CC BY
1138
ОБЗОРЫ
МАКРОфАГИ: РАЗНООБРАЗИЕ фЕНОТИПОВ И фуНКЦИИ,
взаимодействие с чужеродными материалами
Н.Н. Сарбаева, Ю.В. Пономарева, М.Н. Милякова
Самарский государственный медицинский университет, Самара, Россия
Macrophages: diversity of phenotypes and functions, interaction with foreign materials
N.N. Sarbaeva, J.V. Ponomareva, M.N. Milyakova Samara State Medical University, Samara, Russia
В соответствии с «М1/М2» парадигмой выделяют два подтипа активированных макрофагов — классически активированные (М1) и альтернативно активированные (М2), которые экспрессируют различные рецепторы, цитоки-ны, хемокины, факторы роста и эффекторные молекулы Однако данные последних лет указывают на то, что в ответ на изменение сигналов микроокружения, макрофаги могут проявлять уникальные свойства, не позволяющие отнести их ни к одному из этих подтипов
Макрофаги играют главную роль в реакции организма на имплантируемый материал — катетеры, стенты, эндо-протезы, дентальные имплантаты Макрофаги фагоцитируют частицы износа поверхности суставных протезов, инициируют воспаление в зоне протезирования и остео-лиз, управляют процессами образования фиброзной капсулы вокруг инородных тел . Представлен краткий обзор факторов, вызывающих миграцию, адгезию и активацию макрофагов, анализ их функциональных характеристик на различных поверхностях, включая биодеградирующие и не деградирующие материалы in vivo и in vitro .
Ключевые слова: макрофаг, активация, имплантат, воспаление, фиброз
According to "M1/M2" paradigm two distinct subsets of macrophages have been proposed — classically (M1) or alternatively (M2) activated macrophages that express different receptors, cytokines, chemokines, growth factors and effector molecules but recent evidence suggests that in respond to changed environmental stimuli they can demonstrate unique properties which do not allow to attribute them neither to M1 nor to M2 population
Macrophages play a pivotal role in foreign body reaction following installation of catheters, stents prosthesis, dental implants Macrophages englobe wear particles around joint prosthesis initiating an inflammation in periprosthetic tissues and osteolysis, control fibroproliferation and formation of the fibrous capsule surrounding foreign bodies A brief overview of events leading to migration, adhesion and activation of macrophages, and analysis of their functional characteristics on different surfaces including biodegradable and non-biodegradable materials in vivo and in vitro are presented
Keywords: macrophage, activation, implant, inflammation, fibrosis
Введение
Современную медицину в настоящее время невозможно представить без применения имплантируемых изделий, устанавливаемых в организм на различные сроки с целью восстановления анатомии и функции утраченных или пораженных патологическим процессом органов и тканей . Биосовместимость синтетических материалов или тканеинже-нерных конструкций является основной проблемой, влияющей на результаты таких имплантаций . Реакция на протезирующий материал развивается в следующей последовательности: альтерация тканей, инфильтрация клетками острого, затем хронического воспаления с формированием грануляционной ткани и фиброзной капсулы . Степень выраженности этих реакций определяет биосовместимость имплантируемого изделия . Макрофаги играют главную роль в реакции организма на устанавливаемый материал — катетеры, стенты, эндопротезы, дентальные им-плантаты и др
Морфология макрофагов
Макрофаги — это гетерогенная клеточная популяция Макрофаг имеет неправильную, звездчатую, многоотростчатую форму, складки и микроворсинки на поверхности клеток, обилие эндоцитозных микровезикул, первичных и вторичных лизосом . Округлое
e-mail: jvponomareva@mail . ru
или эллипсовидное ядро расположено центрально, гетерохроматин локализован под ядерной оболочной . Структурные особенности клетки во многом зависят от ее органной и тканевой принадлежности, а также от функционального статуса . Так, для клеток Купфера характерен гликокаликс, альвеолярные макрофаги содержат ламеллярные (сурфактантные) тельца, хорошо развитый комплекс Гольджи, шероховатый эндоплазматический ретикулум и множество митохондрий, в то время как в клетках микро-глии митохондрии немногочисленны. В цитоплазме перитонеальных и альвеолярных макрофагов присутствует большое количество липидных телец, содержащих субстраты и ферменты генерации про-стагландинов [1]. Адгезирующиеся и движущиеся макрофаги формируют короткоживущие, содержащие актин структуры — подосомы — в виде плотной центральной части с радиально отходящими от них микрофиламентами . Подосомы могут сливаться, формируя структуры более высокого порядка — розетки, которые эффективно разрушают белки подлежащего внеклеточного матрикса [2].
Функции макрофагов
Макрофаги фагоцитируют чужеродный материал и клеточно-тканевый детрит, стимулируют и регулируют иммунный ответ, индуцируют воспалительную
реакцию, участвуют в репаративных процессах и обмене компонентов внеклеточного матрикса.
Многообразие осуществляемых функций объясняет экспрессию этими клетками большого числа рецепторов, связанных с плазматической мембраной, внутриклеточных и секретируемых. Рецепторы врожденного иммунитета PRR (pattern-recognition receptors, образ-распознающие рецепторы) активируются широким спектром лигандов (исключение — CD163), обеспечивая узнавание высоко консервативных структур большинства микроорганизмов, так называемых PAMP (pathogen-associated molecular patterns, патоген-ассоциированные образы) и схожих с ними эндогенных молекулярных структур DAMP (damage-associated molecular patterns), образующихся в результате повреждения и гибели клеток, модификации и денатурации белковых структур внеклеточного матрикса . Большинство из них опосредует эндоцитоз и элиминацию потенциально опасных эндогенных и экзо-геннных агентов, однако вместе с тем, многие из них выполняют сигнальные функции, регулируя синтез провоспалительных медиаторов, способствуя адгезии и миграции макрофагов (табл . ) [3—7].
На плазматической мембране моноцитов/макрофагов экспрессируются также специализированные рецепторы, связывающие один или несколько близких по строению лигандов: Рс-фрагмент иммуноглобулина G, факторы роста, кортикосте-роиды, хемокины и цитокины, анафилотоксины и костимулирующие молекулы . Функции многих из этих рецепторов опосредованы не только связыванием лигандов, но и взаимодействием с другими рецепторами (C5aR-TLR, MARCO-TLR, FcYR-TLR), что обеспечивает тонкую регуляцию синтеза про-и противовоспалительных медиаторов [2, 6, 8, 9]. Особенностью макрофагальной рецепторной системы является наличие рецепторов-ловушек провос-палительных цитокинов и хемокинов (N-^2 на М2а макрофагах; CCR2 и CCR5 на М2с макрофагах), активация которых блокирует внутриклеточную передачу соответствующего провоспалительного сигнала. Экспрессия клеточных рецепторов видо-, органо- и тканеспецифична и зависит от функционального статуса макрофагов . Детально изученные клеточные рецепторы макрофага приведены в таблице
Таблица. Рецепторы плазматической мембраны макрофага
Рецептор
Лиганды
Регулируемые процессы
Маннозный рецептор, CD206
Рецепторы-скавенджеры класса А^И и МАRCO (мышь), СD163
Бактериальные и эндогенные маннозил/ фукозил- или GюNAc-гликоконыoгаты; лизосомальные гидролазы; тиреоглобулин; амилаза
ЛПС, липотейхоевая кислота, полноценные грам-положительные бактерии, микобактерии, модифицированые ЛПНП, апоптозные клетки. Гемоглобин-гаптоглобиновый комплекс
Фагоцитоз микроорганизмов инфицированных вирусом клеток. Клиренс потенциальных аутоантигенов
Фагоцитоз,рецептор-опосредованный эндоцитоз ЛПНП, регуляция синтеза провоспалительных медиаторов. Элиминация гемоглобина лизированных эритроцитов, блокада провоспалительного сигнала
Рецептор скавенджер класса В, СD36
Тромбоспондин, апоптозные клетки, модифицированные ЛПНП, анионные фосфолипиды, жирные кислоты, серповидные эритроциты, эритроциты, пораженные Plasmodium falciparum
Метаболизм жирных кислот, фагоцитоз апоптозных клеток
Дектин-1
В-глюкановые компоненты стенки дрожжевых грибков
Фагоцитоз
DC-SIGN, CD209
Содержащие маннозу углеводные компоненты бактерий, вирусов, грибов, гликолипиды микобактерий, эндогенные ICAM-3,2, маннозил, фукозил
Фагоцитоз
а^2-интегрин
(рецептор
комплемента
CR3,MAC-1,
CD11b/CD18)
азß2-интегрин
(CR4,
CD11c/CD18) Toll-like
рецепторы:TLR-2, TLR-4
Зимозан, ЛПС, iC3b, С3d,g, С4Ь, ICAM-1, фибриноген, денатурированные белки, гепарансульфат, альбумин, витронектин, фибронектин
Гликолипиды, тейхоевая кислота, ЛПС, зимозан, липопротеины,пептидогликаны и другие структуры микроорганизмов и вирусов, эндогенные фибронектин, ß-дефензин^
Индукция TLR-4, фагоцитоз опсонизированных комплементом и неопсонизированныхчастиц, рекрутирование моноцитов/макрофагов в зону воспаления. Адгезия к структурам межклеточного матрикса и эндотелию, стимуляция синтеза ^-1
Активация синтеза медиаторов воспаления, костимулирующих молекул
Окончание таблицы
Рецептор
Лиганды
Регулируемые процессы
FcyRI, FcyRII, FcyRIII - CD64, CD32, CD16
IFN yRI IFN yRII
IL-1R1
IL-1R2 IL-4R CCR2 CCR5
CXCR3, CXCR4 CSF-1R
Fc фрагмент IgG
ИФНY
IL-1 IL-1
IL-4, IL-13
Хемокины CCL2, 3, 4, 5, 7,13
Хемокины CXCL10, CXCL12 CSF-1
Фагоцитоз опсонизированных 1дО бактерий, антителозависимый лизис клеток-мишеней, несущих на мембране комплекс антиген-антитело. Регуляция синтеза провоспалительных цитокинов
Поляризация макрофага в М1 направлении
Аутокринная амплификация воспалительного ответа
Ингибитор ^-1
Поляризация макрофага в М2 направлении
Миграция моноцитов и макрофагов в зону повреждения тканей и воспаления
Миграция в зону воспаления
Рост и дифференцировка макрофагов. Инициация движения макрофага -поляризация клетки, полимеризация актина
Миграция моноцитов/макрофагов
Тканевые макрофаги происходят преимущественно из моноцитов крови, которые мигрируют в ткани и дифференцируются в различные популяции .
Миграция макрофагов направляется хемокина-ми: СС1_2 СС1_3, СС1_4, СС1_5, СС1_7, СС1_8, ССИ3, СС1_15, СС1_19, СХСИ0, СХСИ2; факторами роста VEGF, PDGF, TGF-P; фрагментами системы комплемента; гистамином; белками гранул полиморфно-ядерных лейкоцитов (ПМЯЛ); фосфолипидами и их производными
На начальных этапах воспалительного ответа ПМЯЛ организуют и модифицируют сеть хемокинов путем секреции СС1_3, СС1_4 и СС1_19 и выброса пре-формированных в гранулы азуросидина, белка 1_1_37, катепсина G, дефензинов (НNP 1-3) и протеиназы 3, которые обеспечивают адгезию моноцитов к эндотелию, тем самым проявляя свойства хемоаттрак-тантов . Кроме того, белки гранул ПМЯЛ индуцируют секрецию хемокинов и другими клетками: азуроси-дин стимулирует продукцию СС1_3 макрофагами, а протеиназа-3 и HNP-1 вызывают синтез СС1_2 эндотелием . Протеиназы ПМЯЛ способны активировать многие хемокины белковой природы и их рецепторы . Так, протеолиз СС1_15 катепсином G многократно усиливает его аттрактивные свойства Апоптозные нейтрофилы привлекают моноциты через сигналы, предположительно, опосредованные лизофосфати-дилхолином [10].
Любое повреждение тканей приводит к аккумуляции макрофагов В зоне травмы сосудов кровяной сгусток и тромбоциты выделяют TGF-p, PDGF, СХС1_4, лейкотриен В4 и ¡1-1, обладающие выраженными хемоаттрактивными свойствами в отношении моноцитов/макрофагов [11—13]. Поврежденные ткани являются источником так называемых аларминов, к которым относятся компоненты разрушенного внеклеточного матрикса, белки теплового шока, амфотерин, АТФ, мочевая кислота, ¡1_-1а, 11_-33, митохондриальная ДНК клеточного детрита и др . Они стимулируют оставшиеся жизнеспособными клетки поврежденных тканей и эндотелий кровеносных со-
судов к синтезу хемокинов, некоторые из них являются прямыми факторами хемотаксиса [13, 14].
Инфицирование тканей приводит к появлению так называемых патогенассоциированных молекул: липополисахаридов, углеводов клеточной стенки и нуклеиновых кислот бактерий . Связывание их мембранными и внутриклеточными рецепторами макрофагов запускает процесс экспрессии генов хемокинов, обеспечивающих дополнительное рекрутирование фагоцитов [11, 15].
Активация макрофагов
Макрофаги активируются под действием множества сигнальных молекул, вызывающих их дифферен-цировку в различные функциональные типы (рис . 1) .
Классически активированные макрофаги (М1 фенотип) стимулируются iFNY, а также iFNY совместно с LPS и TNF . Их основные функции — уничтожение патогенных микроорганизмов и индукция воспалительной реакции . Поляризация в М1 направлении сопровождается секрецией провоспалительных медиаторов. Они экспрессируют рецепторы к iL-1 — iL-1R1, TLR и костимулирующие молекулы, активация которых обеспечивает амплификацию воспалительного ответа . Наряду с провоспалитель-ными цитокинами макрофаги секретируют и антивоспалительный цитокин — iL-10, при характерном высоком соотношении IL-12/IL-10 [11, 13, 16-18].
Бактерицидные свойства М1 макрофагов определяются продукцией свободных радикалов азота и кислорода, генерируемых iNOS и НАДФН-оксидазным комплексом [19, 20]. Являясь эффекторными клетками в реакции организма на бактериальную инфекцию, они, в то же время, подавляют адаптивный иммунный ответ за счет торможения пролиферации стимулированных Т-клеток. Секретируемый М1 макрофагами IL-12 играет ключевую роль в Тх1 поляризации, а IL-1 ß и IL-23 направляют иммунный ответ по Тх17 пути . [11, 18]. Исследования последних лет показали, что М1 макрофаги помимо провоспалительных проявляют репаративные свойства: секретируют VEGF, стимулирующий ангиогенез и образование грануляционной ткани [21].
Рис. 1. Характеристика субпопуляций активированных макрофагов
Альтернативная активация макрофагов (М2 фенотип) наблюдается при стимуляции их интерлей-кинами, глюкокортикоидами, иммунными комплексами, агонистами TLR и др. Они мигрируют в зоны инвазии гельминтами, скапливаются в локусах фиброза, в заживающих ранах кожи и неопластических образованиях . М2 макрофаги способны к активной пролиферации in situ . Они проявляют большую по сравнению с М1 макрофагами способность к фагоцитозу и экспрессируют большее количество связанных с ним рецепторов: CD36 — рецептор ска-венджер апоптозных клеток; CD206 — маннозный рецептор; CD301 — рецептор остатков галактозы и N-ацетилглюкозамина; CD163 — рецептор к гемогло-бин-гаптоглобиновому комплексу . Для макрофагов этого типа характерно низкое отношение iL-12/iL-10 [11, 22-25].
Альтернативно активированные макрофаги подразделяют на подтипы: М2а, М2Ь и М2с . Примером М2а фенотипа макрофагов являются клетки, скапливающиеся вокруг личинок гельминтов и простейших, аллергены которых индуцируют иммунный Тх2 ответ, сопровождающийся продукцией iL-4 и iL-13 [23]. Они не секретируют значительные количества провоспалительных цитокинов, синтезируют особый спектр хемокинов и мембранных рецепторов [11, 17, 22]. Считается, что для них характерен синтез iL-10 [13], однако in vitro макрофаги не всегда продуцируют этот цитокин и могут проявлять высокую транскрипционную активность генов iL-12 и iL-6 [17, 26]. Важной характеристикой этой популяции является синтез антагониста рецептора iL-1 (iL-1ra), который, связываясь с iL-1, блокирует его провос-палительное действие [27].
М2а макрофаги подавляют воспалительную реакцию, блокируя формирование М1 популяции через цитокины рекрутированных ими Тх2-лимфоцитов, либо за счет вырабатываемого хемокина CCL17, который совместно с iL-10 ингибирует дифференци-ровку макрофагов в М1 направлении [11]. Клетки М2а фенотипа считают типичными репаративными макрофагами Синтезируемый ими хемокин CCL2 является хемоаттрактантом предшественников мио-
фибробластов — фиброцитов [28, 29], они секретируют факторы, обеспечивающие ремоделирование соединительной ткани [20, 22, 24, 30—32].
Поляризация в направлении М2Ь осуществляется стимуляцией рецептора к Рсд вместе с агонистами TLR и лигандами к рецептору ^-1. Функционально они близки к М1 макрофагам, продуцируют провос-палительные медиаторы и монооксид азота (N0), но вместе с тем для них характерен высокий уровень синтеза ^-10 и сниженная продукция ^-12 [16, 17]. М2Ь макрофаги усиливают продукцию антител . Синтезируемый ими хемокин ССИ способствует поляризации лимфоцитов в Тх2 направлении [11, 13].
М2с макрофаги обладают супрессивными свойствами — тормозят активацию и пролиферацию С04+-лимфоцитов, вызванную антигенной стимуляцией и способствуют элиминации активированных Т-клеток [33]. ^ vitra М2с подтип получают стимуляцией мононуклеарных фагоцитов глюкокортикоидами, ^-10, TGF-p, простагландином Е2 и др . Они не обладают бактерицидной активностью, продуцируют незначительное количество цитокинов, секре-тируют факторы роста и некоторые хемокины [7, 13, 17, 21, 31]. М2с макрофаги экспрессируют рецепторы фагоцитоза и многих провоспалительных хемо-кинов, которые, предположительно, служат не для возбуждения соответствующих сигналов, а являются ловушками провоспалительных медиаторов, блокируя их функции [11].
Характер активации макрофагов не является жестко детерминированным и стабильным Показана возможность трансформации М1 фенотипа в М2 при изменении спектра стимулирующих цитоки-нов и вследствие эффероцитоза После поглощения апоптозных клеток макрофаги резко снижают синтез и секрецию медиаторов воспаления СС12, СС13, СХСИ, СХС1 2, Т^-а, MG-CSF, ^-1р, ^-8 и многократно усиливают продукцию TGF-p [20, 25, 27]. Обратная трансформация М2 фенотипа в М1 предполагается при развитии ожирения
Многие авторы ставят под сомнение существование в организме двух четко различимых популяций макрофагов М1 и М2 . Сочетание признаков клас-
сической и альтернативной активации характерно для макрофагов кожных ран человека . Так, наряду с типичными для M1 макрофагов цитокинами TNF-a и iL-12, они демонстрируют синтез маркеров М2 макрофагов: iL-10, CD206, CD163, CD36 и рецепторов к iL-4 [34]. Отличный от М1/М2 тип макрофагов с выраженной фибринолитической активностью обнаружен в печени мышей на модели обратимого фиброза и в ткани печени человека при циррозе . В них экспрессируются гены аргиназы 1, маннозных рецепторов и iGF, они секретируют ММП-9, ММП-12, проявляют выраженную способность к пролиферации и фагоцитозу, но не синтезируют iL-10, iL-1ra, TGF-p [35]. Особая популяция макрофагов формируется в селезенке мыши при инфицировании микобактери-ями Они тормозят пролиферацию т-лимфоцитов и секрецию ими как Тх1, так и Тх2 цитокинов, стимулируя поляризацию в Тх17 . направлении . Супрессивные макрофаги обладают уникальным фенотипом — экс-прессируют гены активные в М1 макрофагах — iL-12, iL-1 р, iL-6, TNF-a, iNOS и одновременно гены CD163, iL-10, маннозных рецепторов и других маркеров М2 макрофагов [19].
Эти исследования наглядно показывают, что формирующиеся в естественных условиях популяции макрофагов значительно отличаются от получаемых in vitro М1 и М2 популяций . Воспринимая множество активирующих сигналов, макрофаг отвечает «по запросу», секретируя медиаторы адекватно изменению окружающей среды, поэтому в каждом конкретном случае формируется свой фенотип, иногда, возможно, даже уникальный
Реакция макрофагов на чужеродный
материал
Контакт макрофагов с чужеродным материалом, как в виде мелких частиц, так и в виде обширных поверхностей, приводит к их активации. Одной из серьезных проблем в травматологии и ортопедии, связанной с реакцией на инородное тело, является развитие нестабильности сустава после эндопро-тезирования, которая выявляется, по некоторым данным, у 25—60% больных в первые годы после выполненной операции и не имеет тенденции к снижению [36]
Поверхность ортопедических протезов изнашивается с образованием частиц, инфильтрирующих мягкие ткани . Химические свойства материала определяют возможность опсонизации частиц белками плазмы крови и тип поверхностных рецепторов, инициирующих фагоцитоз так, полиэтилен, активирующий комплемент, подвергается опсонизации и «узнается» рецептором к комплементу CR3, в то время как частицы титана поглощаются клеткой через опсонин-независимый рецептор MARCO . Фагоцитоз макрофагами частиц металла, синтетических полимеров, керамики, гидроксиапатита запускает процесс синтеза провоспалительных медиаторов и индуктора остеокластогенеза RANKL . Секретируе-мый макрофагами CCL3 вызывает миграцию остеокластов, а iL-1p, TNF-a, CCL5 и PGE2 стимулируют их дифференцировку и активацию Остеокласты резорбируют кость в зоне протезирования, но новообразование костной ткани подавлено, поскольку корпускулярный материал ингибирует синтез коллагена, тормозит пролиферацию и дифференцировку остеобластов и индуцирует их апоптоз [37, 38].
Вызванный частицами износа воспалительный ответ считается основной причиной остеолиза
Контакт тканей с материалом, который не может быть фагоцитирован, инициирует каскад событий, известный под названием реакции организма на инородное тело, или тканевой реакции Она заключается в адсорбции белков плазмы, развитии воспалительного ответа, первоначально острого, впоследствии хронического, пролиферации миофи-бробластов и фибробластов и формировании фиброзной капсулы, отграничивающей инородное тело от окружающих тканей Основными клетками перси-стирующего воспаления на границе материал/ткань являются макрофаги, его выраженность определяет степень фиброза в зоне контакта . Интерес к исследованию тканевой реакции связан в первую очередь с широким применением синтетических материалов в различных областях медицины [12, 39, 40].
Адсорбция белков плазмы крови является первой стадией взаимодействия имплантируемых материалов с тканями организма . Химический состав, свободная энергия, полярность поверхностных функциональных групп, степень гидрофильности поверхности определяют количество, состав и кон-формационные изменения в связываемых белках, являющихся матриксом для последующей адгезии клеток, в том числе макрофагов Наиболее значимыми в этом плане являются фибриноген, белки системы комплемента, витронектин, фибронектин и альбумин
Слой фибриногена быстро образуется на практически всех чужеродных материалах . На гидрофобных поверхностях фибриноген образует монослой из прочно связанного, частично денатурированного белка, эпитопы которого открыты для взаимодействия с клеточными рецепторами На гидрофильных материалах фибриноген чаще осаждается в виде рыхлого мультислойного покрытия, причем наружные слои слабо или практически не подвергаются денатурации, оставляя сайты связывания недоступными для клеточных рецепторов макрофагов и тромбоцитов [41, 42].
Многие синтетические полимеры обладают способностью к сорбции компонентов системы комплемента и ее активации с формированием С3-конвертазного комплекса Генерируемые им фрагменты С3а, С5а являются хемоаттрактантами и активаторами фагоцитов, ^3Ь выполняет роль ли-ганда рецептора клеточной адгезии. Запуск каскада активации возможен как по классическому (опосредованному адсорбированными молекулами JgG), так и по альтернативному путям [43]. Последний инициируется связыванием компонента С3 поверхностями, несущими функциональные группы, например — ОН-, вызывающими его гидролиз Альтернативный путь может включаться также после классического пути или вместе с ним за счет работы С3-конвертазы классического пути, генерирующей фиксирующиеся на поверхностях фрагменты С3Ь — пускового фактора амплификационной петли Однако сорбция и даже начавшийся гидролиз С3 не всегда приводят к возникновению амплификационного сигнала Например, С3 сильно сорбируется поливинилпир-ролидоном, однако протеолиз его на этой поверхности слабо выражен Слабо активируют комплемент фторированные поверхности, силикон и полистирен Для клеточных реакций на чужеродных поверхностях значение имеет не только активация системы
комплемента, но опосредованное ее фрагментами связывание других белков .
Роль альбумина заключается в его способности связывать белки системы комплемента [12]. Он не способствует адгезии макрофагов и, в отличие от фибриногена, не индуцирует синтез ими TNF-a [44]. На имплантированных материалах обычно обнаруживают фибронектин и витронектин — белки богатые RGD-последовательностями (участками из аминокислот ARG-GLY-ASP) .
В отношении витронектина неизвестно, адсорбируется ли он непосредственно на поверхности материала или входит в состав фиксированного на нем инактивированного мебранноатакующего комплекса комплемента . Значимость его для развития тканевой реакции состоит в том, что он обеспечивает наиболее прочную и длительную адгезию макрофагов
Взаимодействие макрофагов с субстратом обеспечивают клеточные рецепторы к бел-кам-интегринам (avPg, a5P1, CR3), богатым RGD-последовательностями (табл. ) . Блокада адгезии макрофагов растворимыми RGD-миметиками, либо удаление с их поверхности рецептора CR3 снижает интенсивность тканевой реакции, уменьшая толщину формирующейся фиброзной капсулы [12, 41, 45].
Прикрепившиеся макрофаги сливаются, образуя многоядерные клетки (гигантские клетки инородных тел — ГКИТ) . Индукторами этого процесса являются iFNy, iL-1, iL-2, IL-3, iL-4, IL-13 и GM-CSF, стимулирующие экспрессию маннозных рецепторов, которые играют важную роль в слиянии клеток [12]. ГКИТ функционируют как макрофаги — обладают способностью к фагоцитозу, генерации радикалов кислорода и азота, синтезу цитокинов и факторов роста . Характер синтетической активности этих клеток зависит, по-видимому, от их «возраста»: на ранних этапах развития тканевой реакции экспрессируются iL-1 a, TNF-a, а позднее происходит переключение на антивоспалительные и профиброгеннные медиаторы — iL-4, iL-10, IL-13, TGF-p [46, 47].
Реакция макрофагов на чужеродные материалы исследуется в различных условиях in vitro и in vivo . В экспериментах in vitro принимается во внимание интенсивность их адгезии на изучаемой поверхности и образования ГКИТ, число «включающихся» генов, количество синтезируемых и секретируемых ферментов, цитокинов и хемокинов В монокультурах мононуклеарных фагоцитов, адгезированных на различных поверхностях, происходит не поляризация их в М1 и М2 направлениях, а формирование макрофагов смешанного типа, секретирующих как про-, так и противовоспалительные медиаторы со сдвигом в сторону последних при длительном культивировании [12, 48, 49]. Отсутствие «золотого стандарта» — стабильного контрольного материала, хорошо зарекомендовавшего себя при имплантации в живой организм, с которым можно было бы сравнивать тестируемые материалы, а также использование не стандартизированных клеточных линий макрофагов, разные способы их дифференцировки затрудняют сравнение результатов работ разных авторов . Тем не менее, исследования in vitro дают возможность судить о цитотоксичности материалов, определить реакцию макрофагов на их химическую модификацию
Ценные сведения были получены при изучении активации макрофагов на поверхности различных коллагенов — нативных и химически измененных . Нативные коллагены индуцируют in vitro синтез
макрофагами сигнальных молекул, как стимулирующих воспалительный ответ (TNF-a, iL-6, iL-8, iL-1 p, iL-12, CCL2), так и подавляющих его (iL-1ra, iL-10), а также матриксных металлопротеаз и их ингибиторов . [48-50]. Провоспалительные свойства таких материалов зависят от способа децеллюляризации и стерилизации исходного сырья, в значительной степени изменяющих его характеристики . Полученные по разным технологиям коллагеновые эн-допротезы из нативного коллагена по способности вызывать экспрессию провоспалительных цитокинов варьируют от практически инертных до высокоактивных [51]. Прошивка коллагена различными химическими веществами изменяет характер реакции макрофагов Обработка глутаральдегидом приводит к цитотоксичности, проявляющейся в повреждении цитоплазматической мембраны, нарушении адгезии, снижении жизнеспособности макрофагов При этом продукция ими iL-6, TNF-a повышена, а синтез iL-1ra подавлен в сравнении с макрофагами, адгезирован-ными нативным и прошитым карбодиимидом коллагеном . Обработка карбодиимидом обеспечивает оптимальные свойства коллагену, который не обладает цитотоксичностью, не вызывает существенного повышения секреции провоспалительных цитокинов и металлопротеаз и не подавляет синтез iL-10 и iL-1ra в сравнении с нативным [49].
С целью снижения тканевой реакции в коллаге-новые материалы вводят компоненты межклеточного матрикса, нативные или модифицированные J . Kajahn с соавт . (2012) создали in vitro имитацию провоспалительного микроокружения эндопротезов, что способствовало дифференцировке моноцитов в М1 направлении [50]. В этих же условиях дополнительно сульфатированная гиалуроновая кислота, введенная в коллагеновый субстрат, снизила секрецию макрофагами провоспалительных цитокинов и повысила продукцию iL-10 . По мнению авторов это свидетельствует о М2 поляризации макрофагов, способствующих регенерации и восстановлению функциональных свойств окружающих тканей
Реакция макрофагов на медленно деградируемые и стабильные материалы in vitro в целом однородна и аналогична реакции на биоматериалы, хотя некоторая специфичность ответа все же заметна титан, полиуретан, полиметилметакрилат, политетрафторэтилен являются слабыми индукторами медиаторов воспаления, хотя титан способствует более высокой секреции TNF-a и iL-10, чем полиуретан, а особенность полипропилена заключается в стимулировании продукции профиброгенного хемокина CCL18 [52-54]. PEG, предлагаемый в качестве субстрата для переноса клеток, вызывает резкое, но быстро проходящее усиление экспрессии iL-1 р, TNF-a, iL-12, однако его сополимеризация с олигопептидом клеточной адгезии улучшает биосовместимость материала, в значительной степени снижая экспрессию провоспалительных цитокинов [55].
Реакция макрофагов на различные материалы in vitro не в полной мере характеризует их поведение в организме В монокультурах отсутствуют факторы взаимодействия с другими клеточными популяциями и не учитывается фенотипический полиморфизм -в естественных условиях к имплантату мигрируют не только моноцитарные предшественники, но и зрелые тканевые макрофаги, ответ которых может существенно отличаться от рекрутируемых из крови . Исследование секреторной активности макрофагов,
окружающих инсталлированные в ткани животных и человека эндопротезы, представляет большую сложность Основным методом, позволяющим характеризовать макрофаги на основании парадигмы М1-М2 in situ, стали данные иммуноцитохимии маркерных белков iNOS, CD206, CD163, CD80, CD86 . Постулируется, что наличие этих маркеров у макрофагов in vivo определяет их поляризацию в М1 и М2 направлениях с синтезом соответствующих спектров цито- и хемокинов, но, учитывая возможность существования макрофагов смешанного типа [34], такая характеристика не вполне корректна
тем не менее, эксперименты in vivo дают возможность проследить судьбу имплантированного материала и динамику реакции макрофагов в течение длительного периода, что особенно важно для пожизненно установленных эндопротезов и устройств Наиболее изученными в данном аспекте являются деградирующие биоматериалы на основе коллагена. Первыми клетками воспаления, мигрирующими к таким материалам, являются ПМЯЛ, однако этот эффект транзиторный и популяция второй волны представлена макрофагами [56, 57]. Их реакция зависит от физико-химических свойств коллагена Чем жестче химическая обработка, тем больше отличается коллаген от нативного, тем более «чужим» он становится для макрофага и тем сильнее выражена тканевая реакция . Установленные между мышечными слоями брюшной стенки крысы фрагменты имплантатов из медленно деградирующего прошитого коллагена способствуют формированию ГКИТ и инкапсуляции материала . Мигрирующие макрофаги, судя по экспрессии рецепторов CCR7 и CD206, можно отнести в ряде случаев к М1 фенотипу, но во многих случаях определить их принадлежность к известным фенотипам не представляется возможным . С течением времени вокруг имплантата появляются М2 макрофаги, которые располагаются преимущественно в фиброзной капсуле [58]. Эндопротезы из непрошитого коллагена свиньи, человека и быка [58] и прошитый диизоцианатом коллаген овцы [59], быстро разрушающиеся в организме крысы, стимулируют новообразование полноценной соединительной и мышечной тканей Они не способствуют образованию ГКИТ и не инкапсулируются . Часть монону-клеарных фагоцитов, скапливающихся на границе ткань/материал, не имеет маркеров М1/М2 фенотипа, часть содержит оба маркера, а часть является М2 макрофагами Субпопуляция М1 макрофагов на таких имплантатах отсутствует [58—60]. Гистомор-фометрический анализ показал положительную корреляцию между количеством макрофагов, несущих маркеры М2 фенотипа на ранних этапах развивающейся тканевой реакции, и показателями успешного ремоделирования тканей в зоне имплантации [58].
Тканевая реакция на недеградируемые материалы существует в течение всего времени присутствия их в организме [61]. Ее интенсивность модулируется физико-химическими свойствами материалов: в ряду полиэстер, политетрафторэтилен, полипропилен — первый полимер вызывает максимально выраженное воспаление и слияние макрофагов, последний — минимальное, а выраженность фиброза для всех перечисленных материалов положительно коррелирует с количеством ГКИТ на поверхности синтетических полимеров [40]. Несмотря на большое количество работ, в которых исследована воспалительная реакция на различные материалы,
характеристики аккумулирующихся на них макрофагов изучены недостаточно . M . T . Wolf и соавт . (2014) показали, что на нитях и между узлами полипропиленовой сетки, имплантированной в брюшную стенку крысы, скапливаются преимущественно макрофаги с маркерами М1 фенотипа (CD86 + CD206-) [57]. Нанесенный на полипропилен гель из межклеточного матрикса соединительной ткани снижает число М1 макрофагов и ГКИТ и одновременно тормозит рост микрососудов . Это явление хорошо согласуется с результатами работ, демонстрирующими экспрессию ангиогенных факторов М1 макрофагами ран и подавление васкулогенеза при их блокаде [21, 52].
О синтетической активности макрофагов, спектре их биологически активных молекул, обеспечивающих тканевую реакцию, известно мало . У мыши на периферии зоны имплантации нейлоновой сетки скапливаются макрофаги, секретирующие iL-6 и CCL2, iL-13 и TGF-p и в то же время в популяции клеток, в том числе и в ГКИТ, адгезированных на волокнах эндопротеза, экспрессируются iL-4, iL-10, iL-13 и TGF-p [47]. iL-4 и iL-13 — мощные профиброгенные медиаторы, они не только поляризуют макрофаги в М2а направлении, способствуя продукции факторов роста, но и через индукцию экспрессии фибробла-стами TGF-p, стимулируют синтез ими коллагена . Профиброгенным эффектом обладают также iL-10 и CCL2, обеспечивающие хемотаксис предшественников миофибробластов — фиброцитов [29, 30, 62, 63] Можно предположить, что именно макрофаги создают среду, способствующую развитию фиброза вокруг недеградирующих материалов
Образование фиброзной ткани может оказывать как негативное, так и позитивное влияние на результаты лечения пациентов . В герниологической практике фиброзная трансформация тканей, связанная с имплантацией полипропиленового эндопротеза, является одной из основных проблем (рис 2, собственные данные), которая на фоне нерациональной оперативной тактики в 15—20% случаев приводит к развитию рецидивов грыж различных локализаций [39, 64]
Рис. 2. Гигантские многоядерные клетки инородных тел (обозначены стрелками) вокруг волокон сетчатого полипропиленового имплантата у больного с рецидивом послеоперационной вентральной грыжи .
Окраска: гематоксилин и эозин . Ув . х400
В последние годы особенно интенсивно развиваются технологии дентальной имплантации, основанные на интеграции установленных конструкций за счет развития соединительной ткани (рис 3, собственные данные) . Несмотря на то, что фиброинте-грация имплантатов рядом специалистов признается как допустимый вариант, поиск новых материалов, способствующих процессам остеоинтеграции, продолжается [65].
В этой связи существенное значение приобретают изучение клеточных популяций в зоне протезирования, разработка методов и подходов к блокированию чрезмерной воспалительной реакции с исходом
Рис. 3. Гигантские многоядерные клетки инородных тел (обозначены стрелками) в структуре капсулы титанового эндопротеза, имплантированного в костную ткань кролика . Окраска: гематоксилин и эозин . Ув . х400
в фиброз и стимуляция репаративной регенерации в месте имплантации различных материалов
Заключение
Макрофаги — полиморфная популяция клеток, фенотип которых определяется сигналами микроокружения Они играют решающую роль в реакции организма на чужеродный материал, используемый для эндопротезирования, катетеризации, стенти-рования и др видов лечения Характер реакции и степень ее выраженности зависят как от размера имплантируемого материала, так и от его физико-химических свойств и могут иметь как положительное, так и отрицательное значения для организма пациента . Для деградируемых материалов на основе коллагена показана зависимость типа активации макрофагов и скорости регенерации соединительной ткани от способа обработки коллагенового сырья . Это открывает широкие возможности для специалистов, разрабатывающих новые методы децеллюляризации тканей, химической модификации и стерилизации коллагеновых материалов в целях получения им-плантатов для регенеративной медицины
Проблемы, связанные с активацией макрофагов недеградирующими материалами, по-видимому, должны решаться иначе Макрофаги, фагоцитирующие микрочастицы износа поверхности суставных эндопротезов, и макрофаги, мигрирующие к обширным поверхностям синтетических имплантов, инициируют длительно персистирующее воспаление, остеолиз в первом случае и фиброз во втором Нивелирование этого эффекта, скорее всего, будет достигнуто путем блокады направленной миграции, адгезии и активации моноцитов/макрофагов, что потребует более глубоких знаний об этих процессах, чем те, которыми мы располагаем в настоящее время
ЛИТЕРАТУРА:
I. Маянский А . Н ., Маянский Д . Н . Очерки о нейтрофиле и макрофаге . Новосибирск: Наука; 1983 .
2 . Pixley F . J . Macrophage migration and its regulation by CSF-1. int . J . Cell Biol . 2012; 2012: 501962 .
3 . Меджитов Р ., Джанвей Ч . Врожденный иммунитет. Казанский мед . журнал 2004; 85(3): 161-7 .
4 . Gordon S . Pattern recognition receptors: doubling up for the innate immune response . Cell 2002; 111: 927-30 .
5 . Greaves D ., Gordon S . Recent insights into the biology of macrophage scavenger receptors . J . Lipid Res . 2005; 46(1): 11-20 .
6 . Bowdish D . M ., Sakamoto K ., Kim M . J . et al . MARCO, TLR2, and CD14 are required for macrophage cytokine responses to Mycobacterial trehalose dimycolate and Mycobacterium tuberculosis . PLoS Pathog . 2009; 5(6): e1000474.
7 . Zizzo G . , Hillard B .A ., Monestier M . et al . Efficient clearance of early apoptotic cells by human macrophages requires "M2c" polarization and MerTK induction . J . immunol . 2012; 187(7): 3508-20 .
8 . Vogel D . Y ., Heijnen P . D ., Breur M . et al . Macrophages migrate in activation-dependent manner to chemokines involved in neuroinflammation . Neuroinflammation 2014; 11(1): 23 .
9 . Vogelpoel L . T ., Baeten D . L ., de Jong E . C . et al . Control of cytokine production by human Fc gamma receptors: implications for pathogen defense and autoimmunity . Front . immunol . 2015; 6(1): 79 .
10 Soehnlein O ., Lindbom L ., Weber C . Mechanisms underlying neu-trophil-mediated monocyte recruitment . Blood 2009; 114(21): 4613-31.
II. Mantovani A ., Sica A ., Sozzani S . et al . The chemokine system in diverse forms of macrophage activation and polarization . Trends in immunology 2004; 25(12): 677-86 .
12 . Anderson J . M ., Rodriguez A ., Chang D . T . Foreign body reaction to biomaterials . Semin . immunol . 2008; 20(2): 86-100 .
13 . Нао N . B ., Lu M . H ., Fan Y . H . et al . Macrophages in tumor microenvironments and the progression of tumor . Clin . Develop . immunol . 2012; 2012: 948098 .
14 . Ghigo A ., Franco i ., Morello F . et al . Myocyte signaling in a leucocyte recruitment to the heart . Cardiovasc . Res . 2014; 102(2): 270-80
15 . Newton K . , Dixit V . M . Signaling in innate immunity and inflammation . Cold Spring . Harb . Prospect . Biol . 2012; 4(3): a006049 .
16 . Chen X., Wenke Z ., Xu W . et al . Granulin exacerbates lupus nephritis via enchancing macrophage M2b polarization . PLOS ONE 2013; 8(6): e65542 .
17 Graff J .W . , Dickson A . M ., Clay G . et al . identifying functional microRNAs in macrophages with polarized phenotypes . J . Biol . Chem . 2012; 286(26): 21816-25 .
18 . Tatano Y ., Shimizu T ., Tomioka H . Unique macrophages different from M1/M2 macrophages inhibit T cell mitogenesis while upregu-lating Th17 polarization . Scie . Rep . 2014; 4: 4146 .
19 . Alvarez M . N ., Peluffo G ., Piacenza L . et al . intraphagosomal peroxynitrite as macrophage-derided cytotoxine against internalized Trypanosoma crusi . Consequences for oxidative killing and role of microbial peroxiredoxins in infectivity . JBC 2011; 286(8): 6627-40 .
20 . Gong D . , Shi W ., Yi S . et al . TGF-ß signaling plays a critical role in promoting alternative macrophage activation BMC immunology 2012; 13: 31.
21 Spiller K L , Anfang R R , Spiller K J et al The role of macrophage phenotype in vascularization of tissue engineering scaffolds . Biomaterials 2014; 35(15): 4477-88 .
22 Gratchev A , Kzhyshkowska J , utikal J et al interleukin-4 and dexamethasone counterregulate extracellular matrix remodelling and phagocytosis in type-2 macrophages . Scand . J . immunol . 2005; 61: 10-7 .
23 Kreider T , Anthony R M , urban J F et al Alternatively activated macrophages in helminth infections Curr Opin immunol 2007; 19(4): 448-53 .
24 . Trial J ., Cieslik K . A . , Haudek S . B . et al . Th1/M1 conversion toTh2/M2 responses in models of inflammation lacking cell death stimulates maturation of monocyte precursors to fibroblasts Front immun . 2013; (4): 287 .
25 . Xiong W ., Frasch S . C ., Thomas S . M . et al . induction of TGF-ß1 synthesis by macrophages in response to apoptotic cells requires activation of scavenger receptor CD36 . PLOS ONE 2013; 8(8): e72772 .
26 . Jetten N ., Roumans N . , Gijbels M . J . et al . Wound administration of M2-polarized macrophages does not improve murine cutaneous healing responses . PLOS ONE 2014 . 9(7): e102994 .
27 . Ylöstalo J . H ., Bartosh T.J ., Coble K . et al . Human mesenchymal stem/stromal cells thMSCs) cultured as spheroids are self-activated to produce prostaglandin E2 ÎPGE2) that directs stimulated macrophages into an anti-inflammatory phenotype . Stem Cells 2012; 30(10): 2283-96 .
28 . Wynn T . A. Cellular and molecular mechanisms of fibrosis . J . Pathol . 2008; 214(2): 199-210 .
29 . Sun L ., Louie M . C ., Kevin M . et al . New concepts of IL-10-in-duced lung fibrosis: fibrocyte recruitment and M2activation in a CCL2/ CCR2 axis . Am . J . Physiol . Lung Cell Mol . Physiol . 2011. 300: L341-53 .
30 . Wynes M . W ., Riches D .W . Induction of macrophage insulin-like grows factor-I expression by the Th2 cytokines IL-4 and IL-1. J . Immunol . 2003; 171: 3550-9 .
31. Jetten N . , Verbruggen S . , Gijbels M . J . et al . Anti-inflammatory M2, but not pro-inflammatory M1 macrophages promote angiogenesis in vivo . Angiogenesis 2014; 17: 109-18 .
32 . Shen B ., Liu X ., Yu Fan Y . et al . Macrophages regulate renal fibrosis through modulating TGF-ß superfamily signaling . Inflammation 2014; 37(6): 2076-84 .
33 . Avdic S ., Cao J . Z ., McSharry B . P . et al . Human cytomegalovirus interleukin-10 polarizes monocytes toward a deactivated M2c phenotype to repress host immune responses . J . Virol . 2013; 87(18): 10273-82 .
34 Sindrilaru A , Peters T , Wieschalka S et al An unrestrained proinflammatory M1 macrophage population induced by iron impairs wound healing in humans and mice . J . Clin . Invest . 2011; 121: 985-97 .
35 . Ramachandran P ., Pellicoro A ., Vernon M .A . et al . Differential Ly-6C expression identifies the recruited macrophage phenotype, which orchestrates the regression of murine liver fibrosis . PNAS USA 2012; 109(46): E3186-95 .
36 . Кавалерский Г . М . , Мурылев В . Ю . , Петров Н . В . и др . Асептическое расшатывание эндопротеза тазобедренного сустава . М .: Медицина; 2011.
37 Hallab N E , Jacobs J J Biologic effects of implant debris Bulletin of the NYU Hospital for joint diseases 2009; 67(2): 182-8 .
38 Purdue P E , Koulouvaris P , Nestor B J et al The central role of wear debris in periprosthetic osteolysis . HSSJ 2006; 2: 102-11.
39 . Плешков В . Г . , Агафонов О . И . Послеоперационные вентральные грыжи — нерешенные проблемы . Вестник экспериментальной и клинической хирургии 2009; 2(3): 248-55 .
40 . Orenstein S . B . , Sabeski E . R ., Kreutzer D . L . et al . Comparative analysis of histopathologic effects of synthetic meshes based on material, weight, and pore size in mice . J . Surg . Res . 2012; 176: 423-9 .
41. Hu W . J ., Eaton J .W . , Ugarova T . P . et al . Molecular basis of biomaterial-mediated foreign body reactions . Blood 2001; 98: 1231-8 .
42 Podolnikova N P , Yermolenko I S , Fuhrmann A et al Control of integrin a IIbß 3 outside-in signaling and platelet adgesion by sensing the physical propertiesof fibrin(ogen) substrates . Biochemistry 2010; 46: 68-77
43 Andersson J , Ekdahl K N , Lambris J D et al Binding of C3 fragment on top of adsorbed plasma proteins during complement activation on a model biomaterial surface Biomaterials 2005; 26: 1477-85 .
44 . Brevig T ., Holst B ., Ademovic Z . et al . The recognition of adsorbed and denatured protein of different topographies by ß2 integrins end effects on leukocyte adhesion and activation Biomaterials 2005; 26: 3039-53
45 Zaveri T D , LewisJ S , Dolgova N V et al Integrin-directed modulation of macrophage responses to biomaterials Biomaterials 2014; 35: 3504-15 .
46 . Hernandez-Pando R ., Bornstein Q . L ., Leon D .A . et al . Inflammatory cytokine production by immunological and foreign body multinucleated giant cells . Immunology 2000; 100: 352-8 .
47 . Higgins D . M ., Basaraba R . J ., Hohnbaum A . C . et al . Localized immunosuppressive environment in the foreign body response to implanted biomaterials . Am . J . Pathol . 2009; 175(1): 161-70 .
48 . Ariganello M . B ., Simionescu D .T., Labowa R . S . et al . Macrophage differentiation and polarization on a decellularized pericardial biomaterial . Biomaterials 2011; 32(2): 439-49 .
49 . McDade J . K ., Brennan-Pierce E . P ., Ariganello M . B . et al . Interactions of U937 macrophage-like cells with decellularized pericardial matrix materials: Influence of crosslinking treatment . Acta Biomater. 2013; 9: 7191-9 .
50 . Kajahn J ., Franz S ., Rueckert E . et al . Artificial extracellular matrices composed of collagen I and high sulfated hyaluronan modulate monocyte to macrophage differentiation under conditions of sterile inflammation . Biomatter. 2012; 2(4): 226-36 .
51. Orenstein S . B ., QiaoY ., Kaur M . et al . Human monocyte activation by biologic and biodegradable meshes in vitro Surg Endosc 2010; 24: 805-11.
52 . Gretzer C . , Gisselfält K ., Liljensten E . et al . Adhesion, apop-tosis and cytokine release of human mononuclear cells cultured on degradable poly(urethane urea), polystyrene and titanium in vitro Biomaterials 2003; 24: 2843-52
53 . Grotenhuis N ., Bayon Y., Lange J . F. et al . A culture model to analyze the acute biomaterial-dependent reaction of human primary macrophages . Biochem . Biophys . Res . Communic . 2013; 433: 115-20 .
54 . Schutte R . J ., Parisi-Amon A ., Reichert W . M . Cytokine profiling using monocytes/macrophages cultured on common biomaterials with a range of surface chemistries J Biomed Mater Res 2009; 88(1): 28-39 .
55 Lynn A D , Bryant S J Phenotypic changes in bone marrow derived murine macrophages cultured on PEG-based hydrogels and activated by lipopolysaccharide . Acta Biomater . 2011; 7(1): 123-32 .
56 Ye O , Harmsen M C , van Luyn M J A et al The relationship between collagen scaffold cross-linking agents and neutrophils in the foreign body reaction . Biomaterials 2010; 31: 9192-201.
57 Wolf M T , Dearth C L , Ranallo C A et al Macrophage polarization in response to ECM coated polypropylene mesh Biomaterials 2014; 35: 6838-49 .
58 Brown N , Londono R , Tottey S et al Macrophage phenotype as a predictor of constructive remodeling following the implantation of biologically derived surgical mesh materials . Acta Biomater . 2012; 8: 978-87
59 . Van Putten S . M ., Ploege D . T .A ., Popa E . R . et al . Macrophage phenotypes in the collagen-induced foreign body reaction in rats . Acta Biomater. 2013; 9: 6502-10 .
60 . Bullers S . J . , Baker S . C ., Ingham E . et al . The human tissue— biomaterial interface: a role for PPARg-dependent glucocorticoid receptor activation in regulating the CD163+ M2 macrophage phenotype . Tissue Engineering: Part A 2014; 20(17-18): 2390-401.
61. Zogbi L ., Portella A . O ., Trindade M . R . et al . Retraction and fibroplasia in a polypropylene prosthesis: experimental study in rats Hernia 2010 14: 291-8 .
62 . Wu W . K ., Llewellyn O . P . , Bates D . O . et al . IL-10 regulation of macrophage VEGF production is dependent on macrophage polarisation and hypoxia . Immunobiol . 2010; 215(9-10): 796-803 .
63 . Zhu Z ., Ma B ., Zheng T . et al . IL-13-induced chemokine responses in the lung: role of CCR2 in the pathogenesis of IL-13-induced inflammation and remodeling J Immunol 2002; 168: 2953-62
64 . Иванов И . С ., Иванов С . В ., Горяинова Г . Н . Использование клеточных технологий с целью улучшения свойств соединительной ткани в эксперимент . Новости хирургии 2012; 20(4): 3-8 .
65 . Кулаков А .А ., Григорьян А . С . , Архипов А. В . Влияние различных способов модификации поверхности дентальных имплантатов на их интеграционный потенциал . Стоматология 2012; 6: 75-7 .
Поступила: 03.07.2015
