CC BY
37
УДК 618.2:[612.111.151.4+612.123:543.87]-074(045)
МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ КОРРЕКЦИЯ МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ ПРИ ЭНДОТОКСИКОЗЕ
О.В. ЛОГИНОВА, С.Б. КЕЛЕЙНИКОВ, Е.А. КАЛЯКИНА,
Т.И. ГРИГОРЬЕВА, А.Г. ЗАХАРКИН, И.В. МЕРКУШКИНА,
О.В. МАЙДОКИНА, Е.А. ТЮРИНА*
Изучению синдрома эндогенной интоксикации, его патогенезу, диагностике и эффективным методам лечения уделяется все большее внимание [6]. Это обусловлено распространенностью эндотоксикоза, включением его в патогенез различных заболеваний, что ведет к нарушениям гомеостаза той или иной интенсивности во всех органах и тканях организма [3, 6]. Известно, что одним из негативных проявлений эндогенной интоксикации являются мембранодестабилизирующие явления [1], при крайней степени выраженности которых (деструкция биомембраны) появляется новый «источник» токсичных субстанций, происходит замыкание порочного круга [2, 4]. С целью коррекции эндотоксикоза предпринимаются различные попытки по предупреждению прогрессирования мембранодеструктивных процессов путем стабилизации липидной матрицы биологической мембраны [2, 5]. С этой целью нами оценено действие антиоксиданта (на примере этоксидола) и низкоинтенсивного лазерного излучения.
Материалы и методы. В основу работы положены экспериментальные исследования на беспородных половозрелых собаках, которым с целью воспроизведения синдрома эндогенной интоксикации моделировали перитонит. В контрольные сроки (1,
3, 5 сутки) производили забор крови, биопсию ткани миокарда. В послеоперационном периоде проводили инфузионную и антибактериальную терапию. В первой группе (контроль) оценивали морфо-функциональное состояние сердца, эритроцитов и тромбоцитов. Во второй (опытной) группе аналогичные исследования выполняли на фоне лечения этоксидолом (10 мг/кг) и лазеротерапии (внутрисосудистое облучение крови гелиево-неоновым лазерным лучом дозой 0,1 Дж/см2).
Результаты. У животных уже в раннем послеоперационном периоде происходит развитие синдрома эндогенной интоксикации с дальнейшим токсическим поражением тканевых структур миокарда и форменных элементов крови (эритроцитов и тромбоцитов). На фоне существенного увеличения содержания гидрофильных и гидрофобных токсинов в плазме крови отмечалось заметное нарушение электрофизиологических параметров сердечной мышцы, что проявлялось патологическими изменениями показателей ЭКГ на протяжении всего периода наблюдения в виде снижения продолжительности интервалов QRS, PQ, QT и RR и достоверного уменьшения вольтажа зубцов R, S, Т и Q при повышении ЧСС на 22,3 % (р<0,05). Изучение функциональной активности эритроцитов и тромбоцитов при эндотоксикозе показало выраженные модификации морфо-фенкционального статуса эритроцитов и тромбоцитов, что зафиксировано в виде уменьшения деформабельности, увеличения жесткости и неспецифической проницаемости мембран эритроцитов, в росте агрегационной активности тромбоцитов. Эти изменения функциональных параметров регистрировались уже с первых суток развития эндотоксикоза. Дисфункция форменных элементов крови, неизбежно отражаясь на микроциркуляции и трофике тканей, является одним из патогенетических механизмов поражения миокарда при синдроме эндогенной интоксикации.
На фоне применения комбинированной терапии (этоксидол + внутрисосудистое лазерное облучение крови) интервалы PQ и QT достоверно превосходили контрольные показатели на 22,4 -39,7 и 11,8 - 33,3 % (р<0,05) соответственно. Показатель ЧСС был ниже контрольного на 11,5 - 16,1% (р<0,05). Вольтаж зубцов
S, Т и Q превышал контроль на 13,4 - 18,9, 7,4 - 75,6 и 11,4 -43,4% (р<0,05) соответственно (рис. 1).
Развитие дисфункции миокарда и форменных элементов крови при эндогенной интоксикации сопровождалось активизацией процессов свободно-радикального окисления, что проявлялось увеличением количества первичных и вторичных продуктов липопереокисления; повышением ферментативной активности фосфолипазы А2, а также депрессией собственной антиоксидант-ной системы исследуемых тканей. Указанные изменения обусловливали существенные дислипидные явления, как в ткани миокарда, так и в форменных элементах крови, которые были
зарегистрированы в виде нарушений липидного состава биомембран кардиомиоцитов, эритроцитов, тромбоцитов и коррелировали с нарушением функциональных показателей.
80
60.
40.
20*
їїШШ
О норма О перитонит О 1-е сутки О 3-и сутки □ 5-е сутки
РО РО ОТ ОТ з.Р з.Р з.Т з.Т ЧСС ЧСС
(к) (о) (к) (о) (к) (о) (к) (о) (к) (о)
Рис. 1. Влияние этоксидола и лазеротерапии на показатели ЭКГ при эндотоксикозе (* - значения показателя, достоверно отличающиеся от контроля р<0,05; к - контрольная группа; о - опытная группа)
Применение этоксидола и лазеротерапии показало высокую эффективность в нормализации липидного обмена и снижения выраженности процессов свободно-радикального окисления. Так, с первых суток терапии содержание малонового диальдегида и активность фосфолипазы А2 в ткани миокарда были ниже данных показателей контрольной группы на 20,4 и 21,8 % (р<0,05) соответственно, активность супероксиддисмутазы возрастала на 15,4 % (р<0,05) относительно контроля. На первые сутки терапии были зарегистрированы следующие изменения липидного спектра: уровни моно-, диацилглицеролов, свободных жирных кислот и лизофосфолипидов мембранных структур кардиомиоцитов были достоверно ниже контроля на 15,2, 34,6, 22,2 и 25,4 % (р<0,05) соответственно, причем количество диацилглицеролов было сопоставимо с первоначальным. Содержание эфиров холе-стерола и суммарных фосфолипидов достоверно возрастало, превышая контроль на 38,8 и 12,2 % (р<0,05). Изучение показателей липидного метаболизма эритроцитов и тромбоцитов на фоне применения комбинированной терапии показало их существенную коррекцию. Так, на фоне лечения было зафиксировано достоверное снижение содержания диеновых конъюгатов относительно контроля на 18,60 - 53,19 % (р<0,05), достигая нормы. Показатели спонтанного и индуцированного малонового диальдегида эритроцитов при использовании терапии были ниже контрольных цифр на 18,16 - 30,66 и 13,11 - 28,44 % (р<0,05) соответственно. Активность фосфолипазы А2 снижалась относительно контроля на 37,46 - 52,94 % (р<0,05). Супероксиддисмутазная активность возрастала на 17,35 - 53,23 % (р<0,05). Исследование липидного состава биомембран эритроцитов на фоне применения этоксидола и лазеротерапии при эндотоксикозе показало увеличение содержания суммарных фосфолипидов относительно контроля на 10,41 - 12,48 % (р<0,05). Показатель триацилглицеролов эритроцитов был достоверно меньше контроля на 22,24 - 22,92 % (р<0,05). Удельный вес свободных жирных кислот и эфиров хо-лестерола снижался относительно контроля на 16,04 - 23,40 и 14,87 - 20,48 % (р<0,05) соответственно. Уровень свободного холестерола превосходил контроль на 13,36 - 14,70 % (р<0,05). Экспериментально установлено, что содержание лизофосфати-дилхолина и фосфатидилсерина эритроцитарных мембран снижалось относительно контроля на 30,20 - 43,97 и 12,65 - 22,92 % (р<0,05) соответственно. Содержание фосфатидилинозита и фос-фатидилэтаноламина эритроцитов на фоне лечения увеличивалось по сравнению с контрольными цифрами на 20,69 - 28,46 и 24,86 % (р<0,05) соответственно. Отметим, что существенные положительные изменения показателей липидного обмена были зарегистрированы и в тромбоцитах (рис. 2).
250 т 200 150 100 50 0
ХЛ (к) ХЛ (о)
□ норма Иперитонит ■ 1-е сутки П3-и сутки П5-е сутки
Мордовский университет им. Н.П. Огарева, кафедра факультетской хирургии 430000 г. Саранск, ул. Большевистская, 68
Рис. 2. Некоторые показатели липидного спектра тромбоцитов на фоне применения этоксидола и лазеротерапии при эндотоксикозе (* - значения показателя, достоверно отличающиеся от контроля р<0,05; к - контрольная группа; о - опытная группа)
Применение антиоксиданта этоксидола и внутрисосудисто-го лазерного облучения крови дает возможность на ранних сроках развития синдрома эндогенной интоксикации вести коррекцию функционально-метаболических нарушений в сердечной мышце. Корреляционный анализ показал, что восстановление функциональной активности миокарда определяется купированием дислипидных явлений в кардиомиоцитах, определяющих дестабилизацию их мембран. Немаловажное значение в проявлении этого положительного эффекта является способность апробированной комбинированной терапии восстанавливать при эндогенной интоксикации функциональную и метаболическую активность эритроцитов и тромбоцитов, что способствует улучшению трофики тканей сердечной мышцы.
Литература
\.Авдеев М.Г., Шубич М.Г. // Клин. лаб. диагностика-2003.- № 6.- С. 3-10.
2Алмазов В.А и др.. // Бюл. эксперим. биол. и медицины-1992.- Т. 114.- № 9.- С. 265-267.
3. Власов А.П. и др. Липидмодифицирующий компонент в патогенетической терапии.- М.: Наука, 2008.- 374 с.
4. Келина Н.Ю. и др. // Вест. интенс. тер.- 2001.- № 3.-С. 51-55.
5. Малахова М.Я. // Эфферентная терапия.- 2000.- Т.6, №4.- С. 3-14.
6. Сернов Л.Н. и др.// Мат-лы XV Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство».- М., 2008.- С. 700.
7. Чаленко В.В., Кутушев Ф.Х. // Вест. хир.- 1990.- № 4.-С. 3-8.
УДК 616.37-002
ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ МЕТАБОЛИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ В ПРОФИЛАКТИКЕ УЛЬЦЕРОГЕНЕЗА
А.П. ВЛАСОВ, Т.В. ТАРАСОВА, Е.В. АРСЕНТЬЕВА, О.И. АВДЕЙКИ-НА, Л.М. МОСИНА, О.Ю. РУБЦОВ
Проблема острого панкреатита в абдоминальной хирургии сохраняет свою актуальность по настоящее время. Общая летальность при остром воспалении поджелудочной железы составляет от 4 до 13%, а послеоперационная летальность - 22,9-45%. Социальная значимость проблемы определяется тем, что около 70% больных составляют люди трудоспособного возраста [3, 4].
Патогенез острого панкреатита нельзя рассматривать только как изолированное поражение поджелудочной железы, тесно не увязав характер местных изменений с общими нарушениями, возникающих в организме [2, 4]. В первую очередь патологические изменения затрагивают органы гепатодуоденальной зоны. К осложнениям деструктивного панкреатита относятся и такие, как поздние острые язвы и эрозии желудочно-кишечного тракта, осложненные кровотечениями, поздние тромбозы сосудов органов брюшной полости и другие. Они резко ухудшают течение заболевания и нередко являются причиной смерти [5, 6].
В настоящее время патофизиологические механизмы повреждения органов желудочно-кишечного тракта при остром панкреатите полностью не раскрыты [2], не определена возможность фармакологической коррекции (профилактики) данных нарушений с учетом механизмов их развития, что и послужило основой для проведения данного исследования.
Материалы и методы. В основу работы положены хронические опыты на беспородных половозрелых собаках, которым моделировали отечную форму острого панкреатита по способу [1]. В первой группе (контрольная) в послеоперационном периоде проводили инфузионную терапию (внутривенные введения 5% раствора глюкозы и 0,89% раствора хлорида натрия из расчета 50 мл/кг массы животного). Во второй (опытная) терапия дополнялась 5% раствором мексидола (10 мг/кг). В контрольные сроки (1-е, 3-и, 5-е сутки) выполняли релапаротомию, оценивали состояние поджелудочной железы и тонкой кишки, производили забор ткани. Для каждого вида повреждений слизистой оболочки тонкой кишки рассчитывали «язвенный индекс» Паулса. Выполнялась биопсия тканей тонкой кишки, выделение липидов. Липи-
* Мордовский университет им. Н.П. Огарева, кафедра факультетской хирургии. 430000 г. Саранск, ул. Большевистская, 68
ды фракционировали методом тонкослойной хроматографии. Количественное определение липидов вели денситометрическим методом. Молекулярный анализ осуществляли на денситометре Model GS-670 (BIO-RAD, США) с программным обеспечением Phosphor Analyst/PS Sowtware. Интенсивность перекисного окисления липидов (ПОЛ) определяли по накоплению малонового диальдегида в реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК). Определяли активность фосфолипазы А2, каталазы.
Результаты. Экспериментальными исследованиями установлено, что через сутки после моделирования острого панкреатита паренхима поджелудочной железы была гиперемирована, отечна, с участками кровоизлияний. На 3 сутки отек паренхимы органа нарастал, выявлялись кровоизлияния под капсулу. Петли тонкой кишки были вздуты, их серозная оболочка синюшнобледного цвета, сосуды расширены. К 5-м суткам патологический процесс в поджелудочной железе начинал снижаться.
У всех животных определялись деструктивные изменения слизистой оболочки тонкой кишки. При этом, несмотря на стихание воспаления в поджелудочной железе к 5-м суткам наблюдения, их выраженность нарастала. Количество кровоизлияний и язв достоверно увеличивалось в 1,7 раза, а эрозий - в 2,0 раза. Аналогично менялся индекс Паулса. Установлено, что в ткани тонкой кишки содержание ТБК-активных продуктов через сутки после моделирования острого панкреатита увеличивалось на 95,8% (p<0,05). На 3 и 5-е сутки - сохранялось повышенным соответственно в 1,7 и 1,2 раза (p<0,05). Активность фосфолипа-зы А2 превосходило норму на 221,6, 262,5 и 160,2% (p<0,05) соответственно этапам наблюдения. Интенсификация ПОЛ и активация фосфолипазы А2 приводили к изменению состава липидов клеточных структур тонкой кишки. Уже на первые сутки исследования содержание в них моноацилглицеролов достоверно повышалось на 45,5%, эфиров холестерола - на 17,4%, диацилгли-церолов - на 63,1%, триацилглицеролов - на 105,3%. Уровень суммарных фосфолипидов снижался на 13,8%, сфингомиелина -на 11,7%, фосфатидилхолина - на 25,7%, фосфатидилсерина - на 23,2%, содержание лизофосфолипидов повышалось на 45,8%, фосфатидилинозита - на 64,9%, фосфатидилэтаноламина - на 61,0%. Через 3-е суток наблюдения выявленные изменения прогрессировали, а через 5 суток отмечено сохранение отклонений как в нейтральных липидах, так и фосфолипидах биомембран.
Таблица 1
Влияние мексидола на характер повреждений слизистой оболочки тонкой кишки при остром панкреатите
Виды повреждений Группа Этапы динамического наблюдения
1-е сутки 3-и сутки 5-е сутки
Количество животных в группе (n),% — пораженные животные
Кровоизлияния I 6 (100%) 6 (100%) 6 (100%)
II 6 (100%) 6 (100%) 5 (83,33%)
Эрозии I 6 (100%) 6 (100%) 6 (100%)
II 5 (83,33%) 4 (66,67%) 2 (33,33%)
Язвы I 6 (100%) 6 (100%) 6 (100%)
II 4 (66,67%) 2 (33,33%) -
Среднее число деструкций на одно животное, М±т
Кровоизлияния I 7,50±0,12 9,50±0,22* 12,50±0,22*
II 7,02+0,09 7,12+0,16 7,21+0,11
Эрозии I 7,17±0,22 8,67±0,21* 14,00±0,32*
II 5,94+0,14 5,12+0,14* 5,01+0,19
Язвы I 4,33±0,21 5,50±0,22* 7,33±0,33*
II 2,64+0,11 1,85+0,09* -
Индекс Паулса
Кровоизлияния I 7,50 9,50 12,50
II 7,02 7,12 7,21
Эрозии I 7,17 8,67 14,00
II 4,95 3,41 1,67
Язвы I 4,33 5,50 7,33
II 1,76 0,62 -
Примечание: * - данные, изменение которых достоверно по отношению к предыдущему этапу наблюдения при р<0,05. Здесь и далее: I - контрольная группа, II - основная группа; жирный шрифт - достоверность разницы между данными контрольной и опытной группы при р<0,05
Следовательно, при остром панкреатите в ткани тонкой кишки возникают изменения состава липидов, обусловленные интенсификацией ПОЛ и активацией фосфолипазы А2. Наиболее существенные отклонения изучаемых показателей регистрировались на 3-и сутки наблюдения. Нарушения в липидном гомеостазе тканевых структур тонкой кишки сопоставимы с патоморфо-
