CC BY
67
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ФОРМЫ
С.А. Беляев1, Н.К. Юркштович1, Н.В. Голуб1,
Т. Л. Юркштович1, П.М.Бычковский1, Ф.Н. Капуи-кий1, Д.П. Вееениіс, А. С. Федулов2, И.И. Сакович ПОЛУЧЕНИЕ ПРОЛОНГИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ТЕМОЗОЛОМИДА, ИССЛЕДОВАНИЯ IN VITRO ‘НИИ ФХП БГУ, Минск 2ЛПУ 9 КБ, Минск
Цель настоящей работы ~ получение пролонгированной формы темозоломида, представляющей собой гидрогель для локальной (местной) химиотерапии злокачественных образований головного мозга на основе биодеградируемого полимера ~ фосфорилиро-ванного декстрана. Благодаря удачному сочетанию физикохимических (наличие ионогенных групп, высокая степень набухания) и медико-биологических (биосовместимость, нетоксичность, способность рассасываться в тканях организма без воспалительной реакции, относительная устойчивость в биологических средах) свойств определенный интерес вызывает использование в качестве биорассасывающихся полимеров-носителей модифицированных полисахаридов. Один из таких новых и перспективных полисахаридов і высокозамещенный фосфат декстрана (ВЗФД), являющийся oгpaничeннo-нaбyxaющим гелем.
Изучены закономерности фосфорилирования декстрана в системе H3PO4/P2O5/ Bu3PO4/CCl4, получены фосфаты декстрана с высокой степенью замещения и создание на его основе полимерной формы темозоломида. Установлены зависимости накопления фосфорнокислых групп от соотношения компонентов реакционной смеси и температуры, от времени проведения реакции. Изучено влияние числа фосфорнокислых групп ВЗФД на степень набухания. Разработана методика введения темозоломида (Temodal, Shering-Plough) в ВЗФД. Создана ЛФ ВЗФД ~ темозоломид.
Доклинические исследования выявили пролонгированный дозозависимый цитотоксический эффект полимерной формы темозоломида в течение 24 ч на глиальные клетки в культуре: ингибирование пролиферации (в дозах 375 и 137,5 мкг/мл) и цитодеструктивное действия на клетки глиомы (использовались большие дозы ~ 1500 и 750 мкг/мл). Максимально токсической дозы полимерной формы темозоломида (3 мг на 1 мл геля) не выявлено, что предполагает отсутствие значимого общетоксического действия на ГМ и организм в целом.
Е.В. Игнатьева, Е.В. Тазина, Л.Г. Гатинская,
И.В. Ярцева, Н.А. Оборотова
ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ТЕРМОЗАВИСИМОЙ
ЛИОФИЛИЗИРОВАННОЙ
ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ
ФОРМЫ ДОКСОРУБИЦИНА
ГУ РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА РАМН, МОСКВА
Поиск новых средств доставки основного действующего вещества і важное направление повышения эффективности лекарственной терапии злокачественных новообразований. В качестве новой лекарственной формы доксорубицина предложены термочувствительные липосомы, способные высвобождать препарат в ответ на действие локальной гипертермии, в процессе которой опухоль нагревается до 41^43 °С.
Цель исследования. Разработка критериев и параметров оценки качества лекарственной формы «Доксорубицин термолипосомальный лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,7 мг» (ТЛЛФД-лио).
Материалы и методы. Образцы ТЛЛФД-лио; УФ-спектроскопия, лазерная спектрометрия, по-тенциометрия.
Результаты. Для стандартизации ТЛЛФД-лио выбраны следующие критерии: описание, подлинность, средняя масса содержимого флакона, размер липосо-мальных везикул, pH, потеря в массе при высушивании, количественное определение доксорубицина. Подлинность препарата подтверждали электронным спектром поглощения, характерным для доксорубицина. Определение 0ср везикул проводили в проводящем лазерном луче с помощью фотонного корреляционного анализатора на приборе Submicron Particle Sizer Nicomp-380 (США). Величину pH определяли потен-циометрически. Содержание доксорубицина во флаконе (мг) определяли спектрофотометрически при X 252±2 нм, используя рабочий стандартный образец. Основные показатели качества ТЛЛФД-лио приведены в таблице. Для установления срока годности ТЛЛФД-лио 3 серии лекарственной формы хранили в сухом, защищенном от света месте при температуре ~18 °С. Контроль проводили по перечисленным выше критериям. При хранении в течение 1 года значимых изменений качества препарата не произошло.
Выводы. На основании проведенных исследований установлены параметры критериев качества ТЛЛФД-лио и разработан проект ФСП.
Таблица
Основные показатели качества ТЛЛФД-лио
Описание Средняя масса содержимого флакона, г pH Размер везикул, нм Потеря в массе при высушивании, % Содержание доксорубицина в одном флаконе, мг
Лио филизированная сухая пористая масса красновато-розового цвета 0,088 і 0,098 ,8 7, 1 СП 7, Не более 250 Не более 3 0, 6 і 0, 8
Е.И.Михаевич, А.П.Полозкова, О.Л. Орлова, С.А.Партолина, Н.П.Яворская, И.С.Голубева,
3. С. Смирнова, Н.А.Оборотова, Р.НАляутдин ПОДХОДЫ К РАЗРАБОТКЕ ПАРЕНТЕРАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ЦИФЕТРЕЛИНА
ГУ РОНЦ ИМ. Н.Н.БЛОХИНА РАМН, МОСКВА
Введение. В последнее время повышенный интерес химиотерапевтов вызывает поиск новых противоопухолевых средств, в частности - среди пептидных гормонов гипоталамуса. Одним из наиболее перспективных объектов изучения является соматостатин, обладающий широким спектром биологического действия и способностью ингибировать пролиферативные процессы. Для синтетических аналогов эндогенного соматостатина (ок-треотид, лантреотид) характерно отсутствие токсичности и высокая избирательность противоопухолевого действия. В лаборатории химического синтеза ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН был синтезирован еще один аналог соматостатина - Цифетрелин. В связи с плохой растворимостью лекарственного вещества в воде стояла задача солюбилизации препарата.
Цель исследования. Создание модели лекарственной формы цифетрелина для парентерального введения. Изучение противоопухолевой активности прототипов следующих лекарственных форм: липосо-мальной лекарственной формы и раствора препарата в масле с ДМСО.
Материалы и методы. Липосомальную лекарственную форму готовили методом гидратации тонкой липидной пленки с одновременным включением Цифетрелина в липидный бислой. Липосомы измельчали методом экструзии и стерилизовали фильтрацией. Раствор Цифетрелина в масле готовили ex tempore путем растворения лекарственного вещества в ДМСО и последующего смешивания со стерильным оливковым маслом (содержание ДМСО не более 10%).
Лекарственные формы тестировали на перевиваемых моделях опухолей мышей: раке шейки матки РШМ-5 и аденокарциноме молочной железы Са-755. Оценивали торможение роста опухоли (ТРО%).
Результаты. Для липосомальной лекарственной формы на Са-755 и РШМ-5 при внутривенном введении в дозе 20-40 мг/кг показан выраженный эффект -70-80% ТРО, который в течение последующих двух недель после окончания лечения снижался до 40-50% ТРО. Для раствора цифетрелина в ДМСО и масле на Са-755 при подкожном введении в дозе 70 мг/кг показан выраженный эффект - 85% ТРО, который в течение последующих двух недель после окончания лечения снижался до 35% ТРО.
Выводы. Представляется целесообразным продолжить работу по двум лекарственным формам: ли-посомальная лекарственная форма цифетрелина для внутривенного введения и раствор цифетрелина в масле для подкожного введения. Работа по установлению терапевтических доз продолжается.
Е.В. Тазина, А.П. Полозкова, Е.В. Игнатьева,
О.Л. Орлова, НА. Оборотова ВЛИЯНИЕ РАЗМЕРОВ ТЕРМОЛИПОСОМ НА ВКЛЮЧЕНИЕ ДОКСОРУБИЦИНА ГУ РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА РАМН, МОСКВА
Введение. Одним из важных физических параметров, определяющих поведение липосом в живых системах, является их размер.
Размер везикул также влияет на стабильность ли-посомальных препаратов во время хранения.
Цель исследования. Изучение влияния размеров термолипосом (ТЛ) на включение в них доксорубицина (Доке).
Материалы и методы.
ТЛ получали из:
1.2-дипальмитоил-зп-глицеро-3 -фосфохолина (DPPC);
1.2-дистеароил-Бп-глицеро-3 -фосфохолина (DSPC),
пегилированного
1.2-дистеароил-Бп-глицеро-3 -фосфоэтаноламина (DSPE-PEG-2000 аммониевая соль);
холестерина в молярном соотношении 9:1:0,02:0,2.
Приготовленную дисперсию мультиламеллярных везикул делили на две порции:
одну экструдировали через поликарбонатные мембраны (Whatman) с размером пор 200 нм (ТЛ-200), другую - через мембраны с размером пор 200 нм и 100 нм (ТЛ-100)
- при 50 C с помощью ручного мини-экструдера Avanti Mini-Extruder.
Доке загружали в ТЛ против градиента сульфата аммония при 50 °С в течение 1 ч.
Для разделения Докс-ТЛ от невключившегося Доке использовали метод гель-фильтрации на хроматографической колонке С 10/20, заполненной сефа-дексом G 50 (Amersham Biosciences).
Оценку эффективности включения Доке в ТЛ проводили спектрофотометрически при X 252 нм в течение трех дней. Диаметр везикул измеряли на приборе Nicomp-380 Submicron Particle Sizer.
Результаты. Размеры везикул и включение Доке в ТЛ-200 и ТЛ-100 представлены в таблице.
Как видно из таблицы, в ТЛ-200 включилось больше Доке, чем в ТЛ-100.
На вторые и третьи сутки включение Доке в ТЛ-200 увеличилось на 3,0 % и 4,0 %, соответственно.
В то же время, включение Доке в ТЛ-100 на вторые и третьи сутки уменьшилось на 1,2 % и 2,6 %, соответственно. Предположительно, из более мелких ТЛ Доке с течением времени вытекает.
Выводы. Таким образом, для получения препарата с наибольшим включением Доке в ТЛ экструзию ТЛ желательно проводить через поликарбонатные мембраны с диаметром пор 200 нм.
Т аблица
Размеры везикул и включение Доке в ТЛ-200 и ТЛ-100
Первые сутки Вторые сутки Третьи сутки
ТЛ Размер вези- Включение Размер Включение Размер Включение
кул Доке в ТЛ Везикул Доке в ТЛ везикул Доке в ТЛ
ТЛ-200 158 ± 7 нм 89,3 % 160 ± 7 нм 92,3 % 161 ± 7 нм 93,3 %
ТЛ-100 125 ± 4 нм 88,7 % 125 ± 3 нм 87,5 % 130 ± 6 нм 86,1 %
Е.В. Тазина, Е.В. Игнатьева, И.В. Ярцева,О.Л. Орлова,
Н.А. Оборотова
ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА
ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ФОСФОЛИПИДОВ И ДОКСОРУБИЦИНА
В ТЕРМОЗАВИСИМОИ ЛИПОСОМАЛЬНОЙ
ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ
ГУ РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА РАМН, МОСКВА
Введение. В ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН разработана новая термозависимая липосомальная лекарственная форма доксорубицина (ТЛЛФ Доке).
Наиболее значительными по массе компонентами ТЛЛФ являются Доке и фосфолипиды - 1,2-дипальми-тоил-Бп-глицеро-З-фосфохолин (DPPC), 1,2-дистеароил-sn-глицеро-З-фосфохолин (DSPC).
Для качественного анализа состава ТЛЛФ Доке применен метод хроматографии в тонком слое (ТСХ), отличающийся простотой и экспрессностью.
Цель исследования. Определение фосфолипидов и Доке в ТЛЛФ методом ТСХ.
Материалы и методы. ТСХ проводили на пластинах «Sorbfil» 10^10 см (подложка - алюминиевая фольга) и «Silica gel 60 F 254» 10*20 см, Merck KGaA (подложка - стекло).
Использовали системы растворителей: хлороформ-метанол-вода (65:25:4), (65:30:5),
(75:25:4), (80:20:3) (I);
хлороформ-метанол-аммиак (60:35:5) или
(65:25:4) (II);
хлороформ - метанол - ледяная уксусная кислота -вода (25:15:4:2), (50:25:8:4), (60:50:1:4),
(80:20:14:6), (90:40:12:2) (III).
Содержимое флакона ТЛЛФ Доке растворяли в 2 мл метанола и через 1-2 ч раствор профильтровывали через складчатый фильтр. На хроматографическую пластину наносили по 20 мкл образца ТЛЛФ Доке и стандартных образцов веществ-свидетелей. Пластину с нанесенными пробами выдерживали на воздухе в течение 5-10 мин, затем помещали в камеру, предварительно насыщенную одной из вышеуказанных смесей растворителей в течение 2-3 ч, и хроматографировали восходящим способом. Пластины проявляли парами йода. Пятна фосфолипидов идентифицировали по желтой окраске, а пятно Доке - по характерной красной окраске.
Результаты. Показано, что во всех перечисленных системах растворителей фосфолипиды (DPPC и DSPC) имели практически одинаковые Rf и при хроматографировании лекарственной формы определялись одним пятном.
В системе II хлороформ-метанол -аммиак наблюдали четкое разделение фосфолипидов (Rf около 0,2) и Доке (Rf около 0,4-0,5).
В системе III хлороформ-метанол-ледяная уксусная кислота-вода также получили четкое разделение фосфолипидов (Rf от 0,14 до 0,4) и Доке (Rf от 0,4 до 0,7) в зависимости от соотношения компонентов системы.
Наименее удачной оказалась система I хлороформ метанол-вода, в которой фосфолипиды и Доке не разделялись.
Выводы. Для определения фосфолипидов и Доке в ТЛЛФ методом ТСХ могут быть рекомендованы следующие системы
хлороформ - метанол - аммиак хлороформ - метанол - ледяная уксусная кислота -вода.
Работа выполнена в рамках программы ««Участник Молодежного научно-инновационного конкурса».
О.В. Хугаееа, А.П. Полозкова, Е.В. Тазина,
М.А. Кортава, Н.А. Оборотова, А.Ю. Барышников, И.И. Краснюк
РАЗРАБОТКА ОПТИМАЛЬНОГО СОСТАВА СТЕРИЧЕСКИ СТАБИЛИЗИРОВАННЫХ ЛИПОСОМ,
ЗАГРУЖЕННЫХ МИТОКСАНТРОНОМ
ГУ РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА РАМН, МОСКВА
Побочные эффекты противоопухолевых препаратов преимущественно связаны с их неселективным действием, т.к. кроме злокачественных клеток цитостатики захватываются клетками здоровых тканей с наиболее интенсивным метаболизмом.
Для снижения токсичности и повышения селективного воздействия препарата на опухолевые клетки продолжается поиск новых способов доставки лекарственного вещества клеткам-мишеням. В настоящее время наиболее широко исследуются липосомальные лекарственные формы.
Цель исследования. Разработка оптимального состава липосом с митоксантроном, позволяющих увеличить селективность противоопухолевого действия препарата.
Материалы и методы. Яичный фосфатидилхолин (PC), пегилированный дистеароилфосфатидилэтано-ламин (mPEG-2000-DSPE) фирмы Lipoid; холестерин (Chol) (Sigma); митоксантрона гидрохлорид (ICN Biomedicals, Inc).
Липосомы получали методом обращения фаз с молярным соотношением липидов PC, Chol , ПЭГ-липид 11 : 9 : 1 соответственно. Липидную пленку смывали водным раствором митоксантрона с концентрацией 1мг/мл. Весовое соотношение митоксантрон : липиды составило 1 : 42. Полученную липосомальную дисперсию озвучивали в течение 15 мин., затем пропускали последовательно через поликарбонатные мембраны с диаметром пор 200 и 100 нм (Nuclepore) с помощью мини-экструдера (Avanti Polar Lipids), после чего дисперсию подщелачивали буфером (10 mM HEPES + 140 mM NaCl) до pH 7,8. Анализ среднего диаметра везикул и стандартное отклонение их распределения проводили на приборе Submicron Particle Sizer Nicomp-380 (США). Для разделения включенного и не включенного в везикулы препарата использовали метод гель-фильтрации на хроматографической колонке C10/20 (GE Healthcare, Великобритания) с сефадексом G-50 (элюент -0,15М NaCl). Содержание митоксантрона в липосомах определяли методом спектрофотометрии при X 242 ± 2 нм.
Результаты. В результате исследований получены моноламеллярные липосомы с размером 160-175 нм. Содержание митоксантрона в 1 мл липосомальной дисперсии 0,865 мг/мл. Включение митоксантрона в липосомы оказалось около 78,7 %.
Выводы. Таким образом, на основании проведенных исследований получены липосомы с высокой степенью загрузки митоксантрона.
Чан TxuXau Иен1, А.П. Полозкова2, Е.В. Тазина2,
В.М. Печенникое1, НА. Оборотова2, А.П. Арзамасцев1
РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ ОЧИСТКИ
ЛИПОСОМ С ВОДОРАСТВОРИМЫМ
ФС ФОТОДИТАЗИНОМ
ОТ НЕВКЛЮЧИВШЕГОСЯ ПРЕПАРАТА
*ММА им. И.М. Сеченова, Москва
2ГУ РОНЦ ИМ. Н.Н. БЛОХИНА РАМН, МОСКВА
Введение. В последние годы широко изучаются липосомы как средство для введения и доставки фотосенсибилизатора с целью повышения эффективности лечения и снижения токсичности препарата в фо-тодинамической терапии.
Одним из факторов, определяющих эффективность технологии получения липосомальной лекарственной формы водорастворимого препарата, является процент его включения в липосомы.
Цель исследования. Разработка методики очистки липосом с инкапсулированным фотодитазином на хроматографической колонке для определения эффективности включения препарата в липосомы.
Материалы и методы. Липосомы с инкапсулированным фотодитазином очищали от невключившегося препарата методом гель-фильтрации на колонке C 10/20 (GE Healthcare, Великобритания), заполненной сефадек-сом G 50. Процесс очистки контролировали с помощью детектора UVis-920 с X 215 нм (Amersham Biosciences, Швеция) и самописца ( REC-111 Amersham Biosciences).
В качестве элюентов использовали фосфатный буфер (pH 6,86) и тетраборатный буфер (pH 9,18). На выходе из колонки получали две фракции и измеряли их оптическую плотность на спектрофотометре при X 662 нм с последующим расчетом процента включения препарата в липосомы.
Результаты. При элюировании липосом с фотодитазином фосфатным буфером с нейтральным значением pH получено хорошее разрешение между пиком очищенных липосом и пиком невключившегося препарата, свидетельствующее о полном разделении липосомаль-ного фотодитазина и субстанции препарата. При этом включение фотодитазина в липосомы составило 45,4 %. При использовании в качестве элюента тетраборатного буфера самописец выдавал нечеткое разделение между пиками с инкапсулированным фотодитазином и субстанцией препарата . В результате было невозможно отследить конец первой и начало второй фракции, влед-ствие чего вкючение составило 40,1%.
Вывод. Для очистки липосом с водорастворимым фотосенсибилизатором фотодитазином от невключившегося препарата методом гель-фильтрации целесообразно использовать в качестве элюента фосфатный буфер с pH 6,68.
А.А. Панкратов1, Р.И. Якубовская1, Т.Н. Андреева1, Ю.Б. Венедиктова1, В.И. Чиссов1, А.В.Бутенин2,
Б.Я. Коган2, Г.Н.Ворожцое2, А.Р.Каулъ , В.М. Рудой4, О.В. Дементьева4, М.Е.Карцева 4, М.А. Филлипенко4. ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ЭФФЕКТОВ НАНОЧАСТИЦ,
ПЕРСПЕКТИВНЫХ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ОНКОЛОГИИ
‘МНИОИ ИМ. П.А.ГЕРЦЕНА, МОСКВА 2 ФГУП ГНЦ НИОПИК, Москва 3МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва 4ИФХиЭХ им. А.Н.Фрумкина, Москва
Целью настоящей работы являлось разработка подходов к изучению на экспериментальных моделях in vivo наночастиц органической и неорганической природы, предназначенных для лечения злокачественных новообразований в таких методах противоопухолевой терапии как ГП, ФДТ и XT.
Исследование проводили на интактных животных и животных с опухолями (саркома S-27, карцинома С-26, меланома В-16). В экспериментах по изучению противоопухолевой эффективности в методах гипертермии использовали наночастицы на основе сульфированного углерода (CSO2), коллоидного золота (Auk) и серебра (Agk), манганитов (МГ) и фталоцианинов (алюминия (PcAl), цинка (PcZn), меди (PcCu), кобальта (PcCo), а также без-метального фталоцианина (Н2Р), а при методе ФДГ - на основе фталоцианинов со свойствами фотосенсибилизаторов (PcAl, PcZn, Н2Рс).
В терапевтических экспериментах установлено, что эффективность ГП и ФДТ при использовании наноча-
стиц в качестве сенсибилизаторов зависит от природы и структуры, формы, размера нанокомпозитов, их дозы, а также параметров физического воздействия. Особо важным являлся интервал времени между введением наночастиц и проведением физического воздействия, который обусловлен особенностями фармакокинетики исследуемых наночастиц. Высокая эффективность ГП была выявлена при использовании в качестве термосенсибилизаторов наночастиц на основе РсА1, Рс2п, СиРс, Н2Рс и Agk, а ФДТ - при использовании наночастиц фталоцианиновой природы со свойствами фотосенсибилизаторов: РсА1, Рс2п и Н2Рс. У животных наблюдали длительное торможение роста опухоли на 100-60% и излеченность от опухоли в 10-100% случаев. Полученные данные свидетельствуют о необходимости изучения терапевтической эффективности этих методов лечения с использованием наночастиц только в мультипараметри-ческой системе с учетом физико-химических свойств нанокомпозитов, определяющих их биораспределение и эффективность терапии. Особенностью наночастиц является то, что они плохо подвергаются метаболической трансформации и медленно выводятся из организма. Поэтому важным является оценка их безопасности с определением органов-мишеней, в которых происходит накопление наночастиц (фармакокинетические исследования), а также изучение их общетоксических свойств и специфических видов токсичности с длительным (не менее 2,5 лет) периодом наблюдения за животными. Нами начато изучение безопасности наночастиц органической и неорганической природы в острых и хронических экспериментах на животных. В опытах по изучению «острой» токсичности отмечена хорошая переносимость наночастиц (размером от 100 до 200 нм) при их использовании в высоких дозах - до 600 мг/кг.
Работа выполнена при финансовой поддержке Правительства г Москвы.
И.В.Ярцева, Е.В.Игнатьева, Л.Г.Гатинская,
П.А Чельцов
ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИКЛОПЛАТАМА В СУБСТАНЦИИ
ГУ РОНЦ ИМ. Н.Н.БЛОХИНА РАМН, МОСКВА
Циклоплатам - высокоэффективный отечественный противоопухолевый препарат второго поколения из классса комплексных соединений платины, разрешенный для применения при раке яичников, мезотелиоме плевры и множественной миеломе.
Цель исследования. Показать, что методика количественного определения циклоплатама, позволяет достоверно определять содержание основного действующего вещества и корректно контролировать качество субстанции препарата «циклоплатам».
Материалы и методы. Валидация метода проведена по результатам анализа пяти серий препарата, отличающихся содержанием в них воды и временем выпуска.
Результаты. Для количественного определения циклоплатама предложен весовой метод, основанный на термическом разложении препарата до металлической платины. Валидация метода проведена по следующим параметрам:
правильность,
воспроизводимость,
точность,
линейность результатов.
Стандартное отклонение, доверительный интервал определения и относительная ошибка результата составили: 8=0,23; х=0,22; =0,23% (Р=95%), соответственно. Численное значение коэффициента нормированных отклонений (коэффициента Стьюдента), рассчитанное по результатам двух выборок составило 1,01.
Табличное значение коэффициента Стьюдента при 95%-ной доверительной вероятности и степени свободы 1=5 равно 2,57, т.е. 1выч. (95%, 5).
Это позволяет нам считать, что итоговые результаты, полученные данным методом, не отягощены систематической ошибкой.
Расчеты показывают, что истинное значение определяемой величины (количественное содержание циклопла-тама) с доверительной вероятностью Р=95% в единичном определении находится в интервале х1±0,54%, а для среднего значения х ± 0,31%.
При статистической обработке данных, полученных двумя разными аналитиками, рассчитано, что критерий Фишера равен Гвыч= 4,76 < Ртай1 (99%, 5, 5) = 10,97, т.е. методика анализа воспроизводима. Метод линеен: результаты хорошо описываются зависимостью у = 0,42х +0,02; коэффициент корреляции равен 0,9995.
Выводы. Проведенная валидация гравиметрического метода количественного определения циклопла-тама в субстанции показала, что метод позволяет получать достоверные результаты, обладает высокой точностью и воспроизводимостью.
РАСТИТЕЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
С.М. Адекенов1, А.К. Сариев2, Х.И. Итжанова1,
А.Н. Жабаева1, Л.И. Арыстан1, В.П. Жердев2 ИЗУЧЕНИЕ
ОТНОСИТЕЛЬНОЙ БИОДОСТУПНОСТИ КАПСУЛИРОВАННОЙ ФОРМЫ АРГЛАБИНА
1АО НПЦ Фитохимия, Караганда, Казахстан 2НИИ фармакологии им. В.В. Закусова РАМН, Москва
Задачи исследования. Изучение относительной биодоступности капсулированной ЛФ арглабина.
Материалы и методы. Исследование проведено на 8 кроликах-самцах массой тела 2,8 0,2 кг. В случайном порядке животным с помощью зонда внутрь вводили нативный арглабин в капсулах или субстанцию (суспензия в 1%-ном крахмальном клейстере), а затем, спустя 7 дней - наоборот. Отбор плазмы крови производили из ушной краевой вены в следующие дискретные интервалы времени: 0,0; 0,25; 0,5; 0,75; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 и 4,0 ч. Экстракцию арглабина из плазмы крови проводили ди-этиловым эфиром. Количественное определение арглабина в биологических образцах проводилось методом ВЭЖХ. Основные фармакокинетические параметры (ЛиС0-м, Ттах, Стах/ЛиС^, МЯТ, Ъйеь 1) рассчитаны модельно-независимым методом (программа «М-ГМО»).
Результаты. Сравнительный анализ основных фармакокинетических параметров арглабина показал, что изучаемое соединение всасывается из ЖКТ с различной скоростью. Субстанция арглабина всасывается из ЖКТ в
1,62 раза быстрее, чем при введении в виде капсулы (Стах/ЛИС0 „- для субстанции 1,072 0,229; для капсул -0,660 0,179 ч-1). Время достижения максимальной концентрации (1тах) составило в среднем для субстанции 0,72 0,21 ч.; для капсул - 1,56 0,32 ч. То есть, арглабин из капсулы всасывается в 2,17 раза медленнее, чем при введении в виде субстанции. Необходимо также отметить: ме^ду сравниваемыми ЛФ арглабина существует значимое достоверное различие в параметрах полупе-риода элиминации препарата (Ті/2е1) и среднего времени удерживания молекулы вещества в организме (МЯТ). В случае введения арглабина в виде капсулы препарат в 2,94 раза (Ту2е1) и 1,7 раза (МЯТ) дольше выводится из организма по сравнению с теми же параметрами субстанции. Относительная биологическая доступность (1) арглабина, определяемая отношением индивидуальных значений ЛИС0-М и доз составляет для капсулы по отношению к субстанции в среднем 410,79 276,30 %. Высокую относительную биодоступность арглабина и его замедленное всасывание можно объяснить кислото-устойчивостью капсул, предотвращающей деградацию субстанции в кислой среде желудка и как следствие более полным всасыванием исходного соединения из кишечного тракта в системный кровоток.
Вывод. Выявлена высокая относительная биодоступность капсул арглабина нативного в сравнении с субстанцией (410,79 276,30 %).
Н.В. Бочкова1, А.Х. Досаханов2, В.Б. Сирота1,
Л.Е. Муравлева1, Д. С. Кусаинова1 ОСОБЕННОСТИ ТЕЗИОГРАФИЧЕСКОЙ КАРТИНЫ ПЛАЗМЫ КРОВИ БОЛЬНЫХ РАКОМ ПИЩЕВОДА ПРИ ЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ С АРГЛАБИНОМ 1КГМА, Караганда, Казахстан 2ННМЦ М3 РК, Астана, Казахстан
Задачи исследования. Изучение тезиографиче-ской картины плазмы крови больных раком пищевода (РП) при лучевой терапии (ЛТ) с арглабином.
Материалы и методы. Объектом исследования являлась кровь 15 больных РП в возрасте от 51 до 74 лет, находившихся на лечении в КГКП «ООД». Из них 12 мужчин, 3 женщины. Среди пациентов у 14 был диагностирован РП III стадии, у 1 - IV стадии. Все больные получали ЛТ динамическим фракционированием дозы: первые 3 дня РОД - 4,5 Гр, далее методом мультифракционирования: РОД - 1,2 Гр 2 раза в день с интервалом в 4,5 ч до СОД, эквивалентной 60-80 Гр классического фракционирования. Забор материала производился утром натощак до проведения курса ЛТ. 8 больным ежедневно перед ЛТ вводили в/в 2%-ный раствор арглабина из расчета 185 мг/м2, суммарная доза препарата варьировала от 4 000 до 9 000 мг (15 введений). Тезиограммы ставили по методу В.Н. Шабалина и С.Н. Шатохиной.
Результаты. Тезиограмма плазмы крови больных РП имеет специфические элементы по сравнению с таковой плазмы здорового человека. Радиальные трещины меняют направленность по окружности, могут иметь конкреции правильной и неправильной формы; конкреций может быть много или мало. После ЛТ тезиограмма имеет особенности: капля по-прежнему не принимает округлой формы, количество амебовидных выпячиваний в 2-3 раза меньше, трех зон, в которых сохраняются листовидные растрескивания, в 4 раза меньше; количество секторов и отдельностей приближено к норме; конкреции приобрели округлую форму и расположены асимметрично. Особенности тезиограммы плазмы на фоне ЛТ с арглабином: фация структурирована, наблюдаются краевая, центральная и не полностью промежуточная зона; центральная зона разбита радиальными трещинами, но нет четкого центра, радиальные трещины ветвятся друг от друга; отдельности очень большие (в одной радиальной трещине может быть всего от 3 до 6 отдельностей); конкреции в отдельности занимают всю площадь, следовательно, их не окружает белковое кольцо.
Выводы. Эти особенности тезиограммы плазмы крови больных РП на фоне ЛТ с арглабином обусловлены снижением интоксикации продуктами распада опухолевой ткани, снижением количества тяжелых молекул, липопротеинов, липидов, белков с низкой градиентной плотностью (альбумин, церулоплазмин и.т.д), присутствием нормального количества белков с высокой градиентной плотностью (гамма-глобулины).
