6. Зятьков Л. Л., Ворон В. П. Устойчивость древесных видов к загрязнению атмосферы промпредприятиями г.Северодонецка // Лесоводство и агролесомелиорация. Киев, Вып. 72. 1982. - С 31- 37.
7. Зайцев Г.Н. Математика в экспериментальной ботанике. М., 1990. 50 с.
8. Ковригина Л. Н., Петункина Л. Н., Перфильева Е. В., Волкова И. Ю. Влияние условий промышленного химического комплекса г. Кемерово на развитие и строение годичных побегов древесных растений // Современные проблемы экологической анатомии растений: Сб. науч. тр. 1990. - С. 76-77
9. Негруцкая Г. М., Приседский Ю. Г., Еремка Е. В. Устойчивость некоторых древесных пород к фитотоксикантам // Влияние промышленного загрязнения на лесные экосистемы и мероприятия по повышению их устойчивости. Каунас, 1984. - С. 49
10. Рязанов В. В. Реакция листа покрытосеменных древесных растений, как показатель степени загрязнения атмосферы // ВКР. Южно-Сахалинск, 2010. 65 с.
11. Трешоу М. Диагностика влияния загрязнения воздуха и сходство симптомов // Загрязнение воздуха и жизнь растений. Л., 1988.- С.126-143.
© В.М. Ерёмин, А.С. Багдасарян, К.В. Кузькин, 2015
УДК 576.8.
Э.И.Рехвиашвили,
д.б.н., профессор С.А.Гревцова, к.б.н. доцент М.Ю.Кабулова,
к.б.н. доцент
Горский Государственный Аграрный университет Факультет биотехнологии и стандартизации г. Владикавказ, Российская Федерация
КОРРЕКЦИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ОВЕЦ ПРИ ФАСЦИОЛЕЗЕ
Аннотация
Изучение иммунитета и механизмов его формирования на различных этапах течения гельминтозов является одним из важных направлений в паразитологии. Для повышения иммунореактивности организма овец при фасциолезе и обеспечения наилучшего терапевтического эффекта антгельминтика, одновременно с дегельминтизацией животных применяется иммуностимулятор (полиоксидоний)
Актуальность проблемы объясняется и тем, что гельминтозы являются мощным фактором в создании вторичной иммунологической недостаточности и выявления первичных иммунодефицитов. С одной стороны, это иммунные механизмы тормозящего действия гельминтов на защитные силы хозяина, с другой стороны, новым современным методом защиты здоровья животных является прямая модуляция иммунной системы. В результате изучения иммунного статуса у животных, спонтанно зараженных трематодами, развиваются множественные нарушения иммунной системы, которые прогрессируют со временем. Причины иммунных дефицитов, развивающихся в результате трематодозных инвазий, еще недостаточно изучены. Однако уже имеющиеся данные позволяют заключить, что в патогенезе гельминтозов лежит поражение одного клеточного звена иммунитета весьма упрощенно.
Ключевые слова
фасциолез, иммунитет, Т- и В-лимфоциты, дегельминтизация, полиоксидоний, паразитология,
иммуностимулятор.
Цель и методика исследований
Одним из важных резервов повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и сохранения их здоровья является предотвращение патогенного действия гельминтов и экономического ущерба, причиняемого трематодозами в том числе фасциолезом.
Актуальность проблемы объясняется и тем, что гельминтозы являются мощным фактором в создании вторичной иммунологической недостаточности и выявления первичных иммунодефицитов. С одной стороны, это иммунные механизмы тормозящего действия гельминтов на защитные силы хозяина, с другой стороны, новым современным методом защиты здоровья животных является прямая модуляция иммунной системы [1, с.18],
Под опыт было взято 20 голов овец. Оценка Т-системы иммунитета в реакции спонтанного розеткообразования по методу Jondal (1984) Т-хелперы и Т-супрессоры (ТФЧ, ТФР-РОК) определяли по методу S.Limatilul е1 а1. (1978). Идентификацию В-лимфоцитов проводили по методу E.N.Mendes (1973). Пробы фекалий овец исследовали методом флотации с использованием для подсчета количество яиц фасциол в г фекалий счетной камеры ВИГИС, разработанной Л.Д. Мигачевой, Г.А. Котельниковым(1987).
Результаты исследований
Фасциолез жвачных широко распространены в разных природно-климатических зонах России.
Фасциолы, паразитируя в организме животных, вызывают тяжелые патологические изменения, часто необратимые, а в период острого течения болезни нередко отмечают гибель животных. Хронический фасциолез вызывает так же значительное снижение упитанности, прироста массы тела, и настрига шерсти на 7-12%. Кроме того, болезнь часто сопровождается гибелью животных.
Несмотря на большое количество публикаций по трематодозам эпизоотическая обстановка по фасциолезу, жвачных животных в условиях многоукладной экономики Северного Кавказа остается сложной.
В свете современных представлений о механизме формирования и регуляции иммунного ответа можно судить о том, что в понижении функциональной активности моноцитов и гранулоцитов крови овец, подвергшихся сочетанному заражению, определенную роль играют тимус-зависимые лимфоциты, индуцируемые антигенными субстанциями инвазионных адолескариев фасциол и их половозрелых форм. По мере развития патологических процессов в организме при контакте гельминтов с лимфоидными органами, на фоне ослабления хелперной функции тимус-зависимых лимфоцитов, меняется характер взаимосвязей между макроорганизмом и условно патогенной микрофлорой. Как известно, проявление патогенности условно патогенных микроорганизмов - необязательное условие их существования. Дефекты естественной резистентности организма могут быть результатом развития специфического иммунного ответа, в частности, следствием активации Т-лимфоцитов-супрессоров [2, с. 129. Экспериментальные исследования показывают, что при любом паразитарном заболевании супрессия и, тем более, выключение Т-системы иммунитета, приводит к более тяжелому течению болезни.
Несмотря на очевидные достижения, на современном этапе ант-гельминтиков имеются также неудачи и осложнения. Это касается прежде всего, повышения резистентности некоторых гельминтов к антгельминтикам и развитию чрезмерной чувствительности и даже непереносимости к антгельминтикам у животных. Выяснение механизма побочных явлений при дегельминтизациях, всестороннее изучение действия антгельминтиков на макроорганизмы, представляют особый интерес и имеют важное практическое значение.
Учитывая вышеизложенное, мы считаем актуальным поиск средств и способов регуляции иммунобиологической реактивности животных на основе изучения клеточных механизмов взаимодействий в иммунной системе, создания обоснованных рациональных методов иммунокоррегирующий терапии при спонтанных трематодозах жвачных животных.
Ставя перед собой задачу изучения иммунобиологической реактивности при трематодозах, в своих исследованиях мы ограничились структурным подразделением сложной иерархической системы на уровне спонтанного течения гельминтозов и в качестве модельных паразитов нами были выбраны наиболее часто встречающиеся на Северном Кавказе - фасциолы.
Большие успехи достигнутые в лечении гельминтозов в значительной мере являются следствием внедрения в практику антгельминтиков. Применение их не только обеспечило контроль над
распространением инвазии, но и способствовало снижению интенсивности заражения животных. Однако, несмотря на положительные результаты применения антгельминтиков в ветеринарии, опредилились и серьезные недостатки терапии этими препаратами, к числу которых можно отнести повторные заражения. Решающая роль в исходе инвазионного процесса и в предупреждении заболевания принадлежит защитным факторам организма, его иммунологической реактивности. В связи с тем, что терапевтический эффект при применении антгельминтиков определяется не только их антгельминтной эффективностью, но и состоянием реактивности организма, практически важным является изучение влияния этих средств на иммуногенез микроорганизма.
К настоящему времени накопилось много фактов, свидетельствующих об угнетающем действии гельминтов на иммунореактивность организма при лечении животных больных трематодозами.
Известно, что дегельминтизации животных способствуют быстрому освобождению животных от гельминтов и по видимому тем самым препятствуют выработке полноценного иммунитета (т.к. антгельминтики в большинстве своем являются иммунодепрессантами).
Анализ литературных данных показывает, что частые дегельминтизации способствуют увеличению числа повторных заражений с большей интенсивностью инвазии.
Чтобы повысить иммунореактивность организма и тем самым обеспечить наилучший терапевтический эффект считаем необходимым, одновременно с дегельминтизацией применять иммуностимуляторы. В литературе имеется немало работ, в которых отрицается возможность угнетающего иммуногенез эффекта антгельминтиков при дегельминтизации животных и даже отмечено стимулирующее их действие на иммунитет, но все же дать исчерпывающую характеристику действия антгельминтиков на постинзазионный иммунитет чрезвычайно сложно.
В подавляющем большинстве случаев дегельминтизации проводятся не в первые дни заболевания, а в тот период, когда у зараженных животных уже могли произойти определенные иммунологические изменения. Кроме того, очень трудно установить зависят ли изменения иммунных реакций у животных от действия антгельминтика непосредственно на возбудителя или же они связаны с влиянием лекарственного препарата на способность зараженного животного к иммунологической перестройке. В связи с этим возникает необходимость проведения специальных экспериментальных исследований с четко установленными сроками заражения и дегельминтизаций.
У спонтанно зараженных трематодами животных иммуносупрессия сопровождается стойками иммунодефицитами. Кроме того, установлено, что антгельминтики так же вызывают иммунодефециты [3, с.122].
В связи с этим мы изучили состояние иммунной системы у овец, спонтанно зараженных фасциолезом на фоне дегельминтизации и при коррекции иммуностимулятора полиэлектролита - полиоксидония.
Под опыт взяли 20 овец, которых разделили на 4 группы: 1 -я группа- спонтанно зараженные фасциолезом, служили контролем; 2- я группа - дегельминтизированная политремом из расчета 0,15 г/кг по ДВ; 3-й группе после дегельминтизации на 10 день вводили полиоксидоний из расчета 10 мг/кг внутримышечно двукратно с интервалом 7 дней; 4-я группа-контрольные незараженные животные. (табл 1)
В ходе исследования определяли Т- и В-системы иммунитета, зараженность овец определяли методом последовательных смывов. На 60 сутки животные были убиты и проведено полное гельминтологическое вскрытие с целью определения эффективности препарата.
Из данных таблицы следует, что у овец спонтанно зараженных и на фоне дегельминтизации показатели иммунного статуса снижены, в то время как при введении иммуностимулятора отмечено четкое повышение этих данных.
При изучении В-системы иммунитета у овец, спонтанно зараженных фасциолами, было выявлено уменьшение количества ЕАС-РОК, связанное, по всей вероятности, с нарушением процессов дифференцировки В-лимфоцитов. Количественные изменения в Т-системе сопровождались также функциональными сдвигами, в частности, снижение теофиллинрезистентной Т-популяции лимфоцитов.
Применение полиоксидония в составе комплексной терапии сопровождалось выраженным иммуномодулирующим эффектом, проявляющимся в достоверном увеличении количества лимфоцитов и субпопуляции Тфр-Е-РОК. Восстановление субпопуляции Тфр-Е-РОК сопровождалось снижением Тфч-Е-РОК. Более выраженный эффект препарата наблюдали в отношении увеличения количества "активных" Т-% лимфоцитов.
Анализируя механизм иммунокоррегирующего действия полиоксидония, следует обратить внимание и на В-систему иммунитета. Отражением этого процесса служит достоверное увеличение ЕАС-РОК в группе животных, получивших полиоксидоний после дегельминтизации.
Изменения количественных показателей ЕАС-РОК, характерные для крови овец, спонтанно зараженных только фасциолами, по-видимому, связаны с определенными стадиями развития гельминта [4, с.153].
На основании полученных данных можно предположить, что полиоксидоний оказывает двоякое действие на иммунную систему. С одной стороны возможен прямой контакт пептидов с поверхностными структурами плазматической мембраны лимфоидных клеток, а с другой - пептиды полиоксидония могут непосредственно воздействовать на эпителиальные клетки тимуса, иммунизируя их дифференцировку, в результате чего происходит восстановление Т- и В-системы иммунитета.
Таким образом, применение полиоксидония после дегельминтизации политремом позволяет компенсировать вторичный иммунодефицит, развивающийся в результате воздействия на организм гельминтов и антгельминтика.
Результаты иммунокоррекции полиоксидонием указывают на использование препарата для повышения иммунного статуса и профилактики фасциолеза.
Выводы. Рекомендации
Применение полиоксидония в составе комплексной терапии у овец, зараженных фасциолезом сопровождалось увелеличениям количества субпопуляции Тфр- Е-РОК.
Восстановление субпопуляции Тфр- Е- РОК сопровождалась снижением Тфч- Е- РОК. Иммукоррегирующие действия полиоксидония способствовало достоверному увеличению ЕАС-РОК в группе животных, получавших иммуностимулятор после дегельминтизации. Список использованной литературы .
1.Даугалиева Э.Х., Курочкина К.Т. Иммуносупрессия при гельминтозах.//Труды всероссийского института гельминтологии им. К.И. Скрябина, 1996. -32. - с.17-19.
2.Даугалиева Э.Х. Иммунобиологическая реактивность сельскохозяйственных животных. - Ставрополь, 1997. с. 129.
3.Рехвиашвили Э.И. Эффективность фасковерма при фасциолезе крупного рогатого скота.//Труды Всероссийского института гельминтологии им. К.И. Скрябина, 1997. -32. - с.122-123.
4.Рехвиашвили Э.И. Явление иммуносупрессии у животных разного возраста, спонтанно зараженных трематодами/ В кн. «Иммунологические, технологические, экономические факторы повышения производства продукции сельского хозяйства», М. 2002. с. 151-154.
Таблица 1
Динамика Т- и В-лимфоцитов у овец, спонтанно зараженных фасциолезом на фоне дегельминтизации
и иммунокорегирующей терапии (клеток/мкл)
Дни исслед Т-лимфоциты В-лимфоциты Индекс иммунорегуляции
1группа Пгруппа Шгруппа ^группа 1группа Пгруппа Шгруппа ^группа 1группа Пгруппа Шгруппа ^группа
5 1052 ±44,1 980,4 ±72,1 1150 ±62,2 1350 ±64,8 86,8 ±11,6 76,4 ±18,8 128 ±9,8 104,2 ±4,8 0,6 ±0,01 0,5 ±0,02 1,4 ±0,2 1,2 ±0,2
15 1230 ±72,6 1084 ±38,6 1450 ±52,8 1472 ±48,4 78,2 ±21,4 82,8 ±21,4 180 ±12,2 140,1 ±6,2 0,4 ±0,02 0,4 ±0,03 1,6 ±0,4 1,4 ±0,06
30 1190 ±32,4 1072 ±44,2 1670 ±52,2 1560 ±28,4 88,8 ±22,1 106,2 ±12,2 220 ±18,4 152,6 ±12,4 0,7 ±0,04 0,8 ±0,02 1,8 ±0,6 1,2 ±0,02
45 1087 ±22,8 1290 ±28,8 1780 ±64,0 1640 ±84,6 86,4 ±18,2 132 ±22,2 201 ±21,4 145 ±11,2 0,3 ±0,02 0,9 ±0,04 2,4 ±0,4 1,4 ±0,1
60 1130 ±62,2 1350 ±64,6 1690 ±84,6 1510 ±92,4 78,2 ±16,4 140 ±12,4 18 0±32,2 156 ±18,4 0,6 ±0,04 1,0 ±0,02 2,2 ±0,6 1,2 ±0,1
©Э.И.Рехвиашвили,С.А.Гревцова,М.Ю.Кабулова, 2015г
УДК 575.163:612.13
Э.Р.Шакирова, А.З. Даутова, В.Г.Шамратова
Биологический факультет Башкирский государственный университет г. Уфа, Российская Федерация
ВЛИЯНИЕ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНА АНГИОТЕНЗИН-ПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА И ДВИГАТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НА ПОКАЗАТЕЛИ ГАЗОТРАНСПОРТНОЙ
СИСТЕМЫ КРОВИ
Аннотация
Методом двухфакторного дисперсионного анализа изучено влияние полиморфных вариантов гена ангиотензин-превращающего фермента и двигательной активности и их сочетания на показатели газотранспортной системы крови. Обнаружено, что генотип влияет на изученные показатели только при высокой двигательной активности.
Ключевые слова
Ангиотензин-превращающий фермент, дисперсионный анализ, двигательная активность.
Введение. К одним из основных факторов, непосредственно влияющих на резервные возможности сердечно-сосудистой и дыхательной систем и определяющих функциональную мобилизацию системы транспорта и утилизации кислорода при физических нагрузках, относятся компоненты ренин-ангиотензиновой системы. За последнее десятилетие была установлена связь между аэробными способностями организма и инсерционно-делеционными (1ТО) полиморфизмами генов ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ), ответственного за образование ангиотензина-П [1, с.2]. Показано, что эффективная аэробная работоспособность испытуемых сочетается с большей частотой встречаемости I аллеля и генотипа II АСЕ. Обнаружена также ассоциация АСЕ I аллеля с максимальным потреблением кислорода (МПК) в ответ на физические нагрузки [2, с.3]. В связи с этим представляет интерес изучение влияния полиморфного варианта гена АСЕ на состояние системы доставки кислорода клеткам.
Методы исследования. В исследовании приняло участие 93 студента 18-20-летнего возраста мужского пола, клинически здоровых по результатам ежегодного диспансерного осмотра.
Для генетического анализа использовалась ДНК, выделенная из лимфоцитов крови методом фенольно-хлороформной экстракции. В крови обследованных на амплификаторе «Терцик» с использованием ДНК-полимеразы Thermшaquaticш определяли показатели газотранспортной системы крови: парциальное давление кислорода и углекислого газа (рО2 и рСО2). Материалы исследования обработаны методом двухфакторного дисперсионного анализа при помощи программы «Statisticа 8.0». Первый фактор представлен тремя градациями полиморфных вариантов гена АСЕ (II, ГО, ББ); второй - градациями двигательной активности (ДА): низкая, умеренная и высокая).
Результаты исследования. Рис.1 демонстрирует влияние учтенных факторов на рО2.
110
100 ..о
90
с 80 О CP 70
60
50
40 -о- DD
4 5 6 уровень двигательной активности -о- ID -О" II
Рисунок 1 - Влияние генотипа и физической активности на рО2 (по данным дисперсионного анализа, р<0.05)
Видно, что при низкой ДА у лиц с разными генотипами отсутствуют значимые различия показателей, в то же время у испытуемых с высоким уровнем ДА при генотипе I/I уровень рО2 значительно ниже, чем в