CC BY
17
Летуновский А.В. Метаболические изменения в слюне и эритроцитах больных хроническим.
МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В СЛЮНЕ И ЭРИТРОЦИТАХ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПАНКРЕАТИТОМ АЛКОГОЛЬНОЙ ЭТИОЛОГИИ
А.В. Летуновский
Кафедра общей и клинической биохимии № 1 ГОУ ВПО Ростовский ГМУ пер. Нахичеванский, 29, Ростов-на-Дону, Россия, 344022
С целью поиска новых диагностических констелляций с использованием неивазивно получаемых аналитов, в смешанной слюне и эритроцитах 15 пациентов с хроническим панкреатитом алкогольного генеза определены активности каталазы, глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы, содержание восстановленного глутатиона, пировиноградной кислоты и лактата.
Установлено, что данная патология сопровождается накоплением лактата, свидетельствующем о развитии гипоксии, угнетении глутатионредуктазы и глутатионпероксидазы на фоне снижения содержания восстановленного глутатиона.
Ключевые слова: хронический панкреатит, алкоголизм, слюна, эритроциты.
Несмотря на ряд успехов, достигнутых в диагностике и лечении хронического панкреатита (ХП), прогноз при данной патологии остается плохим: в течение 10 лет после постановки диагноза умирает 23,6% пациентов [1]. С 1960 по 1990 гг. отмечен 2-кратный рост заболеваемости, особенно среди лиц трудоспособного возраста [2]. Растет частота карциномы поджелудочной железы, увеличивается число больных панкреатогенным сахарным диабетом. В России болезни этого органа встречаются в 1,5 раза чаще, чем хронические болезни печени. ХП нередко осложняется распространенными инфекционно-септическими процессами, холе-стазом, гастродуоденальными изъязвлениями, малигнизацией [6].
Одной из важных медико-социальных проблем является хроническая алкоголизация и связанные с ней заболевания. Так, статистическими исследованиями показано, что употребление алкоголя в течение 15 лет облигатно приводит к развитию ХП к 36 годам [4]. С учетом широкого распространения злоупотребления алкоголем в нашей стране выбор в качестве объекта исследования пациентов с ХП, развившимся на фоне хронической алкогольной интоксикации, представляется нам вполне обоснованным.
В последние годы все более широкое внимание исследователей привлекает изучение слюны пациентов в качестве клинико-лабораторного аналита [3]. Атрав-матичность его получения, возможность неоднократного забора при отсутствии неудобств для пациента делают поиск информативных диагностических показателей в слюне весьма перспективным.
Целью исследования являлось сравнение выраженности гипоксии и состояния некоторых звеньев ферментативной антиоксидантной защиты в слюне и эритроцитах при ХП алкогольного генеза.
Объектом исследования были 15 мужчин с ХП, которые составили клиническую группу. Средний возраст — 36,1 ± 3,2 лет. Стаж регулярного употребления крепких алкогольных напитков составлял 17,4 ± 2,2 лет. У всех пациентов данной группы был диагностирован алкоголизм III стадии, для которой характерны необратимые изменения во внутренних органах, в том числе в ПЖ [5]. Наличие у пациентов ХП было подтверждено клиническим исследованием. В качестве дополнительного критерия, подтверждающего вовлечение ПЖ в патологический процесс, нами была определена активность а-амилазы в плазме крови. Контрольная группа состояла из 12 практически здоровых мужчин сопоставимого возраста.
Слюну собирали утром, натощак, после чистки зубов и ополаскивания полости рта дистиллированной водой. Забор материала проводили без стимуляции — путем свободного стекания в пробирку в течение 10 минут. Полученную смешанную слюну центрифугировали 15 минут при 3000 об/мин. Для дальнейшей работы использовали надосадочную жидкость. Эритроциты выделяли из гепаринизиро-ванной венозной крови. Активности каталазы, глутатион-пероксидазы (ГП), глу-татион-редуктазы (ГР), содержание лактата, пировиноградной кислоты (ПВК), восстановленного глутатиона (G-SH), гемоглобина и белка в пробах определяли стандартными спектрофотометрическими методами на спектрофотометре СФ-46, «ЛОМО».
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили согласно общепринятым методам с определением средней арифметической, ошибки средней с использованием программы STADIA, версия 3.0. О достоверности отличий между показателями контрольной и клинической групп судили по величине t-кри-терия Стьюдента после проверки распределения на нормальность. Статистически достоверными считали отличия, соответствующие оценке ошибки вероятности Р < 0,05.
Объектом исследования были пациенты с алкоголизмом III стадии, которая характеризуется поражением внутренних органов, в том числе ПЖ, что, помимо клинического исследования, подтвердилось резко повышенной активностью а-амилазы в плазме крови (64,20 ± 5,50, по сравнению с 4,50 ± 0,02 мг/с-л в контрольной группе).
Известно, что в основе развития многих патологических состояний лежит гипоксия. Создавая, с одной стороны, предпосылки для активации свободноради-кального окисления (СРО), она приводит к изменениям в клетке, усугубляющим эффект этого типового патологического процесса. Принимая во внимание эти положения, с целью регистрации развития гипоксии и оценки ее выраженности нами определено содержание лактата и ПВК.
Почти 3-кратное превышение содержания лактата в слюне пациентов с ХП свидетельствует о выраженной гипоксии. При этом концентрация ПВК в этой биологической жидкости имеет некоторую тенденцию к уменьшению, в то время как в эритроцитах зарегистрирован почти полуторократный прирост ПВК (табл. 1).
В настоящее время широко известно, что свободнорадикальным процессам принадлежит одна из ведущих ролей в повреждающем действии многих факторов
Летуновский А.В. Метаболические изменения в слюне и эритроцитах больных хроническим...
на организм. До настоящего времени в доступной нам литературе изменениям со стороны этих процессов при ХП не уделялось достаточного внимания. Учитывая, что обязательным условием начала СРО является образование активных форм кислорода, нами исследовано состояние некоторых ферментативных систем, направленных на их утилизацию.
Таблица 1
Содержание лактата и ПВК в слюне и эритроцитах больных ХП алкогольной этиологии
Показатель/ группа/материал Лактат, ммоль/л ПВК, ммоль/л
Контрольная слюна 1,79 ± 0,14 0,18 ± 0,01
эритроциты 3,84 ± 0,06 0,22 ± 0,02
Больные ХП слюна 5,54 ± 0,45* 0,15 ± 0,02
эритроциты 3,76 ± 0,07 0,31 ± 0,02*
Примечание: * — р < 0,05.
Так, установлено, что в слюне активность ГП в клинической группе оказалась сниженной почти в 2 раза, по сравнению с практически здоровыми лицами. Принимая во внимание данные о несомненном развитии гипоксии при рассматриваемой патологии, активация СРО на фоне угнетения активности ГР, приводящей к падению концентрации G-SH, представляется вполне закономерной. Интересно отметить, что эти изменения однонаправлены в эритроцитах и слюне (табл. 2). В то же время активность каталазы как в эритроцитах, так и в слюне, практически не отличалась от контроля.
Таблица 2
Состояние некоторых антиоксидантных систем в слюне больных ХП алкогольной этиологии
Показатель/группа ГП мкмоль/ /л.с.г белка ГР ммоль/ г 4 белка х 10 Каталаза мкатал/л G-SH моль/г белка (Hb)
Контрольная слюна 106,87 ± 6,66 0,74 ± 0,01 3,01 ± 0,12 х 106 0,23 ± 0,02
эритроциты 2,02 ± 0,06 х 104 1,28 ± 0,07 2,43 ± 0,05 х107 5,82 ± 0,05
больные ХП слюна 56,5 ± 0,97* 0,42 ± 0,09* 2,62 ± 0,35 0,13 ± 0,01*
эритроциты 2,22 ± 0,27 0,97 ± 0,06 3,09 ± 0,06 х 107 3,81 ± 0,19
Примечание: * — р<0,05.
Таким образом, полученные нами данные говорят о том, что ХП алкогольной этиологии характеризуется развитием гипоксического состояния, проявляющегося, в том числе, выраженным ростом содержания лактата в слюне и дисбалансом в работе ферментативной системы антиоксидантной защиты.
ЛИТЕРАТУРА
[1] Валенкевич Л.Н., Яхонтова О.И. Осложнения и исходы хронического панкреатита // Тер. архив. — 1999. — Т. 71. — № 2. — С. 54—57.
[2] Воробьева Е.Г. Основные направления исследования в области изучения патологии поджелудочной железы (по данным литературы) // Гастроэнтерология. — Вып. 23. — Киев, 1991. — С. 35—37.
[3] Микашинович З.И., Летуновский А.В., Белоусова Е.С., Волжин О.О. Биохимические исследования слюны в клинической практике. — Ростов-на-Дону. 2004. — 80 с.
[4] Садоков В.М. Алкогольный панкреатит: Автореф. дисс. ... докт. мед. наук. — М., 1992. — 42 с.
[5] Стрельчук И.В. Острая и хроническая интоксикация алкоголем. 2-е издание. — М.: Медицина, 1973. — 384 с.
[6] Хазанов А.И. Хронический панкреатит. Новое в этиологии, патогенезе, диагностике. Современная классификация // Российский журнал гастроэнтерол., гепатол. и коло-проктол. — 1997. — Т. 7. — № 1 — С. 56—62.
METABOLIC CHANGES IN CHRONIC ALCOHOLIC PANCREATITIS PATIENTS' SALIVA AND ERYTHROCYTES
A.V. Letounovski
Department of general and clinical biochemistry № 1 SEE HPE RostSMU
Nahichevansky str., 29, Rostov-on-Don, Russia, 344022
With the aim of establishing new diagnostic constellations using uninvasive taken analytes, the activities of catalase, glutathioneperoxidase, glutathionereductase, levels of reduced glutathione, pyruvate and lactate were estimated in mixed saliva and erythrocytes of 15 patients with chronic alcoholic pancreatitis. It was established that this pathology accompanied by accumulation of lactate, that testifies hy-poxia. Depression of glutathionereductase, glutathioneperoxidase with corresponding reduced glutathione diminishing, took place also.
Key words: chronic pancreatitis, alcoholism, saliva, erythrocytes.
