УДК 636.22/.28:612.017.11/12
Коррекция иммунного статуса телят, инфицированных ВЛКРС
С.С.Абакин, к.в.н., С.В.Криворучко, н.с.
Г.А. Дубравная, н.с.
Лейкоз крупного рогатого скота - хроническое заболевание опухолевой природы, этиологическим агентом которого является вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), обладающий иммунодепрессивными свойствами. Болезнь представляет потенциальную опасность для генофонда племенного молочного скота и при отсутствии планомерной борьбы имеет тенденцию к быстрому распространению, так как одной из причин инфицирования является низкая иммунологическая резистентность высокопродуктивных животных.
Для поддержания оптимального функционирования иммунной системы и восстановления иммунитета при иммунодефицитных состояниях в настоящее время в практике широко применяются иммуномодуляторы (Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 2003).
К иммуномодуляторам относятся вещества природного и синтетического происхождения, способные изменять
иммунореактивность организма. Изменение степени
иммунореактивности в ответ на введение иммуномодулятора зависит от множества факторов - химическая структура, доза, способ и схема введения, состояние организма и т. д.
Поскольку вирусные инфекции практически всегда сопровождаются иммуносупрессией, актуальны поиск и применение тех иммуномодуляторов (ИМД), которые способны не только повышать естественную резистентность организма, но и оказывать прямой противовирусный эффект.
В своей экспериментальной работе мы изучали корригирующее действие на организм телят, инфицированных ВЛКРС, таких препаратов, как Лигфол (ООО «Лигфарм», Россия) и Иммунофан (ООО НПП «Бионокс», Россия).
Лигфол - природный экологически безопасный адаптоген, стресс-корректор нового поколения. В его составе находятся гуминовые вещества, полученные при гидролизе природного (древесного) лигнина, - натрия пирофосфат десятиводный, натрия хлорид и апирогенная вода. Одними из основных свойств Лигфола являются иммунорегулирующие, антиоксидантные, противоопухолевые и регенераторные свойства.
Иммунофан - синтетический регуляторный гексапептид структурной формулы аргинил-а-аспартил-лизил-валил-тирозил-аргинин, являющийся иммуноактивным производным фрагментом молекулы тимопоэтина. Фармакологические свойства: Иммунофан
участвует при восстановлении врожденных или приобретенных нарушений клеточного и гуморального иммунитета; повышает антибактериальную и противовирусную резистентность, систему ранней
противоопухолевой защиты организма, оказывает
иммунорегулирующее, противовоспалительное, дезинтоксикационное и гепатопротективное действие.
Экспериментальные исследования проводились на базе СПК «Новомарьевский» Шпаковского района Ставропольского края. Уровень инфицированности ВЛКРС составляет свыше 30%.
От новорожденных телят, до первой выпойки молозива, отбирали пробы крови и проводили исследования на инфицированность вирусом лейкоза по РИД, ИФА (наборы Курской биофабрики) и ПЦР (ООО «Изоген», г. Москва). На основании полученных результатов были сформированы экспериментальные группы.
Иммунобиологические исследования (БАСК, Т-В-лимфоциты, лейкоциты) проводились согласно «Иммунологическим методам» (Фримель Г., 1987).
Для коррекции иммуногенеза инфицированным телятам ежемесячно до 6-месячного возраста вводили иммуномодуляторы Иммунофан (внутримышечно, в дозе 1 мл/гол.) и Лигфол (внутримышечно, в дозе 1 мл/гол.), при этом для объективной оценки воздействия препаратов иммунотерапии подвергались и свободные от вирусной инфекции телята:
• 1-я группа - животные, свободные от лейкозной инфекции;
• 2-я группа - животные, инфицированные вирусом лейкоза;
• 3-я группа - неинфицированный молодняк - применяли
Лигфол;
• 4-я группа - инфицированный молодняк - применяли Лигфол;
• 5-я группа - неинфицированный молодняк - применяли
Иммунофан;
• 6-я группа - инфицированный молодняк - применяли
Иммунофан.
До введения препаратов установлено, что у инфицированных лейкозом животных уровень иммунного ответа был существенно ниже, чем у здоровых особей. Важно отметить, что во все периоды исследований (до 6 мес.) у таких телят отмечены нарушения в формировании иммунного статуса, влекущие за собой ослабление клеточного звена иммунитета: снижение уровня Т-лимфоцитов от рождения до 6 мес. в среднем на 9,9 абс.%, при нормальном уровне В-лимфоцитов, что, по нашему мнению, связано с нарушением дифференцировки последних в плазмоциты, снижением синтеза антител и, как следствие, уменьшением противовирусной защиты организма.
У телят 2-й группы установлены низкие показатели бактерицидной активности сыворотки крови, при этом БАСК в первые четыре месяца жизни этих телят была ниже, чем у животных 1 -й группы в среднем на 13,5 абс.% и в период со 2-го по 4-й месяц выявлена лейкопения (в
среднем на 30%). В 4-й и 6-й опытных группах телят уровень БАСК во все периоды исследования превышал в среднем данные контрольной 2й группы на 10,5абс.% и 16,1абс.% соответственно (рис.1).
%
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
.І-:-*'-
-2гр. Контроль - 4 гр. Лигфол -6 гр.Иммунофан
5 дней 1 мес. 2мес. Змее.
5мес.
Рис. 1. Динамика БАСК у инфицированных ВЛ телят.
%
80
70
60
50
40
30
20
10
0
.А.. *-•-
.-А ...я а . щ ~ ^
—«— 1гр. Контроль
—■— 3 гр. Лигфол
й. 5 гр.Иммунофан
1 1 1 1 1
5 дней 1 мес. 2мес. Змее. 4мес. 5мес. бмес
Рис. 2. Динамика БАСК у свободных от ВЛ телят.
После применения иммуномодуляторов неинфицированным телятам достоверные изменения были выявлены в группе животных, инъецированных Имунофаном. Так, во все периоды исследования у животных 5 группы БАСК увеличилась в среднем на 10абс.%, однако в возрасте 3-х месяцев изменения носили недостоверный характер (рис.2).Анализируя количество лейкоцитов у инфицированных и свободных от ВЛ животных, следует отметить достоверное снижение этого параметра у инфицированных телят: 5,8±1,1*109/л против 6,3±0,7х109/л (рис.3).
Уровень лейкоцитов в 4-й и 6-й группах находился в физиологическом диапазоне (5,5-6,0*109/л), т.е. лейкопении не выявлено. В группах 3 и 5 уровень лейкоцитов под влиянием иммуномодуляторов во все периоды исследования в целом превалировал над данными контроля (8,8-9,0*109/л).
109/л
Рис. 3. Динамика уровня лейкоцитов инфицированных ВЛ и свободных от вируса.
в крови телят,
Анализ данных коррекции клеточного иммуногенеза у инфицированных ВЛ животных показал, что в 4-й и 6-й группах число Т-клеток достигло верхней границы нормы, при этом Лигфол и Иммунофан инициировали увеличение количества Т-лимфоцитов во все периоды исследования в среднем на 7,3абс.% и 10,1абс.% соответственно.
%
45
40
35
30
25
20
15
10
5
-------------*--------*
| *" *" 2гр. Контроль
--------------------------------------—■— 4 гр. Лигфол
-------------------------------------- 6 гр.Иммунофан
5дней 1 мес 2мес Змее 4мес 5мес бмес
Рис.4. Динамика уровня Т-лимфоцитов в крови у инфицированных ВЛ телят.
%
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
______■-
-1 гр. Контроль
- 3 гр. Лигфол
- 5 гр.Иммунофан
5 дней 1 мес. 2мес. Змее. 4 мес. 5мес. бмес.
Рис. 5. Динамика уровня Т-лимфоцитов в крови у свободных от ВЛ телят.
Иммунотерапия свободных от вируса лейкоза телят не имела выраженного эффекта относительно увеличения количества Т-лимфоцитов, однако тенденция к повышению числа Т-клеток отмечена. Следует отметить, что за весь период исследования в этих группах не было выявлено новых положительно реагирующих животных, в то время как 1-й группе за 6 месяцев было обнаружено 5 голов.
Таким образом, изучая иммуногенез телят, инфицированных вирусом лейкоза, установили ослабление естественной резистентности, выражающееся в понижении бактерицидной активности сыворотки крови, снижении количества лейкоцитов и Т-лимфоцитов.
Применение иммуномодуляторов как свободным, так и инфицированным ВЛ телятам от рождения до 6-месячного возраста способствует повышению естественной резистентности и антиген-специфической защиты. Такие препараты, как Иммунофан и Лигфол, сочетающие в себе свойства иммуномодулятора и антивирусного средства, можно рекомендовать для профилактики и терапии вирусных инфекций, особенно ВЛКРС, сопровождающихся иммунодефицитным состоянием.
Литература:
1. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля. - Москва: Медицина, 1987. - 472с.
2. Хаитов, Р.М., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы: механизм действия и клиническое применение // Иммунология. - Москва, 2003. - №4. - С. 196.