CC BY
82
Листья инжира -перспективный компонент для напитков и чайных смесей
Р.Г. Мелкадзе
Кутаисский научный центр АН Грузии Н.Ш. Чиковани, К.Г. Киласония
Грузинский государственный университет субтропического хозяйства
Смоковница (инжир обыкновенный) (Ficus carica) относится к семейству тутовых. Это дерево или кустарник высотой до 10 м, листья крупные, черешковые, 3-5-парнолопастные, до 15-20 см длиной, сверху обычно темно-зеленные, шершавые, снизу опушенные.
Родина инжира — Средиземноморье, Средняя Азия, Иран, Закавказье. На земном шаре известно свыше 600 сортов. Инжир широко распространен в Грузии, где он часто встречается и в диком виде по берегам рек, и в горных каменистых местах.
В листьях смоковницы содержится природный комплекс кумаринов, среди которых ведущими считаются псо-рален и бергантен. В нем обнаружены также флавоноиды, витамины В1, В2, С, Е, Р, дубильные вещества, алкалоиды. Листья инжира с древнейших времен использовали в народной медицине против разных недомоганий: после тяжелых перенесенных болезней, при лечении анемии, заболеваний желудочно-кишечного тракта и
др. [1, 2].
Лист инжира — перспективный компонент для составов чайных смесей и напитков, поэтому мы провели более детальное его исследование с целью установления стандартных показателей.
В начале экспериментов изучали внешние признаки и микроскопические характеристики сырья.
Внешние признаки. Листья цельные или частично измельченные, простые, крупные, длиной 8-30 см, шириной 6-30 см, пальчатолопастные или пальчатораздельные, реже цельные, в очертаниях округлые или широкояйцевидные с сердцевидным или выемчатым основанием и сближенными или расставленными ушками. Количество лопастей (долей) — 3-5 (до 7) овальной, яйцевидной или широкояйцевидной формы (у более молодых деревьев от лопатчатой до широколанцетной). Их верхушки округлые, при-тупленные, заостренные, край у основания — цельный, переходящий в неравномерно волнистый, на отдельных
участках иногда редкопильчатый или выемчатый до лопастного.
Цвет верхней стороны листовой пластинки темно-зеленый, поверхность жестко-шероховатая, нижняя сторона светлее, бархатисто-шероховатая. Жилкование пальчатое с характерным рисунком выступающих над поверхностью (с нижней стороны) светлых жилок. Многие боковые жилки 2-го или 3-го порядка параллельны друг другу и примерно под прямым углом расположены к жилкам 1-го или 2-го порядка соответственно.
Черешок длиной 2-7 (до 12) см, спавшийся, уплощенный, иногда перекручен.
Запах сырья своеобразный, вкус слабый, горьковатый, через некоторое время сгущается.
Микроскопия. При рассмотрении листовой пластинки с поверхности видны паренхимные многоугольные клетки верхней эпидермы с прямыми или слегка изогнутыми слабоутолщенными стенками. Клетки нижней эпидермы более мелкие, их стенки тонкие и извилистые. Кутикула про-дольноскладчатая. Устьица многочисленные, эллиптические, расположены только на нижней стороне листа, их размеры заметно варьируют. Около-устьичных клеток 4-5, реже 3-6 (ано-моцитный тип устьичного комплекса), кроме того, встречаются крупные устьица, окруженные радиально расположенными околоустьичными клетками (до 12) — актиноцитный тип.
Обнаружение окси- и фурокумари-нов на уровне индивидуальных соединений проводили методом тонкослойной хроматографии (ТСХ). Присутствие в сырье большого количества хлорофиллов мешает проведению теста, что требует предварительной водной экстракции суммы кума-ринов из получаемого в аппарате Сок-слета хлороформно-метанольного экстракта листьев и последующей экстракции суммы кумаринов в этил-ацетат с последующим концентрированием путем упаривания растворителя. Хроматографический тест проводили на пластинках «Силуфол УФ-
254» и «Силуфол». Выбор системы растворителей был определен на основании литературных данных. В результате исследования различных смесей растворителей в качестве подвижной фазы была выбрана система следующего состава: хлороформ — эфир диэтиловый — спирт метиловый — вода (77 : 15 : 8 : 1,2). В данной системе растворителей на хроматограммах при просматривании в УФ-свете при 366 нм наблюдается наиболее четкое деление пятен индивидуальных веществ.
На полученных хроматограммах были обнаружены четыре пятна с голубой флуоресценцией, из которых нами были идентифицированы пятна с величиной около 0,47±0,05 (ум-беллиферон) и пятно с величиной И) около 0,70±0,05 (псорален), а также наличие дополнительных пятен, в том числе на линии старта (рис. 1).
Для нижней эпидермы также характерны крупные тонкостенные округлые клетки — литоцисты с остатками ножки цистолита в центральной части клетки в виде утолщенной точки либо с полностью или частично сохранившимся бугристым телом цисто-лита.
Клетки черешка и края листовой пластинки — паренхимные и удлиненные, прямостенные, отличаются мелкими размерами и утолщенными оболочками.
Волоски двух типов — простые и головчатые. Простые волоски прямые или изогнутые, одноклеточные, разной длины. Их оболочки утолщены и покрыты более или менее выраженной бородавчатой кутикулой, а округлое основание окружено радиально расходящимися, как правило, более мелкими и толстостенными клетками, образующими розетку вокруг волоска. С поверхности основания волосков или места их прикрепления просматриваются в виде окружностей разного диаметра с утолщенными контурами. Простые волоски определяют разреженное опушение верхней эпидермы и густое — нижней, приурочены главным образом к жилкам разных порядков и краю листа. На верхней сгорело-листовой пластинке они короче, чем на нижней, и более изогнуты, по краю — прижаты к поверхности или изогнуты в направлении к верхушке листа и имеют более утолщенные оболочки. На черешке преобладают короткие простые волоски, иногда в виде щетинок.
Головчатые волоски встречаются реже, имеют одноклеточную ножку и овальную четырехклеточную двуряд-ную головку, часто с коричневым содержимым, характерным для жилок и черешка.
ПИ
шшитсиу 5 •
2004
О О 0
0 о
О СО(
А Б В
Рис. 1. Хроматограмма качественных реакций: А — хроматограмма испытуемого раствора; Б — хроматограмма раствора умбеллиферона; В — хроматограмма раствора псоралена
На просветленных листовых пластинках с поверхности в мезофилле просматриваются многочисленные кристаллы оксалата кальция в виде друз, расположенных одиночно или сгруппированных. На давленых просветленных препаратах более крупных жилок листа и черешка с поверхности просматриваются цепочки мелких друз и длинные нечленистые млечники, заполненные неокрашенным содержимым.
Общая качественная реакция на кумарины. Для установления подлинности сырья нами предложена общая качественная реакция на кумарины, которая проводится с водным извлечением из хлороформно-метаноль-ного экстракта листьев и диазореак-тивом в щелочной среде. Появляющееся красно-коричневое окрашивание бесцветного раствора свидетельствует о наличии кумаринов.
Известно, что листья инжира содержат разнообразные фенольные соединения, в частности производные кумарина. Эти данные подтверждены нами хроматографическим и спектральным методами. Как указано выше, достоверно обнаружено содержание в сырье, по меньшей мере, двух производных кумарина — фурокумарина псоралена и 7-оксикумарина (умбеллиферона). В спектре извлечения из листьев присутствуют полосы поглощения, характерные для окси- и фур-окумаринов (рис. 2).
Количественное определение суммы кумаринов в сырье проводили спектро-фотометрическим методом, основанным на их способности к поглощению электромагнитной энергии в УФ-обла-сти спектра. В качестве аналитической выбрана длина волны 290 нм, которая соответствует основному максимуму поглощения псоралена; при этой длине волны имеют поглощение и другие кумарины.
Суть методики. После истощающей экстракции навески сырья в аппарате Сокслета смесью растворителей спирт метиловый + хлороформ (15:85) отмеренное количество полученного извлечения экстрагировали водой для отделения кумаринов от хлорофиллов и других природных пигментов, мешающих спектрофотометрированию кумаринов. Для лучшего разделения слоев к смеси прибавляли натрия хлорид. Затем водное извлечение центрифугировали, фильтровали, доводили объем фильтрата до заданного объема водой и спектрофотометрировали при длине волны 290 нм. Расчет суммы содержания кумаринов проводили по формуле с использованием величины удельного показателя поглощения псо-ралена в воде, равного 650.
Аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 3 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в аппарат Сокслета и экстрагировали смесью растворителей спирт метиловый + хлороформ (15:85) в течение 2-3 ч (не менее 15 сливов). Последний слив растворителя был практически бесцветным.
Полученный экстракт упаривали до объема 80-90 мл, охлаждали до комнатной температуры, количественно переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора до метки смесью растворителей спирт метиловый + хлороформ (15:85) и перемешивали. Далее 20 мл полученного раствора помещали в делительную воронку вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл воды и 2 г натрия хлорида, смесь энергично встряхивали в течение 2 мин и давали отстояться до полного разделения фаз. Верхний водный слой переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл, а нижний — хлороформно-метанольный слой вновь обрабатывали 40 мл воды с добавлением 2 г натрия хлорида, как описано выше. После расслоения водную часть переносили в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл, доводили объем раствора водой до метки и перемешивали.
Полученный раствор центрифугировали на центрифуге при 5000 об/мин
1,2 -
1,0 0,8 0,6 -0,4 -0,2 0 -0,2
—I-1-1-1-1-1-г
260 280 300 320 340 360 380
Рис. 2. УФ-спектры поглощения умбеллиферона (1), псоралена (2) и водного извлечения из хлороформно-метанольного экстракта листьев инжира в воде (3)
в течение 5 мин, после чего фильтровали через бумажный фильтр «желтая лента».
Измеряли оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 290 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.
Содержание суммы кумаринов в процентах в пересчете на псорален и высушенное сырье вычисляли по формуле
X =
D•100•100•100 650т • 20 (100- W) D• 500•100 650т (100- W) '
где D — оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 290 нм; 650 — удельный показатель поглощения псоралена при 290 нм; т — масса навески сырья, г; W — содержание влаги в сырье, %.
По полученным данным, в условиях проведения анализа содержание суммы кумаринов в пересчете на псорален и сухое сырье составило от
0.085.до 0,128 % на сухую массу.
ЛИТЕРАТУРА
1. Кузнецова Г. А. Природные кумарины и фу-рокумарины. — Л.: Наука, 1967.
2. Растительные лекарственные средства/ Н.П. Максютина, Н.Ф. Комисаренко, А.П. Прокопенко и др. — Киев: Здоровье, 1985.
3. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография: Пер. с англ. — М.: Мир, 1931.
4. Почему растения лечат/ М.Я. Ловкова, A.M. Рабинович и др. — М.: Наука, 1990.
5. Псорален-стандарт. ЗФС 42-53276.
5•2004
ПИВО " "ЛПИТКИ
