CC BY
1УДК: 618.14 - 065.873 - 055.2 МЕХАНИЗМ РАЗВИТИЯ ГЕНИТАЛЬНОГО ПРОЛАПСА ПОСЛЕ ГИСТЕРЭКТОМИИ У ЖЕНЩИН УЗБЕКСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ
Шомиров Дилшод Абдухамидович Надырханова Наталья Суратовна Нишанова Фируза Пулатовна
Республиканский специализированный научно-практический медицинский центр
акушерства и гинекологии
Данная статья посвящена актуальным проблемам гинекологии, как генитальный пролапс после гистероэктомии. Обледовано 121 женщин в возрасте от 26 до 64 лет. В ходе исследования этих женщин разделили на 2 группы: основную группу 91 женщин с ГППГЭ, а контрольную группу 30 здоровых женщин без пролапса гениталии. По результатам молекулярно-генетического исследования, провоспалительный цитокин IL-17 играет важную роль в развитии пролапса гениталии у женщин узбекской популяции.
Ключевые слова: пролапс, Узбекская популяция, интерлейкин, ген.
THE MECHANISM OF GENITAL PROLAPSE DEVELOPMENT AFTER HYSTERECTOMY IN UZBEK WOMEN
This article is devoted to topical problems of gynecology, such as genital prolapse after hysterectomy. 121 women aged 26 to 64 were examined. During the study, these women were divided into 2 groups: the main group of 91 women with HPPGE, and the control group of 30 healthy women without genital prolapse. According to the results of a molecular genetic study, the pro-inflammatory cytokine IL-17 plays an important role in the development of genital prolapse in Uzbek women.
Keywords: prolapse, Uzbek population, interleukin, gene.
O'ZBEKAYOLLARIDA GISTEREKTOMIYADANKEYIN QINPROLAPSINING
RIVOJLANISH MEXANIZMI
Ushbu maqola ginekologiyaning dolzarb muammolariga, masalan, histerektomiyadan keyingi genital prolapsaga bag'ishlangan. 26 yoshdan 64 yoshgacha bo 'lgan 121 nafar ayol tekshirildi. Tadqiqot davomida bu ayollar 2 guruhga bo'lingan: HPPGE bilan kasallangan 91 ayolning asosiy guruhi va jinsiy a'zolar prolapsasi bo'lmagan 30 nafar sog'lom ayolning nazorat guruhi. Molekulyar genetik tadqiqot natijalariga ko'ra, o'zbek ayollarida jinsiy a'zolar prolapsasining rivojlanishida yallig'lanishga qarshi IL-17 sitokini muhim rol o 'ynaydi.
Kalit so'zlar: prolaps, O'zbekpopulyatsiyasi, interleykin, gen.
Введение. В гинекологической практике наиболее часто диагностируется патология тазового дна - пролапс гениталий. До сих пор нет единого мнения об этиологии, патогенезе опущения органов малого таза [1,4,10].
Появившиеся в последнее время сообщения о пролапсе гениталий у нерожавших женщин, а также у женщин после кесарева сечения, свидетельствует о конституциональном факторе и генетической предрасположенности в развитии данной патологии. В связи с этим, необходимо оценка факторов риска, а также доклинических признаков генитального пролапса у женщин как детородного, так и перименопаузального возраста. Для данного контингента женщин выбор оптимальной тактики лечения основан на определении патогенетических факторов заболевания.
В научных изданиях имеются ряд работ по исследованию экспрессии генов в тканях тазового дна при пролапсах. Имеются данные о том, что причиной развития пролапса гениталий у женщин молодого возраста в большинстве случаев являются наследственные заболевания соединительной ткани. Достаточно изучена роль гена ERa и ERp, а также их рецепторов в развитии пролапса гениталий [2,4,5,9].
Провоспалительный цитокин интерлейкин-17 (ИЛ-17) является Т-клеточным полипептидом, который секретируется в основном субпопуляцией CD4+ Т-хелперов (ИЛ17-клетками), а также ЕК-клетками, нейтрофилами, макрофагами, дендритными, плазматическими и тучными клетками. ИЛ-17 впервые был описан в 1953 г., а как уникальная Т-хелперная клеточная линия идентифицирован в 2005 г. двумя группами авторов [2,3,4,6].
Основными мишенями ИЛ-17 являются лейкоциты, эпителиальные и эндотелиальные клетки, а также фибробласты, на цитоплазматической мембране которых имеются специфические к нему рецепторы (ИЛ-17Р), включающие также другие рецепторы семейства ИЛ-17 (ИЛ-17А, ИЛ-17В, ИЛ-17С, и др. [3,7,8,11].
В настоящее время ИЛ-17 считают одним из важнейших регуляторов естественного и адаптивного иммунитета в организме, особенно проявляющегося при различных воспалительных заболеваниях и аутоиммунных нозологиях, включающих сахарный диабет, а также онкологические заболевания. Несмотря на многочисленные молекулярно-генетические исследования, гена ИЛ17 в патогенезе генитального пролапса до сих не нашли должного внимания в литературе.
Целью исследования. Изучить роль полиморфного варианта С^ гена ИЛ17 провоспалительного цитокина в патогенезе генитального пролапса.
Методы исследования. Нами обследовано 121 женщин в возрасте от 26 до 64 лет. Среди 121 пациенток основную группу составили - 91 (75,2%) женщин с Г11111 Э, а контрольную - 30 здоровых женщин без ГП (рис 1).
о
20-30лет 31-40лет 41-50 лет 51-60 лет старше 60
лет
Рисунок 1. Возрастные аспекты обследуемых женщин (абс).
Молекулярно-генетическое обследование биоматериалов (ДНК) выполняли на базе ГУ РСНПМЦАГ. Объектом и предметом исследования явились образцы ДНК 121 женщин, ген ИЛ23. Образцы ДНК выделяли из лимфоцитов периферической крови в соответствии с модифицированной методикой. Концентрация и чистота выделенной ДНК оценивались при измерении оптической плотности ДНК-содержащих растворов при длине волны 260 и 280 нм против ТЕ на спектрофотометре NаnoDrop 2000 (США).
Генотипирование полиморфизма гена ИЛ17 проводили на ПЦР амплификаторе в реальном времени Rotor Gene 6000 Модель 65Н0-100 (Австралия), с использованием тест-системы компании «Синтол» Кат. №-NP_555_100_RG (Россия), по инструкции производителя. Статистический анализ результатов проведен с использованием пакета статистических программ «OpenEpi 2009, Version 2.3». Частоту вариантов аллелей и генотипов (^вычисляли по формуле:?=п/2К и f=n/N.
Результаты исследования. Результаты молекулярно-генетических исследований С/G гена ИЛ17 провоспалительного цитокина у обследованных пациенток представлены в таблице 1.
Таблица 1
Частота распределения аллельных вариантов и полиморфизма гена (rs 612242) гена ИЛ-17 у женщин с ГППГЭ и контрольной здоровой группы женщин
N -число обследованных пациентов; *п - число исследованных аллели; * - показатель достоверности по отношению к контрольной группы ( Р<0,05) Результаты молекулярно-генетических исследований гена (rs 612242) C/G гена
№ Группа Частота аллелей Частота распределения генотипов
С G C/C C/G G/G
* n % * *n % n % n % n %
1. Основная группа n=91(182) 91 50* 91 50* 0 91 100* 0 0
2 Контрольная группа n=30 (60) 56 93,3 4 6,6 27 90 2 6,6 1 3.3
ИЛ-17 показали, что функциональный аллель С в основной группе женщин с ГППГЭ выявлялся в 50% случаев (91/182), а в контрольной группе женщин без ГППГЭ встречался - в 93,3% случаев ( 56/60), что в 1,8 раз превышал показателей основной группы (х2=35,5; p<0,0009; OR=0,07; 95%CI 0,02-0,21). Мутантный аллель «G» выявлялся также в 50% случаев в основной группе женщин с ГП (91/182), тогда как в контрольной группе в 6,6% случаев (4/60), что в 11,4 раза было ниже по сравнению с основной группой. (х2=35,53; p<0,0009; 0R=14,0; 95%CI 4,8 -40,2); ( таблица 1).
Нами также проанализированы ассоциации полиморфизма генотипов гена ИЛ17. Так, анализ полиморфизма генотипов (rs612242) C/G гена ИЛ-17 показал, что функциональный генотип С/С гена ИЛ-17 в контрольной группе здоровых женщин выявлялся в 90% случаях ( 27/30), тогда как в основной группе женщин с ГППГЭ в наших случаях не определялся ( х2=110,5; p<0 ; 0R=0; 95%CI 0,0-0,01).
Интересным оказался тот факт, что гетерозиготный вариант C/G гена ИЛ-17 в основной группе определялся у всех женщин с ГППГЭ , что составило 100% (91/182) случаев, тогда как в контрольной группе - у 2 из 30, что составило 6,6% случаев, что 15,2 раза было ниже по сравнению с основной группой. (х2=110,5; p<0; 0R=2086,2; 95%CI 97,3 -44734,03);. Полученные данные имели статистически достоверный характер (Р <0,05).
Статистический анализ показал значимости данного различия в частоте выявляемости гетерозиготного генотипа. Тогда как гомозиготный вариант G/G генотипа ассоциации полиморфизма (rs 612242) C/G гена ИЛ-17 определялся у 1 женщины контрольной группы, что составило 3,3% (1/30), а у женщин основной
группы данный генотип не определялся. (х2= 110,5; р<0; OR=0,11 95%С1 0,00-2,71) (таблица 2).
Таблица 2
Показатели различия в частоте встречаемости аллелей и генотипов полиморфизма ^612242 C/G гена ИЛ-17 в основной и контрольной группах
Аллели и генотипы Основная группа Контрольная группа Статистическое различие
Аллель С 91 56 Х2=35,53; p<0,0009; OR=14,0; 95%CI 4,8 -40,2
Аллель G 91 4
Генотип C/C 0 27 Х2=110,5; p<0 ; OR=0; 95%CI 0,0-0,01
Генотип C/G 91 2 X2=110,5; p<0; 0R=2086,2; 95%CI 97,3 -44734,03
Генотип G/G 0 1 X2=110,5; p<0; 0R=0,11 95%CI 0,002,71
Полученные данные свидетельствует о том, что носительство неблагоприятного аллеля G (ге612242) гена ИЛ-17 может явиться диагностическим маркером риска развития к формированию генитального пролапса после гистерэктомии, повышающей ее риск в 14 раза (OR=14,0).
Результаты молекулярно-генетических анализов было проанализирована в зависимости от сопутствующей патологии женщин с ГП. (рис.2).
Сопоставление полученных результатов с сопутствующей патологией у женщин с ГП показало, что у них наиболее часто диагностировали инфекции мочеполового тракта (хронический пиелонефрит, цистит) - 39,5%, метаболический синдром (ожирение) - 33,3%, анемию - 29,6% и варикозная болезнь н/к - в 22,2% соответственно.
Рисунок 2. Показатель сопутствующей патологии у женщин с ГПП1 Э
На наш взгляд, сопутствующая патология у женщин с ГП играет важную роль в клиническом течения заболеваемости. Дисбаланс в иммунной системе в выработке провоспалительного цитокина обусловлено хроническим воспалительным заболеваниям, обусловленной условно-патогенными микроорганизмами на фоне метаболического синдрома, в частности при ожирения.
Анализ полученных результатов свидетельствует о значимую связи неблагоприятного вариантного аллеля полиморфизма (ге612242) гена ИЛ-17,
способствующий к замене С на G в аминокислотной последовательности, с развитием генитального пролапса на фоне инфекционно-воспалительного процесса урогенитальной системы и метаболического синдрома. Установлено, что высокий риск развития генитального пролапса после гистерэктомии у женщин, и в случае наличия в геноме вариантного аллеля G полиморфизма увеличен в 14 раз (OR=14).
Следует отметить, что гетерозиготный генотип С^ полиморфизма ге 612242 гена ИЛ-17 является генетической детерминантой, являющиеся повышенным фактором риска предрасположенности к развитию Г11111 Э, повышающей ее риск в 2086,2 раз ^=2086,2). (Р <0,05).
Анализ полученных данных свидетельствует о том, что с носительством неблагоприятного аллеля G гена ИЛ-17 риск развития ГППГЭ может наблюдаться у женщин с метаболическим синдромом (ожирение) и заболеванием мочеполовой системы, что требует пристального внимания диспансерного учета в кабинетах женщин в первичном здравоохранения. Также представляет важное значение заболевание сосудистой системы, эндокринопатия, заболевания крови, которые являются провоцирующими факторами, способствующие развитию ГППГЭ.
Таблица 3
Ожидаемая и наблюдаемая частота распределения генотипов по РХВ
полиморфизма (rs612242) гена ИЛ-17 в основной группе женщин с ГП ПГЭ:
Генотипы частота генотипов х2 Р
наблюдаемая ожидаемая
C/C 0 60,6 0.250 0
C/G 100,0 34,5 0.500
G/G 0 4,9 0.250
Всего 100,00 100,00 60,78
Нами проанализирована оценка выявляемости ожидаемой и наблюдаемой частоты генотипов изучаемых полиморфных генов, потенциально ассоциированных с развитием и патогенезом заболеваний в соответствии распределения частот равновесию Харди-Вайнберга (ХВ) (таблица 3).
Как следует из таблицы, показатели частоты распределения генотипов по РХВ полиморфизма rs612242 C/G гена ИЛ-17 в основной группе женщин с ГП показали наблюдаемую частоту выявляемости благоприятных генотипов С/С - в 0 %, наблюдаемые гетерозиготных генотипов С/G - 100% и мутантных гомозиготных генотипов - G/G-0% случаев соответственно, тогда как ожидаемая частота благоприятных генотипов увеличилась - в 60,6% , а гетерозиготные генотипы снизились ь в 2,9 раз и составило-34,5% случаев и ожидаемые гомозиготные мутантные генотипы G/G составили - 4,9% случаев соответственно. Полученные результаты имеют статистически достоверный характер (Р <0,05).
Результаты исследования проанализированы в группе контрольных пациенток без ГППГЭ (таблица 4.). Тогда как в группе контроле, наблюдаемая частота функциональных генотипов С/С регистрировалось в 90%, а ожидаемая - 59,4%, гетерозиготный вариант С/G гена ИЛ-17 наблюдалось - в 6,7% случаев, а ожидаемая - в 35,3% случаев, что в 5,3 раза повышалось по сравнению с показателями с наблюдаемыми генотипами, (Р <0,05).
Таблица 4
Ожидаемая и наблюдаемая частота распределения генотипов по РХВ
полиморфизма rs612242 гена ИЛ-17 в контрольной группе женщин без ГППГЭ:
Генотипы частота генотипов х2 Р
наблюдаемая ожидаемая
C/C 90,0 59,4 0,871 0,19
C/G 6,7 35,3 0,124
G/G 3,3 5,3 0,004
Всего 100,00 100,00 1,69
Тогда как неблагоприятный генотип G/G в наблюдаемой частоты составил -3,3%, а ожидаемая частота составило - 5,3% случаев. Полученные данные имеют важное значение в прогнозирование риска развития акушерских осложнений, в частности генитального пролапса. (таблица 4).
Сравнительный анализ ожидаемой и наблюдаемой частот генотипов данного полиморфизма выявлено статистически значимого отклонения показателей (Р<0.05) во всех исследуемых группах. Данный факт указывает на соответствие наблюдаемой доли генотипов в изучаемых выборках равновесию Харди-Вайнберга.
Таким образом, аллель G и гетеро/гомозиготные генотипы C/G полиморфизма гена ИЛ-17 являются значимыми маркерами повышенного риска развития ГППГЭ у женщин трудоспособного возраста в узбекской популяции. (Р<0.05) (х2=110,5; p<0; OR=2086,2; 95%CI 97,3 -44734,03). Аллель C и функционально благоприятный генотип C/C являются достоверными протективными маркерами в отношении развития патологии (х2=35,53; p<0,0009; OR=0,07; 95%CI 0,02 -0,21; х2=35,53; p<0,0009; OR=14,0; 95%CI 4,8 -40,2).
Анализ полученных результатов свидетельствует о том, что у женщин с носительством аллельного варианта G и гетерозиготного С/ G гена ИЛ-17 имеется риск формирования генитального пролапса на фоне инфекции мочеполового тракта и метаболического синдпрома.
Заключение. Таким образом, результаты опубликованных в литературе и проведенных нами собственных исследований свидетельствуют о том, что провоспалительный цитокин IL-17 играет важную роль в развитии ГП у женщин узбекской популяции. ИЛ-17 - представляет мембранный гликопротеин, являющиеся главным агентом, индуцирует созревание гематопоэтические предшественники. Его рецептор и интерлейкин играют важную роль во многих воспалительных и аутоиммунных заболеваниях, что было нами определено в соматических патологиях предшествующих генитальный пролапс.
ЛИТЕРАТУРА
1. Rusina, E.I. Lower urinary tract dysfunction in women with pelvic organ prolapse: diagnostic problems // Journal of Obstetrics and Women's Diseases. - 2018. - Vol. 67 (4). -P. 4-12 (in Russian).
2. Shkarupa D.D. Combined pelvic floor repair on levels I and II support defects: Posterior intravaginal sling and subfascial colporrhaphy/ D.D. Shkarupa, N.D. Kubin, E.A. Shapovalova, A.O. Zaytseva, A.V. Pisarev // Akusherstvo i Ginekologiya. - 2016. - Vol. 8. -P. 99-105 (in Russian).
3. Shkarupa D.D. Patent 2661042 RU. S1 MPK A61B 17/00, A61B 17/42, A61F 2/02. The method of surgical reconstruction of the pelvic floor / D.D. Shkarupa, N.D. Kubin, E.A. Shapovalova, A.O. Zaytseva. - № 2017119821; request 06.06.17; published 11.07.18. -Bulletin № 20 (in Russian).
4. Su, T.H. Single- incision mesh repair versus traditional native tissue repair for pelvic organ prolapse: results of a cohort study / T.H. Su, H.H. Lau, W.C. Huang, C.H. Hsieh, R.C. Chang, C.H. Su // Int Urogynecol J. - 2014. - Vol. 25(7). - P. 901-908.
5. Thomas V., Shek C., Guzman Rojas R.A. et al. The latency between pelvic floor trauma and presentation for prolapse surgery. Ultrasound Obstet.Gynecol. - 2013;42 (S1):39.
6. Trutnovsky, G. Pelvic floor dysfunction - does menopause duration matter? / G. Trutnovsky, R. Guzman-Rojas, A. Martin, H.P. Dietz // Maturitas. - 2013. - Vol. 76(2). -P.134-138.
7. Utomo, E. Validation of the Pelvic Floor Distress Inventory (PFDI-20) and Pelvic Floor Impact Questionnaire (PFIQ-7) in a Dutch population / E. Utomo, B.F. Blok, A.B. Steensma, I.J. Korfage. // Int Urogynecol J. - 2014. - Vol.25(4). - P.531-44.
8. Vitale, S.G. Transvaginal bilateral sacrospinous fixation after second recurrence of vaginal vault prolapse: efficacy and impact on quality of life and sexuality / S.G. Vitale, A.S. Lagana, M. Noventa // Biomed Res Int. - 2018. - P. 6.
9. Volloyhaug I., Wong V., Shek K.L. et al. Does levator avulsion cause distension of the genital hiatus and perineal body? Int.Urogynecol. J. - 2013;24:1161-65.
10. Wilkins, M. F. Epidemiology of Pelvic Organ Prolapse / M. F. Wilkins, J.M. Wu // Current Obstetrics and Gynecology Reports. - 2016. - Vol. 5(2). - P. 119-123.
11. Wright, J.D. Nationwide trends in the performance of inpatient hysterectomy in the United States / J.D. Wright, T.J. Herzog, J. Tsui // Obstet Gynecol. - 2013. -Vol. 122(2 Pt 1). - P. 233-241.
