CC BY
35
СТОМАТОЛОГІЯ
© Г. В. Воронкова, Л. В. Смаглюк, А. П. Левицький*
УДК 613. 34+008. 17+616. 34+008. 022-07
Г. В. Воронкова, Л. В. Смаглюк, А. П. Левицький'
ЛІКУВАЛЬНО-ПРОФІЛАКТИЧНА ДІЯ МУКОЗАЛЬНОГО ГЕЛЮ «СИМБІТЕР» НА ЯСНА ЩУРІВ З ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИМ ДИСБІОЗОМ
ВДНЗУ «Українська медична стоматологічна академія» (м. Полтава) *ДУ «Інститут стоматології' НАМН» (м. Одеса)
Дана робота є фрагментом науково-дослідницької роботи кафедри медичної фізико-колоїдної біоорганічної та біологічної хімії Вищого державного навчального закладу України «Українська медична стоматологічна академія»: «Роль біорегуляторів у механізмі розвитку патологічних змін органів системи травлення» , Державний реєстраційний номер 010911007982.
Вступ. Пошук нових ефективних методів профілактики та лікування запальних процесів тканин пародонту є актуальною проблемою сучасної ор-тодонтії, оскільки захворювання пародонта значно утруднюють ортодонтичне лікування, збільшується тривалість ортодонтичної корекції аномалій прикусу, виникає ризик розвитку рецидиву та пародонто-логічних ускладнень в ретенційному періоді.
Застосування пробіотичних препаратів в профілактиці запальних процесів тканин пародонту еті-опатогенетично обгрунтовано, тому що в їх складі містяться життєздатні мікроорганізми, які відновлюють мікробіоценоз, є антагоністами по відношенню до патогенної та умовно-патогенної мікрофлори і беруть участь у регуляції каскаду імунологічних реакцій.
«Симбітер» відноситься до мультипробіотичних препаратів і містить 4 види співдружніх бактерій (лактобацили, пропіонібактерії, біфідобактерії та оцтові бактерії), що забезпечує йому високу анти-дисбіотичну дію [11].
Нами запропонована нова гігієнічна форма використання «Симбітеру» у вигляді мукозального гелю, що дозволяє пролонгувати його дію при локальному застосуванні в порожнині рота [9].
В нашій попередній роботі була показана паро-донто протектор на дія гелю «Симбітер» при експериментальному гінгівіті у щурів, який викликали за допомогою протаміна [3].
На підставі проведеного дослідження була рекомендована оптимальна концентрація «Симбітера» в мукозальному гелі, а саме 10 %.
Метою даного дослідження стало вивчення лікувально-профілактичної дії мукозального гелю «Симбітер» на стан ясен щурів за умов експериментального дисбіозу.
Об’єкт і методи дослідження. В роботі використовували мукозальний гель на основі карбокси-метилцелюлози (КМЦ) натрієвої солі з вмістом 10 % препарату мультипробіотика «Симбітер» виробництва ТОВ «О. Д. Пролісок» (Україна). В якості препарата порівняння використовували гель «Квертулін», який містить кверцетин, інулін та цитрат кальцію [6, 7].
Досліди було проведено на 28 щурах лінії Вістар (самиці, 13 місяців, жива маса 330±15 г), яких було поділено на 4 групи: 1-а - норма, 2-а , 3-я і 4-а - експериментальний дисбіоз, який викликали за допомогою антибіотика лінкоміцина [4]. Щурі 2-ої групи отримували, починаючи з восьмого дня від початку експеримента, аплікації на слизову оболонку порожнини рота (СОПР) пустого гелю КМЦ («плацебо») в кількості 0,5 мл на щура. Щурі 3-ої групи отримували аплікації на СОПР гелю «Симбітер», а щурі 4-ої групи - аплікації гелю «Квертулін» (20 мг/мл) також в дозі 0,5 мл на щура на протязі 7 днів. Утримання тварин та всі маніпуляції проводилися у відповідності до положень “Загальних етичних принципів експериментів на тваринах”, ухвалених Першим Національним конгресом з біоетики (Київ, 2001р.) та «Європейської конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для експериментальних та інших наукових цілей» (Страсбург, 1985 р).
Щурів піддавали евтаназії на 15-й день досліду у відповідності до Європейської конвенції про захист тварин, які використовуються для експериментів, під тіопенталовим наркозом (20 мг/кг) шляхом
с;
№
Рис. 1. Вплив мукозального гелю «Симбітер» на рівень маркерів запалення в яснах щурів з експериментальним дисбіозом.
Рис. 2. Вплив мукозального гелю «Симбітер» на активність лізоцима і вміст гіалуронової кислоти в яснах щурів з експериментальним дисбіозом.
* [5 а 840 4
700 -
х %
3 560 -
£ 420 -
280 -
140 -
0 --
ч
о
-1^20
2
іс
-«16
ч
■А
«
-■із 12 О о
□ норма □ дисбіоз (Д) ^ Д+"Симбігер" « Д+"Квертулін
Рис. 3. Вплив мукозального гелю «Симбітер» на активність уреази і ступінь дисбіозу в яснах щурів з експериментальним дисбіозом
тотального кровопускання із серця. Виділяли ясна і зберігали їх при -30 °С.
В гомогенаті ясен (20 мг/мл 0,05 М трис-НСІ буфера рН 7,5) визначали рівень біохімічних маркерів запалення: активність протеолітичного фермента еластази [2] і вміст продукта перекисного окислення ліпідів малонового діальдегіда (МДА) [2]. Рівень мікробного обсіменіння оцінювали за активністю фермента уреази [10], стан неспецифічного імунітету - за рівнем активності лізоцима [10], а антиоксидантний захист - за рівнем активності каталази [2].
За співвідношенням відносних активностей уреази і лізоцима розраховували ступінь дисбіозу за Левицьким [5], а за співвідношенням активності каталази і вмісту МДА - антиоксидантно-прооксидантний індекс АПІ [2].
Крім того, в гомогенаті ясен визначали вміст гіалуронової кислоти нефелометрич-ним методом Клемента [1].
Результати досліджень та їх обговорення. На рис. 1 представлено результати визначення рівня біохімічних маркерів запалення - еластази і МДА, які свідчать про розвиток в яснах щурів з експериментальним дисбіозом запального процесу, який достовірно знижується під впливом аплікацій гелю «Симбітер», причому він нічим не поступається гелю «Квертулін».
На рис. 2 показано, що в яснах щурів з дисбіозом значно (майже в 6 разів) знижується активність лізоциму, що свідчить про суттєве зниження рівня неспецифічного імунітету в яснах щурів. Аплікації гелю «Симбітер» більше ніж в 4 рази підвищують активність лізоциму і знову «Симбітер» нічим не поступається гелю порівняння «Квертулін».
При експериментальному дисбіозі значно знижується вміст в яснах гіалуронової кислоти, яка є міжклітинним «цементом» і забезпечує низький рівень проникності в глибину тканини мікробів, лейкоцитів та білків [8]. Таке зниження вмісту гіалуронової кислоти може бути одним із факторів, що забезпечують ріст мікробного обсіменіння ясен і розвиток запального процеса.
Аплікації геля «Симбітер» достовірно збільшують вміст гіалуронової кислоти і за цим показником «Симбітер» незначно поступається «Квертуліну».
На рис. 3 приведено дані визначення активності уреази, які свідчать про значний ріст мікробного обсіменіння ясен за умов
«Симбітер» достовірно збільшують активність каталази і особливо індекс АПІ (до норми), однак за цими показниками гель «Симбітер» дещо поступається гелю «Квертулін».
Висновки. Таким чином, проведені дослідження показали, що мукозальний гель «Симбітер» володіє лікуально-профілактичною дією по відношенню до ясен в умовах дисбіозу, справляючи нормалізуючий вплив на біохімічні показники патологічного стану пародонта. Важливо підкреслити, що захисна дія гелю «Симбітер» здійснюється при його локальній аплікації на слизову оболонку порожнини рота в значно менших дозах в порівнянні з пероральним використанням препарату «Симбітер».
Отримані результати дають підставу для подальшого використання мукозального гелю «Симбітер» в стоматології.
Перспективи подальших досліджень. В подальшому планується проведення клінічного дослідження та обґрунтування використання мукозального гелю «Сімбітер» в клініці у пацієнтів під час ортодонтичного лікування незнімною технікою
Література
1. Асатиани В. С. Новые методы биохимической фотометрии / В. С. Асатиани. - М.: Наука, 1965. - С. 298.
2. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости (метод. рекомендации) / А. П. Левицкий, О. В. Деньга, О. А. Макаренко [и др.] - Одесса, 2010. - 16 с.
3. Воронкова А. В. Пародонтопротекторное действие геля «Симбитер» при экспериментальном гингивите у крыс / А. В. Воронкова, Л. В. Смаглюк, А. П. Левицкий // Вісник стоматології. - 2013. - № 1. - С. 5-9.
4. Деклараційний патент на корисну модель № 31012. Спосіб моделювання дисбіозу (дисбактеріозу) / Левицький А. П., Селіванська І. О., Цісельський Ю. В. [та ін.] - № и 200711609; заявл. 22. 10. 2007; опубл. 25. 03. 2008. Бюл. № 6.
5. Деклараційний патент на корисну модель № 43140, МПК (2009) й01Ы 33/48 Спосіб оцінки ступеня дисбіозу (дисбактеріозу) органів і тканин / Левицький А. П., Дєньга О. В., Селіванська І. О. [та ін.] - № и200815092; заявл. 26. 12. 2008; опубл. 10. 08. 2009. Бюл. № 15.
6. Деклараційний патент на корисну модель № 71429, МПК А61Р 1/16. Гепатопротектор («Квертулін») / Левицький А. П., Левченко О. М., М. І. Скидан [та ін.] - № и 201200359; заявл. 12.01.2012; опубл. 10. 07. 2012. Бюл. № 13.
7. Квертулин: витамин Р, пребиотик, гепатопротектор / А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. А. Селиванская [и др.]. -Одесса: КП ОМД, 2012. - 20 с.
8. Максименко А. В. Эффекты гликозаминогликанов в сосудистых событиях / А. В. Максименко // Хим. -фарм. журн. -2008. - Т. 42, № 10. - С. 3-13.
9. Применение мукозальных гелей в стоматологии (метод. рекомендации) / А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. А. Селиванская [и др.]. - Одесса, 2012. - 20 с.
10. Ферментативный метод определения дисбиоза полости рта для скрининга про- и пребиотиков (метод. рекомендации) / А. П. Левицкий, О. А. Макаренко, И. А. Селиванская [и др.]. - К.: ГФЦ, 2007. - 26 с.
11. Янковский Д. С. Микробная экология человека: современные возможности ее поддержания и восстановления / Д. С. Янковский. - К.: Эксперт ЛТД, 2005. - 362 с.
□ норма □ дисбюз (Д) й Д+"Симбігер" ^ Д+"Квертулін
Рис. 4. Вплив мукозального гелю «Симбітер» на активність каталази та індекс АПІ в яснах щурів з експериментальним дисбіозом.
експериментального дисбіозу, ступінь якого зростає у 18 разів. Аплікації гелю «Симбітер» достовірно знижують активність уреази і значно (майже в 6 разів) - ступінь дисбіозу, причому за цими показниками гель «Симбітер» перевищує гель порівняння «Квертулін».
На рис. 4 представлено результати визначення активності каталази та індекса АПІ, які свідчать про те, що при експериментальному дисбіозі достовірно знижується активність каталази і більш суттєво - індекс АПІ. Аплікації гелю
УДК 613. 34+008. 17+616. 34+008. 022-07
ЛІКУВАЛЬНО-ПРОФІЛАКТИЧНА ДІЯ МУКОЗАЛЬНОГО ГЕЛЮ «СИМБІТЕР» НА ЯСНА ЩУРІВ З ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИМ ДИСБІОЗОМ
Воронкова Г. В., Смаглюк Л. В., Левицький А. П.
Резюме. Експериментальний дисбіоз, який викликали за допомогою лінкоміцину, призводить до збільшення в яснах рівня біохімічних маркерів запалення - еластази і МДА, значного зростання показника мікробного обсіменіння - активності уреази, дуже сильного зниження активності лізоциму, що свідчить про значне зниження неспецифічного імунітету і як наслідок, різкого (в 18 разів) збільшення ступеня дисбіозу в яснах.
Аплікації на слизову порожнини рота гелю «Оимбітер» нормалізує вищезгадані показники, що свідчить про його лікувально-профілактичну дію, за рівнем якого він не поступається гелю «Kвepтyлiн».
Ключові слова: ясна, дисбіоз, запалення, пробіотики, мукозальний гель.
УДК 613. 34+008. 17+616. 34+008. 022-07
ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ МУКОЗАЛЬНОГО ГЕЛЯ «СИМБИТЕР» НА ДЕСНУ КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ДИСБИОЗОМ
Воронкова А. В., Смаглюк Л. В., Левицкий А. П.
Резюме. Экспериментальный дисбиоз, который вызывали с помощью линкомицина, приводит к увеличению в десне уровня биохимических маркеров воспаления - эластазы и МДА, значительному росту показателя микробного обсеменения - активности уреазы, очень сильному снижению активности лизоцима, что свидетельствует о значительном снижении неспецифического иммунитета и как следствие, резкому (в 18 раз) увеличению степени дисбиоза в десне.
Аппликации на слизистую полости рта геля «Cимбiтep» нормализует вышеуказанные показатели, что свидетельствует о его лечебно-профилактическом действии, по уровню которого он не уступает гелю «Kвepтyлин».
Ключевые слова: десна, дисбиоз, воспаление, пробиотики, мукозальный гель.
UDC 613. 34+008. 17+616. 34+008. 022-07
Therapeutic and Preventive Action of Mucosal Gel «Симбитер» on the Gums of Rats with Experimental Dysbiosis
Voronkova A. V., Smaglyuk L. V., Levitsky A. P.
Summary. Experimental dysbiosis that caused by lincomycin, leads to an Increase In the levels of biochemical markers of gingival Inflammation - elastase and MDA, significant Increases microbial contamination - urease activity, a very large reduction In the activity of lysozyme, which shows a significant decrease In non-specific Immunity and as a consequence, a sharp (18-times) Increase In the degree of dysbiosis In the gums.
Application to the oral mucosa of gel “Cимбiтep» normalizes those Indicators, which Indicates Its health-care action, the level of which his not lower than gel “Kвepтyлин».
Key words: gum, dysbiosis, Inflammation, probiotics, mucosal gel.
Стаття надійшла 1. 02. 2013 р.
Рецензент - проф. Ковальов Є. В.
