидидимисе, напротив, отмечается статистически значимое увеличение малонового диальдегида, содержание мочевой кислоты статистически значимо не отличается от контроля (2-й группы) (табл. 3). Активность ферментов антиоксидантной системы при этом во всех изучаемых органах превышает контрольные значения (табл. 2, табл.3, табл.4), это может быть связано с индукцией синтеза молекул ферментов через факторы транскрипции, например, анти-оксидант-респонсивный элемент (ARE) [10].
Введение острой дозы этанола крысам, перенесшим ИФН (5-я группа), вызвало более значительное повышение лактата и урата на фоне снижения уровня общего тестостерона в крови по сравнению с введением этой же дозы интакт-ным крысам (4-я группа) (табл. 1). Кроме того, в органах репродуктивной системы у крыс 5-й группы отмечено более интенсивное накопление мочевой кислоты и малонового диальдегида (табл. 2, табл.3, табл.4). Введение крысам 5-й группы этанола не вызывало повышения активности ферментов СОД и КАТ, так как ИФН,
предшествующие этому введению, вызывали истощение резервов антиоксидантной системы в репродуктивных органах, что указывает на интенсификацию окислительного стресса (табл. 2, табл.3, табл.4). Данные статистически значимо отличаются как в сравнении с 4-й, так и с 3-й
группой. Это указывает на то, что сочетанное воздействие двух изучаемых факторов вызывает более выраженные биохимические сдвиги в органах репродуктивной системы, чем действие этанола или физической нагрузки в отдельности.
Таблица 1
Изменение биохимических показателей сыворотки крови у крыс, подвергнутых острой алкогольной интоксикации на фоне интенсивных физических нагрузок, Ме (Q1-Q3)
Группа Показатель
Молочная кислота, ммоль/л Мочевая кислота, мкмоль/л Тестостерон общий, нмоль/л
1-я (п=15) 6,88 (6,23-7,69) 77,2 (61,6-88,2) 16,2 (13,2-19,3)
2-я (п=15) 6,54 (5,68-7,33) 80,4 (67,0-96,1) 17,5 (15,3-20,3)
3-я (п=12) 10,9 (10,2-11,3) р[1]=0,0002 145 (120-160) р[1]=0,0004 9,56 (7,27-12,3) р[1]=0,0092
4-я (п=10) 7,56 (7,12-8,54) р[2]=0,0074 106 (85,0-135) р[2]=0,0071 11,2 (10,2-13,2) р[2]=0,0020
5-я (п=12) 12,8 (11,2-13,6) р[3]=0,0263 р[4]=0,0002 169 (149-187) р[3]=0,0352 р[4]=0,0061 7,63 (6,45-8,77) р[3]=0,0320 р[4]=0,0018
Примечание: (здесь и в табл. 2-4) р[1] - уровень статистической значимости различий с 1-й группой по критерию Манна-Уитни; р[2] - со 2-й группой; р[3] - с 3-й группой; р[4] - с 4-й группой.
Таблица 2
Изменение биохимических показателей семенников у крыс, подвергнутых острой алкогольной интоксикации на фоне интенсивных физических нагрузок, Ме (Q1-Q3)
Группа Показатель
Мочевая кислота, нмоль /мг белка Малоновый диаль-дегид, нмоль /мг белка СОД, Ед. /мг белка КАТ, Ед. /мг белка
1-я (п=15) 148 (120-158) 43,5 (34,2-66,8) 30,2 (28,0-37,0) 84,1 (76,7-92,8)
2-я (п=15) 137 (112-157) 46,0 (34,5-61,2) 28,8 (25,3-32,8) 94,3 (74,9-105)
3-я (п=12) 208 (173-228) р[1]=0,0003 91,3 (81,7-102) р[1]=0,0024 17,1 (14,1-21,6) р[1]=0,0070 52,2 (36,9-61,7) р[1]=0,0038
4-я (п=10) 159 (146-199) р[2]=0,025 83,4 (76,4-98,6) р[2]=0,0250 50,8 (42,6-54,7) р[2]=0,0001 127 (108-143) р[2]=0,0011
5-я (п=12) 245 (226-263) р[3]=0,0071 р[4]=0,0003 123 (105,3-132,5) р[3]=0,0022 р[4]=0,0054 13,2 (10,4-15,0) р[3]=0,0120 р[4]=0,0001 26,0 (18,1-30,3) р[3]=0,0179 р[4]=0,0008
2022, т. 12, № 1
Таблица 4
Изменение биохимических показателей простаты у крыс, подвергнутых острой алкогольной интоксикации на фоне интенсивных физических нагрузок, Ме (Q1-Q3)
Таблица 3
Изменение биохимических показателей эпидидимиса у крыс, подвергнутых острой алкогольной интоксикации на фоне интенсивных физических нагрузок, Ме (Q1-Q3)
Группа Показатель
Мочевая кислота, нмоль /мг белка Малоновый диаль-дегид, нмоль /мг белка СОД, Ед. /мг белка КАТ, Ед. /мг белка
1-я (п=15) 153 (110-165) 31,0 (24,2-63,3) 40,5 (35,1-49,9) 40,3 (35,1-60,1)
2-я (п=15) 145 (114-169) 34,1 (26,4-60,0) 45,3 (30,7-51,2) 42,8 (30,5-62,7)
3-я (п=12) 215 (182-235) р[1]=0,0002 82,5 (73,4-99,2) р[1]=0,0037 20,7 (16,2-30,5) р[1]=0,0095 23,5 (15,6-28,4) р[1]=0,0019
4-я (п=10) 160 (139-185) р[2]=0,0380 73,5 (65,3-83,3) р[2]=0,0090 71,0 (59,2-88,4) р[2]=0,0002 80,4 (59,3-102) р[2]=0,0003
5-я (п=12) 239 (219-270) р[3]=0,0085 р[4]=0,0004 117 (100-129) р[3]=0,0030 р[4]=0,0098 12,5 (11,7-16,0) р[3]=0,0100 р[4]<0,0001 15,7 (9,82-21,0) р[3]=0,0105 р[4]=0,0004
Группа Показатель
Мочевая кислота, нмоль /мг белка Малоновый диаль-дегид, нмоль /мг белка СОД, Ед. /мг белка КАТ, Ед. /мг белка
1-я (п=15) 118 (97,5-131) 28,1 (19,1-36,5) 24,7 (21,1-29,8) 70,1 (65,2-80,7)
2-я (п=15) 122 (105-128) 30,5 (25,4-33,7) 21,5 (19,8-32,3) 78,5 (67,2-95,0)
3-я (п=12) 189 (155-207) р[1]=0,0003 72,2 (61,3-90,8) р[1]=0,0105 14,5 (12,3-17,2) р[1]=0,0107 40,2 (28,1-59,9) р[1]=0,0057
4-я (п=10) 141 (132-178) р[2]=0,0038 66,5 (52,5-78,0) р[2]=0,0160 47,5 (39,5-50,9) р[2]=0,0055 101 (89,2-127) р[2]=0,0008
5-я (п=12) 220 (192-251) р[3]=0,0102 р[4]=0,0008 95,6 (75,7-108) р[3]=0,0006 р[4]=0,0030 10,2 (8,54-10,9) р[3]=0,0113 р[4]=0,0004 20,2 (17,8-25,0) р[3]=0,0090 р[4]=0,0017
ОБСУЖДЕНИЕ
Отмеченные выше биохимические сдвиги при ИФН могут свидетельствовать о развитии в органах репродуктивной системы острого нарушения метаболизма пуринов, описанного ранее в работах [5; 6; 11]. Суть его заключается в за-кислении тканей лактатом. Как известно, молоч-
ная кислота активно поглощается семенниками для окисления и получения энергии в общих путях катаболизма [12]. Острое нарушение метаболизма пуринов характеризуется усиленным катаболизмом пуринов до мочевой кислоты. Этот процесс сопряжен с активной продукцией свободных радикалов, что в итоге снижает эффективность антиоксидантной системы.
Воздействие ОАИ на органы репродуктивной системы также может быть связано с острым нарушением метаболизма пуринов. Запускать этот процесс могут те же факторы, главным из которых является накопление в крови и тканях молочной кислоты. Однако причины накопления лактата будут иные. ОАИ вызывает нарушение функционирования дыхательной цепи митохондрий, что сопровождается ингибированием пи-руватдегидрогеназного комплекса и активацией лактатдегидрогеназы [13; 14]. Это способствует накоплению лактата, а также снижению пула АТФ в клетке. Накопление молочной кислоты и АДФ в результате ОАИ приводит к активации ферментов катаболизма пуриновых мононукле-отидов до урата, образование которого сопряжено с генерацией активированных кислородных метаболитов в ксантиноксидазной реакции, что ведет к повреждению мембранных структур клеток Лейдига и других функциональных клеток репродуктивных органов с накоплением в них малонового диальдегида. Усиленное образование свободных радикалов после введения крысам этилового спирта сопровождается повышением активности ферментов первого звена антиоксидантной системы (СОД и КАТ). Данные биохимические сдвиги способствуют нарушению эндокринной функции семенников.
ОАИ на фоне ИФН привела к более выраженным метаболическим нарушениям. Это связано с более интенсивным протеканием острого нарушения метаболизма пуринов в результате значительного накопления лактата. Нарушение метаболизма пуринов в семенниках крыс 5-й группы сопровождается ростом уровня малонового диальдегида на фоне снижения активности СОД и КАТ, несмотря на то, что введение этанола крысам 4-й группы вызывало резкое повышение активности этих ферментов. Это связано с истощением антиоксидантной системы в результате действия ИФН на организм экспериментальных животных в течение двух недель. Данные изменения свидетельствуют о прогрессировании окислительного стресса, вызывающего нарушение стероидогенеза, что сопровождается падением уровня тестостерона в крови.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Метаболические нарушения в органах репродуктивной системы экспериментальных животных при сочетанном воздействии интенсивных физических нагрузок с острой алкогольной интоксикацией характеризуются накоплением молочной и мочевой кислот, а также малонового диальдегида на фоне снижения эффективности антиоксидантной системы. Данные биохимические сдвиги указывают на развитие окислитель-
ного стресса в органах репродуктивной системы, что ведет к снижению продукции тестостерона.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.
ЛИТЕРАТУРА
1. Aksoy Y., Yapanoglu T., Aksoy H., Demircan B., Ozta§an N., Canakgi E., Malkog I. Effects of endurance training on antioxidant defense mechanisms and lipid peroxidation in testis of rats. Arch Androl. 2006;52(4):319-323. doi:10.1080/01485010500503587.
2. Hackney A. C., Moore A. W., Brownlee K. K. Testosterone and endurance exercise: development of the «exercise-hypogonadal male condition». Acta Physiol Hung. 2005;92(2):121-137. doi:10.1556/ APhysiol.92.2005.2.3.
3. Hackney A. C. Hypogonadism in Exercising Males: Dysfunction or Adaptive-Regulatory Adjustment? Front Endocrinol. (Lausanne). 2020;11:11. doi: 10.3389/ fendo.2020.00011.
4. Lin P. H., Huang K. H., Tian Y. F., Lin C. H., Chao C. M., Tang L. Y. Hsieh K. L., Chang C. P. Exertional heat stroke on fertility, erectile function, and testicular morphology in male rats. Sci Rep. 2021;11(1):3539. doi: 10.1038/s41598-021-83121-3.
5. Conway V. D., Race B. A., Chigrinski E. A. Role of ribose deficit in rat testicular metabolism under conditions of overtraining. Bull Exp Biol Med. 2011;150(5):649-651. doi: 10.1007/s10517-011-1213-3.
6. Корнякова В. В., Конвай В. Д., Рейс Б. А., Дятлова А. Ю. Утомление после чрезмерных физических нагрузок: механизмы развития, коррекция. Теория и практика физической культуры. 2009;3:23-25.
7. Селютина С. Н., Селютин А. Ю., Паль А. И. Модификация определения концентрации ТБК-активных продуктов сыворотки крови. Клиническая лабораторная диагностика. 2000;2:8-10.
8. Сирота Т. В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы. Вопросы медицинской химии. 1999;45(3):263-272.
9. Королюк М. А., Иванова Л. И., Майорова И. Г Метод определения активности каталазы. Лабораторное дело. 1988;1:16-19.
10. Lyakhovich V. V., Vavilin V. A., Zenkov N. K., Menshchikova E. B. Active defense under oxidative stress. The antioxidant responsive element. Biochemistry (Moscow). 2006;71(9):962-974. doi: 10.1134/ S0006297906090033.
11. Kornyakova V. V., Conway V. D., Muratov V. A., Fomina E. V. Ribose in treatment of purine metabolism disorders in athletes. Theory and Practice of Physical Culture. 2015;11:14.
12. Rato L., Alves M. G., Socorro S., Duarte A. I., Cavaco J. E., Oliveira P. F. Metabolic regulation is important
2022, т. 12, № 1
for spermatogenesis. Nat Rev Urol. 2012;9(6):330-338. doi: 10.1038/nrurol.2012.77.
13. Зезеров Е. Г. Биохимические механизмы острого и хронического действия этанола на организм человека. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1998;2:47-55.
14. Nacca N., Hodgman M. J., Lao K., Elkins M., Holland M. G. Can elevated lactate and LDH produce a false positive enzymatic ethanol result in live patients presenting to the emergency department? Clin Toxicol (Phila). 2018;56(3):189-192. doi: 10.1080/15563650.2017.1357825.
REFERENCES
1. Aksoy Y., Yapanoglu T., Aksoy H., Demircan B., Ozta§an N., Canakgi E., Malkog I. Effects of endurance training on antioxidant defense mechanisms and lipid peroxidation in testis of rats. Arch Androl. 2006;52(4):319-323. doi: 10.1080/01485010500503587.
2. Hackney A. C., Moore A. W., Brownlee K. K. Testosterone and endurance exercise: development of the «exercise-hypogonadal male condition». Acta Physiol Hung. 2005;92(2): 121-137. doi:10.1556/ APhysiol.92.2005.2.3.
3. Hackney A. C. Hypogonadism in Exercising Males: Dysfunction or Adaptive-Regulatory Adjustment? Front Endocrinol. (Lausanne). 2020;11:11. doi: 10.3389/ fendo.2020.00011.
4. Lin P. H., Huang K. H., Tian Y. F., Lin C. H., Chao C. M., Tang L. Y. Hsieh K. L., Chang C. P. Exertional heat stroke on fertility, erectile function, and testicular morphology in male rats. Sci Rep. 2021;11(1):3539. doi:10.1038/s41598-021-83121-3.
5. Conway V. D., Race B. A., Chigrinski E.A. Role of ribose deficit in rat testicular metabolism under conditions of overtraining. Bull Exp Biol Med. 2011;150(5):649-651. doi:10.1007/s10517-011-1213-3.
6. Kornyakova V. V., Konvay V. D., Reys B. A., Dyatlova A. Yu. Fatigue after excessive physical loads: mechanisms of development, correction. Theory and Practice of Physical Culture. 2009;3:23-25.
7. Selyutina S. N., Selyutin A.Yu., Pal' A. I. Modifikatsiya opredeleniya kontsentratsii TBK-aktivnykh produktov syvorotki krovi. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika. 2000;2:8-10. (In Russ.).
8. Sirota T.V. A news approach to the investigation of adrenaline autooxidation and its application for determination of superoxide dismutase activity. Voprosy meditsinskoi khimii. 1999;45(3):263-272. () (In Russ).
9. Korolyuk M. A., Ivanova L. I., Maiorova I. G. Metod opredeleniya aktivnosti katalazy. Laboratornoe delo. 1988;1:16-19. (In Russ.).
10. Lyakhovich V. V., Vavilin V. A., Zenkov N. K., Menshchikova E. B. Active defense under oxidative stress. The antioxidant responsive element. Biochemistry (Moscow). 2006;71(9):962-974. doi: 10.1134/ S0006297906090033.
11. Kornyakova V. V., Conway V. D., Muratov V. A., Fomina E. V. Ribose in treatment of purine metabolism disorders in athletes. Theory and Practice of Physical Culture. 2015;11:14.
12. Rato L., Alves M. G., Socorro S., Duarte A.I., Cavaco J. E., Oliveira P. F. Metabolic regulation is important for spermatogenesis. Nat Rev Urol. 2012;9(6):330-338. doi: 10.1038/nrurol.2012.77.
13. Zezerov E. G. Biokhimicheskie mekhanizmy ostrogo i khronicheskogo deistviya etanola na organizm cheloveka. Voprosy biologicheskoi, meditsinskoi i farmatsevticheskoi khimii. 1998;2:47-55. (In Russ).
14. Nacca N., Hodgman M. J., Lao K., Elkins M., Holland M. G. Can elevated lactate and LDH produce a false positive enzymatic ethanol result in live patients presenting to the emergency department? Clin Toxicol (Phila). 2018;56(3):189-192. doi: 10.1080/15563650.2017.1357825.
