CC BY
68
медицинским совет 2015 | № 2
Н.С. БОРЗИКОВА, Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова
МАРКЕРЫ
ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ
ПРИ БОЛЕЗНЯХ ПАРОДОНТА
Показана взаимосвязь маркеров воспалительных процессов, содержащихся в ротовой жидкости больных хроническим генерализованным пародонтитом, и основных клинических проявлений данной патологии. Проведен иммуноферментный анализ для определения ММП-8, ММП-9, ММП-2, ИЛ-1Р, ФНО-а. Получены достоверные данные, указывающие на информативность биохимических показателей ММП-2, ММП-8, ММП-9 в отношении развития пародонтита.
Ключевые слова:
пародонтит маркер
ротовая жидкость
матриксные металлопротеиназы
интерлейкин
фактор некроза опухоли
Поиск прогностически значимых показателей течения воспалительных заболеваний обусловлен широкой распространенностью данных патологических процессов. В связи с этим в последнее время особого внимания заслуживает изучение состава ротовой жидкости как одной из основных биологических сред. С помощью цитохимических методов выявляют активность ферментов, участвующих в различных сторонах метаболизма, при различных воспалительных заболевания, в т. ч. с локализацией в полости рта.
Одним из широко распространенных воспалительных заболеваний является пародонтит. В настоящее время установлено, что важная роль в регуляции воспаления в пародонтальном комплексе принадлежит про- и противовоспалительным цитокинам. Но взаимосвязь между медиаторами воспаления в пародонте и клиническими показателями изучена недостаточно.
В связи с этим в своей работе мы исследовали нести-мулированную ротовую жидкость, в которой с помощью стандартных наборов для иммуноферментного анализа определяли содержание таких маркеров воспалительных процессов, как металлопротеиназа-8 (ММП-8), металло-протеиназа-9 (ММП-9), металлопротеиназа-2 (ММП-2), интерлейкин-1р (ИЛ-1Р), фактор некроза опухоли (ФНО-а), и анализировали взаимосвязь экспрессии этих маркеров с основными клиническими проявлениями заболеваний пародонта. В исследование было включено 79 человек без общесоматической патологии. Из них 69 больных хроническим генерализованным пародонтитом в возрасте от 27 до 54 лет и 10 человек с клинически интактным пародонтом. Из исследований исключались пациенты, имеющие в анамнезе состояния, требующие регулярное
профилактическое введение антибактериальных препаратов, а также антибактериальную терапию в течение последних 6 мес.; принимающие медикаменты, оказывающие влияние на иммунный статус пациента; беременность или лактацию.
Всем исследуемым было проведено комплексное обследование тканей пародонта. Особое внимание уделялось измерению таких клинических параметров, как глубина пародонтальных карманов, кровоточивость десны при зондировании, уровень гигиены полости рта. Степень кровоточивости десневой борозды дифференцировали при помощи индекса кровоточивости десневой борозды (SBI) по Мюлеманну и Сону (1971). Уровень гигиены полости рта определяли с помощью упрощенного индекса гигиены полости рта по Грину - Вермиллиону (УИГР, OHI-S) (Green, VermiLLion, 1964).
Содержание ММП-2, ММП-8, ММП-9, ИЛ-lß в ротовой жидкости достоверно выше у лиц с хроническим генерализованным пародонтитом, чем у лиц с клинически интактным пародонтом, и достоверно отражает степень тяжести пародонтита, глубину пародонтальных карманов и степень кровоточивости десны
Утром натощак у обследованных пациентов собирали ротовую жидкость. В нестимулированной ротовой жидкости определяли содержание исследуемых белков (ММП-2, ММП-8, ММП-9, ИЛ-lß, ФНО-а). Определение маркеров проводили с помощью стандартных наборов для иммуноферментного анализа в соответствии с инструкциями фирм-производителей.
Поскольку в большинстве случаев распределение исследованных показателей отличалось от нормального, в статистическом анализе использовали непараметрические критерии. Также использовали регрессионную многофакторную модель Кокса. Статистическую обработку данных осуществляли с помощью программного пакета «Statistica 7.0».
медицинский ^^^ совет 2015 | № 2
В результате проведенных исследований были получены данные, показывающие взаимосвязь экспрессии маркеров воспалительных процессов с клинической картиной болезни пародонта. Полученные нами данные показывают достоверное повышение уровней содержания матриксных металлопротеиназ в ротовой жидкости пациентов с хроническим пародонтитом.
Так, содержание в ротовой жидкости ММП-2, ММП-8, ММП-9, ИЛ-1Р и ФНО-а достоверно связано со степенью тяжести пародонтита. Их показатели достоверно повышались с увеличением степени тяжести (табл. 1). Содержание ММП-2 было достоверно выше у больных хроническим генерализованным пародонтитом тяжелой степени - медиана 14,4 нг/мл. Частота выявления нулевых значений ММП-2 составила 17,4% у больных хроническим генерализованным пародонтитом по сравнению с 70% в контрольной группе и была минимальна при тяжелой степени пародонтита - 6,7%. Содержание ММП-8 было достоверно выше в ротовой жидкости больных пародонтитом тяжелой степени - медиана 1 256 нг/мл. Содержание ММП-8 было недостоверно меньше у больных в стадии ремиссии - 446 нг/мл, чем в стадии обострения - 461 нг/мл. Содержание ММП-9 было достоверно выше в ротовой жидкости больных пародонтитом тяжелой степени - медиана 1 629 нг/мл. Содержание ММП-9 было достоверно выше в ротовой жидкости больных пародонтитом тяжелой степени -медиана 1 629 нг/мл. Содержание ИЛ-1Р было достоверно выше в ротовой жидкости больных пародонтитом тяжелой степени - медиана 397 пг/мл. Содержание ФНО-а было достоверно меньше у больных легкой степени тяжести пародонтита - медиана 44,6 пг/мл и 87,7 пг/мл при тяжелой степени.
Но стадию заболевания (обострение, ремиссия) достоверно не отражал ни один из показателей.
Дальнейший сравнительный анализ полученных результатов показал достоверную связь исследуемых показателей с глубиной пародонтальных карманов. При увеличении глубины пародонтальных карманов достоверно повышались медианы показателей (табл. 2). Содержание ММП-2 достоверно повышалось при увеличении степени кровоточивости с 1,9 нг/мл при глубине менее 3 мм до 13,1 нг/мл при глубине от 6 мм и более. Содержание ММП-8 достоверно повышалось пропорционально увеличению глубины пародонтальных карманов с 170 нг/мл при глубине менее 3 мм до 1 256 нг/мл при глубине 6 мм и более. Содержание ММП-9 также достоверно повышалось пропорционально увеличению глубины пародонтальных карманов с 383 нг/мл при глубине менее 3 мм до 1 303 нг/мл при глубине 6 мм и более. Содержание ИЛ-1Р достоверно повышалось пропорционально увеличению глубины пародонтальных карманов с 202 пг/мл при глубине менее 3 мм до 395 пг/мл при глубине 6 мм и более. Содержание ФНО-а достоверно повышалось пропорционально увеличению глубины пародонтальных карманов с 42,4 пг/мл при глубине менее 3 мм до 82,6 пг/мл при глубине 6 мм и более.
Таблица 1. Содержание воспалительных маркеров в ротовой жидкости с учетом степени тяжести пародонтита
Легкая степень Средняя степень Тяжелая степень
пародонтита пародонтита пародонтита
ММП-2 2,7 нг/мл 3 нг/мл 14,4 нг/мл
ММП-8 325 нг/мл 367 нг/мл 1 256 нг/мл
ММП-9 539 нг/мл 693 нг/мл 1 629 нг/мл
ИЛ-1Р 290 пг/мл 313 пг/мл 397 пг/мл
ФНО-а 44,6 пг/мл 82,6 пг/мл 87,7 пг/мл
Таблица 2. Содержание воспалительных маркеров
в ротовой жидкости с учетом глубины пародонтальных
карманов (ПК)
Глубина ПК менее 3 мм Глубина ПК 3-5 мм Глубина ПК 6 мм и более
ММП-2 1,9 нг/мл 3,3 нг/мл 13,1 нг/мл
ММП-8 170 нг/мл 532 нг/мл 1 256 нг/мл
ММП-9 383 нг/мл 903 нг/мл 1 303 нг/мл
ИЛ-1Р 202 пг/мл 311 пг/мл 395 пг/мл
ФНО-а 42,4 пг/мл 64,2 пг/мл 82,6 пг/
Результаты наших исследований также продемонстрировали взаимосвязь экспрессии ММП-2, ММП-8, ММП-9, ИЛ-1Р, ФНО-а с таким клиническим проявлением воспалительных заболеваний пародонта, как кровоточивость десны. Содержание в ротовой жидкости исследуемых показателей повышалось пропорционально увеличению степени кровоточивости десны. Содержание ММП-2 достоверно повышалось с 1,3 нг/мл при отсутствии кровоточивости десны до 5,9 нг/мл при кровоточивости во время еды и спонтанной кровоточивости. Частота выявления нулевых значений этого маркера снижалась пропорционально увеличению степени кровоточивости с 50 до 0%. Также достоверно повышалось содержание ММП-8, ММП-9 и ФНО-а с 302, 560, 37,4 пг/мл соответственно при отсутствии кровоточивости до 775, 1 420, 77,5 пг/мл соответственно при кровоточивости во время еды и спонтанной. Корреляционная зависимость между содержанием ИЛ-1Р в ротовой жидкости и степенью кровоточивости десны была слабой.
Анализируя полученные данные, можно сделать вывод, что содержание ММП-2, ММП-8, ММП-9, ИЛ-1Р в ротовой жидкости достоверно выше у лиц с хроническим генерализованным пародонтитом, чем у лиц с клинически интактным пародонтом, и достоверно отражает степень тяжести пародонтита, глубину пародонтальных карманов и степень кровоточивости десны.
Полученные в результате проведенных нами исследований данные по иммуноферментному определению ММП-8, ММП-9, ММП-2, ИЛ-1Р , ФНО-а в ротовой жидкости больных пародонтитом имеют тесную связь с развитием данной патологии. Нами было показано достоверное повышение уровней ММП при увеличении клинических проявлений заболевания.
