CC BY
132
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ МЕХАНИЗМЫ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ТРАСТУЗУМАБУ 3
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
УДК 618.19-006.6-085.277.3:577.2.088
Е.В. Степанова, К.Р. Зейналова
МЕХАНИЗМЫ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ТРАСТУЗУМАБУ
РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Контактная информация
Зейналова Камала Руфатовна, врач-онколог отделения химиотерапии и комбинированного лечения злокачественных опухолей НИИ клинической онкологии
адрес: 115478, г. Москва, Каширское шоссе, 24; тел. +7(495)324-96-80 e-mail: kamka80@vahoo.com
Статья поступила 19.04.2011., подписана в печать 05.05.2011.
Резюме
Трастузумаб широко используется в клинической онкологии для лечения HER-2+ рака молочной железы в комбинациях с химиотерапией. Однако накапливаются данные, что существует группа больных (15-25 %), имеющих первичную резистентность к трастузумабу. Молекулярно-биологические исследования позволили выявить ряд маркеров, которые могут предсказывать эффективность терапии с трастузумабом. К ним относится фосфорилированный HER-2, EGFR, PTEN, PI3K и другие. В обзоре рассматриваются механизмы возникновения резистентности к трастузумабу, приводятся данные о клинической значимости данных маркеров.
Ключевые слова: рак молочной железы, Трастузумаб, молекулярно-биологические маркеры, резистентность.
E.V. Stepanova, K.R. Zeinalova
MECHANISMS OF TRASTUZUMAB RESISTANCE
N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center of RAMS, Moscow
Abstract
Trastuzumab is widely used drug for the treatment of HER-2/neu+ breast cancer in combination with chemotherapy. However, there is an evidence that some of patients (15-25 %) have primary Trastuzumab resistance. Molecular biological studies have revealed a number of markers that can predict the Trastuzumab efficacy. These include phos-phorylated HER-2, EGFR, PTEN, PI3K and others. This review discusses the possible mechanisms of resistance to Trastuzumab. Here, we also discuss the data on the clinical significance of these markers.
Key words: breast cancer, Trastuzumab, molecular biomarkers, resistance.
Введение
Рак молочной железы - одна из наиболее часто встречаемых опухолей у женщин. Примерно у 25 % женщин, имеющих РМЖ, при морфологическом исследовании определяется экспрессия/амплификация НЕЫ-2 (егЬВ2) [42]. Такие опухоли характеризуются агрессивным биологическим течением, ассоциированным с высоким риском прогрессирования после проведенного лечения, укорочением безрецидивной и общей выживаемости больных [51]. Создание препарата Трастузумаб (Герцептин), гуманизированного моноклонального антитела против НЕЫ-2 рецептора, позволило разработать высокоэффективные режимы лечения таких опухолей. Трастузумаб является высокоэффективным препаратом в комбинации с традиционной противоопухолевой терапией как при лечении метастатической болезни, так и в адъювантных или неоадъювантных режимах [17; 21; 24]. К сожалению, высокие результаты лечения достигаются не для всех больных НЕЫ-2+ РМЖ. Эффективность монотерапии Трастузумабом в 1-й и последующих линиях терапии метастатического НЕЫ-2+ РМЖ составляет от 12 до 34 % с медианой продолжительности эффекта примерно 9 мес. То есть, в 66-88 % случаев имеет ме-
сто первичная резистентность к Трастузумабу [2; 10; 59]. Адъювантная терапия с включением Трастузумаба улучшает безрецидивную и общую выживаемость больных ранними формами HER-2+ РМЖ [45; 47]. Тем не менее, у 15 % из них развиваются отдаленные метастазы. ДаЖе у женщин, эффективно леченных Трасту-зумабом в течение долгого времени, может развиться приобретенная резистентность к препарату. Отсутствие гиперэкспрессии/амплификации HER-2 в опухоли помогает выделить группу больных, которые с высокой вероятностью не ответят на терапию Трастузумабом. Актуальна разработка методов предсказания эффек+-тивности терапии Трастузумабом больных HER-2+ РМЖ. Понимание молекулярных механизмов противоопухолевой активности Трастузумаба, которые могут быть вовлечены в первичную или приобретенную резистентность, и поиск путей ее преодоления важно для дальнейшего улучшения выживаемости больных РМЖ с гиперэкспрессией HER-2. Механизмы действия Трастузумаба многочисленны и до конца не изучены. На моделях in vivo и в клинических испытаниях было показано, что Трастузумаб обладает не только цитостатическими, но и цитотоксическими свойствами. По крайней мере, частично эти свойства могут быть связаны с активацией антителозависимой клеточной цитотоксичности [15].
4 ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ МЕХАНИЗМЫ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К ТРАСТУЗУМАБУ
Другим механизмом действия Трастузумаба является блокирование отщепления внеклеточного домена HER-2 (p105) путем ингибирования активности матриксных металлопротеиназ [33]. В опухолях часто имеет место процесс отщепления внеклеточного фрагмента HER-2 металлопротеиназами, что приводит к образованию постоянно активированной формы рецептора, способной к передаче сигнала внутрь клетки без дополнительных стимулов. Трастузумаб при связывании с рецептором также вызывает снижение активности фосфатидилинозитол-3 киназы (PI3K), что приводит к блокированию пролиферации (за счет ареста в фазе G1) опухолевых клеток [28] и повышает их чувствительность к запуску апоптоза [62]. Также показано, что Трастузумаб может снижать ангиогенную активность опухоли путем блокирования синтеза VEGF [26].
В этом обзоре будут рассмотрены только механизмы резистентности, ассоциированные с HER-2-тирозинкиназным сигнальным путем передачи сигнала внутрь клетки. Они могут быть разделены на несколько типов:
■ Блокирование/активация нижележащих белков сигнального пути (потеря PTEN, активация pAkt, потеря активации pHER-2 и другие).
■ Активация альтернативных рецепторов роста (гиперэкспрессия белков семейства эпидермального фактора роста, инсулиноподобного рецептора и других).
■ Блокирование связывания Трастузумаба с рецептором (гиперэкспрессия MUC4).
Предполагается, что белки, участвующие в механизмах формирования резистентности к Трастузумабу, могут рассматриваться как молекулярно-биологические маркеры предикции резистентности к препарату.
Блокирование/акти вация
нижележащих белков сигнального пути
По своей структуре HER-2-рецептор относится к трансмембранным, состоящим из внеклеточного домена (обеспечивает взаимодействие рецептора со специфическим лигандом), трансмембранной части и внутриклеточного домена с тирозинкиназной активностью [22]. Активация HER-2-рецептора приводит к фосфорилированию его внутриклеточного киназного домена, который, в свою очередь, активирует нижележащие сигнальные пути, такие как Sos-Ras-Raf-МАРК и PI3K. Активация PI3K запускает фосфорилирование белка Akt, что приводит к ингибированию апоптоза (через фосфорилирование Bad, члена семейства Bcl-2), дифференцировке и клеточному росту. Вовлечение белков Sos ведет к активации р21га5, участвующего в стимуляции клеточной пролиферации.
Фосфорилированный HER-2 (pHER-2)
Активация HER-2 путем может происходить либо при гетеродимеризации с другими рецепторами семейства после связывания с различными лигандами-агонистами, либо при гомодимеризации в отсутствие каких-либо активных лигандов. В настоящее время определено, что основным сайтом фосфорилирования HER-2 является тирозиновый остаток 1248 [61].
В инвазивном HER-2+ РМЖ только в 12-14 % случаев наблюдается присутствие активированного pHER-2. Экспрессия рHER-2 ассоциируется с высокой степенью злокачественности опухоли, наличием метастазов в регинарных лимфоузлах, снижением безре-цидивной и общей выживаемости больных [9; 13; 14; 54]. Показано, что случаи с гиперэкспрессией HER-2, но без pHER-2, имеют такой же относительно благо-
приятный прогноз, как и случаи с HER-2- РМЖ [54]. Также экспрессия pHER-2 в опухолевых клетках ассоциирована с резистентностью к химиотерапии так-санами [32], но в то же время предсказывает чувствительность к монотерапии Трастузумабом и Трастузу-маб-содержащим режимам лечения [39].
Предполагается, что опухоли с активированным сигнальным путем pHER-2 могут быть более чувствительны к действию анти-HER-2-антитела. Был исследован статус фосфорилирования по аминокислотному остатку 1248 (pHER-2 у 1248) у 62 больных РМЖ, получавших Трастузумаб в монотерапии или комбинации с химиотерапией [20]. Обнаружено, что только 24 % HER-2+ опухолей имели активированный pHER-2 у1248. Ответ опухоли на лечение имел только тенденцию быть выше у pHER-2-положительных больных. Показано значительное удлинение медианы времени до прогрессирования при назначении Трасту-зумаб содержащих режимов (11,7 и 4,5 мес. соответственно у больных, положительных и отрицательных по pHER-2, р=0,001).
PieK/Akt-сигнальный путь
PI3K/Akt-сигнальный путь регулирует важнейшие клеточные функции, такие как пролиферация клеток, их выживаемость, апоптоз, метаболизм, синтез различных протеинов, ангиогенез и инвазия [58]. На рисунке представлена краткая схема активации данного сигнального пути.
Активация PI3K тирозинкиназным рецептором ведет к фосфорилированию фосфатидилинозитола в D3 позиции, что приводит к образованию фосфатиди-линозитол-3,4-бифосфата (PIP2) и фосфатидилинози-тол-3,4,5-трифосфата (PIP3). PIP2 и PIP3 связываются с серин-треониновой киназой Akt, что приводит к ее прикреплению к внутренней чести цитоплазматической мембраны и активации.
При введении Трастузумаба происходит быстрое дефосфорилирование Akt, путем быстрого (в течение 30-минутной инфузии) повышения активности PTEN [36], в дальнейшем инактивация pAkt поддерживается ингибированием активности PI3K [23]. Основными механизмами возникновения резистентности к Трастузумабу, связанными с активацией PI3K/Akt-сигнального пути, являются постоянная активация Akt (pAkt), которая не блокируется Трастузу-мабом, и потеря PTEN.
Известно, что активация Akt белка в опухолевых клетках молочной железы происходит примерно в 40 % случаев за счет гиперэкспрессии или активации HER-2, мутационной активности онкогена Ras или инактивации гена PTEN [11; 52]. Постоянная активация pAkt ассоциирована с возникновением активных мутаций/увеличением числа копий онкогенов, гиперэкспрессией PI3K или рецепторов, активирующих PI3K.
В HER-2+ опухоли молочной железы гиперэкспрессия рAkt ассоциирована с неблагоприятными клинико-морфологическими факторами, в частности отрицательным гормональным статусом и поражением лимфоузлов [63]. Нарушения в HER-2/PI3K/Akt системе сопровождаются развитием резистентности к проводимой химио- и эндокринотерапии, в том числе и Трастузумабу, и сопровождается низкой безреци-дивной и общей выживаемостью [52; 55; 63]. Гиперэкспрессия pAkt рассматривается как неблагоприятный прогностический и предсказательный фактор при HER-2+ РМЖ. Основным антагонистом киназы Akt является белок и липидная фосфатаза PTEN, который нейтрализует P^K-зависимую активацию Akt (см. рис.) [57]. Потеря PTEN ассоциирована с повышением уровня pAkt в опухолевых клетках.
Рис. Краткая схема PI3K/Akt-сигнaльного пути.
Некоторые исследования показывают, что PTEN играет важную роль в регуляции апоптоза и прохождения опухолевых клеток по клеточному циклу [60].
PTEN
Онкосупрессор PTEN (фосфатаза и гомолог тензина) - белок, кодируемый геном PTEN, являясь частью сигнального пути, участвует в регуляции клеточного цикла. Гиперэкспрессия PTEN приводит к аресту клеточного цикла и индукции апоптоза. При мутациях и делециях PTEN белок теряет свою ферментативную активность, что приводит к активации пролиферации и снижению гибели клеток. Потеря PTEN приводит к повышению уровня PIP3, что имитирует стимуляцию ростовыми факторами.
При РМЖ мутации PTEN встречаются примерно в б % случаев, потеря гетерозиготности (деле-ция) PTEN локуса - в 40 % случаев [12], в общей сложности нарушения PTEN наблюдаются в б0 % случаев РМЖ [44]. Наиболее часто потеря функциональной активности PTEN вследствие делеции наблюдается при РМЖ с гиперэкспрессией HER-2 [31].
В отсутствие лечения, в частности Трастузу-мабом, большая часть белка PTEN находится в неактивном состоянии. При терапии Трастузумабом уровень активированного PTEN заметно повышается, что приводит к блокированию активации PIP3, и соответственно, Akt.
Показано, что потеря PTEN HER-2+ опухолевыми клетками сопровождается значительным снижением антипролиферативного эффекта Тра-стузумаба, что не сказывается на клетках, нелечен-ных Трастузумабом [36].
Согласно данным экспериментальных и клинических исследований на чувствительность HER-2+ клеток к монотерапии таксанами статус PTEN влияет совсем незначительно [36].
В случае же комбинированной терапии Тра-стузумабом и таксанами прослежена прямая взаимосвязь между потерей PTEN и устойчивостью опухолевых клеток к лечению. В исследовании J. Nagata et al. [36] с помощью иммуногистохимиче-ского метода определен уровень PTEN и проанализирована его корреляция с клиническим эффектом в двух группах больных метастатическим РМЖ. В
1-й группе 47 больных с HER-2+ опухолью получили комбинированную терапию Трастузумабом и таксанами (Паклитакселом или Доцетакселом). Во
2-й контрольной группе 37 больных без предварительного отбора по HER-2-статусу получили терапию таксанами без Трастузумаба. В 1-й группе об-
щий эффект комбинированной терапии был значительно выше у больных с опухолью с нормальным статусом PTEN, нежели у больных с потерей PTEN (35,7 % против 66,7 %; p < 0,05). Во 2-й группе результаты были равными по эффективности у больных с разным статусом PTEN.
Перспективы использования статуса PTEN, как предсказывающего эффективность лечения больных РМЖ Трастузумабом, являются многообещающими, однако для широкого внедрения его определения в клиническую практику необходимы еще дополнительные исследования.
Активация альтернативных
рецепторов роста
Было показано, что активация многочисленных альтернативных путей ассоциировано с резистентностью к Трастузумабу в предклинических моделях. В настоящее время проводятся клинические исследования для подтверждения данной гипотезы.
Рецепторы семейства EGFR
Хотя Трастузумаб вызывает блокаду только HER-2-активированной передачи сигнала внутрь клетки через P3K-Akt и MAPK-пути, не оказывая влияния на другие рецепторы семейства HER, тем не менее, гомодимерные EGFR/EGFR и гетероди-мерные EGFR/HER-3 комплексы способны активировать эти же пути в случае терапии Трастузума-бом [39]. Так как препарат связывается с внеклеточным доменом HER2, не влияя на процесс диме-ризации рецепторов, препарат не способен вызывать блокаду лиганд-индуцированных EGFR/HER-2 и HER-2/нER-3-гетеродимеров [19].
При РМЖ гиперэкспрессия EGFR встречается в 16-36 % случаев и играет ключевую роль в стимуляции клеточной пролиферации, дифферен-цировке, миграции и выживаемости [25]. Гиперэкспрессия EGFR часто ассоциирована с мутацими и амлификациями гена EGFR, увеличением коэкс-прессии лигандов рецепторов (TGF-альфа, амфире-гулин), гетеродимеризацией и перекрестной связью с HER-2 или другими членами Erb-семейства [8].
Коэкспрессия EGFR и HER-2 наблюдается примерно в 30 % случаев РМЖ и ассоциируется с неблагоприятным прогнозом и резистентностью к эндокринотерапии даже при положительном гормональном статусе [3; 27; 48]. Активация сигнального пути EGFR может снижать эффективность терапии Трастузумабом [50]. Блокада обоих рецепторов при таких опухолях является рациональной стратегией, которая может устранить резистентность к Трастузумабу [56].
Рецептор инсулиноподобного
фактора роста 1 (IGF-1R)
Другим трансмембранным рецептором, стимулирующим пролиферацию опухолевых клеток, является IGF-1R, который широко экспрессируется на опухолевых клетках, резистентных к Трастузу-мабу. В предклинических исследованиях было показано, что антитела против IGF-1R восстанавливают чувствительность опухолевых клеток к Тра-стузумабу [39; 40].
В клинических исследованиях, изучающих факторы, способные предсказать эффективность неоадъювантного режима Трастузумаб+Винорель-бин, у больных операбельным HER-2+ РМЖ показано, что экспрессия IGF-1R на мембране опухолевых клеток ассоциирована с низким ответом на терапию (50 % против 97 %, р=0,001) [18].
р27
Ингибитор циклин-зависимых киназ (Cdk) р27 является нижележащим регулятором многочисленных сходящихся сигнальных путей рецепторов роста, включая EGFR, HER-2 и IGF-1R. Показано, что HER-2+ опухолевые клетки, резистентные к Трастузумабу, имеют низкий уровень р27, его комплекса p26/Cdk2 и соответственно высокую скорость пролиферации [38]. Когда экспрессия р27 в клетках восстанавливалась при фармакологической индукции или трансфекции, чувствительность к Трастузумабу также увеличивалась.
Блокирование связывания
Трастузумаба с рецептором
Одним из возможных механизмом возникновения резистентности к Трастузумабу является блокирование его связывания с HER-2 либо за счет отщепления внеклеточного домена рецептора, содержащего сайт связывания препарата, либо за счет его «маскировки» различными белками на поверхности опухолевых клеток.
р95HER-2
Как было сказано выше, матриксные металлопро-теиазы способны отщепить внеклеточный домен HER-2, что приводит к образованию постоянно активированной укороченной формы рецептора p95HER-2, не имеющего сайта связывания с Трастузумабом. Трастузумаб не способен подавить активность такого рецептора. Экспрессия полноразмерного и укороченного HER-2 рецептора была оценена в 337 образцах первичного РМЖ и 81 образцах метастатических лимфатических узлов с использованием Вестерн-блоттинга [34]. Укороченная форма р95HER-2 обнаружена в 2,1 % случаев при отсутствии HER-2 в опухоли, в 19,5 % - при низкой экспрессии HER-2, в 31,8 % - при средней и в 60 % - при высокой гиперэкспрессии HER-2. Причем частота гиперэкспрессии p95HER-2 была выше у больных HER-2+ рМж, имеющих метастазы в региональные лимфоузлы, по сравнению с теми, у которых метастазы отсутствовали [7; 34]. Хотя данные in vitro показывают, что Трастузумаб может блокировать отщепление внеклеточного домена HER-2 и, соответственно, появление постоянно активного р95HER-2 [33], ретроспективные исследования показали высокую корреляцию между присутствием р95HER-2 и клинической резистентностью к Трастузумабу [49]. В этом исследовании чувствительность к Тра-стузумабу 46 больных метастатическим РМЖ сравнивалась с экспрессией р95HER-2, измеренной иммунофлуо-ресцентным методом. Эффект на терапию Трастузума-бом наблюдался у 1 из 9 (11,1 %) больных с экспрессией р95HER-2 и 19 из 37 (51,4 %) без экспрессии полноценного HER-2 в ткани опухоли. Кроме того Трастузумаб может связываться с внеклеточным доменом рецептора, циркулирующим в крови больных, формируя комплекс. Период полувыведения этого комплекса, как было обнаружено на предклинических моделях и в популяционных фармакокинетических исследованиях, меньше чем свободного Трастузумаба [2; 5]. Во II фазе клинических исследований по оценке эффективности самостоятельного использования Трастузумаба при HER-2+ метастатическом РМЖ показано, что концентрация в плазме крови р95HER-2 выше чем 500 нг/мл ассоциируется с укорочением периода полувыведения Трастузумаба из организма и субтерапевтического падения уровня препарата [2]. Уровень р95HER-2 долгое время рассматривался как потенциальный маркер предсказания ответа на лечение. Но анализ 4 клинических исследований Трасту-зумаба при метастатическом РМЖ показал, что как начальный уровень р95HER-2, так и степень его снижения во время лечения обладает низкой предсказывающей значимостью [29].
Муцин 4 (MUC4)
MUC4 - гетеродимерный мембранный муцин-гликопротеин, кодируемый геном, располагающийся на хромосоме 3q29 [35]. Как показано, MUC4 связываясь с HER-2 рецептором, затрудняет связывание Трастузумаба с ним [37; 46]. Интересен тот факт, что связываясь с MUC4, HER-2 не способен взаимодействовать не только с Трастузумабом, но и с другими членами HER-семейства (EGFR, HER-3). Несмотря на непосредственное блокирование активации HER-2, MUC4 не оказывает влияния на общий уровень экспрессии рецептора [6; 46]. Также MUC4 ингибирует узнавание иммунной системой опухолевых клеток, усиливает опухолевую прогрессию, метастазирование и ингибирует апоптоз [6].
При иммуногистохимических исследованиях было показано, что MUC4 локализуется на люми-нальной поверхности как нормальных, так и опухолевых кровеносных сосудов, экспрессируется в эпителиальных и эндотелиальных клетках [64]. Экспрессия MUC4 наблюдается в различных эпителиальных тканях, в том числе трахее, легких, желудке, кишечнике, шейке матки [1]. Гиперэкспрессия MUC4 наблюдается при многих солидных опухолях: РМЖ, яичников, поджелудочной железы, легкого, шейки матки, простаты, желчного пузыря [30; 41; 53]. В некоторых исследования было показано, что он вовлечен в механизмы прогрессирования и метастазирования опухоли [6]. Так, гиперэкспрессия MUC4 выше в опухолевых клетках метастазов в лимфоузлы, чем в соответствующей первичной ткани РМЖ. При некоторых злокачественных новообразованиях, в том числе и РМЖ гиперэкспрессия MUC4 - это маркер неблагоприятного исхода течения болезни [30; 53].
В исследованиях in vitro показано, что экспрессия MUC4 выше в Трастузумаб-резистентной клеточной линии, чем в Трастузумаб-чувствительных клеточных линиях [37]. Клиническое значение гиперэкспрессии MUC4 для прогнозирования резистентности РМЖ к Трастузумабу требует дальнейшего изучения.
Комплекс CD44/полимер гиалуронана
CD44 - трансмембранный рецептор для гиалу-ронана. Связывание с полимером гаилуронана с CD44 активирует RAS и PI3K сигнальные пути передачи сигнала [4]. В исследованиях in vivo и in vitro было показано, что комплекс CD44/ полимер гиалуронана может затруднять связывание Трастузумаба с HER-2 рецептором за счет мимикрии близлежащего эпитопа [16; 43]. Однако трансляционные исследования у больных, получавших Трастузумаб, не проводились.
Заключение
Таким образом, в последнее время накапливается все больше данных о том, что определение молекулярно-биологических маркеров дает дополнительную информацию о возможной эффективности использования химиотерапии с использованием Трастузумаба у больных РМЖ. Дополнительные исследования позволят выделить значимые молекулярно-биологические маркеры, пригодные к использованию в клинической практике. Также эти исследования позволят разработать новые препараты направленного действия для повышения эффективности лечения РМЖ.
Работа поддержана Советом по грантам Президента Российской Федерации для поддержки молодых российских ученых - докторов наук и государственным контрактом с Федеральным агентством по науке и инновациям № 02.512.12.2009 от 25 июня 2008 г.
Литература
1. Audie J.P, Janin A., Porchet N. et al. Expression of human mucin genes in respiratory, digestive, and reproductive tracts ascertained by in situ hybridization // J Histochem Cytochem. - 1993. - 41. - P. 1479-85.
2. Baselga J, Tripathy D, Mendelsohn J. et al. Phase II study of weekly intravenous recombinant humanized anti-p185HER2 monoclonal antibody in patients with HER2/neu-overexpressing metastatic breast cancer // J Clin Oncol. - 1996. - 14. - P. 737-44.
3. Bhamrah R, Julka P.K., Nair O. et al. Correlations between epidermal growth factor receptor, her-2-neu and estrogen receptor in carcinoma breast-A study from cancer centre in India // J Clin Oncology. - 2008. -26(15S). - P. 22173.
4. Bourguignon L.Y., Zhu H, Zhou B. et al. Hyaluronan promotes CD44v3-2 interaction with Grb2-185(HER2)... // J Biol Chem. - 2001. - 276. - P. 48679-92.
5. Bruno R, Washington C.B, Lu J-F. et al. Population pharmacokinetics of trastuzumab in patients With HER2+ metastatic breast cancer // Cancer Chemother Pharmacol. - 2005. - 56. - P. 361-9.
6. Carraway K.L., Price-Schiavi S.A., Komatsu M. et al. Muc4/sialomucin complex in the mammary gland and breast cancer // J Mammary Gland Biol Neoplasia. - 2001. - 6. - P. 323-37.
7. Christianson T.A., Doherty J.K., Lin Y.J. et al. NH2-terminally truncated HER-2/neu protein: relationship with shedding of the extracellular domain and with prognostic factors in breast cancer // Cancer Res. - 1998. - 58. - P. 5123-9.
8. Ciardiello F, Tortora G. Epidermal growth factor receptor (EGFR) as a target in cancer therapy: understanding the role of receptor expression and other molecular determinants that could influence the response to anti-EGFR drugs // Eur. J. Cancer . - 2003. - 39(10). - P. 1348-54.
9. Cicenas J, Urban P., Kung W. et al. Phosphorylation of tyrosine 1248-ERBB2 measured by chemilumines-cencelinked immunoassay is an independent predictor of poor prognosis in primary breast cancer patients // Eur J Cancer. - 2006. - 42. - P. 636-45.
10. Cobleigh M.A., Vogel C.L., Tripathy D. et al. Multinational study of the efficacy and safety of humanized anti-HER2 monoclonal antibody in women who have HER-2 overex-pressing metastatic breast cancer that has progressed after chemotherapy for metastatic disease // J Clin Oncol. - 1999. - 17. - P. 2639-48.
11. Datta S.R., Brunet A., GreenbergM.E. Cellular survival: a play in three Akts // Genes Dev. - 1999. - 13. -P. 2905-27.
12. Depowski P.L., Rosenthal S.I., Ross, J.S. Loss of expression of the PTEN gene protein product is associated with poor outcome in breast cancer // Mod. Pathol. - 2001. - 14. - P. 672-6.
13. DiGiovanna M.P, Stern D.F, Edgerton S.M. et al. Relationship of epidermal growth factor receptor expression to ErbB-2 signaling activity and prognosis in breast cancer patients // J Clin Oncol. - 2005. - 23. - P. 1152-60.
14. Frogne T, Laenkholm A-V., Lyng M.B. et al. Determination of HER-2 phosphorylation at tyrosine 1221/1222 improves prediction of poor survival for breast cancer patients with hormone receptor-positive tumors // Breast Cancer Res. - 2009. - 11(1). - P. R11.
15. Gennari R, Menard S., Fagnoni F. et al. Pilot study of the mechanism of action of preoperative trastuzumab in patients with primary operable breast tumors overexpressing HER2 // Clin Cancer Res. - 2004. - 10. - P. 5650-5.
16. Ghatak S., Misra S., Toole B.P. Hyaluronan oligosaccharides inhibit anchorage-independent growth of tumor cells by suppressing the phosphoinositide 3-kinase/Akt cell survival pathway // J Biol Chem. - 2002. -277. - P. 38013-20.
17. Gonzalez-Angulo G.N., Hortobagyi F.J., Esteva et.al. Adjuvant therapy with trastuzumab for Her-2/neu-positive breast cancer // Oncologist. - 2006. - 11. - P. 857-67.
18. Harris L.N., You F, Schnitt S.J. et al. Predictors of resistance to preoperative trastuzumab and vinorelbine for HER2-positive early breast cancer // Clin Cancer Res. - 2007. - 13. - P. 1198-207.
19. Holbro T, Beerli R.R., Maurer P. et al. The ErbB2-ErbB3 heterodimer functions as an oncogenic unit: ErbB2 requires ErbB3 to drive breast tumor cell proliferation // Proc Natl Acad Sci USA. - 2003. - 100. - P. 8933-8.
20. Hudelist G, Kostler W.J., Attems J. et al. Her-2/neu-triggered intracellular tyrosine kinase activation: in vivo relevance of ligand-independent activation mechanisms and impact upon the efficacy of trastuzumab-based treatment // Br. J. Cancer. - 2003. - 89. - P. 983-91.
21. Hudis C.A. Trastuzumab-mechanism of action and use in clinical practice. // N. Engl. J. Med. - 2007. -357(1). - P. 39-51.
22. HungM-C, Lau Y-K. Basic Sciense of HER-2/neu: A Review // Seminars in Oncology. - 1999. - 26(4). -Suppl 12. - P. 51-9.
23. Ignatoski K.M., Maehama T, Markwart et al. ERBB-2 overexpression confers PI 3_ kinase-dependent invasion capacity on human mammary epithelial cells // Br. J. Cancer. - 2000. - 82. - P. 666-74
24. Jakisch C. Her-2-positive metastatic breast cancer: optimizing trastuzumab-based therapy. // Oncologist. -2006. - 11. - P. 34-41.
25. Klijn J.G, Berns P.M., Schmitz P.I, Foekens J.A. The clinical significance of epi-dermal growth factor receptor (EGF-R) in human breast cancer: a review on 5232 patients // Endocr. Rev. - 1992. - 13(1). - P. 3-17.
26. Klos K.S, Zhou X, Lee S. et al. Combined trastuzumab and paclitaxel treatment better inhibits ErbB-2-mediated angiogenesis...// Cancer. - 2003. - 98. - P. 1377-85.
27. Kurokawa H, Lenferink A.E, Simpson J.F. et al. Inhibition of HER2/neu (erbB-2) and mitogen-activated protein kinases enhances tamoxifen action against HER2-overexpressing, tamoxifen-resistant breast cancer cells // Cancer Res. - 2000. - 60. - P. 5887-94.
28. Lane H.A., Motoyama A.B., Beuvink I., Hynes N.E. Modulation of p27/Cdk2 complex formation through 4D5-mediated inhibition of HER2 receptor signaling // Ann Oncol. - 2001. - 12. - Suppl. 1. - P.21-2.
29. Lennon S, Barton C, Banken L. et al. Utility of serum HER2 extracellular domain assessment in clinical decision making: pooled analysis of four trials of trastuzumab in metastatic breast cancer // J Clin Oncol. -2009. - 27. - P. 1685-93.
30. Llinares K, Escande F, Aubert S. et al. Diagnostic value of MUC4 immunostaining in distinguishing epithelial mesothelioma and lung adenocarcinoma // Mod Pathol. - 2004. - 17. - P. 150-7.
31. Lu Y, Lin Y.Z, LaPushin R. et al. The PTEN/MMAC1/TEP tumor suppressor gene decreases cell growth and induces apoptosis and anoikis in breast cancer cells // Oncogene. - 1999. - 18. - P. 7034-45.
32. Modi S., DiGiovanna M.P, Lu Z. et al. Phosphorylated/activated HER2 as a marker of clinical resistance to single agent taxane chemotherapy for metastatic breast cancer // Cancer Invest. - 2005. - 23. - P. 483-7.
33. Molina M.A., Codony-Servat J, Albanell J. et al. Trastuzumab (herceptin), a humanized anti-Her2 receptor monoclonal antibody, inhibits basal and activated Her-2 ectodomain cleavage in breast cancer cells // Cancer Res. - 2001. - 61. - P. 4744-9.
34. Molina M.A., Saez R, Ramsey E.E. et al. NH(2)-terminal truncated HER-2 protein but not full-length receptor is associated with... // Clin Cancer Res. - 2002. - 8. - P. 347-53.
35. Moniaux N., Escande F, Porchet N. et al. Structural organization and classification of the human mucin genes // Front Biosci. - 2001. - 6. - P. 1192-206.
36. Nagata Y, Lan K.H., Zhou X. et al. PTEN activation contributes to tumor inhibition by trastuzumab, and loss of PTEN predicts trastuzumab resistance in patients // Cancer Cell. - 2004. - 6. - P. 117-27.
37. Nagy P, Friedlander E., Tanner M. et al. Decreased accessibility and lack of activation of ErbB2 in JIMT-1, a herceptin-resistant, MUC4-expressing breast cancer cell line // Cancer Res. - 2005. - 65. - P. 473-82.
38. Nahta R, Takahashi T., Ueno N.T. et al. P27(kip1) down-regulation is associated with trastuzumab resistance in breast cancer cells // Cancer Res. - 2004. - 64. - P. 3981-6.
39. Nahta R, Yu D, Hung M.C. et al. Mechanisms of disease: Understanding resis-tance to HER2-targeted therapy in human breast cancer // Natl Clin Pract Oncol. - 2006. - 3. - P. 269-80.
40. Nahta R, Yuan L.X., Zhang B. et al. Insulin-like growth factor-I receptor/human epidermal growth factor receptor 2. // Cancer Res. - 2005. - 65. - P. 1118-28.
41. Ogata S., Uehara H., Chen A., Itzkowitz S.H. Mucin gene expression in colonic tissues and cell lines // Cancer Res. - 1992. - 52. - P. 5971-8.
42. Owens M.A., Horten M.C., da Silvaa M.M. et.al. Her2 amplificaiton ratios by immunofluorescence in situ hybridization. // Clin. Breast Cancer. - 2004. - 5. - P. 63-9.
43. Palyi-Krekk Z, Barok M., Isola J. et al. Hyaluronan-induced masking of ErbB2 and CD44-enhanced trastuzu-mab internalization in trastuzumab resistant breast cancer // Eur J Cancer. - 2007. - 43. - P. 2423-33.
44. Parsons R, Simpson L. PTEN and cancer // Methods Mol. Biol. - 2003. - 222. - P. 147-66.
45. Piccart-Gebhart M.J., Procter M., Leyland-Jones B. et al. Trastuzumab after adjuvant chemotherapy in HER2-positive breast cancer // N Engl J Med. - 2005. - 353. - P. 1659-72.
46. Price-Schiavi S.A., Jepson S., Li .P. et al. Rat Muc4 (sialomucin complex) reduces binding of anti-ErbB2 antibodies to... // Int J Cancer. - 2002. - 99. - P. 783-91.
47. Romond E.H., Perez E.A., Bryant J. et al. Trastuzumab plus adjuvant chemotherapy for operable HER2-positive breast cancer // N Engl J Med. - 2005. - 353. - P. 1673-84
48. Sassen A., Rochon J, Wild P. et al. Cytogenetic analysis of HER1/EGFR, HER2, HER3 and HER4 in 278 breast cancer patients // Breast Cancer Res. - 2008. - 10(1). - P. 2-7.
49. Scaltriti M., Rojo F, Ocana A. et al. Expression of p95HER2, a Truncated Form of the HER2 receptor, and response to anti-HER-2 therapies in breast cancer // J Natl Cancer Inst. - 2007. - 99. - P. 628-38.
50. Singer C.F, KostlerW.J., Hudelist G. Predicting the efficacy of trastuzumab-based therapy in breast cancer: Current standards and future strategies // Biochim Biophys Acta. - 2008. - 1786(2). - P. 105-13.
51. Slamon D.J., Clark G.M., Wong S.G. et al. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with
amplification of the HER-2/neu oncogene // Science. - 1987. - 235. - P. 177-82
52. Stal O, Perez-Tenorio G., Akerberg L. et al. Akt kinases in breast cancer and the results of adjuvant therapy
// Breast Cancer Res. - 2003. - 5. - P. 37-44.
53. Tamada S., Shibahara H., Higashi M. et al. MUC4 is a novel prognostic factor of extrahepatic bile duct car-
cinoma // Clin Cancer Res. - 2006. - 12. - P. 4257-564.
54. Thor A.D., Liu S., Edgerton S. et al. Activation (tyrosine phosphorylation) of ErbB-2 (HER-2/neu): A study of incidence and correlation with outcome in breast cancer // J Clin Oncol. - 2000. - 18. - P. 3230-9.
55. Tokunaga E., Kimura Y, Oki E. et al. Akt is frequently activated in HER-2/neu-positive breast cancers and associated with poor prognosis among hormone-treated patients // Int J Cancer. - 2006. - 118. - P. 284-9.
56. Valabrega G., Montemurro F, Aglietta M. Trastuzumab: mechanism of action, resistance and future perspectives in HER2-overexpressing breast cancer // Annals of Oncology. - 2007. - 18. - P. 977-84.
57. Vazquez F, Seller W.R. The PTEN tumor suppressor protein: an antagonist of phosphoinositide 3-kinase signalling // Biochem Biophys Acta. - 2000. - 1470. - P. 21-35.
58. Vivanco I., Sawyers C.L The phosphatidylinositol 3-kinase/AKT pathway in human cancer // Nat Rev Cancer. - 2002. - 2. - P. 489-501.
59. Vogel C.L, Cobleigh M.A., Tripathy D. et al. Efficacy and safety of trastuzumab as a single agent in first-line treatment of HER2-overexpressing metastatic breast cancer // J Clin Oncol. - 2002. - 20. - P. 719-26.
60. Weng L.P, Brown J.L., Eng C. PTEN coordinates G(1) arrest by downregulating cyclin D1 via its protein phosphatase activity. // Hum Mol Genet. - 2001. - 10. - P. 599-604.
61. Wolf-Yadlin A, Kumar N., Zhang Y. et al. Effects of HER2 overexpression on cell signaling networks governing proliferation and migration // Mol. Syst. Biol. - 2006. - 2. - P. 54.
62. Yakes F.M., Chinratanalab W, Ritter C.A. et al. Herceptin-induced inhibition of phosphatidylinositol-3 kinase and Akt Is required for antibody-mediated effects on p27, cyclin D1, and antitumor action // Cancer Res. - 2002. - 62. - P. 4132-41
63. Yanyuan Wu, Mohamed H., Chillar R. et al. Clinical significance of Akt and HER2/neu overexpression in African-American and Latina women with breast cancer // Breast Cancer Research. - 2008. - 10. - P. 3.
64. Zhang J, Theodore G., Yasin M. et al. MUC4 expression at the apical surfaces of endothelial cells: A new contributor to the cell surface properties of blood vessels // Ophthalmol Vis Sci. - 2006. - 47. - Abstr. 5006.
