CC BY
11Проблемы медицинской микологии. 2020, Т.22. №3
Нейтрофилы представляют собой наиболее многочисленные лейкоциты крови и являются «первой линией защиты» от патогенов в очаге воспаления. Будучи «профессиональными» фагоцитами нейтрофилы содержат в своих гранулах огромный антимикробный арсенал, позволяющий им вместе с активными формами кислорода (АФК) уничтожать патогены как внутри фагосомы, так и при дегра-нуляции. Наконец, существует еще третий защитный механизм, который заключается в высвобождении нейтрофильных внеклеточных ловушек или НЕТ (Neutrophil Extracellular Traps), состоящих из модифицированного хроматина, «декорированного» белками гранул, ядра и цитоплазмы. Однако избыточное образование НЕТ или снижение способности их устранения является причиной развития многих аутоиммунных и воспалительных заболеваний.
Материалы и методы. Индукция НЕТ после распознавания патогена специфическими рецепторами ведет к повышению концентрации внутриклеточного Са2+. В связи с этим, применение кальциевого ионофора А23187 можно рассматривать как полуфизиологическую модель образования НЕТ. Известно, что индукция НЕТ различными стимулами зависит от образования АФК NADPH-оксидазой. Однако образование НЕТ, индуцированное кальциевыми ионофорами, может происходить с участием митохондриальных АФК (мтАФК) или без АФК вообще.
Результаты. В нашей работе с помощью оценки окислительного взрыва и флуоресцентного метода идентификации НЕТ, а также с применением специфического митохондриально-направленного антиоксиданта SkQ1 было показано, что мтАФК участвуют в образовании НЕТ и окислительном взрыве, индуцированных А23187. SkQI-чувствительный НЕТоз был также продемонстрирован на А23187-активированных нейтрофилах, выделенных из крови больных хронической грану-лематозной болезнью. Вместе с тем, используя специфические ингибиторы, нами установлено, что АФК, образованные NADPH-оксидазой, также участвуют в А23187-индуцированном НЕТозе. Один из механизмов образования мтАФК, опосредованного повышением концентрации Са2+, может быть связан с открытием митохондриальной поры, mPTP.
Заключение. В работе с использованием специфических ингибиторов было показано участие mPTP в образовании мтАФК, НЕТозе и окислительном взрыве, индуцированных А23187.
МЕХАНИЗМЫ УСТОЙЧИВОСТИ К АЗОЛАМ ШТАММОВ CANDIDA ALBICANS, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ
Воропаев А.Д., Екатеринчев Д.А., Филина Ю.С., Урбан Ю.Н., Несвижский Ю.В., Воропаева Е.А., Лиханская Е.И.
Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского; Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова, Москва, Россия
AZOLE RESISTANCE MECHANISMS IN CANDIDA ALBICANS ISOLATED FROM HIV-INFECTED PATIENTS
Voropaev A.D., Ekaterinchev D.A., Filina Y.S., Urban Y.N., Nesvizhsky Y.V., Voro-paeva E.A., Likhanskaya E.I.
G.N. Gabrichevsky Research Institute for Epidemiology and Microbiology; I.M. Seche-nov First Moscow State Medical University, Moscow, Russia
Грибы рода Candida - распространенные оппортунисты, способные вызывать инфекции различной локализации, а также угрожающие жизни состояния у иммунокомпрометированных лиц, таких как ВИЧ-инфицированные, онкологические больные, пациенты, проходящие ТГСК, и т.д., число которых в последние годы неуклонно растет. Также распространяется устойчивость к противогрибковой терапии. Природно-чувствительные к азолам C. albicans обладают разнообразными механизмами приобретенной устойчивости, включая эффлюксные переносчики и амплификацию мишени.
Цель исследования - оценка распространенности данных механизмов в выборке изолятов, выделенных от ВИЧ-инфицированных пациентов ИКБ №2 (г. Москва).
Материалы и методы. 18 устойчивых к флуконазолу и вориконазолу штаммов C. albicans были выделены от ВИЧ-инфицированных лиц с рецидивирующим орофарингеальным кандидозом, находящихся на лечении в ГБУЗ ИКБ № 2 ДЗМ. Уровни экспрессии генов ERG11, MDR1, CDR1, CDR2, участвующих в формировании приобретенной устойчивости к азолам, измеряли с помощью количественной ПЦР, метода -2AACT с генами ACT и PMA в качестве контрольных генов и референсных значений чувствительных изолятов. Уровни экспрессии выше средних значений чувствительных изолятов более чем на 3 стандартных отклонения считали достоверно повышенными.
Результаты. У большей части изолятов обнаружены повышенные уровни экспрессии генов CDR1 и CDR2 - 89% и 78% соответственно. Уровень экспрессии гена MDR1 был повышен только в 28% случаев. Уровни экспрессии ERG11 были достоверно повышенными в 78% изолятов. У 4 штаммов были значительно повышены уровни экспрессии всех исследуемых генов устойчивости.
Выводы. В данной выборке изолятов C. albicans приобретенная устойчивость в основном связана с эффлюксными переносчиками, кодируемыми генами
CDR1 и CDR2. Также у большинства изолятов выявлен повышенный уровень экспрессии гена белка мишени азолов - ERG11. Уровень экспрессии гена эф-флюксного переносчика MDR1 был повышен в наименьшем числе образцов. Нельзя также исключать вероятную роль других механизмов приобретенной устойчивости, таких как мутации в гене ERG11.
ВОЗБУДИТЕЛИ ГНОЙНО-СЕПТИЧЕСКИХ ИНФЕКЦИЙ, ВЫДЕЛЕННЫЕ ИЗ КРОВИ ПАЦИЕНТОВ ПСИХИАТРИЧЕСКОЙ БОЛЬНИЦЫ
Вотинова А.О.1, Бегалиева Б.Т.1, Пилипенко С.Б.2, Мамонова Е.А.2, Козлова Н.С.1
1Северо-западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; 2Городская психиатрическая больница №3 им. И.И. Скворцова-Степанова, Санкт-Петербург, Россия
CAUSATIVE AGENTS OF HOSPITAL INFECTION, ISOLATED FROM THE BLOOD OF THE PATIENTS IN A PSYCHIATRIC HOSPITAL
Votinova A.O.1, Begalieva B.T.1, Pilipenko S.B.2, Mamonova E.A.2, Kozlova N.S.1
'North-Western State Medical University after I.I. Mechnlkov; Psychiatric Hospital №3, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - анализ видового состава возбудителей, выделенных из крови пациентов психиатрической больницы Санкт-Петербурга.
Материалы и методы. В 2014-2018 гг. в Санкт-Петербурге из крови пациентов психиатрической больницы было выделено 107 штаммов бактерий, идентификацию которых проводили фенотипическими методами.
Результаты и обсуждение. Среди возбудителей гнойно-септических инфекций (ГСИ), выделенных из крови, преобладали грамотрицательные микроорганизмы, составившие более половины выделенных культур (62,6%). Более чем в 1,5 раза ниже был удельный вес грамположительных бактерий (37,4%). Среди грамотрицательных бактерий превалировали энтеробактерии (79,1%), составившие половину от общего количества культур (49,5%), которые были представлены 4 видами с преобладанием Klebsiella pneumoniae (60,4% от числа энтеробактерий и 29,9% от общего количества изолятов). Значительно реже выявляли Escherichia coli (22,6% от числа энтеробактерий) и Proteus mirabilis (15,1%), был обнаружен также 1 штамм энтеробактера. Находки неферментирующих грамотрицательных бактерий (НГОБ) были редкими (12,0%), среди них большую часть составили изоляты Acinetobacter baumanii (75,0% от НГОБ и 9,4% от общего числа бактерий), остальные НГОБ были представлены Pseudomonas aeruginosae (2,6% от общего числа бактерий). Среди грамположительных бактерий основная доля приходилась на стафилококки (90,0% и 33,6% от общего числа изолятов), было выделено также 3 культуры Enterococcus faecium (2,6%) и 1 штамм пневмококка (0,8%). Стафилококки были представлены Staphylococcus epidermidis (19,6% от общего числа штаммов) и Staphylococcus aureus (14,0%),
Выводы. Среди возбудителей ГСИ, выделенных из крови, преобладали грамотрицательные бактерии (62,6%), при этом ведущим возбудителем таких инфекций, как и во многих стационарах Санкт-Петербурга, была K pneumoniae (29,9%). За ней следовали стафилококки, прежде всего Staphylococcus epidermidis (19,6%), а также Staphylococcus aureus (14,0%), при этом совместный удельный вес штаммов этих трех видов составил более половины выделенных культур (63,5%).
МУТАЦИИ УСТОЙЧИВОСТИ К ПЕРХЛОЗОНУ СЕРИЙНЫХ ИЗОЛЯТОВ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Вязовая А.А.1, Ахмедова Г.М.2, Герасимова А.А.1, Масленникова Н.Б.2, Журавлев В.Ю.3, Мокроусов И.В.1
1Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пасте-ра, Санкт-Петербург; противотуберкулезный диспансер Калининградской области, Калининград; 3Научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии, Санкт-Петербург, Россия
PERCHLOZONE RESISTANCE MUTATIONS IN SERIAL ISOLATES OF MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
Vyazovaya A.A.1, Akhmedova G.M.2, Gerasimova A.A.1, Maslennikova N.B.2, Zhuravlev V.Y.3, Mokrousov I.V.1
1Pasteur Research Institute of Epidemiology and Microbiology, St. Petersburg;
2Regional Tuberculosis Dispensary, Kaliningrad; 3 Research Institute of Phthisiopulmo-nology, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - выявление мутаций устойчивости к перхлозону у изолятов Mycobacterium tuberculosis в процессе лечения больных туберкулезом с множественной (МЛУ) и широкой лекарственной устойчивостью (ШЛУ) возбудителя.
Материалы и методы. Исследовали серийные МЛУ (ШЛУ) изоляты M.
