CC BY
32
■
Маркеры опухолевых стволовых клеток при не метастатическом раке желудка
Ключевые слова: опухолевые стволовые клетки, рак желудка, не метастатический рак
Keywords:
tumor stem cells, stomach cancer, not metastatic cancer
Сагакянц А.Б., Франциянц Е.М., Геворкян Ю.А., Солдаткина Н.В., Бондаренко Е.С., Самойленко Н.С., Златник Е.Ю., Ульянова Е.П., Шульгина О.Г.
ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации
344037, Российская Федерация, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63
Markers of tumor stem cells with not metastatic gastric cancer
Sagakyants A.B., Franciyants E.M., Gevokyan Yu.A., Soldatkina N.V., Bondarenko E.S., Samoilenko N.S., Zlatnik E.Yu., Uljanova E.P., Shulgina O.G.
Rostov Research Institute of Oncology
63 14 line, Rostov-on-Don, 344037, Russian Federation
Несмотря на то, что заболеваемость раком желудка в России не находится на высоком уровне, в структуре смертности от злокачественных новообразований он занимает 2-е место. Это свидетельствует о поздней диагностике рака желудка и агрессивном течении заболевания. Процессы прогрессирования заболевания, вероятность метастазирования и развитие устойчивости к применяемой терапии во многом определяются наличием в опухоли особой субпопуляции клеток — опухолевыми стволовыми клетками (ОСК). Несмотря на то, что данные клетки достаточно трудно идентифицировать, число работ, посвященных изучению биологических и клинических особенностей ОСК при различных формах онкологических заболеваний, неуклонно растет. Для идентификации ОСК при раке желудка могут быть использованы такие фено-типические маркеры как CD44+ и CD133+, наличие которых с высокой вероятностью может указывать на данный тип клеток.
Цель. Исследование CD44+ — ОСК в различных тканях при не метастатической форме рака желудка с использованием метода проточной цитофлюориметрии.
Пациенты и методы. В исследование включено 17 больных раком желудка, в возрасте от 30 до 80 лет, средний возраст 61,7 ± 8,9. По степени дифференциров-ки опухоли пациенты распределялись следующим образом — G2, 11 человек, средний возраст 58,9 ± 9,7; G3, 6 человек, средний возраст 66,1 ± 5,4; Материалом для исследования являлись образцы опухоли (ОП), перифо-кальной зоны (ПЗ), сальника (СА), брюшины (БР), забор которых осуществлялся во время оперативного вмешательства. Ткани ex temporae подвергались дезинтеграции с использованием BD Medimachine (США), клеточную взвесь фильтровали, центрифугировали (Еppendorf 5702 R). Осажденные клетки ресуспендировали раствором CellWash. Фенотипирование клеток осуществляли на проточном цитометре FACSCantoII (BD, USA), после их обработки панелью антител (CD45, CD44). Аналитические процедуры осуществляли в соответствии с указаниями
фирмы производителя наборов. Результаты определения клеток, имеющих маркеры ОСК (CD44+), выражали в процентах от общего количества лимфоцитов CD45+-клеток, либо от общего числа CD45— клеток.
Результаты. В группе обследованных, при степени дифференцировки опухоли G2 количество клеток с фенотипом CD45+CD44+ в ткани ОП и БР статистически не отличались и составили 3,4 ± 1,4 и 3,8 ± 1,6, соответственно. Отмечено увеличение этих клеток в СА — 8,4 ± 4,5, что больше количества этих клеток в ткани ОП на 147% (в 2,4 раза). В случае ПЗ зоны не удалось определить клетки с данным фенотипом. При снижении степени дифференцировки опухоли до G3 Наибольшее число клеток с фенотипом CD45+CD44+ выявлено в БР — 44,3 ± 12,1, в то время как в ОП — 3,7 ± 1,2, а в СА — 8,7 ± 2,1. Таким образом, прослеживается сохранение на определенном стабильном уровне данных клеток в ОП, СА при их увеличении в БР и ПЗ при снижении степени дифференцировки опухоли. При G3 количество данных клеток в БР превышало данный показатель при G2 в 11,6 раза (44,3 ± 12,1 против 3,8 ± 1,6), в ПЗ — от отсутствия данные клеток в G2 до 1 ± 0,4 в G3 стадии. Определение клеток с фенотипом CD45-CD44+ позволило выявить следующие закономерности. Наибольшее количество клеток данного фенотипа выявлено в ткани БР — 1,1 ± 0,5, что выше значений данного показателя в ОП (0,65 ± 0,3) и СА (0,3 ± 0,1) на 69% (в 1,7 раза) и 267% (3,7 раза), соответственно. При G3 выявление клеток с фенотипом CD45-CD44+ отличалось от аналогичных значений при G2. В ПЗ, СА и БР клетки с данным фенотипом не обнаруживались, в то время как в ОП количество этих клеток составило 1,2 ± 0,3, что превышает значения у пациентов с G2 на 84% (в 1,8 раза).
Заключение. Проведенное исследование позволило выявить некоторые особенности распределения клеток, имеющих маркеры ОСК в различных тканях, что может в дальнейшем быть использовано при оценке особенностей развития и прогрессирования заболевания, эффективности проводимой терапии.
242 Proceedings of the First international Forum of Oncology and Radiology, Moscow, September 23-28 2018
