CC BY
57
5. Брюхин, Г. В. Особенности формирования ГЗТу потомства самок с хроническим поражением печени при действии иммобилизационного стресса / Г В Бок>Х1ш ГИМ. хайлова // Физиолог, журн. 1998. № 5-6. С. 18-20. ’ ' '
/ и 6.Б“К°В’В// Гист°Физиология Щитовидной железы в постнатальном онтогенезе / о. Л. Ьыков // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1979. Т. ЬХХУХ № 3 С. 80—92. . * ■"
7. Карпищенко, А. И. Медицинские лабораторные технологии и диагностика /А. И. Карпшценко. СПб.: Интермедика, 1999.
8. Саков, Б. А. Моделирование воспалительного процесса в печени / Б. А. Саков
[и др.] // Моделирование, методы изучения и экспериментальная терапия патологических процессов. М, 1967. Ч. 1.
9. Свириденко, Н. Функциональная автономия щитовидной железы / Н. Свишденко //Врач. 2002. № 7. С. 21-23.
10. Семененя, И. А. Функциональное значение щитовидной железы/И. А, Семененя
Успехи физиол. наук. 2004. Т. 35, № 2, С. 41-56. '
а М. Малышева, Е. Н. Пашнина
МАСТОЦИТЫ КАК ОДИН ИЗ ПОКАЗАТЕЛЕЙ МИКРООКРУЖЕНИЯ СЕЛЕЗЁНКИ ПОТОМСТВА САМОК КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ПОРАЖЕНИЕМ ПЕЧЕНИ
Проведено изучение количественного и качественного популяционного состава тучных клеток селезенки потомства самок крыс с экспериментальным В-галактозам иновым поражением печени. Установлено уменьшение числа тучных клеток, увеличение их функциональной активности, о чем свидетельствует увеличение индекса гранулярного насыщения и дегрануляции.
Микроокрулсение селезенки играет важную роль в становлении ее функциональной активности [5-7]. Структурными компонентами внутриселезеночного микроокружения являются волокнистые (коллагеновые, эластические, ретикулярные волокна) и клеточные элементы (гранулоциты, макрофаги, плазмоциты, ретикулоциты, мастоциты). Цель нашего исследования заключалась в изучении количественного и качественного состава мастоцитов как одного из показателей специфического внутриорганного микроокружения селезенки потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением печени различного генеза.
Материалы и методы исследования. Объектом исследования явилось потомство самок крыс с экспериментальным поражением печени в различные сроки постнатального онтогенеза (на 1, 15, 30-й и 45-й дни жизни) согласно общепринятому подразделению возрастных периодов [2], Все экспериментальные животные были разделены на две группы: подопытную (животные от самок с экспериментальным поражением печени) и контрольную (животные от интактных родителей), Модель экспериментального поражения печени создавали путем введения взрослым половозрелым животным гепатотропного яда 0(+) — галактозамина гидрохлорида однократно, внутрибрюшинно, по общепринятой методике согласно данным литературы (Н. П. Сугробова и др., 1992). Эта модель поражения печени соответствует вирусному гепатиту В человека. С помощью морфологических (дистрофия гепатоцитов, гиперплазия клеток Купфера и другие), биохимических
(гшпопротеинемия, гипербиллирубинемия, повышение АЛТ и ACT) и иммунологических (повышение титра печеночных аутоантител) методов верифицировали поражение гепато-билиарной системы. Отпрепарированную селезенку фиксировали в 10 %-м нейтральном формалине и фиксаторе Карнуа, затем заливали в парафин. Мастодиты определяли на гистологических срезах толщиной 6—7 мкм, окрашивали 0,1 %-м раствором толуидино-вого синего, полихромной синькой и по методу Май-Грюнвальда. Определяли среднее количество мастоцитов на единицу площади. Общепризнанная методика Д. П. Линднера и соавторов (1980) использовалась нами при оценке функционального состояния мастоцитов селезенки экспериментальных животных. Клетки оценивались по четырем критериям: методу цитограмм, индексу насыщения гепарином, индексу дегрануляции, относительной частоте слабой, умеренной и сильной дегрануляции.
Результаты исследования и их обсуждение. По количеству гранул в тучной клетке и за ее пределами молено судить о ее функциональной активности [1; 3]. При оценке структурно-функционального состояния мастоцитов в селезенке потомства экспериментальных животных нами установлено, что количество клеток значительно снижено в экспериментальной группе по сравнению с контрольной на всех сроках исследования. Оценка функциональной активности мастоцитов селезенки с различной степенью гранулярного насыщения цитоплазмы показала высокое содержание клеток с высокой и очень высокой степенью гранулярного насыщения (темные и очень темные клетки) у интактных животных, в то время как содержание мастоцитов с низкой степенью гранулярного насыщения (светлые и очень светлые клетки) оказалось сниженным по сравнению с контролем. У животных подопытной группы, наоборот, количество тучных клеток с низкой степенью гранулярного насыщения выше, чем мастоцитов с высокой степенью гранулярного насыщения (табл. 1).
Таблица 1
Содержание в селезенке экспериментальных животных мастоцитов различной степени гранулярного насыщения (М±т)
Группа Степень Количество клеток гранулярного насыщения цитоплазмы
насыщения* 1-е сут. 15-е сут . 30-е сут. 45-е сут.
К 1 40,19*2,13 34,47*2,33 30,01*2,17 28,93*1,56
п=27 2 25,4Ш,03 . 20,80*2,38 27,04*2,71 23,79*1,14
3 20,08±1,43 20,79*1,02 21,17*2,19 23,41±1,19
4 23,23*1,56 20,40*1,509 19,33*1,3 20,95*1,19
СО °ї 1 18,45*0,59** 20,28*1,58** 15,97*1,28** 20,99*1,89**
2 10,30±0,32* 18,40*0,98 14,74*0,97** 15,97*1,28**
3 ' 30,28*2,41** 32,75*2,51** 40,44*2,19** 35,08±1,76**
4 36,09*1,08** 35,86*2,408** 28,43±1,53** 30,28*1,76**
* Степень гранулярного насыщения тучных клеток: 1 — очень темные клетки, 2 — темные клетки, 3 — светлые клетки, 4 — очень светлые клетки.
** Результаты статистически достоверны по сравнению с контролем.
Интенсивность дегрануляции является наиболее важным критерием, отражающим функциональную активность мастоцитов. Нами установлено, что у интактных животных клетки со слабой степенью дегрануляции (неактивные и слабоактивные) преобладают над •тучными клетками с умеренной и сильной степенью дегрануляции (активные). У животных опытной группы, наоборот, преобладают клетки с высокой степенью дегра-нулявди на всех сроках исследования (табл. 2). Вместе с изменением субпопуляционного
состава тучных клеток с различной степенью дегрангуляции меняется и индекс дегрануляции, который у животных опытной группы больше, чем в контроле.
Таблица 2
Содержание в селезенке экспериментальных животных мастоцитов различной степени дегрануляции (№ш)
Группа Степень Количество клеток с различной степенью дегрануляции
дегрануляции* 1-е сут 15-е сут 30-е сут 45-е сут
К 0 18,27*0,97 13,55*0,91 11,30*0,96 10,30*0,32
п=27 1 24,98*1,43 29,66*1,38 28,43*1,53 25,41*1,03
2 20,15*1,81 24,98*1,43 23,59*1,43 28,43*1,53
3 13,55*0,91 19,47*0,91 21,17*2,19 19,33*1,3
0 0 15,97*1,28 12,45*0,48 11,86*0,78 10,07*1,09
п=28 1 24,98*1,43 20,99*1,89 20,28*1,58 23,79*1,14
2 40,01*1,20** 36,56*1,69** 36,09*1,08** 34,47*2,33
3 12,45*0,48 18,40*0,98 20,28*1,58 25,19*1,46**
* Степень дегрануляции тучных клеток: 0 — неактивные клетки, 1— слабая дегрануляция,
2—умеренная дегрануляция, 3 — сильная дегрануляция.
** Результаты статистически достоверны по сравнению с контролем.
Мастоциты — резидентные клетки соединительной ткани [4]. Их основная функция — синтез и накопление в гранулах разнообразных биологически активных веществ, медиаторов, ферментов. Основным компонентом гранул тучных клеток является отрицательно заряженный сульфатированный гликозаминогликан гепарин, синтезируемый и запасаемый исключительно тучными клетками. Гепарин регулирует клеточную пролиферацию, стимулирует как фагоцитоз, так и пиноцитоз, но угнетает действие комплемента, участвует в реакции ГЗТ (М. Früeri, 1984). И. С. Фрейдлин и А, А. Тотолян (2001) считают, что медиатором гиперчувствительности немедленного типа является гистамин, который также выступает компонентом гранул тучных клеток. Он подавляет гуморальный иммунитет, так как угнетает дифференцировку В-лимфоцитов и продукцию иммуноглобулинов. Гистамин снижает продукцию С2- и СЗ-компоненты комплемента через Н2-рецепторы клеток-мишеней, но стимулирует продукцию СЗ-компонента комплемента через Hl-рецепторы соответственно. Кроме того, выработка цитокинов контролируется гистамином: стимулируется секреция ИЛ-6, а угнетается ИЛ-1, ИЛ- , .
При активации тучных клеток (наряду с секрецией содержимого гранул) о разуются метаболиты арахидоновой кислоты — простагландины, тромбоксан ХГА-2и леикотри-ены. Мастоциты имеют высокоаффинные поверхностные рецепторы к с-фрагментам IgE. Связывание Аг (аллергена) с молекулой IgE на поверхности тучных клеток^сопровождается экзоциттом содержимого гранул, образованием мстаболитов арахидо^й кислоты [4]. Активация и дегрануляция тучных клеток опосредована IgE. В результате
дегрануляции мастоциты теряют специфические гранулы.
СиЛбразом, речи«*1“ функциональной аоиЕНоеги »ас-
тоцитов селезенки потомства самок крыс с экспериментальнь р
детельствуют об изменении ““™”1ного микроокружения
состояния, что не может не сказаться на нарушении ту у у
(снижение процессов пролиферации и кл^ж и их функционального
Логично предположить, чтогаюяе внутрИорганного микроокружения,
состояния, являющихся важнейшим компонентом У Г ¥
может обусловить нарушения гемопоэтических процессов в селезенке потомства самок Крыс с Хроническим экспериментальным О-галактозаминовым поражением печени.
Список литературы
1. Автандилов, Г Г. Медицинская морфометрия / Г. Г. Автандилов. М. : Медицина,
1990. 384 с.
2. Западнюк, И. П. Лабораторные животные, их разведение, содержание и использование в эксперименте / И. П. Западнюк [и др.]. Киев : Вища шк., 1983. 383 с.
3. Линднер, Д. II Морфометрический анализ популяции тучных клеток / Д. П. Лин-днер [и др.] // Архив патологии. 1980. № 6. С. 60-64.
4. Улумбеков, Э. Г. Гистология: учебник / Э. Г. Улумбеков; под ред. Э. Г. Улумбекова, Ю, А. Челышева. 2-е изд., перераб. и доп. М : ГЭОТАР—МЕД, 2002. 672 с.
5. Фрейндлин, И. С. Клетки иммунной системы / И. С. Фрейндлин, А. А. Тотолян. СПб.: Наука, 2001. 390 с. (Т. 3, 5,44).
6. Хаитов, Р. М. Иммунология / Р. М. Хаитов, Г. А. Игнатьева, И. Г. Сидорович. М.:
Медицина, 2000.432 с,
7. Ярилин, А. А. Основы иммунологии / А. А. Ярилин. М.: Медицина, 1999.608 с.
О. В. Николина, Д. Р. Жданова, А. А. Федосов, Е. Я. Пашнина
ХАРАКТЕРИСТИКА П АРАФО ЛЛИКУЛЯРНЫХ КЛЕТОК ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПОТОМСТВА САМОК КРЫС С ХРОНИЧЕСКОЙ НАРКОТИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИЕЙ НА РАЗНЫХ СРОКАХ ИССЛЕДОВАНИЯ
Изучено морфофункциональное становление парафолликулярных клеток ('С-клеток) щитовидной железы потомства самок крыс с хронической наркотической интоксикацией. Выявление парафолпикулярных клеток проводилось с помощью иммуногистохимической реакции — стрептовидин-биоттовым методом (с моноклональными антителами к кальцитонту). Установлено, что хроническая наркотическая интоксикация самок крыс приводит к увеличению количества па-рафолликулярных клеток в щитовидной железе потомства.
В настоящее время большое внимание уделяется изучению так называемого специфического микроокружения различных органов человека, в том числе и микроокружения щитовидной железы. Такой интерес обусловлен регулирующим влиянием компонентов микроокружения на дифференцировку, функциональную и пролиферативную активность основных компонентов паренхимы органов, иммунной, эндокринной и других систем [3].
Неотъемлемым компонентом щитовидной железы являются С-клетки, которые наряду с гемокапиллярами, тучными клетками, макрофагами, фибробластами и симпатическими нервными сплетениями входят в состав микроокружения тиреоцитов щитовидной железы [3].
Парафолликулярные клетки (С-клетки) вырабатывают большой спектр биологически активных веществ, среди которых главную роль выполняет кальцитонин [1; 6; 7]. Кальцитонин усиливает функциональную активность тиреоцитов и влияет также на процесс образования тиреоидных гормонов за счет регуляции содержания ионов кальция в цитоплазме тиреоцитов [5; 6].
