CC BY
19«ШТАТ ГАТАТ
КОРРЕЛЯЦИЯ УРОВНЯ ЦИНКА В СПЕРМОПЛАЗМЕ С ХАРАКТЕРИСТИКАМИ ФЕРТИЛЬНОСТИ ЭЯКУЛЯТА ЧЕЛОВЕКА
Д.Л. Луцкий1,2, А.М. Луцкая1,2, Р.М. Махмудов3, Е.В. Палкина4, А.И. Полунин5
1 Астраханский государственный медицинский университет, Астрахань, Российская Федерация
2 Лаборатория «ДИАМЕД-экспресс» ООО «РЕПРОДИАМЕД», Астрахань, Российская Федерация
3 Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова, Москва, Российская Федерация
4 Александро-Мариинская областная клиническая больница, Астрахань, Российская Федерация
5 Областной кожно-венерологический диспансер, Астрахань, Российская Федерация
Обоснование. Цинк имеет важное значение для нормального функционирования мужской репродуктивной системы. Данные о диагностическом значении определения цинка в спермоплаз-ме человека и взаимосвязи его уровня с основными параметрами фертильности спермы носят противоречивый характер. Цель исследования — изучение корреляций уровня цинка в спермо-плазме с характеристиками спермограммы. Методы. Исследована сперма мужчин репродуктивного возраста (п=486, средний возраст 33,07±3,03 года). В образцах спермы кроме стандартной спермограммы были выполнены MAR-тесты (IgA, IgG и IgM), проведена оценка степени фрагментации ДНК сперматозоидов и взаимодействия сперматозоидов с гиалуроновой кислотой; определены активность акрозина и нейтральной альфа-глюкозидазы, уровни лимонной кислоты, фруктозы и гликоделина; исследован уровень активных форм кислорода. Определение уровня цинка в спермоплазме проведено стандартным спектрофотометрическим методом c хромогеном 5-Br-PAPS. Для корреляционного анализа использована формула Пирсона. Исследование проводилось с 2018 г. по май 2022 г., однократно. Результаты. Выявлена достоверная отрицательная корреляция уровня цинка в спермоплазме с возрастом мужчин (=-0,16; p <0,001). Уровень цинка в спермоплазме слабоотрицательно коррелировал со временем разжижения и вязкостью спермы. Положительная корреляция была с количеством сперматозоидов (=0,13; p <0,01) и их подвижностью (=0,38; p <0,00001). Уровень цинка в спермоплазме отрицательно коррелировал со степенью фрагментации ДНК сперматозоидов и количеством активных форм кислорода, а с тестом на связывание сперматозоидов с гиалуроновой кислотой — положительно. Заключение. Уровень цинка в спермоплазме достоверно коррелирует с рядом физиологических и биохимических характеристик спермы. Полученные данные позволяют рекомендовать определение цинка в спермоплазме не только для оценки функциональной активности предстательной железы, но и для диагностики фертильности эякулята, а также оптимизировать терапию цинксодержащими препаратами и улучшить контроль над эффективностью проводимого лечения. Ключевые слова: цинк; эякулят; сперматозоиды; фертильность; мужское бесплодие.
Для цитирования: Луцкий Д.Л., Луцкая А.М., Махмудов Р.М., Палкина Е.В., Полунин А.И. Корреляция уровня цинка в спермоплазме с характеристиками фертильности эякулята человека. Клиническая практика. 2023;14(1):54-65. с1ок https://doi.org/10.17816/clinpract115002
Поступила 30.11.2022 Принята 03.12.2022 Опубликована 30.12.2022
ОБОСНОВАНИЕ
Спермоплазма человека содержит множество макро- и микроэлементов, которые, несомненно, играют важную роль в нормальном функционировании сперматозоидов и формировании их оплодотворяющих свойств [1-3]. Но среди них особое место занимает микроэлемент цинк (Ип): не случайно его концентрация в спермоплазме значительно
выше, чем в любой другой биологической жидкости организма человека [4].
Цинк — единственный среди микроэлементов включен в рекомендации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) по исследованию эякулята человека в качестве одного из биохимических маркеров фертильности спермы [5]. И действительно, участие цинка в функционировании
Лицензия CC BY-NC-ND 4 / The article can be used under the CC BY-NC-ND 4 license
9Г)23
2023
Том 14 »1
CORRELATION OF THE ZINC LEVEL IN THE SPERMOPLASM WITH THE FERTILITY CHARACTERISTICS OF HUMAN EJACULATE
D.L. Lutsky1' 2, A.M. Lutskaya1' 2, R.M. Makhmudov3, E.V. Palkina4, A.I. Polunin5
1 Astrakhan State Medical University, Astrakhan, Russian Federation
2 Laboratory "DIAMED-Express" REPRODIAMED, Astrakhan, Russian Federation
3 Moscow State University of Medicine and Dentistry named after A.I. Evdokimov, Moscow, Russian Federation
4 Alexander-Mariinsky Regional Clinical Hospital, Astrakhan, Russian Federation
5 Regional Skin and Venereological Dispensary, Astrakhan, Russian Federation
Background: Zinc is essential for the normal functioning of the male reproductive system. The data on the diagnostic value of the zinc level in the human spermoplasm and its relationship with the main parameters of the sperm fertility are contradictory. Aim: study of the correlations between the zinc level in the spermoplasm and the spermogram characteristics. Methods: The sperm of men of the reproductive age (n=486, average age 33.07±3.03 years) was studied. In addition to the standard spermogram, MAR tests (IgA, IgG and IgM) were performed in the sperm samples, the degree of fragmentation of the sperm DNA, the sperm interaction with hyaluronic acid, the acrosine activity, and the neutral alpha-glucosidase activity were assessed, the citric acid, fructose and glycodelin levels were determined, and the level of reactive oxygen species was studied. The zinc level determination in the spermoplasm was carried out by a standard spectrophotometric method with 5-Br-PAPS chromogen. The Pearson's formula was used for the correlation analysis. The study was conducted from 2018 to May 2022, once. Results: A significant negative correlation of the zinc level in the spermoplasm with the age of men was revealed (r=-0.16; p <0.001). The level of zinc in the spermoplasm weakly negatively correlated with the dilution time and with the viscosity of the sperm. The positive correlation was found with the number of spermatozoa (r=0.13; p <0.01) and their mobility (r=0.38; p <0.00001). The level of zinc in the spermoplasm negatively correlated with the degree of the sperm DNA fragmentation and with the amount of reactive oxygen species, and positively correlated with the results of the test for binding to hyaluronic acid. Conclusions: The level of zinc in the spermoplasm significantly correlates with a number of physiological and biochemical characteristics of the sperm. The data obtained allow us to recommend determination of the zinc level in the sperm plasma to not only assess the functional activity of the prostate gland, but also to diagnose the fertility of the ejaculate, as well as to optimize the therapy with zinc-containing drugs and improve the control over the effectiveness of the treatment. Keywords: zinc; ejaculate; sperm; fertility; male infertility.
For citation: Lutsky DL, Lutskaya AM, Makhmudov RM, Palkina EV, Polunin AI. Correlation of the Zinc Level in the Spermoplasm with the Fertility Characteristics of Human Ejaculate. Journal of Clinical Practice. 2023;14(1):54-65. doi: https://doi.org/10.17816/clinpract115002
Submitted 30.11.2022 Revised 03.12.2022 Published 30.12.2022
более трехсот металлоферментов [6] справедливо позволяет отнести его к группе эссенциальных микроэлементов [7].
Нарушение метаболизма цинка может быть обусловлено не только природными эндогенными факторами, но и экзогенными, а также техногенными [8], тем более что природные геохимические аномалии в распределении этого элемента встречаются в целом ряде стран (Португалия, Иран, Египет, Турция, Панама и др.), включая и ряд регионов России [9, 10].
Препараты цинка давно используются для лечения заболеваний органов мужской репро-
дуктивной системы [6, 11]. Однако, несмотря на признаваемую всеми исследователями важную роль цинка в функционировании репродуктивной системы мужчин [7, 11-13], данные о диагностическом значении определения этого микроэлемента в спермоплазме человека и взаимосвязи его уровня с основными параметрами фертильности спермы носят довольно противоречивый характер (табл. 1). Так, например, в работе А.Р. Ра!ап1 и А.Н. А!эИаиеп [2] показано отсутствие корреляции подвижности, морфологии и количества сперматозоидов с уровнем цинка в спермоплаз-ме. В работах других исследователей сообщается
«ШТАТ ГАТАТ кТ ГА к
Таблица 1 / Table 1
Корреляция уровня цинка в спермоплазме с основными параметрами спермограммы
по данным литературы /
Correlation of the zinc level in the spermoplasm with the main parameters of the spermogram
according to the literature
Количество сперматозоидов Морфология сперматозоидов Подвижность сперматозоидов Общее количество обследованных (фертильных/ субфертильных) Средний возраст обследованных (фертильных/ субфертильных) Метод определения цинка в спермоплазме Год публикации Источник литературы
+ N - 106 (8/98) нд ПК 1999 [14]
+ N + 210 (103/107) 34,2±4,3/34,8±5,3 ААС-ПА 2000 [15]
+ N N 210 (107/103) нд ААС-ПА 2001 [1]
+ + + 170 (20/150) нд ААС-ПА 2005 [16]
+ + N 72 (36/36) 30,44±3,83/30,02±3,88 ААС-ПА 2009 [17]
N нд N 99 (39/60) 31,87±3,76* ПК 2009 [18]
+ N N 152 (61/91) 33,43±5,10* ААС-ПА 2010 [19]
+ N + 1618 (318/1300) 33,09±0,59/34,33±0,37 ПК 2011 [4]
+ N + 250 (60/190) 33,43±4,40/37,80±4,54 ААС-ПА 2012 [20]
+ + + 52 (8/44) нд ААС-ПА 2013 [21]
нд + + 110 (50/60) 35,0±9,5* ПК 2016 [22]
N N N 131 (25/106) 32,3±6,9/36,3±6,9 ОЭС-ИСП 2017 [2]
N нд N 106 (96/96) 30,2±5,3/31,2±5,9 ААС-ПА 2018 [3]
+ + + 144 нд ААС-ПА 2018 [23]
+ нд нд 276 (176/100) 32 (30-37)/35 (31-38) ПК 2020 [24]
N + + 70 (40/30) 36,80±4,91/37,74±5,41 ААС-ПА 2021 [25]
N N + 70 32,50±6,58* ААС-ПА 2022 [26]
Примечание. * — средний возраст всех обследованных; «нд» — данные не приводятся; «N» — корреляция отсутствует; «+» — достоверная положительная корреляция; «-» — достоверная отрицательная корреляция. ААС-ПА — атомно-абсорбционная спектроскопия с пламенной атомизацией; ПК — прямая колориметрия (спектрофотомет-рия); ОЭС-ИСП — оптическая эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой. Note: * — the average age of all the examined persons; нд — the data are not provided by the author; N — no correlation found; «+» — reliable positive correlation; «-» — reliable negative correlation; ААС-ПА — atomic absorption spectroscopy with flame atomization; ПК — direct colorimetry (spectrophotometry); ОЭС-ИСП — optical emission spectrometry with inductively coupled plasma.
о достоверной корреляции уровня цинка в спермоплазме с подвижностью, морфологией и количеством сперматозоидов [16, 21]. В ряде исследований установлена достоверная корреляция уровня цинка в спермоплазме только с количеством сперматозоидов [1, 19, 24] (рис. 1), в то время как в работах других авторов показаны корреляции спермоплазменного уровня цинка с морфологией и подвижностью сперматозоидов, но не с количеством сперматозоидов [25] или только с подвижностью [26] (рис. 1б, в).
Использование разных методических подходов к определению уровня цинка в спермоплазме также не может объяснить противоречивость полученных
данных (рис. 1г), тем более что для основных методов определения уровня цинка в спермоплазме, а именно атомно-абсорбционной спектроскопии с пламенной атомизацией и прямой колориметрии (спектрофотометрии), показана высокая степень корреляции (г=0,996, л=105) [27]. Не случайно все исследовательские работы, включая обзоры и ме-таанализы, в заключение делают вывод о необходимости дальнейших исследований взаимосвязи уровня цинка в спермоплазме с параметрами фер-тильности эякулята.
Цель исследования — изучение корреляций уровня цинка в спермоплазме с характеристиками спермограммы.
опро
МЕТОДЫ
Дизайн исследования
Двухцентровое наблюдательное когорное ретроспективное.
Критерии соответствия
Критерии включения: мужской пол.
Критерии невключения: рак предстательной железы; синдромом Данбольта-Клосса, болезнь Прасада; вредные привычки (курение, алкоголизм); лечение цинксодержащими, а также препаратами, способными оказывать негативное воздействие на мужскую фертильность [28].
Критерии исключения: азооспермия.
Условия проведения
Исследование выполнено на базе лаборатории «ДИАМЕД-экспресс» ООО «РЕПРОДИАМЕД» и клинико-диагностической лаборатории Александро-Мариинской областной клинической больницы (Астрахань).
Продолжительность исследования
Исследование проводилось однократно в период с 2018 г. по май 2022 г.
Описание медицинского вмешательства
Для достижения поставленной цели пациентам, обратившимся для проведения спермограммы, выполнены комплексный анализ эякулята и определение уровня цинка в спермоплазме.
Комплексный анализ спермы, кроме выполнения стандартной спермограммы по протоколу ВОЗ [5], включал MAR-тест (Mixed Agglutination Reaction) или IBD-тест (ImmunoBead Direct) для выявления на поверхности сперматозоидов анти-спермальных антител — иммуноглобулинов изоти-пов A, G, M; определение в спермоплазме лимонной кислоты, фруктозы, активности нейтральной а-глюкозидазы и акрозина, степени фрагментации ДНК сперматозоидов (Sperm DNA Fragmentation, SDF-тест), взаимодействия сперматозоидов с гиалуроновой кислотой и уровня оксидативного стресса.
Для оценки результатов спермограммы использовали нормативные значения (табл. 2), рекомендованные экспертной группой ВОЗ [5] и общепринятые в лабораторной диагностике при исследовании эякулята [29].
Для выполнения MAR-теста использовали коммерческие наборы SpermMar IgA и SpermMar IgG
Корреляция положительная
Щ Корреляция отсутствует
Щ Оптическая эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой (ОЭС-ИСП)
Щ Прямая колориметрия (спектрофотометрия) (ПК)
Щ Атомно-абсорбционная спектроскопия с пламенной атомизацией (ААС-ПА)
Рис. 1. Взаимосвязь уровня цинка с параметрами спермоплазмы по данным литературы. Частота выявления взаимосвязи с количеством (a); морфологией (б) и подвижностью (в) сперматозоидов; (г) — методы определения цинка в спермоплазме. Fig. 1. Correlation of zinc levels with sperm parameters according to the literature. Frequency of zinc relationship with the amount (a); morphology (б) and motility (в) of spermatozoa; (г) — methods for determining zinc in spermoplasm.
(FertiPro, Бельгия), а также ImmunoSpheres AntiIgM (Bioscreen Inc., США). Исследование проводили в соответствии с рекомендациями экспертной группы ВОЗ [29].
Определение в спермоплазме уровня лимонной кислоты проводили спектрофотометричес-ким методом с использованием коммерческого набора Citric Acid Test (FertiPro, Бельгия). Оптическую плотность определяли при длине волны 405 нм [29].
Для определения в спермоплазме уровня фруктозы использовали спектрофотометрический метод. В работе применяли коммерческий набор
ГАТАТ
кТ ГА
Таблица 2 I Table 2
Референсные значения показателей фертильности эякулята / Reference values of the ejaculate fertility indicators
Характеристики эякулята Значение параметров спермограммы Единицы измерения
Объем >1,5 мл
Вязкость эякулята <2,0 см
Общее количество сперматозоидов >40,0 х106
Концентрация сперматозоидов >15,0 х106!мл
Активно подвижные сперматозоиды (категория «а») >25,0 %
Прогрессивно подвижные сперматозоиды (категория «а+b») >50,0 %
Жизнеспособность сперматозоидов (витальная окраска и/или HOS-тест) >58,0 %
Нормальные формы сперматозоидов >4,0 %
рН >7,2 -
Лейкоциты <1,0 х106!мл
Неспецифическая агрегация сперматозоидов Отсутствует -
Агглютинация сперматозоидов Отсутствует -
MAR-тест (или IBD-тест) <50,0 %
HBA-тест >80,0 %
SDF-тест <15,0 %
Цинк >150,0 мкг!эякулят
Лимонная кислота >10,0 мг!эякулят
Фруктоза >2,4 мг!эякулят
Нейтральная альфа-глюкозидаза >20,0 мМЕ!эякулят
Акрозин от 50,0 до 250,0 мкМЕ! 106 сперматозоидов
Гликоделин-S от 20,0 до 200,0 мкг!мл
ROS (активные формы кислорода) Уровень-1 (низкий) -
Fructose Test (FertiPro, Бельгия). Оптическую плотность определяли при длине волны 492 нм [29].
Активность нейтральной а-глюкозидазы определяли спектрофотометрическим методом с р-нитро-фенил-а^-глюкопиранозидом в качестве субстрата. Для исследования использовали коммерческий набор EpiScreen Plus (FertiPro, Бельгия). Оптическую плотность определяли при длине волны 405 нм [29].
Для определения степени фрагментации ДНК сперматозоидов использовали непрямой метод оценки дисперсии хроматина (Sperm Chromatin Dispersion, SCD), в основе которого лежит восприимчивость ДНК сперматозоидов к кислотной денатурации. Неповрежденные цепи ДНК раскрываются после денатурации и экстракции ядерных белков, в то время как при фрагментации ДНК дисперсии не происходит или она бывает минимальной. Метод SCD основан на способности неповрежденного хроматина сперматозоидов образовывать ореолы
дисперсии (halo) после воздействия кислоты и ли-зирующего раствора. Ореолы (halo) соответствуют развернутым петлям ДНК, которые прикреплены к остаточным структурам ядра, образующимся после удаления ядерных белков. Разрывы ДНК, поскольку они подвержены денатурации, препятствуют образованию ореолов (halo). Детекцию образующихся ореолов проводили с использованием световой микроскопии [29]. В работе использовали коммерческие наборы GoldCyto DNA (Guangzhou Jinsaite Trading, Китай) и Halosperm G2 (Halotech DNA, Испания).
Тест НВА (Hyaluronan Binding Assay) проводили на слайдах с иммобилизованной гиалуроновой кислотой по стандартной методике с использованием коммерческого набора HBA Assay (Biocoat Inc., США) [29].
Активность акрозина определяли стандартным спектрофотометрическим методом с N-a-бензоил-
9Г)23
2023
Том 14 »1
DL-аргинин-р-нитроанидидом (BAPNA) в качестве субстрата при помощи коммерческого набора AcroScreen (Bioscreen Inc., США). Оптическую плотность определяли при длине волны 405 нм [29].
Определение гликоделина в спермоплазме проводили методом твердофазного иммуноферментно-го анализа в «сэндвич»-модификации с использованием коммерческого набора «АМГФ Фертитест-М» (ООО «Диатекс-ЭМ», Россия).
Для определения активных форм кислорода (Reactive Oxygen Species, ROS) использовали колориметрический метод с нитросиним тетразолием (НСТ). Метод основан на способности супероксидного анион-радикала восстанавливать водорастворимый НСТ до нерастворимого в воде формазана. Кристаллы формазана имеют интенсивную синюю окраску [29]. В работе использовали коммерческий набор OxiSperm (Halotech DNA, Испания).
Определение уровня цинка в спермоплазме проводили стандартным спектрофотометрическим методом [29], при котором хромоген 5-Br-PAPS [2-(5-нитро-2-пиридилазо)-5-^-пропил-^сульфо-пропиламино)-фенол], связываясь с цинком, меняет цвет:
5-Br-PAPS + Zn2+ ^ 5-Br-PAPS-Zn.
Комплекс 5-Br-PAPS-Zn поглощает свет с длиной волны 560 нм (550-580). Оптическая плотность образующегося стабильного комплекса пропорциональна содержанию цинка в пробе.
В работе использовали коммерческий набор Zinc Sp-DAC.Lq (DAC-SpectroMed s.r.l., Республика Молдова). Оптическую плотность определяли при длине волны 570 нм. Границы линейности — 0-10,0 мкг/мл (эквивалентно 1000,0 мкг/мл в цельном образце). Внутрисерийный коэффициент вариации (воспроизводимость в пределах периода) — CV ^3,0%. Межсерийный коэффициент вариации (воспроизводимость от периода к периоду) — CV ^6,5%.
Этическая экспертиза
Работа выполнена в соответствии с этическими нормами Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками от 2013 года. От всех обследованных лиц получено информированное согласие на проведение исследования и использование анонимизированных данных о состоянии их здоровья в научных целях.
Статистический анализ
Исходя из поставленной цели, для статистического анализа использовали t-критерий Стьюден-та, коэффициент линейной корреляции (формула Пирсона), программный пакет MedCalc Ver.19.8 (MedCalc Software Ltd., Бельгия). В качестве порогового уровня статистической значимости принято значение p <0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Объекты (участники) исследования
Всего обследовано 510 пациентов, соответствующих критериям включения и невключения, из них у 24 (4,7%) установлена азооспермия, и в соответствии с заявленными критериями эякуляты этих пациентов были исключены из дальнейшей работы.
Оставшиеся 486 мужчин в возрасте от 17 до 68 лет приняли участие в дальнейшем исследовании, из них 407 субфертильных пациентов и 79 условно здоровых с подтвержденной фертиль-ностью (дети в возрасте до полутора лет). Более подробная характеристика приведена в табл. 3.
Основные результаты исследования
При определении концентрации цинка в спермоплазме выявлена достоверная отрицательная корреляция с возрастом мужчин (p <0,001). Несмотря на значительные индивидуальные различия, у мужчин моложе 30 лет уровень цинка в спермоплазме
Таблица 3 / Table 3
Характеристика обследованной группы пациентов / Characteristics of the examined group of patients
Характеристика Все обследованные Фертильные Субфертильные
Число пациентов, п 486 79 407
Средний возраст, лет 33,07±3,03 33,12±3,06 33,06±3,02
Минимальный возраст, лет 17 20 17
Максимальный возраст, лет 68 68 58
«ШТАТ ГАТАТ
300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100
Моложе 30-34 года 35-39 лет Старше 30 лет n=151 n=121 39 лет
n=146 n=68
Щ Средний уровень цинка в спермоплазме, мкг/экулят
Рис. 2. Средний уровень цинка в спермоплазме у мужчин разных возрастных групп.
Fig. 2. The average level of zinc in the spermoplasm in men of different age groups.
в среднем был значительно выше, чем у мужчин в возрасте 40 лет и старше (рис. 2).
Анализ физико-химических свойств эякулята в сопоставлении с уровнем цинка в спермоплазме показал очень слабые отрицательные корреляции со временем разжижения и с вязкостью спермы (г=-0,0984 и г=-0,0917 соответственно при p <0,05); табл. 4.
Что касается основных характеристик оплодотворяющей способности спермы, то уровень цин-
ка в спермоплазме показал слабую, но достоверную корреляцию (г=0,1345; р <0,01) с количеством сперматозоидов в эякуляте; корреляция с подвижностью сперматозоидов была более сильной (г=0,3825; р <0,00001); см. табл. 4.
Наряду с количеством и подвижностью, одной из важных характеристик фертильности сперматозоидов является их морфология, однако при анализе уровня цинка в спермоплазме эякулятов с различным содержанием морфологически нормальных и дефективных форм сперматозоидов нам не удалось обнаружить достоверной коррелятивной связи.
С жизнеспособностью сперматозоидов уровень цинка в спермоплазме коррелировал слабоположительно (см. табл. 4).
Некоторое количество лейкоцитов в норме всегда присутствует в сперме, но если концентрация лейкоцитов составляет более 106/мл, это считается лейкоспермией и, как правило, свидетельствует о воспалительном процессе (часто инфекционной природы) в органах мужской репродуктивной системы. В проведенном исследовании мы наблюдали достоверную слабоотрицательную корреляцию уровня лейкоцитов и уровня цинка (г=-0,1180; р <0,05).
При анализе наличия антиспермальных антител разных классов (1дА, 1дМ) на поверхности сперматозоидов (МАЯ-тест) значимой корреляции с уровнем цинка в спермоплазме не наблюдалось.
Таблица 4 / Table 4
Корреляция уровня цинка в спермоплазме и показателей спермограммы / Correlation between the zinc level in the spermoplasm and the spermogram parameters
Корреляция уровня цинка в спермоплазме (мкг/эякулят), л=486 Коэффициент линейной корреляции (формула Пирсона), г Р
Возраст пациента -0,1625 <0,001
Количество сперматозоидов 0,1345 <0,01
Подвижность сперматозоидов 0,3825 <0,00001
Морфология сперматозоидов Не коррелирует Недостоверно
Вязкость эякулята -0,0917 <0,05
Время разжижения эякулята -0,0984 <0,05
рН эякулята Не коррелирует Недостоверно
Жизнеспособность сперматозоидов 0,1381 <0,01
Концентрация лейкоцитов в эякуляте -0,1180 <0,01
МАЯ-тест (1дА) Не коррелирует Недостоверно
МАЯ-тест (ВД Не коррелирует Недостоверно
МАЯ-тест (1дМ) Не коррелирует Недостоверно
SDF-тест -0,1907 <0,0001
НВА-тест 0,1201 <0,01
9Г)23 23
Том 14 »1
Дальнейшее исследование, выходящее за рамки стандартной спермограммы, показало, что степень нарушения целостности ДНК сперматозоидов (выявленная при проведение SDF-теста) отрицательно коррелирует с уровнем цинка в спер-моплазме (см. табл. 4).
Тест на связывание с гиалуроновой кислотой (Hyaluronan Binding Assay, НВА-тест) позволяет оценить характер взаимодействия сперматозоидов с прозрачной оболочкой яйцеклетки (zona pellucida), что играет важную роль в оценке оплодотворяющей способности спермы. Обнаружена слабая положительная корреляция результатов HBA-теста с уровнем цинка в спермоплазме (r=0,1201; p <0,01).
Исследование корреляций биохимических параметров эякулята с уровнем цинка позволило установить достоверные положительные корреляции «цинк-лимонная кислота» (p <0,001) и «цинк-активность акрозина» (p <0,00001) и слабоотрицательную корреляцию «цинк-ROS» (p <0,01); табл. 5.
По полученным нами данным, уровень цинка в спермоплазме не коррелировал с концентрацией фруктозы, уровнем гликоделина и активностью нейтральной альфа-глюкозидазы.
ОБСУЖДЕНИЕ
Полученные нами данные о достоверной отрицательной корреляции уровня цинка в эякуляте с возрастом мужчин подтверждают ранее полученные данные [9]. Однако до сих пор в отдельных работах взаимосвязь уровня цинка в спермоплазме с возрастом не прослеживается. Например, в относительно свежей работе H.A. Bazid и соавт. [26] достоверной корреляции уровня цинка в сперме с возрастом не выявлено, на наш взгляд, из-за недостаточного объема выборки (n=70). Полученный нами коэффициент корреляции оказался низким (r=-0,0984; p <0,001; n=486), но характеризовался
достаточно высокой достоверностью, что подтверждает вывод о снижении с возрастом среднего уровня цинка в спермоплазме (см. рис. 2).
При анализе литературы выяснилось, что исследования взаимосвязей уровня спермоплазменного цинка со временем разжижения и вязкостью спермы крайне немногочисленны. Несильные, но достоверные (р <0,05) отрицательные корреляции уровня цинка в спермоплазме со временем разжижения эякулята и с вязкостью спермы, полученные нами в ходе проведенного исследования в целом, согласуются с ранее полученными данными [19]. Пролонгированное время разжижения эякулята на фоне сниженного уровня цинка, вероятно, обусловлено некоторым снижением активности цинкзависимых металлоферментов, которые принимают участие в процессе разжижения коагулировавшей после эякуляции спермы.
Заявленная й. Dissanayake и соавт. [19] корреляция уровня цинка в спермоплазме с рН эякулята (г=-0,193; р <0,05; п=152) при исследовании нами в 3 раза большего количества образцов (п=486) не была подтверждена.
Большинство исследовательских работ сосредоточено на исследовании взаимосвязи уровня цинка в спермоплазме с наиболее значимыми характеристиками фертильности эякулята: количеством, двигательной активностью и морфологией сперматозоидов. Именно с этими параметрами связаны наиболее противоречивые результаты. Наблюдаемые противоречия связаны, на наш взгляд, с недостаточной репрезентативностью: во многих работах число наблюдений не превышает 200 образцов спермы (см. табл. 1), а иногда и меньше 100: п=99 [18], п=72 [17], п=70 [25], п=70 [26], п=52 [21]. В пяти представленных в качестве примера работах исследовано в общей сложности всего 363 образца эякулята, и получены противоречивые
Таблица 5 / Table 5
Корреляция уровня цинка и других биохимических компонентов спермоплазмы / Correlation between the level of zinc and other biochemical components of the spermoplasm
Корреляция уровня цинка в спермоплазме (мкг/эякулят), n=486 Коэффициент линейной корреляции (формула Пирсона), г Р
Концентрация лимонной кислоты 0,1541 <0,001
Концентрация фруктозы Не коррелирует Недостоверно
Концентрация гликоделина-S Не коррелирует Недостоверно
Активность нейтральной альфа-глюкозидазы Не коррелирует Недостоверно
Активность акрозина 0,2137 <0,00001
Уровень ROS (активных форм кислорода) -0,1212 <0,01
«ШТАТ ГАТАТ
данные. Такой объем выборки представляется недостаточным для выявления слабых корреляций и вызывает путаницу при интерпретации полученных результатов.
По нашим данным (л=486), уровень цинка в спер-моплазме слабоположительно коррелирует с количеством сперматозоидов (p <0,01), что, вероятно, обусловлено участием цинка в процессе сперматогенеза при митозе сперматогоний и мейозе спер-матоцитов, например, через регуляцию одного из ключевых ферментов — рибонуклеазы [7, 30]. Полученные нами данные согласуются с достаточно презентативным исследованием (л=1618), показавшим, что уровень цинка в спермоплазме пациентов с олигозооспермией в среднем более чем на 20% ниже, чем у пациентов с нормозооспермией [4].
Проведенный метаанализ взаимосвязи уровня цинка в спермоплазме с двигательными характеристиками сперматозоидов показал большую неоднородность данных, но в целом было показано, что при астенозооспермии уровень цинка в спер-моплазме более низкий в сравнении с эякулятами с нормальной подвижностью сперматозоидов [31]. Известно, что тестикулярные и эпидидимальные сперматозоиды содержат меньше интрацеллюляр-ного цинка, чем эякулированные сперматозоиды (2,56±0,51 и 12,58±3,16 против 40,48±12,71 нг Zn на 106 сперматозоидов соответственно) [32]. Цинк присутствует в митохондриях сперматозоидов и вдоль жгутиков [12]. Поддержание баланса экстра- и инт-рацеллюлярного цинка осуществляется системой рецепторов и белков-переносчиков, один из транс-портно-регуляторных путей включает следующий каскад: GPR39 (G protein-coupled receptor 39 type; zinc-sensing receptor) - аденилилциклаза - циклический аденозинмонофосфат (цАМФ) - протеин-киназа А - тирозинкиназа SRC - рецептор эпидер-мального фактора роста (epidermal growth factor receptor, EGFR) - фосфолипаза С [33]. При этом передача сигналов вторичных мессенджеров (цАМФ) организована в сперматозоидах в субклеточных доменах (головка, основная часть жгутика, концевая часть жгутика) [34], что позволяет эффективно регулировать подвижность сперматозоидов, включая и своевременную стимуляцию гиперактивности за счет поддержания оптимального баланса цинка внутри сперматозоидов [35], что невозможно без достаточного уровня цинка в спермоплазме. Что и подтверждается наблюдавшейся нами значимой корреляцией уровня цинка с подвижностью сперматозоидов (p <0,00001). Схожие регуляторные
механизмы, вероятно, объясняют и корреляцию уровня цинка в спермоплазме с активностью акро-зина, так как рецептор GPR39 обнаружен не только на жгутике, но и на акросоме сперматозоида [33], и цинк может стимулировать акросомальный экзо-цитоз сперматозоидов млекопитающих [12, 36].
В отличие от некоторых других исследователей, достоверной корреляции уровня цинка в спермоплазме с морфологией сперматозоидов мы не наблюдали. Вероятно, выявленные другими исследователями зависимости уровня спермоплазменного цинка и морфологии сперматозоидов обусловлены недостаточным объемом выборки (например, л=70 [25], n=52 [21]) или неслучайным характером выборки (например, наличие у пациентов урогени-тального хламидиоза) [22].
Положительная корреляция уровня цинка в спермоплазме с жизнеспособностью сперматозоидов, на наш взгляд, может быть обусловлена участием этого микроэлемента в стабилизации мембран сперматозоидов как путем регуляции фазового состояния мембранных липидов [7, 15], так и за счет участия в антиоксидантной защите [6, 37]. Не исключено, что определенную роль может играть участие цинка в регуляции процесса ферроптоза сперматозоидов [38].
В работе белорусских коллег была показана достаточно сильная корреляция (r=0,40; p <0,05; л=144) между уровнем цинка в спермоплазме и общей антиоксидантной активностью спермоплазмы [23]. Действительно, мы наблюдали достоверную (p <0,01) отрицательную корреляцию уровня цинка в спермо-плазме с уровнем активных форм кислорода в эякуляте. Участие цинка в системе антиоксидантной защиты может реализоваться как через цинксодер-жащие ферменты, например супероксиддисмутазу, так и через неферментативные механизмы, что подтверждается другими исследователями [7].
Слабоотрицательная корреляция уровня цинка в спермоплазме с концентрацией лейкоцитов в эякуляте, которую мы наблюдали, подтверждает ранее полученные данные [39]. В ряде случаев снижение уровня цинка в сперме отражает нарушение функциональной активности предстательной железы при простатитах, которые часто становятся причиной лейкоспермии [40, 41]. Урогенитальные инфекции, наиболее частые причины лейкоспер-мии, также могут сопровождаться снижением уровня цинка в спермоплазме, но не во всех случаях. Например, при урогенитальном хламидиозе уровень цинка в спермоплазме, по данным О.Р. Зи-ганшина и соавт. [22], был достоверно снижен, в то
9Г)Р3
же время, по нашим данным, при урогенитальном уреаплазмозе значимого изменения уровня цинка в спермоплазме не наблюдалось [4P]. Следует также отметить, что системные воспалительные процессы могут влиять на уровень цинка в спер-моплазме. Например, после COVID-19 в отдельных исследованиях отмечалось снижение уровня цинка в спермоплазме (p <0,05; n=17) на фоне фрагментации ДНК сперматозоидов 15% и выше [43]. В проведенном нами исследовании (n=144) после бессимптомных и легких форм COVID-19 достоверного изменения уровня цинка в спермоплазме не отмечено [44]. Указанные выше противоречия, на наш взгляд, объясняются особенностями воздействия разных патогенов на макроорганизм и различной тяжестью протекания инфекционного процесса.
Наблюдавшаяся отрицательная корреляция уровня цинка в спермоплазме и степени фрагментации ДНК сперматозоидов полностью согласуется с ранее полученными данными [45]. Цинк участвует в образовании связей типа S-Zn-S в структуре протамина, действует как регулятор дисульфидных поперечных связей в ядре сперматозоида [7], улучшает метилирование ДНК и целостность хроматина при токсических воздействиях [46].
Корреляция уровня цинка в спермоплазме с результатами HBA-теста, на наш взгляд, может быть обусловлена свойством цинка регулировать степень сродства рецепторов через механизм кон-формационных изменений, модулируя таким образом процесс взаимодействия сперматозоидов с zona pellucida [47, 48].
Положительная корреляция уровня в спермо-плазме цинка и лимонной кислоты обусловлена общим местом биосинтеза — предстательной железой [40]; кроме того, секреция цинка происходит частично в комплексе с лимонной кислотой, которая выступает в роли лиганда [7].
В отличие от некоторых других исследователей [49], мы не обнаружили какой-либо корреляции уровня цинка в спермоплазме с активностью нейтральной альфа-глюкозидазы (имеющей эпи-дидимальное происхождение), а также с уровнем в спермоплазме фруктозы и гликоделина (секрети-руемых семенными пузырьками).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Показана корреляция уровня цинка в спермо-плазме с рядом физиологических и биохимических характеристик спермы. Полученные данные позволяют рекомендовать определение цинка в спер-
моплазме не только для оценки функциональной активности предстательной железы, но и для диагностики фертильности эякулята, а также оптимизировать терапию цинксодержащими препаратами и улучшить контроль над эффективностью проводимого лечения.
ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ / ADDITIONAL INFORMATION Вклад авторов. Д.Л. Луцкий — концепция и дизайн исследования, статистический анализ данных, написание рукописи; Р.М. Махмудов — статистический анализ данных; А.М. Луцкая — сбор и обработка материала, написание рукописи, Е.В. Палки-на, А.И. Полунин — сбор и обработка материала, редактирование рукописи. Авторы подтверждают соответствие своего авторства международным критериям ICMJE (все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи прочли и одобрили финальную версию перед публикацией).
Author contribution. D.L. Lutsky — research concept and design, statistical data analysis, manuscript writing; R.M. Makhmudov — statistical data analysis; A.M. Lutskaya — collection and processing of material, manuscript writing; E.V. Palkina, A.I. Polunin — collection and processing of the date, manuscript editing. The authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work.
Источник финансирования. Исследование и публикация статьи осуществлены на личные средства авторского коллектива.
Funding source. The study had no sponsorship.
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.
ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES
1. Wong WY, Flik G, Groenen PM, et al. The impact of calcium, magnesium, zinc, and copper in blood and seminal plasma on semen parameters in men. Reprod Toxicol. 2001;15(2):131-136. doi: 10.1016/s0890-6238(01)00113-7
2. Palani AF, Alshatteri AH. Impact of trace elements in the seminal plasma on sperm quality in infertile men. ZJPAS. 2017;29(4): 150-156. doi: 10.21271/ZJPAS.29.s4.18
«ШТАТ ГАТАТ
3. Hashemi MM, Behnampour N, Nejabat M, et al. Impact of seminal plasma trace elements on human sperm motility parameters. J Intern Med. 2018;56(1):15-20. doi: 10.1515/rjim-2017-0034
4. Khan MS, Zaman S, Sajjad M, et al. Assessment of the level of trace element zinc in seminal plasma of males and evaluation of its role in male infertility. Int J Appl Basic Med Res. 2011;1(2): 93-96. doi: 10.4103/2229-516X.91152
5. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. 6th ed. Geneva: WHO Press; 2021. 276 p.
6. Skalny AV, Aschner M, Tinkov AA. Zinc. Adv Food Nutr Res. 2021;96:251-310. doi: 10.1016/bs.afnr.2021.01.003
7. Fallah A, Mohammad-Hasani A, Colagar A. Zinc is an essential element for male fertility: A review of Zn roles in men's health, germination, sperm quality, and fertilization. J Reprod Infertil. 2018;19(2):69-81.
8. Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология. Москва: Медицина, 1991. 496 с. [Avtsyn AP, Zhavoronkov AA, Rish MA, Strochkova LS. Human microelementoses: etiology, classification, organopathology. Moscow: Medicina; 1991. 496 р. (In Russ).]
9. Brown KH, Rivera JA, Bhutta Z, et al. International Zinc Nutrition Consultative Group (IZiNCG) technical document #1. Assessment of the risk of zinc deficiency in populations and options for its control. Food Nutr Bull. 2004;25(1 Suppl 2):S99-203.
10. Сальникова Е.В. Потребность человека в цинке и его источники // Микроэлементы в медицине. 2016. Т. 17, № 4. С. 11-15. [Salnikova EV. Human needs for zinc and its sources. Trace elements med. 2016;17(4):11-15. (In Russ).] doi: 10.19112/2413-6174-2016-17-4-11-15
11. Полунин А.И., Мирошников В.М., Николаев А.А., и др. Использование препарата цинка в лечении мужской субфер-тильности // Микроэлементы в медицине. 2001. Т. 2, № 4. С. 44-46. [Polunin AI, Miroshnikov VM, Nikolaev AA, et al. The use of zinc preparation in the treatment of male subfertility. Trace elements med. 2001;2(4):44-46. (In Russ).]
12. Allouche-Fitoussi D, Breitbart H. The role of zinc in male fertility. Int J Mol Sci. 2020;21(20):7796. doi: 10.3390/ijms21207796
13. Осадчук Л.В., Даниленко А.Д., Осадчук А.В. Влияние цинка на мужскую фертильность // Урология. 2021. № 5. С. 84-93. [Osadchuk LV, Danilenko AD, Osadchuk AV. The effect of zinc on male fertility. Urologiya. 2021;(5):84-93. (In Russ).] doi: 10.18565/urology.2021.5.84-93
14. Fuse H, Kazama T, Ohta S, Fujiuchi Y. Relationship between zinc concentrations in seminal plasma and various sperm parameters. Int Urol Nephrol. 1999;31(3):401-408. doi: 10.1023/a:1007190506587
15. Chia SE, Ong CN, Chua LH, et al. Comparison of zinc concentrations in blood and seminal plasma and the various sperm parameters between fertile and infertile men. J Androl. 2000;21(1):53-57.
16. Zhao RP, Xiong CL. [Zinc content analysis in serum, seminal plasma and spermatozoa of asthenozoospermic and oligoasthenozoospermic patients.] Zhonghua Nan Ke Xue. 2005; 11(9):680-682. (In Chinese).
17. Colagar AH, Marzony ET, Chaichi MJ. Zinc levels in seminal plasma are associated with sperm quality in fertile and infertile men. Nutr Res. 2009;29(2):82-88. doi: 10.1016/j.nutres.2008.11.007
18. Abdul-Rasheed OF. The relationship between seminal plasma zinc levels and high molecular weight zinc binding protein and sperm motility in Iraqi infertile men. Saudi Med J. 2009;30(4):485-489.
19. Dissanayake D, Wijesinghe P, Ratnasooriya W, Wimalasena S. Relationship between seminal plasma zinc and semen quality in a subfertile population. J Hum Reprod Sci. 2010;3(3):124-128. doi: 10.4103/0974-1208.74153
20. Atig F, Raffa M, Habib BA, et al. Impact of seminal trace element and glutathione levels on semen quality of Tunisian infertile men. BMC Urology. 2012;12(6):1-8. doi: 10.1186/1471-2490-12-6
21. Sundaram V, Srinivas M, Gurunathan J, et al. Influence of trace elements and their correlation with semen quality in fertile and infertile subjects. Turk J Med Sci. 2013;43(6): 1000-1007. doi: 10.3906/sag-1211-54
22. Зиганшин О.Р., Гизингер О.А., Францева О.В. Снижение цинка в семенной жидкости как фактор нарушения фертильно-сти у пациентов с хламидийным поражением мочеполовой системы // Клиническая дерматология и венерология. 2016. Т. 15, № 4. С. 42-47. [Ziganshin OR, Gizinger OA, Frantseva OV. Decrease in zinc level in the semen as a factor of impaired fertility in patients with Chlamydial infection of the genitourinary system. Clin Dermatol Venereol. 2016;15(4):42-47. (In Russ).] doi: 10.17116/klinderma201615442-47
23. Ниткин Д.М., Ракевич М.В., Коледа А.Г., и др. Характеристика репродуктивного потенциала эякулята в зависимости от антропометрического статуса и метаболического состояния организма мужчин фертильного возраста // Лабораторная диагностика. Восточная Европа. 2018;7(4):517-526. [Nitkin DM, Rakevich MV, Koleda AG, et al. Characteristics of the reproductive potential of ejaculate depending on anthropometric status and metabolic condition of the organism of fertile men. Laboratory diagnostics. Eastern Europe. 2018;7(4): 517-526. (In Russ).]
24. Milostic-Srb A, Vcev A, Tandara M, et al. Importance of zinc concentration in seminal fluid of men diagnosed with infertility. Acta Clin Croat. 2020;59(1):154-160. doi: 10.20471/acc.2020.59.01.19
25. Aljaser F, Tabassum H, Fatima S, et al. Effect of trace elements on the seminal oxidative status and correlation to sperm motility in infertile Saudi males. Saudi J Biol Sci. 2021;28(8):4455-4460. doi: 10.1016/j.sjbs.2021.04.042
26. Bazid HA, Attia AM, Yousef AM, et al. Evaluating the serum and seminal plasma levels of zinc and cadmium in smokers and their relation to the semen parameters. Biol Trace Elem Res. 2022;200(3):1002-1009. doi: 10.1007/s12011-021-02720-3
27. Johnsen O, Eliasson R. Evaluation of a commercially available kit for the colorimetric determination of zinc in human seminal plasma. Int J Androl. 1987;10(2):435-440. doi: 10.1111/j.1365-2605.1987.tb00216.x
28. Ших Е.В., Махова А.А., Мандыч Д.В. Влияние лекарственных средств на мужскую фертильность. Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2018. 128 с. [Shikh EV, Makhova AA, Mandych DV. Influence of medicinal products on male fertility. Moscow: GEOTAR-Media; 2018. 128 р. (In Russ).]
29. Луцкий Д.Л., Николаев А.А., Луцкая А.М. Руководство по исследованию эякулята человека: монография. Астрахань: Астраханский государственный медицинский университет, 2022. 215 с. [Lucky DL, Nikolaev AA, Luckaya AM. Guide to the study of human ejaculate: Monograph. Astrakhan: Astrakhan State Medical University; 2022. 215 p. (In Russ).]
30. Elgazar V, Razanov V, Stoltenberg M, et al. Zinc-regulating proteins, ZnT-1, and metallothionein I/II are present in different cell populations in the mouse testis. J Histochem Cytochem. 2005;53(7):905-912. doi: 10.1369/jhc.4A6482.2005
31. Taravati A, Tohidi F. Association between seminal plasma zinc level and asthenozoospermia: A meta-analysis study. Andrologia. 2016;48(6):646-653. doi: 10.1111/and.12494
32. Foresta C, Garolla A, Cosci I, et al. Role of zinc trafficking in male fertility: From germ to sperm. Hum Reprod. 2014;29(6): 1134-1145. doi: 10.1093/humrep/deu075
33. Allouche-Fitoussi D, Bakhshi D, Breitbart H. Signaling pathways involved in human sperm hyperactivated motility stimulated by Zn. Mol Reprod Dev. 2018;85(6):543-556. doi: 10.1002/mrd.22996
34. Balbach M, Beckert V, Hansen JN, Wachten D. Shedding light on the role of cAMP in mammalian sperm physiology. Mol Cell Endocrinol. 2018;468:111-120. doi: 10.1016/j.mce.2017.11.008
35. Allouche-Fitoussi D, Bakhshi D, Breitbart H. Signaling pathways involved in human sperm hyperactivated motility stimulated by Zn. Mol Reprod Dev. 2019;86(5):502-515. doi: 10.1002/mrd.23128
9Г)Р3
36. Michailov Y, Ickowicz D, Breitbart H. Zn2+-stimulation of sperm capacitation and of the acrosome reaction is mediated by EGFR activation. Dev Biol. 2014;396(2):246-255. doi: 10.1016/j.ydbio.2014.10.009
37. Roy B, Baghel RP, Mohanty TK, Mondal G. Zinc and male reproduction in domestic animals: A review. Indian J Anim Nutr. 2013;30(4):339-350.
38. Николаев А.А., Кузнецова М.Г. Ферроптоз в репродуктивной системе // Проблемы репродукции. 2022. Т. 28, № 5. С. 65-71. [Nikolaev AA, Kuznetsova MG. Ferroptosis in the reproductive system. Russ J Human Reproduction. 2022; 28(5):65-71. (In Russ).] doi: 10.17116/repro20222805165
39. Луцкий Д.Л., Луцкая А.М., Махмудов Р.М. Исследование эякулята и его компонентов в диагностике воспалительных заболеваний мужской репродуктивной системы. Часть 1 // Проблемы репродукции. 2011. Т. 17, № 1. С. 83-87. [Lutsky DL, Makhmudov RM, Lutskaya AM. Parameters of ejaculate in men with inflammatory diseases of reproductive system. Part 1. Russ J Human Reproduction. 2011;17(1):83-87. (In Russ).]
40. Полунин А.И., Мирошников В.М., Луцкий Д.Л., Николаев А.А. Хронический неспецифический простатит и уретрит: современные вопросы диагностики и лечения. Астрахань: АГМА, 2001. 194 с. [Polunin AI, Miroshnikov VM, Lutsky DL, Nikolaev AA. Chronic nonspecific prostatitis and urethritis: Modern issues of diagnosis and treatment. Astrakhan: AGMA; 2001. 194 p. (In Russ).]
41. Cui D, Han G, Shang Y, et al. The effect of chronic prostatitis on zinc concentration of prostatic fluid and seminal plasma: A systematic review and meta-analysis. Curr Med Res Opin. 2015;31(9):1763-1769. doi: 10.1185/03007995.2015.1072707
42. Луцкий Д.Л., Луцкая А.М., Выборнов С.В., Махмудов Р.М. Биохимическое и морфофункциональное исследование спермы мужчин, инфицированных антибиотико-резистентными штаммами Ureaplasma urealyticum // Клиническая практика. 2021. Т. 12, № 2. C. 21-29. [Lutsky DL, Lutskaya AM, Vybornov SV, Makhmudov RM.
A biochemical and morphofunctional study of the sperm of men infected with antibiotic-resistant strains of ureaplasma. J Clin Practice. 2021;12(2):21-29. (In Russ).] doi: 10.17816/clinpract71584
43. Shcherbitskaia AD, Komarova EM, Milyutina YP, et al. Oxidative stress markers and sperm DNA fragmentation in men recovered from COVID-19. Int J Mol Sci. 2022;23(17):10060. doi: 10.3390/ijms231710060
44. Луцкий Д.Л., Махмудов Р.М., Луцкая А.М., и др. Влияние бессимптомного и легкого течения COVID-19 на характеристики спермы // Клиническая практика. 2022. Т. 13, № 3. C. 17-24. [Lutsky DL, Makhmudov RM, Lutskaya AM, et al. The impact of asymptomatic and mild COVID-19 on sperm characteristics. J Clin Practice. 2022;13(3):17-24. (In Russ).] doi: 10.17816/clinpract109001
45. Nguyen TT, Trieu TS, Tran TO, Luong TL. Evaluation of sperm DNA fragmentation index, Zinc concentration and seminal parameters from infertile men with varicocele. Andrologia. 2019; 51(2):e13184. doi: 10.1111/and.13184
46. Khadivi F, Razavi S, Hashemi F. Protective effects of zinc on rat sperm chromatin integrity involvement: DNA methylation, DNA fragmentation, ubiquitination and protamination after bleomycin etoposide and cis-platin treatment. Theriogenology. 2020;142:177-183. doi: 10.1016/j.theriogenology.2019.09.039
47. Kerns K, Zigo M, Drobnis EZ, et al. Zinc ion flux during mammalian sperm capacitation. Nat Commun. 2018;9(1):2061. doi: 10.1038/s41467-018-04523-y
48. Kerns K, Sharif M, Zigo M, et al. Sperm cohort-specific zinc signature acquisition and capacitation-induced zinc flux regulate sperm-oviduct and sperm-zona pellucida interactions. Int J Mol Sci. 2020;21(6):2121. doi: 10.3390/ijms21062121
49. Mankad M, Sathawara NG, Doshi H, et al. Seminal plasma zinc concentration and alpha-glucosidase activity with respect to semen quality. Biol Trace Elem Res. 2006;110(2):97-106. doi: 10.1385/BTER:110:2:97
ОБ АВТОРАХ
Автор, ответственный за переписку: Луцкий Дмитрий Леонидович, д.м.н., доцент; адрес: Россия, 414056, Астрахань, ул. Татищева, д. 17-45; e-mail: dmitry.lutsky@bk.ru; eLibrary SPIN: 8826-1441; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1412-3322
Соавторы:
Луцкая Аделя Мукминовна, к.м.н., ассистент; e-mail: amm80@bk.ru;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-7094-6331
Махмудов Рамиль Мукминович;
e-mail: ramilmahmudov@mail.ru;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-8565-4788
Палкина Елена Валентиновна;
e-mail: krdlab@rambler.ru;
ORCID: https://orcid.org/0000-0001-8316-7989
Полунин Андрей Иванович, к.м.н.; e-mail: v.pankratenkova@yandex.ru; eLibrary SPIN: 3218-6090; ORCID: https://orcid.org/0000-0003-3491-8349
AUTHORS' INFO
The author responsible for the correspondence: Dmitry L. Lutsky, MD, PhD, Assitant Professor; address: 17-45 Tatishcheva street, 414056 Astrakhan, Russia; e-mail: dmitry.lutsky@bk.ru; eLibrary SPIN: 8826-1441; ORCID: https://orcid.org/0000-0002-1412-3322
Co-authors:
Adela M. Lutskaya, MD, PhD, Assistant; e-mail: amm80@bk.ru;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-7094-6331
Ramil M. Mahmudov;
e-mail: ramilmahmudov@mail.ru;
ORCID: https://orcid.org/0000-0002-8565-4788
Elena V. Palkina;
e-mail: krdlab@rambler.ru;
ORCID: https://orcid.org/0000-0001-8316-7989
Andrej I. Polunin, MD, PhD; e-mail: v.pankratenkova@yandex.ru; eLibrary SPIN: 3218-6090; ORCID: https://orcid.org/0000-0003-3491-8349
